UE-96血基因组DNA试剂盒

产品货号: UE-96-BL-GDNA-4/UE-96-BL-GDNA-12

产品规格: 4T/12T

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产品概述：
储存条件
Proteinase K: 冻干的蛋白酶K可室温贮存6个月，长期贮存请置于4℃: 溶解后在2-8℃可贮存2个月，长时间保存请勿置千室温。
Buffer PK: 蛋白酶K溶解液，室温密闭贮存。
Buffer BL: 细胞裂解液，室温密闭贮存。
Buffer W1 B concentrate: 洗涤液。使用前，按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇（可用100%乙醇或95%乙醇），混合均匀，室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate: 去盐液。使用前，按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇（可用100%乙醇或95%乙醇）， 混合均匀，室温密闭贮存。可用100%乙醇或95%乙醇。
10X Buffer W2 (12X96试剂盒）：用于配制Buffer W2。
Eluent B: 7.5 mM Tris-HCI, pH 8.5, 0.3 mM EDTA, 室温密闭贮存。

流程图

说明书：

 UE-UE-96-BL-GDNA-4/UE-96-BL-GDNA-12    
常见问题解答：

◆制备板堵孔
·血液凝固
去除血块后重新实验
·冷冻或者室温保存过长时间的血中会形成沉淀物。
使用新鲜血
·白细胞含量过多或者加入了血沉棕黄层。
用PBS稀释样品。
·不充分混匀导致裂解不完全。
样品与Buffer BL混匀要快速充分。
·蛋白酶K活性降低导致裂解不完全。
使用新的蛋白酶K

◆洗涤后96孔制备板中含有有色的残留物（亚铁血红素）
·样品与Buffer BL不充分混匀导致细胞裂解效率降低。
·蛋白酶K活性降低导致裂解不完全。
使用新的蛋白酶K
·正确配置Buffer W1B和Buffer W2。
确保正确的乙醇用量用于稀释Buffer W1B和Buffer W2浓缩液。

◆得率低或者得不到DNA
·样品中白细胞的含量少
·在将裂解产物移入96孔制备板前没有加入乙醇。
准备新的样品再次进行纯化。
·样品与Buffer BL不充分混匀导致细胞裂解效率降低。
样品与Buffer BL混匀要快速充分
·温浴时间不足或者温度不够引起的细胞裂解不充分或者蛋白降解不足。
蛋白酶K活性降低导致裂解不完全。
使用新的蛋白酶K
·在洗脱前96孔制备板没有在室温中静置1min。
·DNA没有被有效洗脱。
为了提高洗脱效率，Eluent B或者去离子水在使用之前可以先在65℃温浴。

◆A260/280比值低
·样品与Buffer BL不充分混匀导致的细胞裂解效率降低。
·温浴时间不足或者温度不够引起的细胞裂解不充分或者蛋白降解不足蛋白酶K·活性降低导致裂解不完全。
使用新的蛋白酶K
·正确的乙醇量用于稀释Buffer W1B和Buffer W2浓缩液。

◆基因组DNA后续酶反应效果差
·样品中没有足够的DNA 
可以在得率低或者得不到DNA中查找可能的原因。
·纯化的DNA被抑制物污染。
可参照“A260/280比值低”
·DNA降解
可将样品跑分析凝胶电泳来检测其完整性
·过多的DNA应用于PCR中 
减少DNA模板量重新PCR
·洗脱液中有Buffer W2残留