Doxycycline (hyclate) 盐酸强力霉素
| EC | EINECS 2017-001-1 |
| MDL | MFCD07357237 |
| 别名 | 盐酸多西环素 |
| CAS | 24390-14-5 |
| 分子式 | C22H24N2O8·HC1·1/2C2H6O·1/2H2O |
| 分子量 | 512.94 |
| 纯度 | HPLC≥98% |
| 单位 | 瓶 |
| 生物活性 | Doxycycline hyclate 是一种四环素抗生素，广谱的金属蛋白酶 (MMP) 抑制剂。[1-5] |
| In Vitro | 强力霉素在体外对鸡毒支原体菌株S6显示出优异的有效性和时间依赖性[2]。与对照成骨细胞培养物相比，在所有实验时间点，暴露于含有25μg/ mL多西环素（DOX）/β-环糊精（βCD）的复合物的成骨细胞具有增加的细胞增殖（p <0.05），在第二周达到最大值。暴露于DOX /βCD复合物的成骨细胞中碱性磷酸酶（AP）活性和胶原分泌水平也升高（与对照相比p <0.05），14天后达到最大值[3]。强力霉素（20 nM）抑制SMC（平滑肌细胞）类型培养物中ECM（细胞外基质）的产生和重塑，SMC-Ch（富含胆固醇的饮食）中胶原蛋白和异戊二烯化蛋白的合成高于SMC -C（标准饮食）[4]。 |
| In Vivo | 在杂合（HT）Col3a1敲除小鼠中，在用强力霉素或安慰剂治疗3个月后，对9个月大的HT或野生型（WT）小鼠进行主动脉的外科应力。干预后1周未治疗的HT小鼠中应力诱导的主动脉病变增加3倍（累积评分4.5±0.87对比WT中的1.3±0.34，p <0.001）在强力霉素中完全预防（25或100 mg / kg） ，po） – 处理组（1.1±0.56）[1]。 |
| 激酶实验 | 将明胶（0.1％（w/v））加入到标准LaemmLi丙烯酰胺聚合混合物中。将组织提取物与样品缓冲液[250mM Tris-Cl pH 6.8,10％（w/v）SDS，20％（v）1：2混合。/v）甘油，0.005％（w/v）溴酚蓝]。血清用电泳缓冲液（2.5mM Tris，20mM甘氨酸，0.005％SDS）1:10稀释，并与样品缓冲液1：2混合。二十μL是在室温下孵育10分钟而不煮沸。在90V电泳后，将凝胶浸泡在2.5％（w/v）Triton X-100中，在37℃下在明胶消化缓冲液中孵育2至3天[50] mM Tris-Cl，pH 8.0,8mM CaCl 2,10mM ZnSO 2,0.02％（w/v）NaN 3]，在0.05％考马斯蓝R-250的乙酸/甲醇/水（体积比1：4.5：4.5）中染色），在10％乙酸和5％甲醇中脱色，扫描裂解带强度。裂解带强度与明胶酶活性成正比，并用一维扫描软件进行光密度定量。结果，数值在0.07和3.75之间， 没有通过将光密度测定结果与来自BCA蛋白质测定试剂盒结果的相对光密度分开，使蛋白质含量变得均匀。结果用作任意单位的分析。对于MMP-9的裂解条带的总MMP活性结果，加入活性MMP-9，pro-MMP-2和活性MMP-2。蛋白质大小标记用于确定正确的大小。 |
| SMILES | O=C(C(C1=O)=C(O)[C@@H](N(C)C)[C@]2([H])[C@@H](O)[C@]3([H])[C@@H](C)C4=C(C(C3=C(O)[C@@]21O)=O)C(O)=CC=C4)N.Cl.[0.5H2O].[0.5C2H6O] |
| 靶点 | Bacterial;MMP |
| 动物实验 | 用强力霉素治疗两组6个月大的雌性杂合（HT）Col3a1敲除小鼠3个月。用含有200或800mg/kg多西环素的食物提供治疗。因为这些小鼠的初步测量食物摄入量平均为3.5克/天，动物的平均体重为25克，低剂量和高剂量组的平均药物剂量为25（Doxy25）或100（Doxy100）mg /每天kg，分别。未处理的（野生型）WT和HT小鼠维持常规饮食（NIH-07小鼠/大鼠饮食）并用作对照。 3个月后，在一般吸入麻醉（氧气中异氟醚2％）和无菌条件下，腹主动脉通过以下手术进行手术暴露和应激：通过用无菌方法将腹主动脉阻塞在脊柱上来阻止血流。在肾动脉水平压迫棉签。在髂骨分叉处按压第二个涂药器后，第一个涂药器突然松开，然后释放第二个涂药器。缝合腹部切口，将小鼠放回家笼中。干预后继续治疗。干预一周后，通过过量的异氟烷使小鼠安乐死。收集血液，收获主动脉和结肠和皮肤的部分。 |
| 细胞实验 | 当SMC中的ECM合成开始明显时，所有体外处理在SMC培养物中以90％汇合进行。将多西环素（20 nM）稀释于培养基中，浓度为10μg/ mL（20 nM），此时未报告原代培养的SMC增殖的毒性或变异，以及其他细胞系，培养时间为48小时将SMC-C和SMC-Ch以相同的细胞密度接种在6孔板中，当汇合度达到90％时，向每个含有3.7×104 Bq L- [5-3H] – 脯氨酸的孔中加入1mL培养基（ 9.62×1011 Bq/mmol）。温育48小时后，将细胞用0.5mL 0.5mol/L NaOH裂解1小时。用等量的0.5mol/L HCl中和所得溶液，用Bradford法测定50μL总蛋白质。向剩余的250μL中加入一体积的10％TCA，并在4℃下以13,000g离心15分钟。将所得沉淀物溶于100μL0.2mol/ L NaOH中，然后用1mol/L HCl中和。将溶液与胶原酶缓冲液（Tris-HCl，pH 7.6 20mM，CaCl 2 250mM终浓度）和10单位胶原酶在37℃温育过夜。然后，加入150μL10％TCA并在4℃下以13000g离心15分钟。将得到的上清液加入到4mL闪烁液中，并在液体闪烁计数器LS 600 TA中测量放射性。 |
| 数据来源文献 | [1]. Wilfried Briest, et al. Doxycycline ameliorates the susceptibility to aortic lesions in a mouse model for the vascular type of Ehlers-Danlos syndrome. J Pharmacol Exp Ther. 2011 Jun;337(3):621-7.
[2]. Zhang N, et al. The PK/PD Interactions of Doxycycline against Mycoplasma gallisepticum. Front Microbiol. 2016 May 4;7:653. [3]. Trajano VC, et al. Osteogenic activity of cyclodextrin-encapsulated doxycycline in a calcium phosphate PCL and PLGA composite. Mater Sci Eng C Mater Biol Appl. 2016 Jul 1;64:370-5. [4]. Palomino-Morales R, et al. Inhibition of extracellular matrix production and remodeling by doxycycline in smooth muscle cells. J Pharmacol Sci. 2016 Mar 25. Epub ahead of print [5]. Wang X, et al. FTO is required for myogenesis by positively regulating mTOR-PGC-1α pathway-mediated mitochondria biogenesis. Cell Death Dis. 2017 Mar 23;8(3):e2702. |
| 规格 | 100mg 10mM*1mL (in Water) 500mg |
是一种四环素抗生素，广谱的金属蛋白酶 (MMP) 抑制剂。