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产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – cDNA 合成
WarmStart® RTx 反转录酶（无甘油） 收藏
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#M0439L
2000 Units
5,209.00
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产品概述：
WarmStart RTx 反转录酶是一种依赖 RNA 的 DNA 聚合酶，由计算机模拟设计完成；利用核酸适配体技术，可逆结合到聚合酶上，从而抑制 RTx 在 40℃ 以下的活性。该酶以 RNA（cDNA 合成）或单链 DNA 作为模板，由引物起始合成一条互补的 DNA 链。RTx 酶是一种性能稳定的反转录酶，适用于扩增反应中 RNA 的检测，特别适用于 LAMP（环介导等温扩增）实验。WarmStart 支持高通量应用、室温反应建立，并提高了扩增反应的一致性和特异性。RTx 反转录酶包含完整的 RNase H 活性。
产品特点
• 无甘油版 WarmStart RTx 反转录酶（NEB #M0380）支持冻干和自动化实验流程
• 适合搭配环介导等温扩增（LAMP）使用
• WarmStart® 技术实现了高通量应用、室温反应建立，并提高了扩增反应的一致性和特异性
• 灵敏检测 RNA：LAMP 实验中 1 pg RNA，RT-PCR 实验中 10 fg RNA 起始量
• 最佳反应温度：55 – 65℃
产品性能
WarmStart RTx 反转录酶（无甘油）在 RT-LAMP 实验中对人 RNA 靶标检测效果与含甘油版酶相同，可提供稳定而可靠的检测性能。
使用 NEB #M0380 进行 RT-LAMP（RNA 靶标）实验：WarmStart RTx 反转录酶和 NEB #M0538：Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶或 NEB #M0439：WarmStart RTx 反转录酶（无甘油）和 NEB #M0402：Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶（无甘油）。反应加入 1X LAMP 引物和 0.5X LAMP 荧光染料后，分别加入三个数量级的总 Jurkat RNA（10 ng – 0.1 ng），每个样品做 4 个重复，96 孔板，反应体系为 25 µl。同时设置了无模板的对照反应（NTC）。反应混合物在 65℃ 温育 40 分钟，使用实时热循环仪（Bio-Rad® CFX96）中的 SYBR/FAM 通道进行 15 秒一次的荧光检测。每个点代表单个反应的荧光信号超过仪器阈值的时间。除了个别说明外，每个样品都检测到所有四个重复（注：如果各重复的检测时间相似，则检测点重叠）。总体而言，含甘油版酶（NEB #M0538 和 NEB #M0380）与无甘油版酶（NEB #M0402 和 NEB #M0439）在各个模板起始量下都呈现出相似表现。无模板对照均无扩增。