UE细菌基因组DNA小量制备试剂盒 货号: UE-MN-BT-GDNA-50/UE-MN-BT-GDNA-250 规格: 50T/250T

UE细菌基因组DNA小量制备试剂盒

产品货号: UE-MN-BT-GDNA-50/UE-MN-BT-GDNA-250

产品规格: 50T/250T

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产品概述:

储存条件
RNase A: 50 mg/ml, 室温贮存6个月;长期贮存于-20℃。
溶菌酶:50%甘油溶解溶菌酶,使溶菌酶浓度为50 mg/ml,-20密闭贮存。
Buffer S: 细菌原生质制备液,加入RNase A后,4密闭贮存。
0.25M EDTA: 室温密闭贮存。
Buffer G-A: 裂解液,室温密闭贮存。
Buffer G-B: 蛋白去除液,室温密闭贮存。
Buffer DV-A: Buffer DV的制备液(请参照实验准备Buffer DV的配制方法配制),室温密闭贮存。
Buffer DV: 相分离液,室温密闭贮存。
Buffer BV: DNA结合液,室温密闭贮存。
Buffer W1: 洗涤液,室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate: 去盐液。使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(可用100%乙醇或95%乙醇)并混合均匀,室温密闭贮存。
Eluent: 2.5 mM Tris-HCI, pH 8.5,室温密闭贮存。

UE细菌基因组DNA小量制备试剂盒 货号:               UE-MN-BT-GDNA-50/UE-MN-BT-GDNA-250  规格:               50T/250T

流程图

UE细菌基因组DNA小量制备试剂盒 货号:               UE-MN-BT-GDNA-50/UE-MN-BT-GDNA-250  规格:               50T/250T

说明书:

UE细菌基因组DNA小量制备试剂盒 货号:               UE-MN-BT-GDNA-50/UE-MN-BT-GDNA-250  规格:               50T/250T UE-UE-MN-BT-GDNA-50/UE-MN-BT-GDNA-250    
常见问题解答:

洗脱产物的DNA量很少或没有
·样品量过多,使试剂处理能力不够。
·裂解不充分 
溶菌酶失活(-20℃可放6个月)
溶菌酶作用时间不够
·吸取下相时有上相的物质污染
·buffer W2中未加无水乙醇或者使用了低浓度的乙醇代替了无水乙醇。 
·DNA洗脱效率不高
最后一次buffer W2洗涤完后不要将制备管放于负压装置上抽的过干。

A260/280比值过低
·样品量过多
·细菌裂解不完全
·吸取下相时有中相层物质污染

RNA污染 (A260/280比值偏高)
·未将RNase A加入到buffer S中
·RNase A失活或者酶量不够

基因组DNA有降解
完全降解的基因组DNA在凝胶电泳上会出现模糊的条带或者是拖尾现象。
·菌液不新鲜,细胞凋亡导致DNA降解
·操作过于剧烈导致DNA被机械打断
·未能有效抑制内源核酸酶作用
溶菌酶裂解时间过长,没有及时加入EDTA并且低温操作。

基因组DNA酶反应效果不佳
·DNA纯度低
样品过多导致裂解不充分,从而引起大量蛋白、多糖、脂类等杂质残留,影响后续酶切反应效果。可适当减少样品初始量。
·盐分污染:可以用2× Buffer W2进行洗涤
·乙醇污染:在最后一次Buffer W2洗涤后可将制备管由原来离心1min 增加至离心2min

滤器或者制备管堵孔
·样品过多
·裂解不充分