葡聚糖凝胶LH-20
有效期 | 5年 |
英文名称 | Sephadex LH-20 |
CAS | 9041-37-6 |
储存条件 | RT |
外观(性状) | 白色粉末 |
单位 | 瓶 |
规格 | 25g 500g |
说明:凝胶过滤填料。颗粒大小:干粉18-111µm;最高流速:720cm/h;分离范围(球蛋白):100-4000; 可用于分离胆固醇,脂肪酸,激素,维他命,天然产物等。
备注:产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。
葡聚糖凝胶LH-20
有效期 | 5年 |
英文名称 | Sephadex LH-20 |
CAS | 9041-37-6 |
储存条件 | RT |
外观(性状) | 白色粉末 |
单位 | 瓶 |
规格 | 25g 500g |
说明:凝胶过滤填料。颗粒大小:干粉18-111µm;最高流速:720cm/h;分离范围(球蛋白):100-4000; 可用于分离胆固醇,脂肪酸,激素,维他命,天然产物等。
备注:产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。
6% SDS-PAGE彩色凝胶快速制备试剂盒
货号:BL563B
规格:125块/盒
品牌:BL563B
SDS-PAGE Colorful Gel Fast Preparation Kit, with dye
SDS-PAGE彩色凝胶快速制备试剂盒
产品编号 |
产品名称 |
规格 |
BL563B |
6% SDS-PAGE彩色凝胶快速制备试剂盒 |
125块 |
BL564B |
8% SDS-PAGE彩色凝胶快速制备试剂盒 |
125块 |
BL565B |
10% SDS-PAGE彩色凝胶快速制备试剂盒 |
125块 |
BL566B |
12% SDS-PAGE彩色凝胶快速制备试剂盒 |
125块 |
BL567B |
15% SDS-PAGE彩色凝胶快速制备试剂盒 |
125块 |
产品简介:
蛋白电泳经常使用聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)来实现蛋白分离,此类凝胶一般由浓缩胶和分离胶两部分组成,前者将蛋白样品进行浓缩,后者则根据凝胶所使用的丙烯酰胺单体和N,N-亚甲基双丙烯酰胺(甲叉丙烯酰胺)交联剂的浓度不同分离不同大小的蛋白质。为简化制备SDS-PAGE凝胶的操作步骤,本产品提供了快速制备浓缩胶和分离胶的预混溶液,配胶过程无需计算所需溶液量,无需稀释;无需额外添加TEMED;只需加入改良型促凝剂即可凝胶,可快速灌制多块凝胶,使制胶过程更加便捷。试剂盒中配备了彩色上层胶缓冲液,加入浓缩胶后,点样孔易辨,点样方便;更易区分含不同样品;所含颜色配方不影响电泳、染色及转膜等后续实验。
本试剂盒可制备125块SDS-PAGE凝胶,具体可以配制的数量与凝胶的厚度及凝胶的尺寸有关。
产品组份:
组分 |
规格 |
彩色上层胶缓冲液 |
80 mL |
上层胶溶液 |
80 mL |
下层胶缓冲液 |
250 mL |
下层胶溶液 |
250 mL |
改良型促凝剂 |
10 mL |
使用方法:
一.分离胶制备:(以配置一块mini胶为例0.75/1.0/1.5 mm)
1、等体积吸取下层胶溶液和下层胶缓冲液,混匀,即各吸取2/2.7/4 mL。
2、对应加入40/60/80 μL的促凝剂,混匀。
3、将配置好的溶液,注入制胶玻璃板中(备注:此溶液配置为过量,留少许于小量杯中,以判断凝胶状态),加入适量水或醇覆盖于下层胶之上,待下层胶凝固后,倒去上层水或醇,用滤纸吸去多余的水或醇(备注:当水或醇和胶之间有一条折射线时,说明胶已凝固,大约15 min左右,以具体实际情况为准)。
二.浓缩胶制备:
1、等体积吸取上层胶溶液和上层胶缓冲液混匀,即各吸取0.5/0.75/1 mL。
2、对应加入10/15/20 μL的促凝剂,混匀。
3、将配置好的溶液,注入制胶玻璃板中,插入梳子,待上层胶凝固后拔取梳子(大约15 min左右,以具体实际情况为准),便可进行上样电泳。
注意事项:
1、请根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,具体可参考下表
SDS-PAGE分离胶浓度 |
最佳分离范围 |
6% |
50-150kD |
8% |
30-90kD |
10% |
20-80kD |
12% |
12-60kD |
15% |
10-40kD |
2、改良型促凝剂的使用量仅作参考,实际用量可根据个人实验习惯和经验调整。
3、本产品已加入适量TEMED的替代品,如需进一步加速凝胶,临配胶前可按需补充适量TEMED。
4、配胶溶液中含有Acr-Bis,对人体有毒,操作时请特别小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
5、由于颜料的理化性,使用前请摇匀。
6、当室温过高时,建议促凝剂用量减半或酌情减少(如推荐使用量的1/4等),避免胶凝过快。
7、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
8、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件:
改良型促凝剂需-20℃保存,其他成分可保存于4℃,有效期一年。
货号 | BL563B |
规格 | 125块/盒 |
品牌 | BL563B |
说明书下载 | 点击下载 |
丙烯葡聚糖凝胶S-100
有效期 | 2年 |
单位 | 瓶 |
规格 | 25mL 100ml 500ml |
丙烯葡聚糖凝胶系列填料是烯丙基葡聚糖和 N,N'-亚甲基双丙烯酰胺的交联共聚物,平均粒径为 50μm,
同时增加了基体的刚性,确保快速流动特性和高分辨率。
分离范围
1×103~1×105(球蛋白)
贮存条件
产品应密封贮存在 4℃~25℃(保存溶液为 20%乙醇)通风、干燥、清洁的地方,不能冷冻。用过的柱子贮存在 4℃(20%乙醇),保质期:2 年
用途
分离填料,用于蛋白等物质的纯化分离。本品仅供科研,不得用于其它用途。
操作步骤
1 装柱 (1)让所有的材料和试剂均平衡至层析实验的温度。配制缓冲液,对所有的缓冲液进行脱气处理。
(2)检查层析柱所有部件,特别是过滤网,密封圈,螺旋塞是否紧密,玻璃管是否干净和完整。
(3)根据需要量取相应量的凝胶,用去离子水清洗掉 20%乙醇。
(4)将柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位,务必使底端无气泡。
(5)用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内,注意勿使产生气泡。打开柱子出液口,使凝胶 在柱内自由沉降,连结好柱子顶端柱头。
(6)打开蠕动泵,让缓冲液用使用时流速的 1.33 倍的流速流过,使柱床稳定(注意压力不要超过填 料最大耐压)。
2 平衡 上样前平衡层析柱至少 5-10 个柱体积,直到记录仪基线变得平稳为止(流出液的 pH 值和电导值等于 上柱 Buffer 的 pH 值和电导值)。
3 上样 (1)样品用平衡液配制,样品一定要离心或过滤后上样(0.45um 滤膜),如果样品盐浓度太大,则需要处理后再上样。
(2)推荐的上样量不超过柱体积的 5%。
5 再生 一般用缓冲液洗到平衡,可再次使用。在一些应用中,诸如变性蛋白质或脂质体物质在再生过程中洗 脱不掉。出现下面这些情况,是必须需要清洗再生的: (1)背压增加; (2)色谱柱顶部的颜色变化; (3)分辨率降低; (4)转换接头和凝胶表面之间出现空隙。
如果观察到压力增大,在开始柱清洁程序之前先检查管路中的各个过滤阀、过滤膜是否被污染,然后 通过用 0.1M NaOH 洗涤柱子,除去沉淀的蛋白质,非特异性结合的蛋白质和脂蛋白。
注意事项
(1)上样之前,样品必须经过膜过滤及去除色素,否则杂质及色素会被吸附到填料上,影响填料的
正常使用。所有的缓冲液均需要用 0.45um 的过滤器过滤。
(2)在使用过程中,避免使用高浓度的强酸强碱,酸和碱的浓度应低于 0.1 摩尔。碱会使流速变慢。
(3)不同的样品,吸附和洗脱方法不相同,可以根据相关的文献进行
DEAE-琼脂糖凝胶FF
有效期 | 3年 |
别名 | 快流速DEAE-琼脂糖凝胶 |
英文名称 | DEAE-Sepharose Fast Flow |
储存条件 | 2-8℃ |
单位 | 瓶 |
规格 | 100ml |
本品呈白色,球状、无嗅、无味、无肉眼可见杂质。
备注:产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。
6% SDS-PAGE彩色凝胶快速制备试剂盒
货号:BL563A
规格:30-50块
品牌:Jinpan
6% SDS-PAGE Gel Fast Preparation Kit, with dye
6% SDS-PAGE彩色凝胶快速制备试剂盒
产品编号 |
产品名称 |
规格 |
BL563A |
6% SDS-PAGE彩色凝胶快速制备试剂盒 |
30-50块 |
产品简介:
蛋白电泳经常使用聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)来实现蛋白分离,此类凝胶一般由浓缩胶和分离胶两部分组成,前者将蛋白样品进行浓缩,后者则根据凝胶所使用的丙烯酰胺单体和N,N-亚甲基双丙烯酰胺(甲叉丙烯酰胺)交联剂的浓度不同分离不同大小的蛋白质。 为简化制备SDS-PAGE凝胶的操作步骤,本产品提供了快速制备浓缩胶和分离胶的预混溶液,配胶过程无需计算所需溶液量,无需稀释;无需额外添加TEMED;只需加入改良型促凝剂即可凝胶,可快速灌制多块凝胶,使制胶过程更加便捷。试剂盒中配备了红色染料,加入浓缩胶后,点样孔易辨,点样方便;更易区分含不同样品;所含颜色配方不影响电泳、染色及转膜等后续实验。
本试剂盒可制备30-50块6% SDS-PAGE凝胶,具体可以配制的数量与凝胶的厚度及凝胶的尺寸有关。
产品组成:
组分 |
规格 |
6%分离胶溶液 |
100ml |
6%分离胶缓冲液 |
100ml |
浓缩胶溶液 |
40ml |
浓缩胶缓冲液 |
40ml |
改良型促凝剂 |
1ml×3 |
浓缩胶染料(红色) |
250μl |
使用方法:
一.分离胶制备:
按下表配制所需分离胶,可根据需要酌情增减,但不要改变分离胶溶液和分离胶缓冲液加入比例。
6%分离胶配制 |
4ml |
8ml |
15ml |
20ml |
25ml |
6%分离胶溶液 |
2ml |
4ml |
7.5ml |
10ml |
12.5ml |
6%分离胶缓冲液 |
2ml |
4ml |
7.5ml |
10ml |
12.5ml |
改良型促凝剂 |
40μl |
80μl |
150μl |
200μl |
250μl |
注:配制时,待分离胶溶液和分离胶缓冲液充分混匀后,再加入改良型促凝剂,促凝剂加入后尽量迅速混合并倒胶,倒胶后,加入适量水或异丙醇覆盖于分离胶之上。
二.浓缩胶制备:
待分离胶凝固后,按下表配制所需分离胶,可根据需要酌情增减,但不要改变浓缩胶溶液和浓缩胶缓冲液加入比例。
浓缩胶配制 |
2ml |
3ml |
5ml |
8ml |
10ml |
浓缩胶溶液 |
1ml |
1.5ml |
2.5ml |
4ml |
5ml |
浓缩胶缓冲液 |
1ml |
1.5ml |
2.5ml |
4ml |
5ml |
改良型促凝剂 |
20μl |
30μl |
50μl |
80μl |
100μl |
红色染料 |
2.5μl |
4μl |
6.5μl |
10μl |
13μl |
注:配制时,待浓缩胶溶液和浓缩胶缓冲液充分混匀后,加入改良型促凝剂混匀,然后再加入红色染料混匀即可,混匀后尽量迅速倒胶,灌胶后,插入梳齿。(由于染料的特殊理化性质,使用前请摇匀,用量可适当增加以提高效果)
等浓缩胶凝固后,把梳子拔去即可用于后续加样电泳。
注意事项:
1、改良型促凝剂的使用量仅作参考,实际用量可根据个人实验习惯和经验调整。
2、本产品已加入适量TEMED的替代品,如需进一步加速凝胶,临配胶前可按需补充适量TEMED。
3、配胶溶液中含有Acr-Bis,对人体有毒,操作时请特别小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
4、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件:
改良型促凝剂需-20℃保存,其他成分可保存于4℃,有效期一年。
保存条件:
-20℃保存,有效期一年。
货号 | BL563A |
规格 | 30-50块 |
品牌 | Jinpan |
说明书下载 | 点击下载 |
葡聚糖凝胶G-100
有效期 | 6年 |
英文名称 | Sephadex G-100 medium |
CAS | 9050-94-6 |
储存条件 | RT |
外观(性状) | 白色粉末 |
单位 | 瓶 |
规格 | 25g |
化学和物理性质:
葡聚糖凝胶是一种珠状的凝胶,含有大量的羟基,很容易在水中和电解质溶液中溶胀。 G型的葡聚糖凝胶有各种不同的交联度,因此它们的溶胀度和分级分离范围也有所不同。 葡聚糖凝胶的溶胀度基本上不因盐和洗涤剂的存在而受影响。
葡聚糖凝胶有不同的粒度。超细级的葡聚糖凝胶是用于需要极高分辨率的柱色谱和薄层色谱。粗级和中级的凝胶用于制备性色谱过程,可在较低的压力下获得较高的流速。 另外,粗级也可用于批量工艺。
化学稳定性:
葡聚糖凝胶不溶于一切溶剂(除非它被化学降解)。 它在水、盐溶液、有机溶剂、碱和弱酸性溶液中都是稳定的,在强酸中凝胶骨架的糖昔键被水解。 长期接触氧化剂将破坏凝胶,因而应避免使用。
物理稳定性:
葡聚糖疑胶并不熔融,可以在湿态、中性PH进行灭菌或在高压灭菌器120℃、30分钟而不影响它的色谱性质。 干态的凝胶加热至120℃以上将开始焦糖化。 葡聚糖凝胶的机械强度取决于交联度。
使用方法:
1. 葡聚糖凝胶预处理:
在室温下,将葡聚糖凝胶干粉浸泡于蒸馏水中至少24小时,并不断搅拌以保证凝胶溶胀,或者用热水浸泡(不建议煮沸)至少1小时直至充分溶胀,凝胶体积不再变化。
注:在溶胀前,加入蒸馏水搅拌后使其自然沉降,沉降后若上层溶液中漂浮的凝胶碎片颗粒较多,需要重复多次漂洗将其除去,防止层析时阻塞凝胶柱,影响流速。
2. 装柱:
将溶胀好的凝胶根据装柱要求一次性置入柱内,注意保持湿态装柱,并避免柱内产生气泡或断层; 装柱要均匀,可在凝胶耐受的操作压下装柱,装好的凝胶柱可以检测柱效,检测过滤柱装填是否合格。
凝胶层析分离度取决于柱高,为分离不同组分,凝胶柱床必须有适宜的高度:分级分离时,一般需要 100cm 左右长的层析柱,柱高与直径之比为 20:1-100:1,柱高过高时,凝胶挤压变形阻塞会引起较大的反压,应当尽可能避免;分组分离(例如脱盐)时用短柱,柱高控制在40-50cm 以下,柱高与直径的比约为 5:1-10:1。
3. 平衡:
上样前用平衡液平衡层析柱至少3-5个柱体积直到记录仪基线变得平稳为止(例如流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值);
4. 上样:
分级分离时上样量一般为5%的柱床体积,我们建议初次上样控制在1-2%的床体积,视分离情况可以调整;脱盐时上样量可以达到20%的柱床体积。
样品溶液如有杂质或沉淀应过滤或离心除去,样品的粘度不能过高,否则影响分离效果。
5. 洗脱方法:
可以用无盐水,也可以采用上柱时的缓冲液洗脱;在上柱缓冲液中加入NaCl等梯度洗脱或盐梯度洗脱也可以完全分离纯化;
6. 在位清洗(CIP)
凝胶使用十次后作一次CIP,目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。 方法是以40cm/h用1M氢氧化钠反向清洗四个柱体积,再以至少三个柱体积平衡缓冲液再生。
7. 保存
凝胶柱暂时不用,可将其回收,一般方法是将凝胶用水冲洗干净滤干,可加入0.02%叠氮化钠防腐或用20%乙醇浸泡,以控制微生物生长。
备注:产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。
|
商品属性 | |
---|---|
商品名称 | UVP BioSpenctrum 810 全自动荧光、化学发光凝胶成像系统-BioSpenctrum 810-UVP |
型号 | BioSpenctrum 810 |
类别 | 生命科学仪器|||电泳成像|||凝胶成像系统|||UVPBioSpenctrum810全自动荧光、化学发光凝胶成像系统 |
品牌 | UVP |
品牌简介 | UVP |
关键字 | 凝胶成像系统 凝胶成像分析系统,凝胶,系统,荧光,全自动,化学 |
热可逆温敏性水凝胶,热可逆温敏性水凝胶原理-Wako富士胶片和光
应用领域 | 生物产业 |
---|
温敏性水凝胶
水凝胶具有聚合材料的多种特征,如网络结构和高含水量,目前他广泛的运用于医药生命科学等多种领域,但不仅限于3D培养、组织工程和药物传送这些。聚N-异丙基丙烯酰胺和聚乙二醇的嵌段共聚物早在2000年初就已经商业化,研究证明,Mebiol® Gel的特性使其非常适合应用于细胞培养和组织工程。
可用于3D细胞培养和其他领域
PNIPAAm-PEG;聚N-异丙基丙烯酰胺和聚乙二醇的嵌段共聚物
水凝胶具有聚合材料的多种特征,如网络结构和高含水量,目前他广泛的运用于医药生命科学等多种领域,但不仅限于3D培养、组织工程和药物传送这些。聚N-异丙基丙烯酰胺和聚乙二醇的嵌段共聚物早在2000年初就已经商业化,研究证明,Mebiol® Gel的特性使其非常适合应用于细胞培养和组织工程。
◆原理
Mebiol® Gel温敏性水凝胶与市面上其它水凝胶的不同之处在于它可以跟随温度变化进行可逆性溶胶-凝胶转换。当温度降低时,Mebiol® Gel为溶胶状态(像液体),当温度较高时形成水凝胶。在实验操作中,该特性特别有利于进行细胞操作,比如可轻松向冷却的Mebiol® Gel中加入培养基,可通过给培养瓶降温的方式进行细胞离心收集。在凝胶状态时,Mebiol Gel的高亲脂性为细胞增殖、细胞信号转导、气体质量交换以及细胞和组织对剪切力的防御等提供了非常有效的生长环境。
◆优点、特色
●易于操作
●无毒性,生物相容性好
●100%合成,无病原体
●透明度高,利于细胞观察
●性能完善
◆案例、应用
●干细胞和多能干细胞培养,增殖和分化
●3D细胞培养
●细胞移植
●器官和组织再生
●药物传递
●非细胞培养应用
1. Mebiol® Gel中培养原发性肿瘤细胞
选取人肿瘤组织中的原发性肿瘤细胞进行培养该技术能够鉴定来自患者的原发性肿瘤细胞的表征,因此可根据其主要细胞化学敏感性,恶性肿瘤,转移酶活性和其它参数对患者的治疗进行评估。在胶原或者3D凝胶中培养原发性肿瘤细胞,纤维细胞的过度生长可能对其产生抑制作用。而成纤维细胞在Mebiol® Gel中不容易增殖,因此能选择性增殖原代肿瘤细胞,以便后续进一步分析鉴别。
图 1:人体癌变结肠组织Mebiol® Gel培养10天。
(提供者:Dr. S. Kubota, Dept. of General Surgery, St.Marianna University School of Medicine)
人结肠癌组织在Mebiol® Gel培养10天。只有原发性肿瘤细胞中Mebiol® Gel中增殖。
成纤维细胞在Mebiol® Gel中生长受到抑制,而在胶原蛋白和其它许多3D凝胶培养基质中,长满成纤维细胞,阻止癌细胞的增殖。
图 2:细胞生长曲线
2. 干细胞培养
猕猴胚胎干细胞用不含LIF的Mebiol® Gel培养(右图),和2D饲养层培养(左图)相比,发现形态学和碱性磷酸酶染色均未分化。
图 3
左图:2D 饲养层培养。
右图:不含LIF的3D Mebiol® Gel培养(7天)。
提供者:Dr. K. Hishikawa, Dept of Clinical Renal Regeneration, University of Tokyo.
猕猴(灵长类)胚胎干细胞在Mebiol Gel® 培养,碱性磷酸酶染色表现强阳性,表明未分化。
图 4
左图:2D 饲养层培养。
右图:不含LF的3D Mebiol® Gel培养(5天)。
3.球状体形成
Mebiol® Gel 可支持肿瘤细胞系和iPS细胞形成球体。
图 5:粘液表皮样癌(胆管癌)衍生细胞系在Mebiol® Gel中形成球状体。
(提供者: Dr. S. Kubota, Dept. of General Surgery, St. Marianna University School of Medicine)
4. 保持组织结构
Mebiol® Gel提供的环境,有利于维护组织结构在长期培养。
图 6
左图:正常结肠黏膜组织在Mebiol® Gel 中培养7天后。
右图:转移性肝癌组织在Mebiol® Gel 中培养21天后。
(提供者:Dr. S. Kubota, Dept. of General Surgery, St. Marianna University School of Medicine)
5. 体干细胞的选择性分离培养(小鼠胚胎皮肤源)
“Epithelial Stem Cells from Dermis by a Three-dimensional Culture System”, Journal of Cellular Biochemistry, 98 (1), 174-184 (2006)
6. 体外3-D软骨细胞培养再生软骨组织
“Chondrocytes Containing Growth Factors in a Novel Thermoreversible Gelation Polymer Scaffold”, Tissue Engineering, 12 (5), 1237-1245 (2006)
7. 体外3-D培养人细胞间质干细胞(hMSC)进行骨诱导
“Gene expression profile of human mesenchymal stem cells during osteogenesis in three-dimensional thermoreversible gelation polymer”, Biochem. Biophys. Res. Commun., 317, 1103-1107 (2004).
8. 人类肝细胞3-D培养生产丙型肝炎病毒(HCV)
“Production of infectious hepatitis C virus particles in three-dimensional cultures of the cell line carrying the genome-length dicistronic viral RNA of genotype 1b”, Virology, 351 (2), 381-392 (2006)
9. 通过局部加热进行通道控制(芯片细胞分选系统)
“On-Chip Cell Sorting System Using Laser-Induced Heating of a Thermoreversible Gelation Polymer to Control Flow”, Y. Shirasaki, J. Tanaka, H. Makazu, K. Tashiro, S. Shoji, S. Tsukita, T. Funatsu,Anal. Chem., 78, 695-701 (2006)
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 |
MBG-PMW20-1001 | 温敏性水凝胶 | 1×10 mL |
MBG-PMW20-1005 | 温敏性水凝胶 | 5×10 mL |
MBG-PMW20-5001 | 温敏性水凝胶 | 1×50 mL |
MBG-PMW20-5005 | 温敏性水凝胶 | 5×50 mL |
可用于3D细胞培养和其他领域
PNIPAAm-PEG;聚N-异丙基丙烯酰胺和聚乙二醇的嵌段共聚物
热可逆温敏性水凝胶,热可逆温敏性水凝胶原理-wako富士胶片和光
应用领域 | 生物产业 |
---|
温敏性水凝胶
水凝胶具有聚合材料的多种特征,如网络结构和高含水量,目前他广泛的运用于医药生命科学等多种领域,但不仅限于3D培养、组织工程和药物传送这些。聚N-异丙基丙烯酰胺和聚乙二醇的嵌段共聚物早在2000年初就已经商业化,研究证明,Mebiol® Gel的特性使其非常适合应用于细胞培养和组织工程。
可用于3D细胞培养和其他领域
PNIPAAm-PEG;聚N-异丙基丙烯酰胺和聚乙二醇的嵌段共聚物
水凝胶具有聚合材料的多种特征,如网络结构和高含水量,目前他广泛的运用于医药生命科学等多种领域,但不仅限于3D培养、组织工程和药物传送这些。聚N-异丙基丙烯酰胺和聚乙二醇的嵌段共聚物早在2000年初就已经商业化,研究证明,Mebiol® Gel的特性使其非常适合应用于细胞培养和组织工程。
◆原理
Mebiol® Gel温敏性水凝胶与市面上其它水凝胶的不同之处在于它可以跟随温度变化进行可逆性溶胶-凝胶转换。当温度降低时,Mebiol® Gel为溶胶状态(像液体),当温度较高时形成水凝胶。在实验操作中,该特性特别有利于进行细胞操作,比如可轻松向冷却的Mebiol® Gel中加入培养基,可通过给培养瓶降温的方式进行细胞离心收集。在凝胶状态时,Mebiol Gel的高亲脂性为细胞增殖、细胞信号转导、气体质量交换以及细胞和组织对剪切力的防御等提供了非常有效的生长环境。
◆优点、特色
●易于操作
●无毒性,生物相容性好
●100%合成,无病原体
●透明度高,利于细胞观察
●性能完善
◆案例、应用
●干细胞和多能干细胞培养,增殖和分化
●3D细胞培养
●细胞移植
●器官和组织再生
●药物传递
●非细胞培养应用
1. Mebiol® Gel中培养原发性肿瘤细胞
选取人肿瘤组织中的原发性肿瘤细胞进行培养该技术能够鉴定来自患者的原发性肿瘤细胞的表征,因此可根据其主要细胞化学敏感性,恶性肿瘤,转移酶活性和其它参数对患者的治疗进行评估。在胶原或者3D凝胶中培养原发性肿瘤细胞,纤维细胞的过度生长可能对其产生抑制作用。而成纤维细胞在Mebiol® Gel中不容易增殖,因此能选择性增殖原代肿瘤细胞,以便后续进一步分析鉴别。
图 1:人体癌变结肠组织Mebiol® Gel培养10天。
(提供者:Dr. S. Kubota, Dept. of General Surgery, St.Marianna University School of Medicine)
人结肠癌组织在Mebiol® Gel培养10天。只有原发性肿瘤细胞中Mebiol® Gel中增殖。
成纤维细胞在Mebiol® Gel中生长受到抑制,而在胶原蛋白和其它许多3D凝胶培养基质中,长满成纤维细胞,阻止癌细胞的增殖。
图 2:细胞生长曲线
2. 干细胞培养
猕猴胚胎干细胞用不含LIF的Mebiol® Gel培养(右图),和2D饲养层培养(左图)相比,发现形态学和碱性磷酸酶染色均未分化。
图 3
左图:2D 饲养层培养。
右图:不含LIF的3D Mebiol® Gel培养(7天)。
提供者:Dr. K. Hishikawa, Dept of Clinical Renal Regeneration, University of Tokyo.
猕猴(灵长类)胚胎干细胞在Mebiol Gel® 培养,碱性磷酸酶染色表现强阳性,表明未分化。
图 4
左图:2D 饲养层培养。
右图:不含LF的3D Mebiol® Gel培养(5天)。
3.球状体形成
Mebiol® Gel 可支持肿瘤细胞系和iPS细胞形成球体。
图 5:粘液表皮样癌(胆管癌)衍生细胞系在Mebiol® Gel中形成球状体。
(提供者: Dr. S. Kubota, Dept. of General Surgery, St. Marianna University School of Medicine)
4. 保持组织结构
Mebiol® Gel提供的环境,有利于维护组织结构在长期培养。
图 6
左图:正常结肠黏膜组织在Mebiol® Gel 中培养7天后。
右图:转移性肝癌组织在Mebiol® Gel 中培养21天后。
(提供者:Dr. S. Kubota, Dept. of General Surgery, St. Marianna University School of Medicine)
5. 体干细胞的选择性分离培养(小鼠胚胎皮肤源)
“Epithelial Stem Cells from Dermis by a Three-dimensional Culture System”, Journal of Cellular Biochemistry, 98 (1), 174-184 (2006)
6. 体外3-D软骨细胞培养再生软骨组织
“Chondrocytes Containing Growth Factors in a Novel Thermoreversible Gelation Polymer Scaffold”, Tissue Engineering, 12 (5), 1237-1245 (2006)
7. 体外3-D培养人细胞间质干细胞(hMSC)进行骨诱导
“Gene expression profile of human mesenchymal stem cells during osteogenesis in three-dimensional thermoreversible gelation polymer”, Biochem. Biophys. Res. Commun., 317, 1103-1107 (2004).
8. 人类肝细胞3-D培养生产丙型肝炎病毒(HCV)
“Production of infectious hepatitis C virus particles in three-dimensional cultures of the cell line carrying the genome-length dicistronic viral RNA of genotype 1b”, Virology, 351 (2), 381-392 (2006)
9. 通过局部加热进行通道控制(芯片细胞分选系统)
“On-Chip Cell Sorting System Using Laser-Induced Heating of a Thermoreversible Gelation Polymer to Control Flow”, Y. Shirasaki, J. Tanaka, H. Makazu, K. Tashiro, S. Shoji, S. Tsukita, T. Funatsu,Anal. Chem., 78, 695-701 (2006)
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 |
MBG-PMW20-1001 | 温敏性水凝胶 | 1×10 mL |
MBG-PMW20-1005 | 温敏性水凝胶 | 5×10 mL |
MBG-PMW20-5001 | 温敏性水凝胶 | 1×50 mL |
MBG-PMW20-5005 | 温敏性水凝胶 | 5×50 mL |
可用于3D细胞培养和其他领域
PNIPAAm-PEG;聚N-异丙基丙烯酰胺和聚乙二醇的嵌段共聚物
Kodak柯达 GL212 Pro 凝胶成像系统产品特点
美国Kodak公司(现Carestream),新一代明星产品Gel Logic 212 Pro凝胶成像系统,
时尚的外观设计、细致齐全的配件、优异的性能,简便、智能化的全自动操作,
为全球科研工作者提供最佳的选择。
科研级单色CCD Camera;
多种曝光模式,智能暗箱设计,开门UV自动关闭,光源全自动控制;
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可选配紫外防护挡板,方便安全切胶
双侧落射白光及白光转换板,可选配LED白光发光板
全自动六孔滤光片轮,无需手动切换滤光片,配有590nm滤光片,
用于EB, Ruby Red, Texas Red, Ruby Orange等染色成像
Molecular Imaging软件,集图像采集、分析功能与一体;
商品属性 | |
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商品名称 | Kodak柯达 GL212 Pro 凝胶成像系统-Kodak GL212 Pro-Kodak柯达 |
型号 | Kodak GL212 Pro |
类别 | 生命科学仪器|||电泳成像|||凝胶成像系统|||Kodak柯达GL212Pro凝胶成像系统 |
品牌 | Kodak柯达 |
品牌简介 | Kodak柯达 |
关键字 | 全自动凝胶成像分析系统,凝胶,全自动,柯达,系统,像素,科研 |