2×TaqplusMasterMix含染料
货号：BL547D
规格：100ml
品牌：Biosharp
2×Taq plus Master Mix 含染料
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产品编号 |
产品名称 |
规格 |
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BL547A |
2×Taq plus Master Mix 含染料 |
1 ml |
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BL547B |
2×Taq plus Master Mix 含染料 |
5 ml |
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BL547C |
2×Taq plus Master Mix 含染料 |
25 ml |
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BL547D |
2×Taq plus Master Mix 含染料 |
100 ml |
注：以50μl PCR反应体系为例,1ml可40次PCR反应,5ml可做200次PCR反应,25ml可1000次PCR反应,100ml可做4000次PCR反应。
产品简介：
本制品是将PCR反应所需的Taq酶、dNTPs、MgCl2以及反应缓冲液预先配制成2倍浓度的混合物。2×Taq plus Master Mix专为常规PCR扩增反应优化,扩增长度可达8kb,能对4kb及其以下长度的片段进行高效地扩增。使用时只需再加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应,大大地简化了操作过程,减少了PCR操作过程中的污染。提供普通型/快速上样型两种形式供您选择。经测试,染料的加入不影响PCR反应,在PCR反应完成后可直接电泳,节省时间。使用本试剂扩增得到的PCR产物3´端有一突出“A”碱基,可直接克隆于T载体中。
产品特点 ：
高效：以λDNA为模板,扩增长度可达8kb,能高效扩增≤4kb片段。
灵敏：可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段。
稳定：反复冻融几十次,4℃放置30天,室温放置一周后,扩增性能不受影响。
快捷：PCR反应所必需试剂集于一管,数分钟即可完成反应体系配制。
便利：PCR反应后可直接电泳。
质量保证：
经检测无外源核酸酶残留,qPCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。
使用说明：
1、冰浴中彻底融化2×Master Mix,混匀后离心快甩将溶液收集到管底。
2、按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系：
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50μl反应体系 |
终浓度 |
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2×Master Mix |
25μl |
1× |
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上游引物 10μM |
1-5μl |
0.2-1.0 μM |
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下游引物 10μM |
1-5μl |
0.2-1.0 μM |
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模板 |
× μl |
1-50ng（质粒） 10ng-1μg（基因组） |
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水 |
补至50μl |
3、快甩离心将反应液收集到管底。
4、PCR仪如果没有热盖加热的话,补加25μl矿物油。
5、PCR仪上执行以下程序：
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步骤 |
温度 |
时间 |
循环数 |
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初始变性 |
94℃ |
5 min |
1 |
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变性 |
94℃ |
30 sec |
25-40* |
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退火 |
Tm-5℃* |
30 sec |
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延伸 |
72℃ |
1 kb/min |
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最后延伸 |
72℃ |
5 min |
1 |
注： PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,设定最佳的反应条件（温度、时间等）。
6、电泳检测：含染料的2×Taq plus Master Mix可以直接上样。
注意事项：
1、 需要溶解完全后使用,防止离子浓度不均匀。
2、 菌液 PCR 时预变性时间≥5min,更有利于破壁。
3、 应根据实验目的选择合适循环数,循环数过少,会造成扩增量不足；循环数过多,扩增量增加,但突变率也会增加,并造成非特异性扩增。
4、 根据引物 Tm 值设置合适退火温度,退火温度过低,会造成非特异性扩增；过高可能扩增不到。
5、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件:
-20℃保存一年有效；4℃稳定贮存3个月。经常使用时,一旦融化后请4℃贮存,尽量避免反复冻融。
| 货号 | BL547D |
| 规格 | 100ml |
| 品牌 | Biosharp |
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