AZD 8055

AZD 8055

货号:
IA2020

品牌:
Jinpan

AZD 8055

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产品简介
别名 5-[2,4-双[(3S)-3-甲基-4-吗啉]吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-甲氧基苯甲醇
英文名称 AZD 8055
CAS 1009298-09-2
分子式 C25H31N5O4
分子量 465.54
纯度 ≥98%
单位
生物活性 AZD-8055 是一种ATP竞争性的 mTOR 抑制剂,IC50 为 0.8 nM。AZD-8055 抑制 mTORC1 和 mTORC2。[1-3]
In Vitro 使用两种不同的测定评估AZD-8055(AZD8055)对mTOR的抑制活性。使用截短的重组mTOR酶,AZD8055的IC 50为0.13±0.05nM。使用从HeLa细胞提取的天然mTOR酶复合物,IC50为0.8±0.2nM。 AZD-8055对所有I类PI3K同种型和PI3K样激酶家族的其他成员显示出优异的选择性(~1,000倍)。 AZD-8055抑制mTORC1底物p70S6K和4E-BP1的磷酸化以及mTORC2底物AKT和下游蛋白的磷酸化。对于pAKT Ser473,AZD8055的细胞IC50计算为24±9nM(n = 13),对于MDA-MB-468细胞中的pS6Ser235/236计算为27±3nM(n = 12)[1]。
In Vivo 在携带U87-MG(PTEN null)胶质母细胞瘤异种移植物的小鼠中,用AZD-8055(AZD8055)口服治疗导致剂量依赖性肿瘤生长抑制为33%,48%和77%,2.5,5和10mg/kg/d每天两次。在携带A549异种移植物的裸鼠中观察到类似的剂量依赖性:分别在2.5,5和10mg/kg/d每天两次后,肿瘤生长抑制分别为44%,55%和93%。当以10mg/kg每天两次或每天以20mg/kg的剂量给药时,AZD8055还导致乳腺癌,肺癌,结肠癌,前列腺癌和子宫异种移植物模型中肿瘤生长和/或消退的显著抑制[1]。 AZD8055显著降低mTOR及其底物的磷酸化水平和体内小胶质细胞的活化,并促进从M1表型到M2表型的小胶质细胞极化。此外,蛛网膜下腔出血(SAH)后AZD8055的使用可显著改善EBI,包括神经细胞凋亡,神经元坏死,脑水肿和血脑屏障通透性[2]。
激酶实验 使用两种方法评估mTOR的抑制:高通量测定使用α筛选捕获复合物技术,其具有重组截短的FLAG标记的mTOR(氨基酸1362-2549;在HEK293细胞中表达)和生物素化的p70肽底物。此外,使用来自HeLa细胞质提取物的全长mTOR的免疫沉淀测定天然mTOR活性,并且内源性mTOR与Rictor和Raptor在蛋白质复合物中。在作为底物的重组4E-BP1蛋白存在下进行激酶测定,通过ELISA形式检测磷酸化产物。使用脂质PIP2作为底物的重组PI3K测量脂质激酶,I类PI3Ksα,β,δ和γ的活性。进行共济失调 – 毛细血管扩张症突变(ATM)和DNA-PK的测定。最后,针对260种激酶的反筛选以10μMAZD-8055的固定浓度进行[1]。
SMILES OCC1=CC(C2=NC3=NC(N4CCOC[C@@H]4C)=NC(N5[C@@H](C)COCC5)=C3C=C2)=CC=C1OC
靶点 mTOR
动物实验 小鼠[1]以0.1mL的体积皮下注射肿瘤细胞(U87-MG为106,A549为5×106),当肿瘤大小达到0.2cm 3时,将小鼠随机分为对照组和治疗组。 AZD-8055通过口服强饲法(0.1mL/10g体重)每日一次或两次给药。对照组仅接收车辆。在研究期间每周两次记录肿瘤体积(通过厚度测量),动物体重和肿瘤状况。计算肿瘤体积。使用大鼠[2] Sprague-Dawley(SD)大鼠(250g)和妊娠SD大鼠(妊娠16-18天,用于小胶质细胞提取)。在实验1中,将48只大鼠(使用54只大鼠,48只大鼠在手术后存活)随机分为4组:假手术组,SAH 3小时组,SAH 24小时组,SAH 72小时组。 SAH 3小时,24小时和72小时组的动物进行实验性SAH,并分别在注射后3小时,24小时和72小时处死(每组n = 12)。在实验2中,将72只大鼠(使用83只大鼠,72只大鼠在手术后存活)随机分配到假手术组(n = 18),SAH +媒介物组(n = 18),SAH +雷帕霉素组(n = 18)。 ,SAH + AZD8055组(n = 18)。在诱导SAH后立即大鼠接受单次腹膜内注射雷帕霉素,所用雷帕霉素的剂量为150μg/ kg体重。 AZD8055通过口服强饲法给药,剂量为14mg/kg体重。载体组中的大鼠用等体积溶剂处理。实验2中的所有大鼠在SAH后24小时被杀死。在实验3中,将富集的小胶质细胞分成5组:对照,OxyHb,OxyHb +载体(DMSO),OxyHb +雷帕霉素和OxyHb + AZD8055。在小胶质细胞再接种后24小时,在新鲜培养基中分别用OxyHb(10μM),DMSO(体积等于雷帕霉素和AZD8055),雷帕霉素(2.74mM),AZD8055(0.8nM)处理细胞。在温育24小时(在37℃,5%CO 2中)后,除去细胞培养基,用PBS洗涤3次并用4%多聚甲醛固定。
细胞实验 对于生长抑制和吖啶染色,将细胞暴露于增加浓度的AZD-8055(0至1,280nM)72至96小时并染色细胞核(0.03mg/mL Hoechst 33342)和酸性囊泡(1μg/ mL吖啶)橙子)。在ArrayScan II平台上以450和536nm捕获图像,并且量化酸性囊泡的百分比和细胞数量。对于LC3评估,在与AZD8055孵育之前,将细胞暴露于e64d /胃蛋白酶抑制剂(10μg/ mL)30至90分钟。将细胞在冰上裂解并通过免疫印迹分析[1]。
数据来源文献 [1]. Chresta CM, et al. AZD8055 is a potent, selective, and orally bioavailable ATP-competitive mammalian target of rapamycin kinase inhibitor with in vitro and in vivo antitumor activity. Cancer Res, 2010, 70(1), 288-298.

[2]. You W, et al. Inhibition of mammalian target of rapamycin attenuates early brain injury through modulating microglial polarization after experimental subarachnoid hemorrhage in rats. J Neurol Sci. 2016 Aug 15;367:224-31.

[3]. Kawata T, et al. Dual inhibition of the mTORC1 and mTORC2 signaling pathways is a promising therapeutic target for adult T-cell leukemia. Cancer Sci. 2017 Oct 27.

规格 10mg 50mg 100mg

AZD-8055 是一种ATP竞争性的 mTOR 抑制剂。