ONPG 邻硝基苯-β-D吡喃半乳糖苷
货号：
IO0050
品牌：
Jinpan
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产品简介
| MDL | MFCD00063255 |
| EC | EINECS 206-716-1 |
| 别名 | 2-Nitrophenyl beta-D-Galactopyranoside |
| CAS | 369-07-3 |
| 分子式 | C12H15NO8 |
| 分子量 | 301.25 |
| 纯度 | HPLC≥98% |
| 单位 | 瓶 |
| 生物活性 | ONPG 是一种比色和分光光度计底物，用于检测 β-半乳糖苷酶活性。[1] |
| In Vitro | 该酶对ONPG具有高水解能力（100％），对其天然底物乳糖具有中等活性（25.7％）。然而，酶对所有其他生色硝基苯类似物的水解能力非常弱，表明Gal308是具有窄底物特异性的β-半乳糖苷酶。为了研究重组酶的动力学参数，测定了GalP8对ONPG和乳糖的Michaelis-Menten常数（Km），转换数（kcat）和催化效率（kcat/Km）。 ONPG的kcat和Km值分别为464.7±7.8s-1和2.7±0.3mM，乳糖分别为264.2±2.1s-1和7.1±0.8mM。 ONPG（172.1 s-1mM-1）酶的kcat/Km值比乳糖（37.2 s-1mM-1）高4.6倍，这清楚地表明Gal308对ONPG的催化效率要高得多而不是乳糖[1]。 |
| 激酶实验 | 在该研究中使用包括ONPG和乳糖的两种底物测量β-半乳糖苷酶活性。通过遵循从ONPG释放的邻硝基苯酚的量来测量ONPG的β-半乳糖苷酶活性。反应混合物由100μL酶溶液和400μLONPG溶液（2.5g/L，在pH6.8的100mM Tris-HCl缓冲液中）组成。在78℃温育15分钟后，通过加入等体积的1M Na 2 CO 3终止反应。通过在A405测量来定量测定释放的邻硝基苯酚。一个活性单位定义为在测定条件下每分钟产生1μmol邻硝基苯酚所需的酶量。比活性表示为每毫克蛋白质的单位。在含有100μL酶溶液和5％乳糖的相同缓冲液中进行对乳糖活性的测定，并通过煮沸10分钟终止反应，并使用葡萄糖氧化酶 – 过氧化物酶测定试剂盒测定葡萄糖浓度。通过测量A492定量测定释放的葡萄糖。一个酶活性单位定义为每分钟释放1μmol葡萄糖所需的活性量[1]。 |
| SMILES | O[C@H]([C@@H](O)[C@H]1O)[C@@H](O[C@@H]1CO)OC2=C([N+]([O-])=O)C=CC=C2 |
| 靶点 | Others |
| 数据来源文献 | [1]. Zhang X, et al. Metagenomic approach for the isolation of a thermostable β-galactosidase with high tolerance of galactose and glucose from soil samples of Turpan Basin. BMC Microbiol. 2013 Oct 24;13:237. doi: 10.1186/1471-2180-13-237 |
| 规格 | 200mg 10mM*1mL (in Water) 1g |
用于检测β-半乳糖苷酶（β-galactosidase）活性，是β-半乳糖苷酶的显色底物。经β-半乳糖苷酶催化后可产生黄色产物，在410－420nm波长可以检测吸光度。