2×TaqplusMasterMix含染料

2×TaqplusMasterMix含染料

货号:BL547B

规格:5ml

品牌:Biosharp

2×Taq plus Master Mix 含染料

产品编号

产品名称

规格

BL547A

2×Taq plus   Master Mix 含染料

1 ml

BL547B

2×Taq plus   Master Mix 含染料

5 ml

BL547C

2×Taq plus   Master Mix 含染料

25 ml

BL547D

2×Taq plus   Master Mix 含染料

100 ml

注:以50μl PCR反应体系为例,1ml40PCR反应,5ml可做200PCR反应,25ml1000PCR反应,100ml可做4000PCR反应。

产品简介:

本制品是将PCR反应所需的Taq酶、dNTPsMgCl2以及反应缓冲液预先配制成2倍浓度的混合物。2×Taq plus Master Mix专为常规PCR扩增反应优化,扩增长度可达8kb,能对4kb及其以下长度的片段进行高效地扩增。使用时只需再加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应,大大地简化了操作过程,减少了PCR操作过程中的污染。提供普通型/快速上样型两种形式供您选择。经测试,染料的加入不影响PCR反应,在PCR反应完成后可直接电泳,节省时间。使用本试剂扩增得到的PCR产物3´端有一突出“A”碱基,可直接克隆于T载体中。

产品特点 

高效:以λDNA为模板,扩增长度可达8kb,能高效扩增≤4kb片段。

灵敏:可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段。

稳定:反复冻融几十次,4℃放置30天,室温放置一周后,扩增性能不受影响。

快捷:PCR反应所必需试剂集于一管,数分钟即可完成反应体系配制。

便利:PCR反应后可直接电泳。

质量保证:

经检测无外源核酸酶残留,qPCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。

使用说明:

1、冰浴中彻底融化2×Master Mix,混匀后离心快甩将溶液收集到管底。

2、按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系:


50μl反应体系

终浓度

2×Master Mix

25μl

上游引物 10μM

1-5μl

0.2-1.0 μM

下游引物 10μM

1-5μl

0.2-1.0 μM

模板

× μl

1-50(质粒)

10ng-1μg(基因组)

补至50μl


3、快甩离心将反应液收集到管底。

4PCR仪如果没有热盖加热的话,补加25μl矿物油。

5PCR仪上执行以下程序:

步骤

温度

时间

循环数

初始变性

94

5 min

1

变性

94

30 sec

25-40*

退火

Tm-5*

30 sec

延伸

72

1 min/kb

最后延伸

72

5 min

1

 PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。

注意事项:

1、   需要溶解完全后使用,防止离子浓度不均匀。

2、   菌液 PCR 时预变性间≥5min,更有利于破壁。

3、   应根据实验目的选择合适循环数,会造成扩增量不足;循环数过多,扩增量增加,但突变率也会增加,并造成非特异性扩。

4、   根据引物 Tm 值设置合适退火温度 ,退火温度过低,会造成非特异性扩增;过高可能扩增不到。

5、   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件:

-20保存一年有效;4稳定贮存3个月。经常使用时,一旦融化后请4贮存,尽量避免反复冻融。

货号 BL547B
规格 5ml
品牌 Biosharp
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