CW-069
货号：
IC3660
品牌：
Jinpan
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产品简介
| MDL | MFCD28009372 |
| 别名 | 5-碘-2-[[(2S)-1-氧代-3-苯基-2-[(苯基甲基)氨基]丙基]氨基]苯甲酸;微管动力蛋白HSET变构抑制剂(CW-069) |
| 英文名称 | CW-069 |
| CAS | 1594094-64-0 |
| 分子式 | C23H21IN2O3 |
| 分子量 | 500.33 |
| 储存条件 | -20度 |
| 纯度 | ≥98% |
| 单位 | 瓶 |
| 生物活性 | CW-069 是一种 HSET 的别构抑制剂，IC50 值为 75 μM[1]。 |
| IC50 | HSET:75 μM [1] |
| In Vitro | CW-069是HSET的变构抑制剂，IC50为75μM。 CW-069显示出比KSP更具统计学意义的选择性。 CW-069有效抑制N1E-115细胞，并且有效抑制NHDF细胞，IC50分别为86±10μM和181±7μM。 CW-069（100或200μM）导致具有超数中心体的N1E-115细胞中增加的多极纺锤体，并且对改变正常人真皮成纤维细胞中的双极纺锤体形态没有影响。 CW-069（200μM）通过HSET siRNA转染在N1E-115细胞中诱导多极后期和细胞死亡，并通过monastrol拮抗KSP的抑制，但不在HeLa细胞中发挥有丝分裂停滞[1]。 |
| 激酶实验 | 该方案针对全长，N末端，6His标记的HSET和KSP进行了优化，并测量了MT刺激的蛋白质活性。通过将ATP的水解与经丙酮酸激酶/乳酸脱氢酶反应氧化NADH相结合，通过分光光度法观察到HSET/KSP的Gsp合成酶活性的抑制。通过将纯化的Gsp合成酶/酰胺酶（12.8nM）加入含有以下组分（终浓度）的测定混合物中来启动测定：6nM蛋白质，0.07mg/mL MT，1.56mM谷胱甘肽，10mM亚精胺，2mM ATP，在50 mM Na PIPES（pH 6.8）中加入2.7 mM MgCl 2,1 mM磷酸（烯醇） – 丙酮酸，0.2 mM NADH，50μg/ mL乳酸脱氢酶，100μg/ mL丙酮酸激酶和各种浓度的抑制剂（CW-069） ）在37°C。进行ADP-Glo检测测定。使用多点BioMek Nxp进行所有化合物添加。使用Pherastar酶标仪读取平板[1]。 |
| SMILES | O=C(NC1=CC=C(I)C=C1C(O)=O)[C@@H](NCC2=CC=CC=C2)CC3=CC=CC=C3 |
| 靶点 | HSET;Kinesin |
| 细胞实验 | 通过STR基因分型验证NHDF细胞，HeLa细胞，BT549，MCF-7和MDA-MB-231细胞，并且所有测试的支原体均为阴性。将细胞在补充有10％胎牛血清（FCS）的Dulbecco改良的Eagle培养基（DMEM）中于37℃和5％CO 2下培养。将磺酰罗丹明B比色（SRB）测定中使用的所有化合物（CW-069）溶解在DMSO中并在培养基中稀释至终浓度为0.2％DMSO。对于SRB测定和活细胞成像，将细胞以每孔2,500个细胞的密度接种在96孔板中。 24小时后，用化合物（CW-069）处理细胞72小时，每种浓度一式三份孔。对于SRB测定，然后用三氯乙酸（TCA）固定细胞并用SRB染色。使用Infinite 200 PRO读板仪在545nm的波长下定量荧光。将化合物（CW-069）处理的孔与溶剂对照孔进行比较，并将导致50％溶剂对照细胞生长的化合物浓度指定为IC50浓度，使用Graphpad PRISM 6计算。至少三个生物学重复每次测定都进行[1]。 |
| 数据来源文献 | [1]. Watts CA, et al. Design, synthesis, and biological evaluation of an allosteric inhibitor of HSET that targets cancer cells with supernumerary centrosomes. Chem Biol. 2013 Nov 21;20(11):1399-410. |
| 规格 | 2mg 5mg |
CW069 是一种变构选择性microtubule motor protein HSET抑制剂.