CP-466722

CP-466722

货号:
IC3310

品牌:
Jinpan

CP-466722

暂无详情
产品简介
EC EINECS 808-414-0
MDL MFCD17392566
别名 CP466722
CAS 1080622-86-1
分子式 C17H15N7O2
分子量 349.35
储存条件 2-8℃
纯度 ≥98%
单位
生物活性 CP-466722 是一种可逆的 ATM 抑制剂,IC50 值为 4.1 μM,但对 PI3K,PIKK 家族蛋白没有作用[1-3]。
IC50 ATM:4.1 μM [1-3]
In Vitro CP-466722(CP466722,6-10μM)抑制IR诱导的ATM激酶活性,并且抑制可以快速且完全逆转。 CP466722(6,10μM)抑制小鼠细胞中p53诱导和ATM依赖性磷酸化,但CP466722不能抑制Chk1的ATR活性和ATR依赖性磷酸化。 CP466722(6μM)破坏细胞中依赖ATM的细胞周期检查点[1]。 CP466722(1μM)完全抑制MCF7细胞中的ATM依赖性磷酸化。 CP466722(10μM)可降低MCF7细胞中的pKAP1磷酸化,IC50为0.41μM。 CP466722(10μM)抑制pATM和pKAP1信号[2]。 CP-466722(CP466722,5-50μM)比MCF-7癌细胞更强烈地抑制SKBr-3癌细胞的增殖。 CP466722(10μM)在处理48小时后也略微增加了G1期MCF-7和SKBr-3细胞的比例[3]。
激酶实验 为了筛选ATM激酶活性的小分子抑制剂,进行体外激酶测定,并开发ELISA测定法,其测量ATM下游靶标p53的磷酸化状态。纯化重组GST-p53(1-101)和全长Flag标记的ATM和ATR用于ELISA和体外激酶测定。简言之,将Nunc 96孔Maxisorp板用PBS中的2μg纯化的重组GST-p53(1-101)包被过夜(4℃)。所有后续孵育均在室温下进行。将板洗涤(0.05%v/v-Tween/PBS),然后加入纯化的重组全长ATM激酶(30-60ng),最终体积为80μL反应缓冲液(20mM HEPES,50mM NaCl2,在化合物存在或不存在下,10mM MgCl 2,10mM MnCl 2,1mM DTT和1μMATP)。将包括CP-466722(10μM)的化合物一式两份加入板中,并孵育激酶测定法(90分钟)。洗涤平板(0.05%v/v-吐温/ PBS),封闭(1小时,1%w/v-BSA/PBS)并在抗磷酸化(Ser15)-p53抗体(1:1000/PBS)之前冲洗。加入板中并孵育(1小时)。为了减少非特异性结合板,在用HRP缀合的山羊抗兔IgG二抗(1:5000/PBS)温育(1小时)之前洗涤(0.05%v/v-Tween/PBS)。用TMB底物试剂检测与磷酸化GST-p53(1-101)蛋白连接的二抗。开发平板(15-30分钟)并在确定吸光度(λ450nm)之前停止反应(1M H 2 SO 4终浓度)。在ELISA测定中抑制ATM激酶活性的化合物的特征在于使用体外激酶测定法抑制ATM/ATR激酶。使用抗磷酸化(Ser15)-p53抗体的Western印迹用作ATM/ATR抑制的读数[1]。
SMILES NC1=NC(C2=NC=CC=C2)=NN1C3=C4C=C(OC)C(OC)=CC4=NC=N3
靶点 ATM/ATR
细胞实验 将细胞一式三份(40,000个细胞/板)铺板,根据需要孵育,然后将培养基和胰蛋白酶消化的细胞组合并测定活力:Vi-CELL TM XR细胞活力分析仪[1]。
数据来源文献 [1]. Rainey MD, et al. Transient inhibition of ATM kinase is sufficient to enhance cellular sensitivity to ionizing radiation. Cancer Res. 2008 Sep 15;68(18):7466-74.
[2]. Guo K, et al. Development of a cell-based, high-throughput screening assay for ATM kinase inhibitors. J Biomol Screen. 2014 Apr;19(4):538-46.
[3]. Węsierska-Gądek J, et al. Interactions Between Ataxia Telangiectasia Mutated Kinase Inhibition, Poly(ADP-ribose) Polymerase-1 Inhibition and BRCA1 Status in Breast Cancer Cells. J Cancer Prev. 2014 Jun;19(2):125-36.
规格 5mg 10mg

CP-466722是一种有效的,可逆的ATM抑制剂。