DAPI Dihydrochloride; 4′,6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐
MDL | MFCD00012681 |
EC | EINECS 249-186-7 |
别名 | 4′,6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐 |
CAS | 28718-90-3 |
分子式 | C16H15N5·2HCl |
分子量 | 350.25 |
储存条件 | -20℃ |
纯度 | ≥98% |
单位 | 瓶 |
SMILES | N=C(C1=CC2=C(C=C1)C=C(C3=CC=C(C(N)=N)C=C3)N2)N.[H]Cl.[H]Cl |
规格 | 5mg 10mM*1mL in Water 10mM*1mL in DMSO 10mg |
是结合富含A-T碱基对DNA序列的荧光染料。DAPI是一种能够与DNA中大部分A,T碱基相互结合的荧光染料﹐常用于荧光显微镜观测。因为DAPI可以透过完整的细胞膜﹐它可以用于活细胞和固定细胞的染色。当DAPI与双链DNA结合时,最大吸收波长为358nm,最大发射波长为461nm。DAPI的发射光为蓝色,且DAPI和绿色荧光蛋白GFP或Texas Red染剂(红色荧光染剂)的发射波长仅有少部分重叠,可以利用这项特性在单一的样品上进行多重荧光染色。
一般的,用于细胞核染色时,推荐的DAPI工作浓度为0.5-10μg/mL。
注意事项:
1)DAPI对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
2)荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
4)一般的,DAPI常用于固定细胞或组织切片染核;活细胞细胞核的观察更推荐使用Hoechst 33342或Hoechst 33258。
使用方法(仅供参考):
1.固定的细胞或组织染色:
对于固定的细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。DAPI染色通常在其他染色的最后进行。如果不需要进行其它染色,则直接进行DAPI 染色。
a)对于贴壁细胞或组织切片:加入适量DAPI染色液,覆盖住样品即可。
对于悬浮细胞:至少加入待测染色样品体积3倍的染色液,混匀。室温放置3-5分钟。
b)吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。
c)直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长360nm,发射波长460nm。
2. 活细胞或组织染色:
a)细胞培养物中加入适量DAPI染色液,约1/10细胞培养基体积,必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1mL染色液,对于96孔板一个孔需加入100μL染色液。
b)在 37℃培养细胞 10~20 分钟。
c)用 PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
d)直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长360nm,发射波长460nm。