Rat IL-6 ELISA Kit别名检验原理产品组成检测范围使用方法背景说明储存/保存方法注意事项
概述 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
别名 |
B cell stimulatory factor-2, B-cell differentiation factor, BSF2, BSF-2, BSF2CTL differentiation factor, CDF, HGFHSFIFNB2Hybridoma growth factor, IFNB2, IFN-beta-2, IL6, IL-6, IL-6B-cell stimulatory factor 2, Interferon beta-2, interleukin 6 (interferon, beta 2), interleukin BSF-2, interleukin-6, MGI-2A,大鼠白介素6Elisa试剂盒
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
检验原理 |
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗大鼠IL-6抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体,经过孵育,样本中存在的IL-6与固相抗体和检测抗体结合,形成免疫复合物。洗涤去除未结合的物质后,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)。洗涤后,加入显色底物,避光显色。加入终止液终止反应,在450nm波长(参考校正波长540nm或570nm)测定吸光度值。
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
产品组成 |
请在试剂盒有效期内使用(新老产品随机发货)
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
检测范围 |
125pg/mL-8000pg/mL
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
使用方法 |
需自备试验器材
1. 酶标仪(可测量450nm检测波长的吸收值及540nm或570nm校正波长的吸收值) 2. 高精度加液器及一次性吸头 3. 蒸馏水或去离子水 4. 洗瓶(喷瓶)、多通道洗板器或自动洗板机 5. 500mL量筒 一、实验前准备 二、操作步骤 注:提供的标准曲线数据仅供参考,应根据同次试验所绘标准曲线计算样本含量。 三、试剂盒参数
四、常见问题解析
2. 花板(空白、阴性阳性对照正常,但标本孔OD值明显偏高)
五、实验流程图 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
背景说明 |
白细胞介素-6(IL-6)是一个具有α螺旋结构、22-28kDa的磷酸化和不同程度糖基化的多功能细胞因子,它在疾病急性期反应、炎症、造血、骨代谢以及癌症恶化等方面起重要作用。成熟的人IL-6有183个氨基酸,与小鼠和大鼠IL-6有41%的同源性。IL-6内部的选择性剪接而产生多种异构体,有些剪接体表现出拮抗特性。已知表达IL-6的细胞包括CD8+T细胞、成纤维细胞、滑膜细胞、脂肪细胞、成骨细胞、巨核细胞、内皮细胞(在内皮素的影响下)、交感神经元、大脑皮质神经细胞、肾上腺髓质嗜铬细胞、视网膜色素细胞、肥大细胞、角质形成细胞、朗格汉斯细胞、胎儿和成人星形胶质细胞、中性粒细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、结肠上皮细胞、B1B细胞和胰岛β细胞。IL-6的产生通常是在糖皮质激素、儿茶酚胺和第二性类固醇控制之下,一般与细胞激活相关。正常人血液中的IL-6在1pg/mL范围内,在月经期略有升高、在某些癌症中有中度增高、在手术后有显著提高。
IL-6通过细胞表面异二聚体受体复合物引发细胞信号,该复合物由一个配体结合亚单位 (IL-6受体)和一个信号转导亚单位gp130组成。IL-6结合到IL-6受体上,引发了IL-6受体与gp130的结合及gp130的二聚体化。gp130也是CLC、CNTF、CT-1、IL-11、IL-27、LIF和OSM受体的组成部分。可溶性IL-6受体是由选择性剪接和蛋白水解产生的。通过一个反式信号传导机制,可溶性IL-6和IL-6受体复合物可引发表面缺乏IL-6受体但表达gp130细胞的应答。IL-6受体的表达主要局限于肝细胞、单核细胞、淋巴细胞和静息淋巴细胞,由于gp130分子表达非常广泛,反式信号转导实现了更广泛的细胞类型对IL-6的响应。可溶性gp130剪接体阻止了IL-6/IL-6R的反式信号转导,但不能阻止其他细胞因子利用gp130分子作为共同受体的信号转导。 IL-6与肿瘤坏死因子(TNF)和IL-1一起所引起的急性炎症反应,在发热和肝脏急性炎症反应中几乎起着独一无二的作用,它在急性炎症转化为获得性免疫或者慢性炎症疾病时也发挥重要作用。IL-6失调有助于如肥胖、胰岛素抵抗、炎症性肠道疾病、炎性关节炎以及败血症情况下的慢性炎症,往往涉及IL-6的反式信号转导。在转化生长因子TGF-存在的条件下,IL-6在幼稚型T细胞向Th17炎性细胞分化的过程中其中起重要作用。IL-6调节骨吸收,并且通过促进Th17炎性细胞的活性成,为类风湿性关节炎中造成炎性关节损伤的主要因素I。L-6有助于动脉粥样硬化斑块的形成和不稳定性。但是IL-6也有抗炎症作用,如体育锻炼时骨骼肌分泌IL-6。它作为造血干细胞生长因子促进造血、诱导B细胞成熟为浆细胞、永生化多发性骨髓瘤细胞。IL-6也促进但是启动其它炎症相关的癌症发生,如肠炎相关癌。 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
性能 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
储存/保存方法 |
未开封试剂盒,2-8°C储存。
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
注意事项 |
1. 请在试剂盒有效期内使用。
2. 不同试剂盒及不同批号试剂盒的组分不能混用。 3. 样本值若大于标准曲线的最高值,应将样本用稀释剂(1×)稀释后重新检测;若细胞培养上清液样本需分布稀释,除最后一步用稀释剂稀释外,其它中间稀释可采用细胞培养基。 4. 检测结果的不同可由多种因素引起,包括实验人员的操作、移液器的使用方式、洗板技术、反应时间或温度、试剂盒的储存等。 5. 试剂盒中的终止液是酸性溶液,使用时请做好眼镜、手、面部及衣服的防护。 6. 仅供科研使用,不可用于体外诊断。 |