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mRNA 脱帽酶 收藏
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特性
mRNA 脱帽酶可使带有 m7G 帽结构的 mRNA 脱帽,产生 5’单磷酸末端。
·有效替代烟草酸焦磷酸酶(TAP)
·去除 Cap 0 和 Cap 1 的效率相同
·适用于 5’RLM-RACE 和 RNA-seq
·1 µl 的酶可在 15 min 内将 20 µg 的 mRNA(1.7 kb)完成脱帽
产品信息
mRNA 脱帽酶可以将 mRNA 5’末端的 7-甲基鸟苷帽(m7G)结构去除,产生 5’单磷酸末端并释放 m7GDP。mRNA 脱帽酶能够使各种长度的 mRNA 脱帽,对 Cap 0 和 Cap 1 的去除效率相同。mRNA 脱帽酶也可将 5’三磷酸末端转化为 5’单磷酸,但转化效率相对较低。5’单磷酸化的 RNA 可用于多种下游应用,包括 5’RNA 连接酶介导的 RACE、RNA-seq 和 5’→3’核酸外切酶消化。
mRNA 脱帽酶(MDE)和烟草酸焦磷酸酶(TAP)脱帽活性的比较
(图 A)用 mRNA 脱帽酶(MDE)或其它品牌的烟草酸焦磷酸酶(TAP)对 500 nM 的 5’加帽 RNA(25 nt)溶液进行脱帽反应。每种酶使用各自适合的反应缓冲液,且反应体积相同。其它品牌的 TAP 浓度未知,经比较显示 0.3 nM 的 MDE 与 1 µl 的 TAP 活性相当。脱帽反应后的反应产物使用毛细管电泳分析。需要注意的是,在阴性对照中,所用的合成底物中都存在 10%的三磷酸 RNA。(图 B)测试了在其它条件不变的情况下,引入不同长度、不同种类末端的 RNA,是否会影响 MDE 的活性,在反应中添加 500 ng Jurkat 细胞总 RNA。结果显示:MDE 的脱帽活性不受影响,而 TAP 活性则显着降低,这说明 MDE 的脱帽能力在该测试条件下更稳定。
随酶提供的试剂
储存温度 (°C) |
浓度 |
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mRNA Decapping Enzyme Reaction Buffer |
储存温度
-20°C