Plastic gel 预制胶 Tris-Gly 8-16%, 15wells, 1.0mm

Plastic gel 预制胶 Tris-Gly 8-16%, 15wells, 1.0mm描述浓度包装技术指标应用使用方法注意事项储存/保存方法

产品描述
描述

Plastic gel 预制胶 Tris-Gly 是一款安全、快捷、高性能的预制聚丙烯酰胺凝胶,常用于PAGE和Western blot检测。

1. 采用自动化的灌胶生产技术,确保了产品质量的高稳定性和重复性。
2. 采用镀膜塑料胶板,有效减少蛋白非特异性吸附,使蛋白条带更为敏锐,清晰。
3. 胶夹打开极为轻松,塑料板可以用螺丝刀撬开。
4. 凝胶中不含SDS, 可用于变性和非变性电泳。
5. 兼容市场上主流的mini电泳槽,如Bio-Rad, 天能和君意东方等。
基本信息:
胶板尺寸:宽×高×厚度为100×89×4.8mm;
凝胶尺寸:宽×高×厚度为84×74×1mm;
Acr-Bis:29:1;
浓缩胶:4%,1.5cm;
凝胶厚度:1.0mm;
孔数:15孔;
最大上样量:30uL

浓度
8-16%
包装
10片/盒
技术指标

Plastic gel 迷你预制胶兼容的电泳槽:

Plastic gel系列预制胶可以兼容大部分的mini SDS-PAGE 电泳槽,包括

a. Bio-Rad Mini-PROTEAN (II/3 /Tetra System);

b. Hoefer Mighty Small (SE 250/ SE 260/ SE 280);

c. 北京六一 DYCZ-25E、DYCZ-24K、DYCZ-24KS、DYCZ-24KF;

d. 君意东方 JY-SCZ2+;

e. 天能 VE180;

或其它胶板宽度在10厘米的电泳槽。

 Bio-Rad 电泳槽中的应用:

Bio-Rad Mini-PROTEAN系列电泳槽的U型密封条顶部有凸起结构,而Plastic gel系列预制胶的短玻板是凹形结构,因此该部位是平的,电泳前需将具有凸起结构的密封条取出后反过来安装,是平滑面朝外,从而防止漏液(如下图所示)。另有厚度约为0.5mm的塑料垫片,请根据您电泳槽的实际宽度进行相应的增加。
a. 将Bio-Rad电泳槽中的U型密封条(如图绿色部分) 拉出,注意这时的密封条两端是有凸起的,凸起的这面为正面,无凸起的为反面。
b. 将密封条旋转180度(正面朝里,反面朝外),重新装回电泳槽中,注意把密封圈周边压实,防止发生漏液。
c. 放置好预制胶进行正常的电泳操作即可。
Plastic gel 预制胶 Tris-Gly 8-16%, 15wells, 1.0mm

应用
PAGE、Western blot
使用方法

预制胶本身都不含SDS,可根据电泳缓冲液的不同用于变性电泳和非变性电泳(电泳缓冲液需自备)

非变性胶(Native-PAGE)

1. 非变性胶的蛋白迁移率受到蛋白分子量、蛋白空间结构等多种因素影响。

2. 将Plastic gel 预制胶 Tris-Gly 从包装袋中取出,撕掉底部密封胶带。

3. 将预制胶固定在电泳槽中。

4. 准备非变性电泳缓冲液 (#JP9360) :取 500mL 1× Tris-Glycine非变性电泳缓冲液。

5. 阴极加满电泳液,阳极的电泳液最低须加到1/3液面处,最高不可漫过胶板,再缓慢地将梳子拔出。

6. 上样前请使用移液器吸取电泳缓冲液轻轻吹打加样孔,去除加样孔内残余的胶液。

7. 上样:将非变性蛋白样品与 5× 非变性 Loading buffer 进行 4:1 混合均匀。注意枪头不要戳破凝胶,不要过度插入梳孔使胶板变形造成漏液。

8. 电泳条件:180 V, 60 min,当溴酚蓝指示带电泳至胶板底部,或实验预定位置时,即可结束电泳。

9. 电泳结束,取出凝胶。用螺丝刀在板子侧边缘慢慢撬开板子,打开胶盒,轻轻取出凝胶。

10. 酸性蛋白(等电点pI<7)正常上样电泳即可。反之,碱性蛋白(等电点pI>7)带正电荷,需将电极插反(红插黑,黑插红),这时上样孔成为正极,样品向下电泳。

 

变性胶(SDS-PAGE)

1. 请参考下面的分离图谱选择合适浓度的预制胶,以帮助您进行更好的蛋白电泳条带分离。

2. 将Plastic gel 预制胶 Tris-Gly 从包装袋中取出,撕掉底部密封胶带。

3. 将预制胶固定在电泳槽中。

4. 准备变性电泳缓冲液 (#JP9359) :取 500mL 1× Tris-Glycine变性电泳缓冲液。

5. 阴极加满电泳液,阳极的电泳液最低须加到1/3液面处,最高不可漫过胶板,再缓慢地将梳子拔出。

6. 上样前请使用移液器吸取电泳缓冲液轻轻吹打加样孔,去除加样孔内残余的胶液。

7. 上样:将蛋白样品与 5× 变性Loading buffer 进行4:1混合均匀,加热处理。注意枪头不要戳破凝胶,不要过度插入梳孔使胶板变形造成漏液。

8. 电泳条件:180 V, 60 min,当溴酚蓝指示带电泳至胶板底部,或实验预定位置时,即可结束电泳。

9. 电泳结束,取出凝胶。用螺丝刀在板子侧边缘慢慢撬开板子,打开胶盒,轻轻取出凝胶。

Plastic gel 预制胶 Tris-Gly 8-16%, 15wells, 1.0mm

注意事项

1. Tris-Gly 预制胶使用的是中性的Tris-Gly缓冲系统。

2. 如果需要蛋白条带更加清晰、平直,可降低电压至150V, 适当延长电泳时间。

3. 电压为180V电泳时,1块胶的初始电流在75mA左右,2块胶的初始电流在150mA左右,随时间增加电流逐步降低。

4. 电泳缓冲液不建议重复使用。因为经过电泳之后,缓冲液中的离子强度、缓冲能力都发生了变化,不能确保电泳效果。

5. 湿转时120V恒压转膜60-90min。为达到更好的转膜效果,可以根据预制胶上残留的预染marker及膜上的预染marker确定转膜效率,并对转膜条件进行适当调整。目的蛋白的分子量,凝胶浓度及转膜液中的甲醇浓度都会影响转膜效率。 大蛋白尽量选择低浓度的胶。

蛋白分子量 100kDa以上 10-100kDa 10kDa以下
建议甲醇浓度 5% 10% 20%-30%

6. 本产品适用于蛋白分子量为10kDa-300kDa范围内的。
7. 仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
8. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

基本信息
储存/保存方法

1. 常温运输,常温保存时应放置于阴凉处,避免温度剧烈变化和阳光直射。

2. 4-8℃保存,可以存放12个月。

3. 请勿置于0℃以下,凝胶在0℃以下会冻凝,产生气泡和裂纹,凝胶报废。