透明室-用于组织透明化样品的成像室透明组织化-wako富士胶片和光

透明室-用于组织透明化样品的成像室透明组织化-wako富士胶片和光

应用领域 生物产业    

透明室-用于组织透明化样品的成像室
透明室是在使用显微镜观察组织透明化样品时使用的观察容器。透明室由10套硅橡胶板、盖玻片和载玻片组成,它能让您轻松地观察组织透明化后的样品。其中有五种厚度的硅橡胶可供作垫片,分别为0.3 mm、0.5 mm、1.0 mm、2.0 mm和3.0 mm,可根据您的样品选择所需尺寸。

用于组织透明化样品的成像室透明室-用于组织透明化样品的成像室透明组织化-wako富士胶片和光

透明室

 

 

透明室-用于组织透明化样品的成像室透明组织化-wako富士胶片和光

 

透明室是在使用显微镜观察组织透明化样品时使用的观察容器。透明室由10套硅橡胶板、盖玻片和载玻片组成,它能让您轻松地观察组织透明化后的样品。其中有五种厚度的硅橡胶可供作垫片,分别为0.3 mm、0.5 mm、1.0 mm、2.0 mm和3.0 mm,可根据您的样品选择所需尺寸。

硅橡胶板的两侧贴有保护膜,可在使用时剥离,从而使载玻片与盖玻片紧密接触。

 

 

透明室-用于组织透明化样品的成像室透明组织化-wako富士胶片和光

 

 

◆透明化工序(使用SeeDB时)

 

1. 在4°C下用4%多聚甲醛/ PBS固定小鼠大脑,过夜。

2. 用PBS清洗3次样品(各10 min)。

3. 将样品放入装有20 mL SeeDB:20 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中。在室温下,用旋转器旋转试管

3. 4~8 h(月4 rpm)。易损的样品和切片可使用跷跷板振荡摇床。(约17 rpm)。

4. 将样品转移至装有SeeDB:40 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中,室温下旋转4~8 h。

5. 将样品转移至装有SeeDB:60 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中,室温下旋转4~8 h。

6. 将样品转移至装有SeeDB:80 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中,室温下旋转12 h。

7. 将样品转移至装有SeeDB:100 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中,室温下旋转12 h。

8. 将样品转移至装有SeeDB的50 mL锥形管中,室温下旋转24 h。

 

透明室-用于组织透明化样品的成像室透明组织化-wako富士胶片和光

 

图1. 使用SeeDB的生物体样品的透明化

 

从左至右分别为使用SeeDB透明化处理的小鼠胎儿(胎儿12天),新生小鼠(生后3天)的全脑,成年小鼠大脑切片(8周龄,厚度2 mm)的案例。

 

 

 

◆安装方法

 

1. 使用与样品尺寸相匹配的透明室

2. 使用SeeDB时,请使用SeeDB液安装样品。

*若样品较小,观察时会移动的话可使用琼脂糖凝胶等固定样品。

 

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◆观察

 

1. 使用激光共聚焦显微镜或双光子激发显微镜观察SeeDB处理的大脑样品。

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*使用SeeDB透明化处理的样品的折射率较高,为1.49。因此虽然适用于甘油浸没透镜,油浸透镜以及透明化用透镜,但是水浸透镜的

*使用深度只达约2 mm。浸泡液请使用各厂商推荐的浸泡液。请不要使用SeeDB液作为浸泡液。使用空气物镜(折射率1.0)或水浸物

*镜(折射率1.33)获得图像时,深度的数值需进行校正。(校正公式请参阅参考文献)。

 

 

◆观察实例

 

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图2. 使用双光子激发显微镜获得的Thy1-YFP-H 小鼠(10周龄)大脑荧光图像

 

 

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图3. 使用共焦距显微镜获得的Thy1-YFP-H 小鼠(10周龄)大脑荧光图像

 

 

◆产品列表

 

产品编号

产品名称

产品规格

产品等级

294-35631

透明室,0.3 mm厚

10 set

组织光学透明试剂

291-35641

透明室,0.5 mm厚

10 set

组织光学透明试剂

295-35661

透明室,1.0 mm厚

10 set

组织光学透明试剂

292-35671

透明室,2.0 mm厚

10 set

组织光学透明试剂

299-35681

透明室,3.0 mm厚

10 set

组织光学透明试剂

 

 

◆相关产品

 

产品编号

产品名称

包装

规格

291-79601

SeeDB实验试剂盒

1 kit

组织透明化

193-18391

SeeDB:20w/v% 果糖溶液

250 mL

组织透明化

196-18401

SeeDB:40w/v% 果糖溶液

250 mL

组织透明化

193-18411

SeeDB:60w/v% 果糖溶液

250 mL

组织透明化

190-18421

SeeDB:80w/v% 果糖溶液

250 mL

组织透明化

197-18431

SeeDB:100w/v% 果糖溶液

250 mL

组织透明化

194-18441

SeeDB
深层透明化试剂

250 mL

组织透明化

160-16061

多聚甲醛

100 g

组织固定用

162-16065

500 g

164-25511

1×PBS(-)平衡缓冲液

5 L

生化学用

045-33421

细胞膜橙红色荧光探针

10 mg

细胞生物学用

041-33423

50 mg