GSK3235025

GSK3235025

货号:
IG2250

品牌:
Jinpan

GSK3235025

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产品简介
有效期 2年
别名 EPZ-015666
英文名称 GSK3235025
CAS 1616391-65-1
分子式 C20H25N5O3
分子量 383.44
储存条件 -20℃
纯度 ≥98%
外观(性状) Solid
单位
生物活性 EPZ015666 是有口服活性的 PRMT5抑制剂,IC50 为 22 nM。[1-2]
IC50 22 nM (PRMT5)[1]
In Vitro 用EPZ015666处理MCL细胞系导致SmD3甲基化和细胞死亡的抑制,IC50值在纳摩尔范围内[1]。 EPZ015666,一种有效的肽竞争性和SAM合作抑制剂,相对于其他甲基转移酶,对PRMT5具有> 10,000倍的特异性[2]。
In Vivo EPZ015666是口服生物可利用的并且适合于体内研究。我们对携带皮下Z-138和Maver-1异种移植物的严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠进行了21天的功效研究,每天两次(BID)口服给药4个剂量组:每公斤25,50,100和200毫克体重(mg / kg)。在连续给药21天后,对动物实施安乐死,并分析血液和组织以确定甲基标记药效学和肿瘤生长抑制(TGI)之间的关系。在两种MCL模型中,EPZ015666在21天后显示剂量依赖性暴露和TGI。与载体治疗的肿瘤相比,在第21天测量的所有EPZ015666剂量组中的肿瘤显示出重量,体积和肿瘤生长的统计学显著差异。以200mg / kg BID给药诱导Z-138细胞中的肿瘤停滞,21天后具有> 93%TGI,而Maver-1细胞显示> 70%TGI。另外,使用Granta-519细胞系测试第三次MCL异种移植物,该细胞系是在第18天达到终点的快速生长模型,并且在200mg / kg组中显示出剂量依赖性功效,45%TGI。 EPZ015666在所有三种模型中都具有良好的耐受性,在200mg / kg剂量组中体重损失最小,没有其他临床观察[1]。
激酶实验 将EPZ015666从1,000至0.051nM连续稀释三倍,并点样到384孔聚丙烯V底微孔板中。将3H-SAM在测定缓冲液中连续稀释两倍,用于七浓度稀释系列,最高浓度为700nM(最终测定浓度)。通过添加4nM酶和40nM肽(两者的最终测定浓度)开始反应。将反应温育60分钟,并通过在测定缓冲液中加入10μL/孔的600μM未标记的SAM(最终测定浓度)来猝灭。对于肽竞争,EPZ015666从1,000至0.051nM连续稀释三倍,并点样到384孔聚丙烯V底微孔板中。将肽在测定缓冲液中连续稀释两倍,得到七峰稀释系列,最高浓度为480nM(最终测定浓度)。通过加入4nM酶和75nM 3H-SAM(两者的最终测定浓度)引发反应。将反应物温育60分钟,并通过在测定缓冲液中加入10μL每孔600μM未标记的SAM(最终测定浓度)来淬灭反应[1]。
SMILES O=C(NC[C@H](O)CN1CCC(C=CC=C2)=C2C1)C3=CC(NC4COC4)=NC=N3
靶点 PRMT5
动物实验 小鼠[1]雄性CD-1小鼠(25-40g; n = 6,每个时间点3只)用单剂量的EPZ015666以2mg / kg静脉尾静脉注射和10mg / kg口服强饲法给药,两种剂量均配制在20%NN-二甲基乙酰胺的水溶液中。将动物禁食过夜并在给药当天给药前称重。通过下颌下或眼眶后出血以预先指定的时间间隔(7个时间点)从动物中取出约30μL血液。对于最后一个时间点(24小时),在动物麻醉(70%CO 2:30%O 2)的同时通过心脏穿刺收集样品。将血液样品转移到K2-EDTA管中并置于湿冰上,然后在4℃(3,000g,15分钟)离心以在样品收集后30分钟内获得血浆。在蛋白质沉淀和LC-MS / MS分析之前,将血浆样品储存在-70±10℃。我们通过分析一系列含有100 ng / mL拉贝洛尔作为内标的对照血浆等分试样和1-3,000 ng / mL EPZ015666来构建标准校准曲线。分析中还包括四个级别的质量控制(3-2,400 ng / mL EPZ015666)。
细胞实验 线性/对数生长的培养细胞在2-20mL培养基中分裂成2×10 5个细胞/ mL的接种密度,这取决于生长期结束时所需的产量。将化合物在DMSO中稀释并加入到每个培养容器中,DMSO的最终浓度为0.2%。使细胞不受干扰地生长96小时。在每个处理期结束时,通过离心(5分钟,1,200rpm)收获细胞,并用PBS冲洗细胞沉淀一次,然后在干冰上冷冻,等待进一步处理。对所有MCL系进行长期增殖测定,根据每种细胞系的生长特征对初始接种密度稍作调整。所有测定均进行12天[1]。
数据来源文献 [1]. Chan-Penebre E, et al. A selective inhibitor of PRMT5 with in vivo and in vitro potency in MCL models. Nat Chem Biol. 2015 Jun;11(6):432-7.
[2]. Kryukov GV, et al. MTAP deletion confers enhanced dependency on the PRMT5 arginine methyltransferase in cancer cells. Science. 2016 Mar 11;351(6278):1214-8
规格 2mg 5mg

是一种有效的,选择性的 PRMT5 抑制剂。