透明室-用于组织透明化样品的成像室透明组织化-wako富士胶片和光

透明室-用于组织透明化样品的成像室透明组织化-wako富士胶片和光

应用领域 生物产业    

透明室-用于组织透明化样品的成像室
透明室是在使用显微镜观察组织透明化样品时使用的观察容器。透明室由10套硅橡胶板、盖玻片和载玻片组成,它能让您轻松地观察组织透明化后的样品。其中有五种厚度的硅橡胶可供作垫片,分别为0.3 mm、0.5 mm、1.0 mm、2.0 mm和3.0 mm,可根据您的样品选择所需尺寸。

用于组织透明化样品的成像室透明室-用于组织透明化样品的成像室透明组织化-wako富士胶片和光

透明室

 

 

透明室-用于组织透明化样品的成像室透明组织化-wako富士胶片和光

 

透明室是在使用显微镜观察组织透明化样品时使用的观察容器。透明室由10套硅橡胶板、盖玻片和载玻片组成,它能让您轻松地观察组织透明化后的样品。其中有五种厚度的硅橡胶可供作垫片,分别为0.3 mm、0.5 mm、1.0 mm、2.0 mm和3.0 mm,可根据您的样品选择所需尺寸。

硅橡胶板的两侧贴有保护膜,可在使用时剥离,从而使载玻片与盖玻片紧密接触。

 

 

透明室-用于组织透明化样品的成像室透明组织化-wako富士胶片和光

 

 

◆透明化工序(使用SeeDB时)

 

1. 在4°C下用4%多聚甲醛/ PBS固定小鼠大脑,过夜。

2. 用PBS清洗3次样品(各10 min)。

3. 将样品放入装有20 mL SeeDB:20 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中。在室温下,用旋转器旋转试管

3. 4~8 h(月4 rpm)。易损的样品和切片可使用跷跷板振荡摇床。(约17 rpm)。

4. 将样品转移至装有SeeDB:40 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中,室温下旋转4~8 h。

5. 将样品转移至装有SeeDB:60 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中,室温下旋转4~8 h。

6. 将样品转移至装有SeeDB:80 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中,室温下旋转12 h。

7. 将样品转移至装有SeeDB:100 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中,室温下旋转12 h。

8. 将样品转移至装有SeeDB的50 mL锥形管中,室温下旋转24 h。

 

透明室-用于组织透明化样品的成像室透明组织化-wako富士胶片和光

 

图1. 使用SeeDB的生物体样品的透明化

 

从左至右分别为使用SeeDB透明化处理的小鼠胎儿(胎儿12天),新生小鼠(生后3天)的全脑,成年小鼠大脑切片(8周龄,厚度2 mm)的案例。

 

 

 

◆安装方法

 

1. 使用与样品尺寸相匹配的透明室

2. 使用SeeDB时,请使用SeeDB液安装样品。

*若样品较小,观察时会移动的话可使用琼脂糖凝胶等固定样品。

 

透明室-用于组织透明化样品的成像室透明组织化-wako富士胶片和光

 

 

◆观察

 

1. 使用激光共聚焦显微镜或双光子激发显微镜观察SeeDB处理的大脑样品。

透明室-用于组织透明化样品的成像室透明组织化-wako富士胶片和光

 

*使用SeeDB透明化处理的样品的折射率较高,为1.49。因此虽然适用于甘油浸没透镜,油浸透镜以及透明化用透镜,但是水浸透镜的

*使用深度只达约2 mm。浸泡液请使用各厂商推荐的浸泡液。请不要使用SeeDB液作为浸泡液。使用空气物镜(折射率1.0)或水浸物

*镜(折射率1.33)获得图像时,深度的数值需进行校正。(校正公式请参阅参考文献)。

 

 

◆观察实例

 

透明室-用于组织透明化样品的成像室透明组织化-wako富士胶片和光

 

图2. 使用双光子激发显微镜获得的Thy1-YFP-H 小鼠(10周龄)大脑荧光图像

 

 

透明室-用于组织透明化样品的成像室透明组织化-wako富士胶片和光

 

图3. 使用共焦距显微镜获得的Thy1-YFP-H 小鼠(10周龄)大脑荧光图像

 

 

◆产品列表

 

产品编号

产品名称

产品规格

产品等级

294-35631

透明室,0.3 mm厚

10 set

组织光学透明试剂

291-35641

透明室,0.5 mm厚

10 set

组织光学透明试剂

295-35661

透明室,1.0 mm厚

10 set

组织光学透明试剂

292-35671

透明室,2.0 mm厚

10 set

组织光学透明试剂

299-35681

透明室,3.0 mm厚

10 set

组织光学透明试剂

 

 

◆相关产品

 

产品编号

产品名称

包装

规格

291-79601

SeeDB实验试剂盒

1 kit

组织透明化

193-18391

SeeDB:20w/v% 果糖溶液

250 mL

组织透明化

196-18401

SeeDB:40w/v% 果糖溶液

250 mL

组织透明化

193-18411

SeeDB:60w/v% 果糖溶液

250 mL

组织透明化

190-18421

SeeDB:80w/v% 果糖溶液

250 mL

组织透明化

197-18431

SeeDB:100w/v% 果糖溶液

250 mL

组织透明化

194-18441

SeeDB
深层透明化试剂

250 mL

组织透明化

160-16061

多聚甲醛

100 g

组织固定用

162-16065

500 g

164-25511

1×PBS(-)平衡缓冲液

5 L

生化学用

045-33421

细胞膜橙红色荧光探针

10 mg

细胞生物学用

041-33423

50 mg

 

SeeDB实现生物体样本深层成像透明组织化-Wako富士胶片和光

SeeDB实现生物体样本深层成像透明组织化-Wako富士胶片和光

产地类别 进口 价格区间 面议
仪器种类 多色荧光凝胶成像 应用领域 生物产业

SeeDB实现生物体样本深层成像
今井猛博士等人开发了一种对于水溶性生物体组织的形态和组成在不破坏荧光蛋白以及荧光神经同位素的条件下,可快捷简便地使大脑等生物体组织透明化的方法——SeeDB(See Deep Brain)。SeeDB由水、果糖、还原剂构成。SeeDB法是在使用共聚焦显微镜和双光子激发显微镜下可深层成像的方法。可利用荧光蛋白和神经示踪剂,实现对荧光神经回路的全貌阐

SeeDB实现生物体样本深层成像透明组织化-Wako富士胶片和光SeeDB实现生物体样本深层成像

 

  今井猛博士等人开发了一种对于水溶性生物体组织的形态和组成在不破坏荧光蛋白以及荧光神经同位素的条件下,可快捷简便地使大脑等生物体组织透明化的方法——SeeDB。SeeDB由水、果糖、还原剂构成。

  SeeDB法是在使用共聚焦显微镜和双光子激发显微镜下可深层成像的方法。可利用荧光蛋白和神经示踪剂,实现对荧光神经回路的全貌阐明和定量分析等各种各样的应用。

 

◆SeeDB protocol案例

  SeeDB法,可用于脊椎动物的各种组织,下面以小鼠大脑为例进行介绍。

 

1.固定

 将小鼠大脑在4%多聚甲醛/PBS,4℃下固定过夜。

 样本用PBS清洗三次(每次清洗10分钟)

 

2.透明化处理

③ 将样品加入放有20 mL的SeeDB:20 w/v%果糖溶液的50 mL锥形瓶中。

  在室温下在旋转器中旋转4-8小时(约4 rpm)

  在脆弱的样本和薄片情况也可以用压板式摇床(约17 rpm)

④ 将样本加入放有SeeDB:40 w/v%果糖溶液的50 mL锥形管中,室温下旋转4-8小时。

⑤ 将样本加入放有SeeDB:60 w/v%果糖溶液的50 mL锥形管中,室温下旋转4-8小时。

⑥ 将样本加入放有SeeDB:80 w/v%果糖溶液的50 mL锥形管中,室温下旋转12小时。

⑦ 将样本加入放有SeeDB:100 w/v%果糖溶液的50 mL锥形管中,室温下旋转12小时。

⑧ 将样本加入放有SeeDB的50 mL锥形管中,室温下旋转24小时。

    长时间可延长至48小时。在透明化成功时,透光可观察到组织透明化。

 

3.观察

⑨ 将SeeDB处理过的大脑样本置于共聚焦显微镜或双光子激发显微镜下观察。

 

(注意点)

  样本用SeeDB液固定。用SeeDB透明化处理后的样本折射率可达到1.49。因此,物镜中应该有甘油浸没透镜、油镜、透明化用镜片,即使浸水镜头到达2 mm深度也是没有问题的。浸没式镜片请使用浸没液,SeeDB不能用作浸没液。在使用干式镜头(折射率1.0)和浸水镜头(折射率1.33)获取画像情况下,需要补正深度值(补正值请参考相关文献)。

 

SeeDB 处理案例

SeeDB实现生物体样本深层成像透明组织化-Wako富士胶片和光

SeeDB生物体样本透明化

左起依次为经SeeDB液透明化处理的小鼠幼胎(幼胎12天)

新生鼠(生后3天)的全脑、成鼠大脑(8周龄,厚度2 毫米)

 

SeeDB 观察案例

SeeDB实现生物体样本深层成像透明组织化-Wako富士胶片和光

SeeDB实现生物体样本深层成像透明组织化-Wako富士胶片和光

双光子激发显微镜下的Thy1-YFP-H小鼠

(10周龄)大脑荧光成像

使用Olympus公司产品 

多光子物镜:XLPLN10XSVMP观察案例

共聚焦显微镜下的Thy1-YFP-H小鼠

(10周龄)大脑荧光成像

使用Olympus公司产品

有机硅浸没式物镜:UPLSAPO 10X2观察案例

 

SeeDB实现生物体样本深层成像透明组织化-Wako富士胶片和光

双光子激发显微镜下的Thy1-YFP-H小鼠

(10周龄)大脑荧光成像

使用Olimpus公司产品

多光子物镜:XLSLPLN25XGMP观察案例

比例尺:100 微米

 

 

SeeDB实现生物体样本深层成像透明组织化-Wako富士胶片和光

 

小鼠大脑固定后用Dil标记,SeeDB透明化处理案例   

左:嗅球僧帽细胞树突(横向观察)

右:嗅球僧帽细胞树突(纵向观察)

使用Olympus公司产品

有机硅浸没型物镜:UPLSAPO 20X观察案例。比例尺:100 微米。

 

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
291-79601   SeeDB实验试剂盒  1 kit 组织透明化 
 193-18391 SeeDB:20w/v% 果糖溶液   250 mL  组织透明化
196-18401  SeeDB:40w/v% 果糖溶液  250 mL   组织透明化
 193-18411 SeeDB:60w/v% 果糖溶液   250 mL  组织透明化
 190-18421 SeeDB:80w/v% 果糖溶液   250 mL  组织透明化
197-18431  SeeDB:100w/v% 果糖溶液   250 mL  组织透明化
194-18441   深层透明化试剂  250 mL  组织透明化

SeeDB实现生物体样本深层成像

透明室-用于组织透明化样品的成像室透明组织化-Wako富士胶片和光

透明室-用于组织透明化样品的成像室透明组织化-Wako富士胶片和光

应用领域 生物产业    

透明室-用于组织透明化样品的成像室
透明室是在使用显微镜观察组织透明化样品时使用的观察容器。透明室由10套硅橡胶板、盖玻片和载玻片组成,它能让您轻松地观察组织透明化后的样品。其中有五种厚度的硅橡胶可供作垫片,分别为0.3 mm、0.5 mm、1.0 mm、2.0 mm和3.0 mm,可根据您的样品选择所需尺寸。

用于组织透明化样品的成像室透明室-用于组织透明化样品的成像室透明组织化-Wako富士胶片和光

透明室

 

 

透明室-用于组织透明化样品的成像室透明组织化-Wako富士胶片和光

 

透明室是在使用显微镜观察组织透明化样品时使用的观察容器。透明室由10套硅橡胶板、盖玻片和载玻片组成,它能让您轻松地观察组织透明化后的样品。其中有五种厚度的硅橡胶可供作垫片,分别为0.3 mm、0.5 mm、1.0 mm、2.0 mm和3.0 mm,可根据您的样品选择所需尺寸。

硅橡胶板的两侧贴有保护膜,可在使用时剥离,从而使载玻片与盖玻片紧密接触。

 

 

透明室-用于组织透明化样品的成像室透明组织化-Wako富士胶片和光

 

 

◆透明化工序(使用SeeDB时)

 

1. 在4°C下用4%多聚甲醛/ PBS固定小鼠大脑,过夜。

2. 用PBS清洗3次样品(各10 min)。

3. 将样品放入装有20 mL SeeDB:20 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中。在室温下,用旋转器旋转试管

3. 4~8 h(月4 rpm)。易损的样品和切片可使用跷跷板振荡摇床。(约17 rpm)。

4. 将样品转移至装有SeeDB:40 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中,室温下旋转4~8 h。

5. 将样品转移至装有SeeDB:60 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中,室温下旋转4~8 h。

6. 将样品转移至装有SeeDB:80 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中,室温下旋转12 h。

7. 将样品转移至装有SeeDB:100 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中,室温下旋转12 h。

8. 将样品转移至装有SeeDB的50 mL锥形管中,室温下旋转24 h。

 

透明室-用于组织透明化样品的成像室透明组织化-Wako富士胶片和光

 

图1. 使用SeeDB的生物体样品的透明化

 

从左至右分别为使用SeeDB透明化处理的小鼠胎儿(胎儿12天),新生小鼠(生后3天)的全脑,成年小鼠大脑切片(8周龄,厚度2 mm)的案例。

 

 

 

◆安装方法

 

1. 使用与样品尺寸相匹配的透明室

2. 使用SeeDB时,请使用SeeDB液安装样品。

*若样品较小,观察时会移动的话可使用琼脂糖凝胶等固定样品。

 

透明室-用于组织透明化样品的成像室透明组织化-Wako富士胶片和光

 

 

◆观察

 

1. 使用激光共聚焦显微镜或双光子激发显微镜观察SeeDB处理的大脑样品。

透明室-用于组织透明化样品的成像室透明组织化-Wako富士胶片和光

 

*使用SeeDB透明化处理的样品的折射率较高,为1.49。因此虽然适用于甘油浸没透镜,油浸透镜以及透明化用透镜,但是水浸透镜的

*使用深度只达约2 mm。浸泡液请使用各厂商推荐的浸泡液。请不要使用SeeDB液作为浸泡液。使用空气物镜(折射率1.0)或水浸物

*镜(折射率1.33)获得图像时,深度的数值需进行校正。(校正公式请参阅参考文献)。

 

 

◆观察实例

 

透明室-用于组织透明化样品的成像室透明组织化-Wako富士胶片和光

 

图2. 使用双光子激发显微镜获得的Thy1-YFP-H 小鼠(10周龄)大脑荧光图像

 

 

透明室-用于组织透明化样品的成像室透明组织化-Wako富士胶片和光

 

图3. 使用共焦距显微镜获得的Thy1-YFP-H 小鼠(10周龄)大脑荧光图像

 

 

◆产品列表

 

产品编号

产品名称

产品规格

产品等级

294-35631

透明室,0.3 mm厚

10 set

组织光学透明试剂

291-35641

透明室,0.5 mm厚

10 set

组织光学透明试剂

295-35661

透明室,1.0 mm厚

10 set

组织光学透明试剂

292-35671

透明室,2.0 mm厚

10 set

组织光学透明试剂

299-35681

透明室,3.0 mm厚

10 set

组织光学透明试剂

 

 

◆相关产品

 

产品编号

产品名称

包装

规格

291-79601

SeeDB实验试剂盒

1 kit

组织透明化

193-18391

SeeDB:20w/v% 果糖溶液

250 mL

组织透明化

196-18401

SeeDB:40w/v% 果糖溶液

250 mL

组织透明化

193-18411

SeeDB:60w/v% 果糖溶液

250 mL

组织透明化

190-18421

SeeDB:80w/v% 果糖溶液

250 mL

组织透明化

197-18431

SeeDB:100w/v% 果糖溶液

250 mL

组织透明化

194-18441

SeeDB
深层透明化试剂

250 mL

组织透明化

160-16061

多聚甲醛

100 g

组织固定用

162-16065

500 g

164-25511

1×PBS(-)平衡缓冲液

5 L

生化学用

045-33421

细胞膜橙红色荧光探针

10 mg

细胞生物学用

041-33423

50 mg