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Biolabs（NEB）酶

Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶（无甘油） #M0402L 8000 Units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 等温扩增和链置换

Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶（无甘油）                              收藏

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#M0402L
8000 Units
5,989.00
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产品概述：

Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶是嗜热脂肪芽孢杆菌（Bacillus stearothermophilus）DNA 聚合酶 I，大片段（Bst DNA 聚合酶，大片段）的同源物，由计算机模拟设计完成；利用核酸适配体技术，可逆结合到聚合酶上，从而抑制聚合酶在 45℃ 以下的活性。当温度高于 45℃ 时，核酸适配体会迅速从酶上脱落，无需单独的激活步骤来激活该聚合酶。Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶具有 5´→3´ DNA 的聚合酶活性和强链置换活性，但没有 5´→3´ 核酸外切酶活性。但和野生型 Bst DNA 聚合酶，大片段相比，该酶可有效提高扩增速度、产量、耐盐性和热稳定性。
 

产品特点

• 无甘油版 Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶（NEB #M0538）支持冻干和自动化实验流程

• 可在室温条件下建立反应体系，保持扩增性能的一致性
• WarmStart 技术可消除脱靶扩增，提高反应效率
• 相比野生型 Bst DNA 聚合酶，大片段，具有更高的耐盐性和热稳定性
• 最佳反应温度：60 – 72℃
 

产品性能

 Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶（无甘油）在 LAMP 实验中对人 DNA 靶标检测效果与含甘油版酶相同。

Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶（无甘油） #M0402L 8000 Units
 使用 NEB #M0538 进行 LAMP（DNA 靶标）实验：Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶或 NEB #M0402：Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶（无甘油）。反应加入 1X LAMP 引物和 0.5X LAMP 荧光染料后，分别加入三个数量级的总 Jurkat DNA（10 ng – 0.1 ng），每个样品做 4 个重复，96 孔板，反应体系为 25 µl。同时设置了无模板的对照反应（NTC）。反应混合物在 65℃ 温育 40 分钟，使用实时热循环仪（Bio-Rad® CFX96）中的 SYBR/FAM 通道进行 15 秒一次的荧光检测。每个点代表单个反应的荧光信号超过仪器阈值的时间。除了个别说明外，每个样品都检测到所有四个重复（注：如果各重复的检测时间相似，则检测点重叠）。总体而言，含甘油版酶（NEB #M0538）与无甘油版酶（NEB #M0402）在各个模板起始量下都呈现出相似表现。无模板对照均无扩增。

WarmStart® RTx 反转录酶（无甘油） #M0439L 2000 Units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – cDNA 合成

WarmStart® RTx 反转录酶（无甘油）                              收藏

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#M0439L
2000 Units
5,209.00
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产品概述：

 WarmStart RTx 反转录酶是一种依赖 RNA 的 DNA 聚合酶，由计算机模拟设计完成；利用核酸适配体技术，可逆结合到聚合酶上，从而抑制 RTx 在 40℃ 以下的活性。该酶以 RNA（cDNA 合成）或单链 DNA 作为模板，由引物起始合成一条互补的 DNA 链。RTx 酶是一种性能稳定的反转录酶，适用于扩增反应中 RNA 的检测，特别适用于 LAMP（环介导等温扩增）实验。WarmStart 支持高通量应用、室温反应建立，并提高了扩增反应的一致性和特异性。RTx 反转录酶包含完整的 RNase H 活性。

 

产品特点

• 无甘油版 WarmStart RTx 反转录酶（NEB #M0380）支持冻干和自动化实验流程

• 适合搭配环介导等温扩增（LAMP）使用
• WarmStart® 技术实现了高通量应用、室温反应建立，并提高了扩增反应的一致性和特异性
• 灵敏检测 RNA：LAMP 实验中 1 pg RNA，RT-PCR 实验中 10 fg RNA 起始量
• 最佳反应温度：55 – 65℃
 

产品性能

WarmStart RTx 反转录酶（无甘油）在 RT-LAMP 实验中对人 RNA 靶标检测效果与含甘油版酶相同，可提供稳定而可靠的检测性能。
WarmStart® RTx 反转录酶（无甘油） #M0439L 2000 Units
使用 NEB #M0380 进行 RT-LAMP（RNA 靶标）实验：WarmStart RTx 反转录酶和 NEB #M0538：Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶或 NEB #M0439：WarmStart RTx 反转录酶（无甘油）和 NEB #M0402：Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶（无甘油）。反应加入 1X LAMP 引物和 0.5X LAMP 荧光染料后，分别加入三个数量级的总 Jurkat RNA（10 ng – 0.1 ng），每个样品做 4 个重复，96 孔板，反应体系为 25 µl。同时设置了无模板的对照反应（NTC）。反应混合物在 65℃ 温育 40 分钟，使用实时热循环仪（Bio-Rad® CFX96）中的 SYBR/FAM 通道进行 15 秒一次的荧光检测。每个点代表单个反应的荧光信号超过仪器阈值的时间。除了个别说明外，每个样品都检测到所有四个重复（注：如果各重复的检测时间相似，则检测点重叠）。总体而言，含甘油版酶（NEB #M0538 和 NEB #M0380）与无甘油版酶（NEB #M0402 和 NEB #M0439）在各个模板起始量下都呈现出相似表现。无模板对照均无扩增。

NEBuffer 1.1（10X） #B7201S 5.0 ml-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 限制性内切酶 – 缓冲液稀释液

NEBuffer 1.1（10X）                              收藏

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#B7201S
5.0 ml
339.00
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停产通知

该产品于 2021 年 12 月 15 日停产，替代产品为 NEBuffer™ r1.1（NEB #B6001）

概述

为确保内切酶发挥 100% 的酶切活性，NEB公司随酶免费提供 10X 反应缓冲液（NEBuffer）。绝大多数内切酶配有四种标准反应缓冲液中的一种，但有些内切酶配有特殊的反应缓冲液。四种标准反应缓冲液具有不同颜色标记，以便实验者使用方便。

贮存条件

 -20℃。

NEBuffer 成分

NEBuffer 1.1（黄）：
10 mM Bis Tris Propane-HCl, 10 mM MgCl2, 100 μg/ml
BSA（pH 7.0 @ 25℃）。
NEBuffer 2.1（蓝）：
50 mM NaCl, 10 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 100 μg/ml
BSA（pH 7.9 @ 25℃）。
NEBuffer 3.1（红）：
100 mM NaCl, 50 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 100 μg/ml
BSA（pH 7.9 @ 25℃）。
CutSmart 缓冲液（绿）：
50 mM KAc, 20 mM Tris-Ac, 10 mM Mg(Ac)2, 100 μg/ml
BSA（pH 7.9 @ 25℃）。
NEBuffer EcoRI：

50 mM NaCl, 100 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 0.025% Trition® X-100 (pH 7.5 @ 25℃)。

注意：使用前，反应缓冲液（NEBuffer）应彻底融化并混匀。

RNase 4 #M1284L 12,500 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

RNase 4                              收藏

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#M1284L
12,500 units
4,709.00
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#M1284S
2,500 units
1,179.00
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概述

 RNase 4 是一种单链核糖核酸内切酶，在尿苷-嘌呤序列（切割位点：U/A 和 U/G）中尿苷的 3´ 端产生切割。与单核苷酸特异性 RNase 相比，例如 T1（切割位点：G 后）、RNase U2（切割位点：A 和 G 后）或牛胰腺 RNase A（切割位点：C 和 U 后），RNase 4 可以对底物 RNA 的消化更有针对性。RNase 4 可耐受修饰的尿苷，例如假尿苷、N1-甲基-假尿苷、二氢尿苷和 5-甲氧基-尿苷（Ψ、m1Ψ、D 和 mo5U）。受 RNase 4 酶解化学机制的影响，寡核苷酸产物具有异源 3´ 端，其中大多数为 3´-磷酸或 2´,3´-环磷酸。

RNase 4 #M1284L 12,500 units

特性

• 切割产生大量具有独特谱型的寡核苷酸，对其进行 LC-MS/MS 分析，能够改善对 RNA 的序列表征。
• 核糖核酸内切酶活性可耐受常见的 RNA 化学修饰。
• 改善对 mRNA 5′ Cap 结构的鉴定和分布情况分析。
 

产品描述

 图2：在 LC–MS/MS 技术中使用 RNase 4 可对 mRNA 进行全面的分析

 RNase 4 #M1284L 12,500 units

结构检测：通过互补的 DNA 探针阻断 RNase 4 切割，从而识别并检测 5´ mRNA 末端的相对丰度。使用含有亲和标签的探针分离切割产物，随后进行 LC–MS/MS 分析。仅需通过简单的实验设计，RNase 4 即可产生可预测的、位点特异性的 5´ 端产物。序列分析：为了验证 mRNA 序列及其修饰状态，使用 RNase 4 充分消化样品，产生一系列大小适中的特定寡核苷酸进行 LC–MS/MS 分析。通过将观察到的寡核苷酸与参考序列进行比对，可以生成覆盖图谱。同时额外使用一种或多种 RNases（例如 RNase T1）进行平行消化实验，可以提升 mRNA 的整体覆盖度。尾长度分析：通过切割和释放 poly(A) 尾并进行长度分析，RNase 4 可用于评估 mRNA 3´ 端。

图3：在 LC–MS/MS 技术中使用 RNase 4 改善 mRNA 序列表征
 
 RNase 4 #M1284L 12,500 units
A：RNase 4 消化实验流程示意图。RNA 样品在 3 M 尿素（用户自备）中，90℃ 加热变性 10 分钟。尿素浓度稀释至 1 M 后，在 1X NEBuffer™ r1.1（NEB #M1284）中进行反应。NEBuffer r1.1 以 10X 原液形式提供。消化得到的寡核苷酸库直接用于 LC–MS/MS 分析。B：分别使用 RNase 4 或 RNase T1 对 FLuc mRNA 进行两次独立消化实验，获得具有代表性的序列覆盖图谱。FLuc mRNA 由 HiScribe®  T7（NEB #E2040）试剂盒合成。覆盖图谱中的彩条表示寡核苷酸匹配到参考序列（X 轴）的特定位置。图中标注了序列覆盖度百分比。
 
图 4：使用 RNase 4 进行 mRNA 5´ 端分析的实验流程概览
 
RNase 4 #M1284L 12,500 units
1：在选定的 UA 或 UG 切割位点上游，设计生物素标记的 DNA 寡核苷酸探针，使其与 RNA 的 5´ 端杂交。由于 RNase 4 具有单链 RNA 特异性，因此 DNA:RNA 杂交双链区内的潜在切割位点都会受到保护而阻碍切割。2：RNase 4 消化后，可以通过链霉亲和素磁珠（NEB #S1420）捕获探针杂交的 mRNA 5´ 端产物。3：洗脱富集到的 DNA:RNA 双链，并进行 UHPLC–MS/MS 分析
 
图5：使用 RNase 4 进行 mRNA 5´ 端分析时，使实验设计和数据处理变得简单
 
RNase 4 #M1284L 12,500 units
 
A：RNase H 的切割位点特异性难以预测，与其相比，RNase 4 在切割位点的选择上更灵活，且特异性更好。此外，RNase H 实验流程需要精心设计和优化嵌合的 RNA-DNA 探针，而 RNase 4 实验流程仅使用 DNA 探针。通过 5´ 端或 3´ 端偶联生物素或脱硫生物素，可以在 LC–MS/MS 分析之前通过链霉亲和素富集探针杂交的片段。B：如图 A 所示，使用 RNase 4 或 RNase H 对 FLuc mRNA 进行两次独立实验，获得的 5´ 端切割产物的代表性热图。C：预估 5´ 端加帽产物及其中间体的分布情况。误差条代表两个独立实验的标准差。
 
图 6：根据 RNA 的序列和修饰情况调整反应条件，RNase 4 可以获得更好的比对结果
 
RNase 4 #M1284L 12,500 units
图中显示了长度为 878（红色）或 4,938 个核苷酸（蓝色）的 RNA 的结果。使用 HiScribe T7 高效 RNA 合成试剂盒（NEB #E2040），用同源 m1φTP 代替 UTP，通过体外转录合成长度为 4,938 个核苷酸的 m1φ 完全取代转录本（黄色）。为了获得最大的序列覆盖率，应根据经验确定 RNase 4 的用量，这与其他用于 LC–MS/MS 序列比对的 RNase 类似。一般来说，长度更长和修饰更多的 RNA 需要更多单位的酶才能获得最佳的比对覆盖度。然而，若 RNase 4 过量使用或温育时间过长，未必能获得最高的序列覆盖度，反而可能导致假消化。RNase 4（NEB #M1284）以 50 U/µl 的溶液形式提供。

 

 

NEBuffer 2.1（10X） #B7202S 5.0 ml-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 限制性内切酶 – 缓冲液稀释液

NEBuffer 2.1（10X）                              收藏

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#B7202S
5.0 ml
339.00
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停产通知

该产品于 2021 年 12 月 15 日停产，替代产品为 NEBuffer™ r2.1（NEB #B6002）

概述

为确保内切酶发挥 100% 的酶切活性，NEB公司随酶免费提供 10X 反应缓冲液（NEBuffer）。绝大多数内切酶配有四种标准反应缓冲液中的一种，但有些内切酶配有特殊的反应缓冲液。四种标准反应缓冲液具有不同颜色标记，以便实验者使用方便。

贮存条件

-20℃。

NEBuffer 3.1（10X） #B7203S 5.0 ml-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 限制性内切酶 – 缓冲液稀释液

NEBuffer 3.1（10X）                              收藏

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#B7203S
5.0 ml
339.00
无
无
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停产通知

 该产品于 2021 年 12 月 15 日停产，替代产品为 NEBuffer™ r3.1（NEB #B6003）

概述

为确保内切酶发挥 100% 的酶切活性，NEB公司随酶免费提供 10X 反应缓冲液（NEBuffer）。绝大多数内切酶配有四种标准反应缓冲液中的一种，但有些内切酶配有特殊的反应缓冲液。四种标准反应缓冲液具有不同颜色标记，以便实验者使用方便。

贮存条件

-20℃。

NEBuffer 成分

NEBuffer 1.1（黄）：
10 mM Bis Tris Propane-HCl, 10 mM MgCl2, 100 μg/ml
BSA（pH 7.0 @ 25℃）。
NEBuffer 2.1（蓝）：
50 mM NaCl, 10 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 100 μg/ml
BSA（pH 7.9 @ 25℃）。
NEBuffer 3.1（红）：
100 mM NaCl, 50 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 100 μg/ml
BSA（pH 7.9 @ 25℃）。
CutSmart 缓冲液（绿）：
50 mM KAc, 20 mM Tris-Ac, 10 mM Mg(Ac)2, 100 μg/ml
BSA（pH 7.9 @ 25℃）。

NEBuffer EcoRI：

50 mM NaCl, 100 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 0.025% Trition® X-100 (pH 7.5 @ 25℃)。

注意：使用前，反应缓冲液（NEBuffer）应彻底融化并混匀。

CutSmart 缓冲液（10X） #B7204S 5.0 ml-NEB酶试剂 New England Biolabs

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CutSmart 缓冲液（10X）                              收藏

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
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武汉库存

#B7204S
5.0 ml
339.00
无
无
无
无
无
无

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停产通知

  该产品于 2021 年 12 月 15 日停产，替代产品为 rCutSmart™ 缓冲液（NEB #B6004）

概述

为确保内切酶发挥 100% 的酶切活性，NEB公司随酶免费提供 10X 反应缓冲液（NEBuffer）。绝大多数内切酶配有四种标准反应缓冲液中的一种，但有些内切酶配有特殊的反应缓冲液。四种标准反应缓冲液具有不同颜色标记，以便实验者使用方便。

贮存条件

 -20℃。

NEBuffer 成分

NEBuffer 1.1（黄）：
10 mM Bis Tris Propane-HCl, 10 mM MgCl2, 100 μg/ml
BSA（pH 7.0 @ 25℃）。
NEBuffer 2.1（蓝）：
50 mM NaCl, 10 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 100 μg/ml
BSA（pH 7.9 @ 25℃）。
NEBuffer 3.1（红）：
100 mM NaCl, 50 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 100 μg/ml
BSA（pH 7.9 @ 25℃）。
CutSmart 缓冲液（绿）：
50 mM KAc, 20 mM Tris-Ac, 10 mM Mg(Ac)2, 100 μg/ml
BSA（pH 7.9 @ 25℃）。
 
NEBuffer EcoRI：

50 mM NaCl, 100 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 0.025% Trition® X-100 (pH 7.5 @ 25℃)。

注意：使用前，反应缓冲液（NEBuffer）应彻底融化并混匀。

S-adenosylmethionine #B9003S 0.5 ml-NEB酶试剂 New England Biolabs

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#B9003S
0.5 ml
589.00
有
有
有
无
有
有

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概述

NEB 的所有 DNA 甲基化酶以及某些限制性内切酶中单独提供有 S-腺苷甲硫氨酸（SAM），SAM 制备于 0.005 M 的 H2SO4 和 10％ 的 ETOH 的溶液中并经过滤。
储存温度：
-20℃

无核酸酶水 #B1500L 100 ml-NEB酶试剂 New England Biolabs

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无核酸酶水                              收藏

货 号
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价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
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武汉库存

#B1500L
100 ml
879.00
有
有
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有
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#B1500S
25 ml
359.00
有
有
有
无
有
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概述

无核酸酶水是配制试剂和酶学反应使用的理想用水。生产过程中未使用DEPC等有毒溶剂，因此不会对酶学反应有任何抑制作用。

优势和特性

储存温度：

25℃

NEBuffer r1.1（10X） #B6001V 2X1.25 ml-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 限制性内切酶 – 缓冲液稀释液

NEBuffer r1.1（10X）                              收藏

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价 格(元)
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#B6001V
2X1.25 ml
229.00
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产品描述

为确保内切酶发挥 100% 的酶切活性，NEB 公司随酶免费提供 10X 反应缓冲液（NEBuffer）。绝大多数内切酶配有四种标准反应缓冲液中的一种，但有些内切酶配有特殊的反应缓冲液。四种标准反应缓冲液具有不同颜色标记，以便实验者使用方便。

贮存条件

 -20℃。

NEBuffer 成分

1X NEBuffer r1.1（黄）组分：

10 mM Bis-Tris-Propane-HCl
10 mM MgCl2
100 μg/ml 重组白蛋白
pH 7.0@25°C