mRNA 脱帽酶 #M0608S 2,000 U-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 合成

mRNA 脱帽酶                              收藏

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#M0608S
2,000 U
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特性

 mRNA 脱帽酶可使带有 m7G 帽结构的 mRNA 脱帽,产生 5’单磷酸末端。

  ·有效替代烟草酸焦磷酸酶(TAP

  ·去除 Cap 0 Cap 1 的效率相同

  ·适用于 5RLM-RACE RNA-seq

  ·1 µl 的酶可在 15 min 内将 20 µg mRNA1.7 kb)完成脱帽

产品信息

 mRNA 脱帽酶可以将 mRNA 5’末端的 7-甲基鸟苷帽(m7G)结构去除,产生 5’单磷酸末端并释放 m7GDPmRNA 脱帽酶能够使各种长度的 mRNA 脱帽,对 Cap 0 Cap 1 的去除效率相同。mRNA 脱帽酶也可将 5’三磷酸末端转化为 5’单磷酸,但转化效率相对较低。5’单磷酸化的 RNA 可用于多种下游应用,包括 5RNA 连接酶介导的 RACERNA-seq 5→3’核酸外切酶消化。

mRNA 脱帽酶(MDE)和烟草酸焦磷酸酶(TAP)脱帽活性的比较

mRNA 脱帽酶                               #M0608S 2,000 U

A)用 mRNA 脱帽酶(MDE)或其它品牌的烟草酸焦磷酸酶(TAP)对 500 nM 5’加帽 RNA25 nt)溶液进行脱帽反应。每种酶使用各自适合的反应缓冲液,且反应体积相同。其它品牌的 TAP 浓度未知,经比较显示 0.3 nM MDE 1 µl TAP 活性相当。脱帽反应后的反应产物使用毛细管电泳分析。需要注意的是,在阴性对照中,所用的合成底物中都存在 10%的三磷酸 RNA。(图 B)测试了在其它条件不变的情况下,引入不同长度、不同种类末端的 RNA,是否会影响 MDE 的活性,在反应中添加 500 ng Jurkat 细胞总 RNA。结果显示:MDE 的脱帽活性不受影响,而 TAP 活性则显着降低,这说明 MDE 的脱帽能力在该测试条件下更稳定。

随酶提供的试剂

 

 

储存温度 (°C)

浓度

mRNA Decapping Enzyme Reaction Buffer

   

 

储存温度

 

-20°C