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常规限制酶SnaB I酶试剂盒Takara Clontech

发表于2024年10月8日由上海金畔生物科技有限公司

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常规限制酶SnaB I
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	1245A	SnaB I	200 U	￥682 ￥512

*红字为促销价格，促销时间: 2024年3月1日-2024年4月30日

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■ 识别位点

■ 制品内容

□ 酶浓度 10 U/μl □ 附带缓冲液        反应缓冲液 SnaB I Buffer +BSA      反应停止液 10×Loading Buffer

■ 制品说明

□ 起源 Sphaerotilus natans □ 反应温度 37℃ □ 活性测定用底物 λ DNA □ Genome DNA Analysis Arthrobacter luteus Genome DNA □ 甲基化的影响 受CG methylase的影响。

页面更新：2024-01-25 13:15:19

均一化Mate & Plate文库酶试剂盒Takara Clontech

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均一化Mate & Plate文库
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	630479	Mate & Plate Library – HeLa S3 (Normalized)	5×1 ml	￥15,948
Clontech	630486	Mate & Plate Library – Human Brain (Normalized)	5×1 ml	￥15,948
Clontech	630484	Mate & Plate Library – Mouse Embryonic Stem Cell (Normalized)(库存销售完毕即终卖)	5×1 ml	￥16,037
Clontech	630487	Mate & Plate Library – Universal Arabidopsis (Normalized)	5×1 ml	￥15,948 ￥11961
Clontech	630485	Mate & Plate Library – Universal Drosophila (Normalized)	5×1 ml	￥15,948
Clontech	630480	Mate & Plate Library – Universal Human (Normalized)	5×1 ml	￥15,948 ￥11961
Clontech	630481	Mate & Plate Library – Universal Human (Normalized)(库存销售完毕即终卖)	2×1 ml	￥7,912
Clontech	630483	Mate & Plate Library – Universal Mouse (Normalized)	5×1 ml	￥15,948

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文库构建         → →       预制文库                                     → → →             ↓

均一化的酵母双杂交cDNA文库——Normalized Mate & Plate

■ 制品说明

Normalized Mate and Plate Libraries是高度复杂的cDNA文库，文库克隆到GAL4 AD载体上并转化到酵母菌株Y187中。因为文库扩增和酵母转化操作已经完成，所以使用这些文库进行双杂交筛选更加省时省力。均一化处理降低了文库中高丰度的转录本，低丰度及稀少的cDNA得以富集，这样的文库更加具有基因代表性，也使筛选操作更加简单，并大大降低了在筛选文库时获得假阳性的可能性。 · 操作仅需三步： 1. 用Matchmaker Gold Yeast Two-Hybrid System构建表达目的蛋白质的酵母菌株。 2. 将bait菌株与1 ml均一化文库混合过夜培养。 3. 铺板于筛选培养基上。 · 什么是均一化文库？ 均一化处理降低了cDNA文库中高丰度转录本所占的比例，这意味着许多管家基因的拷贝数显著降低，所以筛选的克隆数更少，并且可以确保筛选到包含中等丰富和低等丰度转录本的克隆。简而言之，您可以花费较少的精力筛选到更多的独立克隆，并有更大的机会检测到重要的互作。 · 如何制备均一化文库？ 首先用SMART技术扩增获得cDNA，之后用双链特异性核酸酶（DSN）进行均一化处理（1,2）。简单来说，cDNA经变性及退火后，用特异切割双链DNA的酶快速酶切，因为cDNAs丰度越高退火越快，越有可能被酶降解。最后，用Northern blot方法分析cDNA均一化效率，将均一化的cDNA文库克隆到prey载体pGADT7-RecAB上。 · 通用型文库提供通用型基因覆盖范围 人和小鼠通用型文库提供了广泛且完善的表达基因覆盖范围。这些均一化通用型文库来自于不同的齐全组织，这些特异挑选的组织能够代表广阔范围内表达的基因（2）。结合“全面的”基因代表性及低拷贝cDNAs的富集度，Mate & Plate Universal (Normalized) Libraries为鉴定新的真实的互作提供了更大的可能。 · 为什么使用均一化通用型文库? 事实上，许多有意义的互作发生在位置适宜但表达较弱的蛋白质之间，这类互作用传统的单一组织文库不容易检测到。通用型且均一化的文库为这个问题提供了有效的解决方法，因为这些文库代表了平衡的转录本，能够更大范围的覆盖表达的基因。因此，筛选不再局限于仅能鉴定出单一组织中高水平表达的蛋白质之间的互作。

■ 制品特点

1. 为蛋白质互作中的文库筛选提供简便方法。 2. 筛选更少的克隆，检测更多的互作。 3. 通用型文库——更高的基因代表性。 4. 筛选不再大海捞针。

■ 制品用途

1. 酵母双杂交文库筛选。

■ 文献

1. Zhulidov, P. A. et al. (2004) Nucleic Acids Res. 32(3):e37. 2. Shagin, D. A. et al. (2002) Genome Res. 12(12):1953-1942.

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页面更新：2024-01-29 10:14:47

Cas9-sgRNA细胞纳米囊泡制备酶试剂盒Takara Clontech

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Cas9-sgRNA细胞纳米囊泡制备
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	632612	Guide-it CRISPR/Cas9 Vector System	1 System	￥4,859
Clontech	632613	Guide-it CRISPR/Cas9 Gesicle Production System	1 System	￥9,710
Clontech	632616	Guide-it CRISPR/Cas9 Gesicle Packaging Set	10 Rxns	￥7,470
Clontech	632617	Gesicle Producer 293T Cell Line	1 ml	￥7,959

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基因敲除               ↗ → → → →               基因敲入                   ↘

Guide-it™CRISPR/Cas9 Gesicle Production System

· 细胞来源的纳米囊泡（Gesicle），可用于直接导入Cas9-sgRNA · 转染效率低的哺乳动物细胞（分裂細胞、非分裂細胞、iPS細胞）也可实现有效的基因编辑 · Cas9蛋白质/sgRNA复合物可以快速从细胞内消除，降低脱靶效应

■ 产品说明：

Guide-it CRISPR/Cas9 Gesicle Production System用于制备Cas9/sgRNA Gesicle，Cas9/sgRNA Gesicle是可以将Cas9蛋白质/sgRNA复合物导入到哺乳动物细胞的细胞来源的纳米囊泡（Gesicle）。与采用质粒或者病毒载体相比较，采用Cas9/sgRNA Gesicle进行基因编辑实验，可以实现在广泛细胞类型中高效导入Cas9蛋白质/sgRNA复合物，从而提高基因编辑效率。同时，可以严格控制用于细胞的Cas9蛋白质/sgRNA复合物的剂量和持续时间，从而降低脱靶效应。

■ CRISPR／Cas9 Gesicle特点：

· 适用于多种细胞类型    可在分裂细胞、非分裂细胞、原代细胞、细胞株、iPS细胞等多种细胞类型中进行基因编辑（图4） · 高活性Cas9蛋白质／sgRNA确保有效的细胞导入    Cas9蛋白质／sgRNA直接导入细胞，无需转录和翻译过程，导入后可以直接开始基因编辑 · 实现在需要的时候进行基因编辑    可以严格控制Cas9蛋白质/sgRNA复合物的剂量和持续时间，与采用质粒或者病毒载体导入系统进行    基因编辑相比较，降低了脱靶效应

■ CRISPR／Cas9 Gesicle原理：

图1． Cas9/sgRNA Gesicle制备和靶细胞导入

(Step 1) 将诱导Gesicle形成的质粒预混液，靶特异sgRNA表达载体和Cas9表达载体共转染至Gesicle Producer 293T Cell Line (Code No. 632617)中。(Step 2) 利用Clontech iDimerize系统技术原理，借助与gesicle表面的膜结合红色荧光蛋白质CherryPicker之间的相互作用， iDimerize诱导配体将Cas9-sgRNA核糖核蛋白复合物载入到gesicle中。(Step 3) 携带红色荧光标记的Gesicle装配完成并从制备细胞中释放出来，收集培养基上清液，获得Cas9-sgRNA Gesicle浓缩储液。(Step 4) 收集获得的Gesicle适用于广泛细胞类型，可将靶细胞瞬时标记为红色并将Cas9-sgRNA复合物释放至靶细胞中。由于Cas9蛋白质C端有核定位信号（NLS），同时靶细胞培养液中没有dimerizer诱导配体，因此可以确保Cas9-sgRNA复合物与红色荧光蛋白质分离之后可以转运至细胞核内。

图2．Guide-it CRISPR/Cas9 Gesicle Production System实验流程

■ 实验例

图3. 脱靶效应比较

比较采用Cas9-sgRNA Gesicle和质粒系统导入sgRNA所带来的脱靶效应。凝胶电泳结果、Guide-it™ Mutation Detection Kit检测结果以及测序结果均表明，采用Cas9-sgRNA Gesicle导入sgRNA时在潜在脱靶位点检测不到明显的脱靶效应，而采用质粒系统导入sgRNA时在靶基因位点EMX1和潜在脱靶位点均可检测到基因突变。

图4. 不同细胞类型中基因敲除效率比较

建立整合ZsGreen1表达框的不同细胞系，采用Cas9-sgRNA Gesicle（sgRNA以ZsGreen1为靶基因）处理细胞系，流式细胞仪进行结果分析。以添加不同量的ZsGreen1为靶基因的Cas9-sgRNA Gesicle（添加量分别为10 μl、20 μl、30 μl）处理组为实验组、以转染Cas9/sgRNA表达质粒处理组作为对照组，流式细胞仪检测基因敲除效率。 在Jurkat等难转染细胞类型中，Cas9-sgRNA Gesicle的Cas9-sgRNA导入效率和ZsGreen1基因敲除效率要优于Cas9/sgRNA表达质粒。

图5.成功敲除hiPS细胞中的CD81基因

以人CD81为靶标设计sgRNA，采用Gesicle Producer 293T Cell Line制备产生含有Cas9-sgRNA复合物的细胞纳米囊泡，收集Cas9-sgRNA Gesicle并将其添加至48孔板培养的未分化Cellartis human iPS cell line 18（Code No. Y00305）。Cellartis human iPS cell line 18以Cellartis DEF-CS Culture System（Code No. Y30010）为培养体系，培养6 hr和24 hr后更换为不含有Gesicle的DEF-CS培养基继续培养7天。未添加Gesicle处理并且采用相同培养条件培养的Cellartis human iPS cell line 18作为实验对照组。通过流式细胞仪检测经Gesicle处理和未经Gesicle处理的Cellartis human iPS cell line 18, 采用FITC标记的CD81抗体检测细胞表面CD81的表达情况。 Panel A. 未经处理的Cellartis human iPS cell line 18（左）和FITC标记的CD81抗体检测未经Gesicle处理的Cellartis human iPS cell line 18（右）。 Panel B. FITC标记的CD81抗体检测经Gesicle处理6 hr（左）和24 hr（右）的Cellartis human iPS cell line 18。 流式细胞仪检测结果表明， 经Cas9/sgRNA Gesicle处理6 hr 后，CD81基因敲除效率为43%；经Cas9/sgRNA Gesicle处理24 hr 后，CD81基因敲除效率为49%。

■ 产品组份

Guide-it CRISPR/Cas9 Gesicle Production System（Code No. 632613）

1. Guide-it CRISPR/Cas9 Gesicle Packaging Set（ Code No. 632616）

Guide-it CRISPR/Cas9 Gesicle Packaging Mix 1 (green cap) 10 vials Guide-it CRISPR/Cas9 Gesicle Packaging Mix 2 (yellow cap) 10 vials A/C Heterodimerizer (500 nM in Ethanol) 50 μl Protamine Sulfate (4 mg/ml) 200 μl

2. pGuide-it-sgRNA1 Vector System（ Code No. 632612）

a．pGuide-it-sgRNA1 Vector (Linear) (7.5 ng/μl) 20 μl b．Guide-it Ligation Components v2       DNA Ligation Mighty Mix 50 μl     Guide-it Oligo Annealing Buffer 1.5 ml     Guide-it Control Annealed Oligos v2 (100 fmol/μl) 10 μl     Guide-it Sequencing Primer 1 (100 pmol/μl) 10 μl     PCR-Grade Water 1 ml c．Stellar Competent Cells（ Code No. 636763）       Stellar Competent Cells (100 μl/tube) 10 tubes     SOC Medium (1 ml/tube) 10 tubes     pUC19 Vector (0.1 ng/μl) 10 μl

Gesicle Producer 293T Cell Line（Code No. 632617）

Gesicle Producer 293T Cell Line 1 ml

■ 保存

Stellar Competent Cells：－80℃ 其它：－20℃ Gesicle Producer 293T Cell Line :液氮保存 · 收到产品后，立即将其保存在液氮中。 · 在液氮保存的情况下，立即复苏细胞进行细胞培养。

■ 所需要的其它产品（主要产品）

· 0.45 μm 无菌过滤器（cellulose acetate或者polysulfonate） · 20 ml 无菌注射器 · 50 ml 离心管 (Corning Falcon Cat. No. 352017等) · 离心机、摆动转子（50 ml 离心管可以满足8,000X g离心要求）（例如：离心机Beckman J2-HS、摆动转子 JS-7.5 swinging bucket rotor） · 不含氯化钙和氯化镁的Dulbecco’s PBS（用于细胞培养）（Sigma Cat. No. D8537等) · 细胞培养液 · 胶原蛋白质预包被培养板

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页面更新：2020-03-05 10:48:39

AsRed2荧光蛋白质酶试剂盒Takara Clontech

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AsRed2荧光蛋白质
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	632449	pAsRed2-N1 Vector	20 μg	￥7,730
Clontech	632450	pAsRed2-C1 Vector	20 μg	￥7,730
Clontech	632451	pAsRed2 Vector	20 μg	￥7,730
Clontech	630050	Reef Coral Fluorescent Protein Vector Set	Each	￥71,451

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注意：购买以上产品，需要填写专利确认书

■ 制品说明

AsRed2是人类密码子优化的Anemonia sulcata红色荧光蛋白质的变体。它可以用于与其他荧光蛋白质的多色分析。使用RCFP多克隆抗体来检测AsRed2荧光蛋白质。

■ 制品特点

1. AsRed2激发光和发射光最大值分别为576 nm和592 nm

■ 制品用途

1. 融合蛋白质 2. 多色标记实验

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页面更新：2020-01-17 08:57:05

酵母菌穿梭载体pAUR123 DNA酶试剂盒Takara Clontech

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酵母菌穿梭载体pAUR123 DNA
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	3602	pAUR123 DNA	20 μg	￥2,224

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□ 浓度        1.0 μg/μl   □ 贮存溶液        Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM      EDTA 1 mM

■ 制品说明

pAUR载体含有酿酒酵母的AUR1-C突变体基因作为筛选标记，使用Aureobasidin A (AbA)进行酵母转化的抗性筛选。pAUR123 DNA来源于pAUR112 DNA，是一种蛋白质表达穿梭载体，能够在酿酒酵母细胞中自主复制。蛋白质表达用的启动子是ADH1基因3（Alcohol dehydrogenase 1 gene）的启动子。 (注：本载体不适用于蛋白质的高表达。)

■ 保存

-20℃。

■ GenBank登录

Accession No. : AB012284

■ 链长

6,982 bp

■ 制备

CsCl-EtBr 超离心方法制备。

■ 用途

pAUR123是利用Aureobasidin A (AbA)进行酿酒酵母 (Saccharomyces cerevisiae) 转化的载体 (穿梭表达载体)。

■ pAUR123载体图谱

页面更新：2024-02-29 10:46:34

肉毒杆菌酶试剂盒Takara Clontech

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肉毒杆菌
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	S021	Primer Set BAS-1&2	各1,000 pmol	￥1,475
Takara	S022	Primer Set BBS-1&2	各1,000 pmol	￥1,475
Takara	S023	Primer Set BCS-1&2	各1,000 pmol	￥1,475
Takara	S024	Primer Set BDS-1&2	各1,000 pmol	￥1,475
Takara	S025	Primer Set BES-1&2	各1,000 pmol	￥1,475
Takara	S026	Primer Set BFS-1&2	各1,000 pmol	￥1,475
Takara	S027	Primer Set BGS-1&2	各1,000 pmol	￥1,475

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■ 制品列表

Code No. 制品名称 S021  肉毒杆菌A型毒素基因检出用Primer Set BAS-1&2 S022  肉毒杆菌B型毒素基因检出用Primer Set BBS-1&2 S023  肉毒杆菌C型毒素基因检出用Primer Set BCS-1&2 S024  肉毒杆菌D型毒素基因检出用Primer Set BDS-1&2 S025  肉毒杆菌E型毒素基因检出用Primer Set BES-1&2 S026  肉毒杆菌F型毒素基因检出用Primer Set BFS-1&2 S027  肉毒杆菌G型毒素基因检出用Primer Set BGS-1&2

□ 浓度 19 pmol/μl □ 体积 53 μl □ 检出细菌 Clostridium botulinum

■ 制品说明

下表是使用PCR方法特异性检测肉毒杆菌各毒素基因的引物信息。

Primer (Code No.) 检测基因 扩增产物大小        BAS-1&2(S021) 肉毒杆菌A型毒素基因 284 bp        BBS-1&2(S022) 肉毒杆菌B型毒素基因 314 bp        BCS-1&2(S023) 肉毒杆菌C型毒素基因 290 bp        BDS-1&2(S024) 肉毒杆菌D型毒素基因 497 bp        BES-1&2(S025) 肉毒杆菌E型毒素基因 266 bp        BFS-1&2(S026) 肉毒杆菌F型毒素基因 332 bp        BGS-1&2(S027) 肉毒杆菌G型毒素基因 488 bp

■ 保 存

-20℃。

页面更新：2020-06-17 16:02:07

常规限制酶Hpa I酶试剂盒Takara Clontech

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常规限制酶Hpa I
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	1064A	Hpa I	500 U	￥442 ￥332
Takara	1064B (A × 5)	Hpa I	500 U × 5	￥2,100

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■ 识别位点

■ 制品内容

□ 酶浓度 10 U/μl □ 附带缓冲液        反应缓冲液 K      反应停止液 10×Loading Buffer

■ 制品说明

□ 起源 Haemophilus parainfluenzae □ 反应温度 37℃ □ 活性测定用底物 λ DNA □ Star活性 高甘油浓度、DMSO存在条件下，识别序列会发生变化。

页面更新：2024-01-25 12:57:48

组织特异性cDNA(人血液 & 免疫系统)酶试剂盒Takara Clontech

发表于2024年10月7日由上海金畔生物科技有限公司

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组织特异性cDNA(人血液 & 免疫系统)
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	637240	Human Leukocyte QUICK-Clone cDNA(库存销售完毕即终卖)	2 × 10 Rxns	￥9,483

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高质量的cDNA模板是PCR扩增得到良好结果的必备条件。QUICK-Clone cDNA是预制的双链cDNA，您可以使用基因特异性引物从中扩增感兴趣的序列，是扩增先前分离的、结构相关的或跨物种cDNA的理想选择。使用oligo (dT) 引物从来自人类淋巴结组织和人类白细胞的高质量poly A+ RNA合成的QUICK-Clone cDNA，经纯化以去除残留的RNA并去除小于400 bp的cDNA片段。 使用QUICK-Clone cDNA可让您扩增感兴趣的cDNA，同时避免传统的文库构建和筛选步骤，还可用于使用基因特异性或简并引物制作杂交探针 (Parmentier et al. 1989; Wilks et al. 1989; Vallins et al. 1990; Lee et al. 1988; Schuchman, Jackson, and Desnick 1990)。

概述

· 高纯度的双链cDNA · 直接通过PCR克隆基因，而不是文库筛选 · 从高质量的人体组织和细胞系中制备 · 非常适合扩增先前分离的、结构相关的或跨物种的cDNA

更多信息

应用

· 无需文库筛选即可克隆cDNA · 使用基因特异性或简并引物制作杂交探针 · 非常适合扩增先前分离的、结构相关的或跨物种的cDNA

参考文献

Lee, C. et al. Generation of cDNA probes directed by amino acid sequence: cloning of urate oxidase. Science 239 (1988).

Parmentier, M. et al. Molecular cloning of the thyrotropin receptor. Science 246 (1989).

Schuchman, E. H., Jackson, C. E. & Desnick, R. J. Human arylsulfatase B: MOPAC cloning, nucleotide sequence of a full-length cDNA, and regions of amino acid identity with arylsulfatases A and C. Genomics 6, 149-158 (1990).

Vallins, W. J. et al. Molecular cloning of human cardiac troponin I using polymerase chain reaction. FEBS Lett. 270, 57-61 (1990).

Wilks, A. F., Kurban, R. R., Hovens, C. M. & Ralph, S. J. The application of the polymerase chain reaction to cloning members of the protein tyrosine kinase family. Gene 85, 67-74 (1989).

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Cas9蛋白质检测抗体酶试剂盒Takara Clontech

发表于2024年10月6日由上海金畔生物科技有限公司

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Cas9蛋白质检测抗体
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	632606	Guide-it Cas9 Polyclonal Antibody	3 x 100 μl	￥8,559
Clontech	632607	Guide-it Cas9 Polyclonal Antibody	100 μl	￥2,854
Clontech	632627	Guide-it Cas9 Monoclonal Antibody (Clone TG8C1)	3 × 100 μg	￥7,256
Clontech	632628	Guide-it Cas9 Monoclonal Antibody (Clone TG8C1)	100 μg	￥2,685

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Cas9蛋白质检测抗体
· 重组Cas9蛋白质检测用单克隆抗体/多克隆抗体 · 多克隆抗体可识别野生型Cas9蛋白质和切口酶突变体（单克隆抗体还未进行测验） · 高特异性：检测哺乳动物细胞裂解液样品时背景很低 · 高灵敏度：这两种抗体均可检测低于1 ng的重组Cas9蛋白质
■ 产品说明：
Takara Bio提供的单克隆抗体和多克隆抗体可用于检测Streptococcus pyogenes来源的重组Cas9蛋白质。 Guide-it Cas9 Monoclonal Antibody (Clone TG8C1)是以Streptococcus pyogenes来源的全长重组Cas9蛋白质为抗原，采用杂交瘤细胞制备生产的小鼠源抗体。用于Western blot检测时，此抗体可以识别细菌和哺乳动物细胞裂解液样品中低于1 ng的重组Cas9蛋白质。 Guide-it Cas9 Polyclonal Antibody是用于检测Streptococcus pyogenes来源的重组Cas9蛋白质的兔源抗体。此抗体可以识别Cas9核酸酶的3种突变体：野生型Cas9蛋白质、Cas9切口酶和Cas9核酸酶-缺陷型突变体。此抗体具备高特异性和高灵敏度，检测哺乳动物细胞样品时其背景很低，用于Western blot检测时可识别低至0.5 ng的重组Cas9蛋白质。
图1． Western blot评估Guide-it Cas9 Polyclonal Antibody检测灵敏度
0.15-20.0 ng重组Cas9蛋白质（rCas9）电泳后采用Guide-it Cas9 Polyclonal Antibody(1:1,000稀释)进行Western Blot检测。采用HRP-conjugated goat anti-rabbit secondary antibody（1:5,000 稀释）作为二抗，ECL作为检测试剂。HT1080、HEK293细胞裂解液作为阴性对照。
Lane 1：HT1080細胞裂解液（3.5×104 cells）	Lane 6：rCas9 protein 1.25 ng
Lane 2：HEK293細胞裂解液（3.5×104 cells）	Lane 7：rCas9 protein 2.5 ng
Lane 3：rCas9 protein 0.15 ng	Lane 8：rCas9 protein 5.0 ng
Lane 4：rCas9 protein 0.30 ng	Lane 9：rCas9 protein 10.0 ng
Lane 5：rCas9 protein 0.625 ng	Lane 10：rCas9 protein 20.0 ng
图2．Western blot评估Guide-it Cas9 Polyclonal Antibody检测特异性
制备多种未转染细胞和表达Cas9重组蛋白质的HEK 293细胞（CMV启动子）的细胞裂解液，以细胞裂解液为样品通过Western blot方法评估Guide-it Cas9 Polyclonal Antibody检测特异性。1 ng重组Cas9蛋白质（rCas9）作为阳性对照。Guide-it Cas9 Polyclonal Antibody (1:1,000稀释)作为一抗，HRP-conjugated goat anti-rabbit secondary antibody（1:5,000 稀释）作为二抗，ECL作为检测试剂。
Lane 1：HepG2细胞裂解液（3.5×104 cells）	Lane 8：裂解缓冲液
Lane 2：CHO-K1细胞裂解液（3.5×104 cells）	Lane 9：rCas9 protein 1 ng
Lane 3：HeLa细胞裂解液（3.5×104 cells）	Lane 10：Cas9表达HEK293细胞裂解液（2.0×103 cells）
Lane 4：MCF7细胞裂解液（3.5×104 cells）	Lane 11：Cas9表达HEK293细胞裂解液（5.0×103 cells）
Lane 5：HEK293细胞裂解液（3.5×104 cells）	Lane 12：Cas9表达HEK293细胞裂解液（1.0×104 cells）
Lane 6：HT1080细胞裂解液（3.5×104 cells）	Lane 13：Cas9表达HEK293细胞裂解液（1.5×104 cells）
Lane 7：NIH3T3细胞裂解液（3.5×104 cells）
图3. Western blot评估Guide-it Cas9 Monoclonal Antibody (Clone TG8C1) 检测灵敏度
A. 1～5 ng重组Cas9蛋白质(rCas9）电泳后采用Guide-it Cas9 Monoclonal Antibody (Clone TG8C1）（1：3,000稀释）进行Western Blot检测。HEK293细胞裂解液作为阴性对照。 B. 以表达Cas9重组蛋白质的HEK 293细胞的细胞裂解液为样品，采用Guide-it Cas9 Monoclonal Antibody (Clone TG8C1）（1：3,000稀释）进行Western Blot检测。HT1080、HEK293细胞裂解液作为阴性对照。
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－20℃
■ 用途
Western blot（1：1,000～1：5,000稀释）
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常规限制酶Apa I酶试剂盒Takara Clontech

发表于2024年10月6日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

常规限制酶Apa I
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	1005S	Apa I	2,000 U	￥130
Takara	1005A	Apa I	10,000 U	￥637 ￥478
Takara	1005B (A × 5)	Apa I	10,000 U × 5	￥3,025
Takara	1005AH (高浓度)	Apa I	10,000 U	￥707 ￥530
Takara	1005BH (AH×5)(高浓度)	Apa I	10,000 U × 5	￥3,358

*红字为促销价格，促销时间: 2024年3月1日-2024年4月30日

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■ 识别位点

■ 制品内容

□ 酶浓度 15 U/μl (高浓度 50 U/μl) □ 附带缓冲液        反应缓冲液 L      反应停止液 10×Loading Buffer

■ 制品说明

□ 起源 Acetobacter pasteurianus sub. pasteurianus □ 反应温度 37℃ □ 活性测定用底物 λ DNA □ 甲基化的影响 当含识别位点的序列为GGGCCC(A/T)GG时，受dcm methylase影响。   此时，一般来源于E.coli的DNA不能被切断。   当序列为GGGCCCG时，受CG methylase影响。

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