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JQ1

发表于由

JQ1

货号：
IJ0070

品牌：
Jinpan

JQ1

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产品简介
含量 Purity≥98%
别名 (+)-JQ1
CAS 1268524-70-4
分子式 C23H25ClN4O2S
分子量 456.99
纯度 ≥98%
单位 支
生物活性 (+) -JQ-1 是一种 BET bromodomain 抑制剂, 抑制 BRD4 (1/2) 的 IC50 分别为 77 nM 和 33 nM[1]。
IC50 IC50: 77/33 nM (BRD4 (1/2) ) [1]
In Vitro (+) – JQ1代表溴结构域BET家族的有效, 高度特异性和Kac竞争性抑制剂。 (+) – JQ1 (100nM, 48小时) 促进细胞纺锤, 扁平化和角蛋白表达增加所表现出的鳞状分化。 (+) – JQ1 (250 nM) 诱导处理的NMC 797细胞中角蛋白的快速表达, 与 ( – ) – JQ1 (250 nM) 和载体对照相比, 通过定量免疫组织化学测定。 (+) – JQ1 (250 nM) 引发与 ( – ) – JQ1 (250 nM) 相比, 处理的NMC 797细胞的强 (3+) 角蛋白染色的时间依赖性诱导[1]。 (+) – JQ1是BET家族共激活蛋白BRD4的有效噻东嗪抑制剂 (Kd = 90nM) , 其通过MYC致癌基因的转录控制参与癌症的发病机理。 (+) – JQ1的剂量范围研究表明H4Kac4结合的有效抑制, 小鼠BRDT (1) 的IC50值为10nM, 人BRDT (1) 的IC50值为11nM [2]。
In Vivo 将具有已建立的肿瘤的匹配的小鼠组随机化为用 (+) – JQ1 (50mg / kg) 或载体治疗, 通过每日腹膜内注射施用。在随机化之前和治疗四天后, 通过FDG-PET成像评估小鼠。用 (+) – JQ1处理观察到FDG摄取显着降低。肿瘤体积测量证实JQ1治疗可减少肿瘤生长。 (+) – JQ1的药代动力学研究在静脉内和口服给药后在CD1小鼠中进行。静脉内给药 (5mg / kg) 后 (+) – JQ1的平均血浆浓度 – 时间曲线。静脉注射 (+) – JQ1的药代动力学参数表现出优异的药物暴露 (AUC = 2090hr * ng / mL) 和约1小时的半衰期 (T1 / 2) 。口服给药后 (+) – JQ1的平均血浆浓度 – 时间曲线 (10mg / kg) 。口服 (+) – JQ1的药代动力学参数显示出优异的口服生物利用度 (F = 49％) , 峰值血浆浓度 (Cmax = 1180ng / mL) 和药物暴露 (AUC = 2090hr * ng / mL) [1]。
SMILES O=C(C[C@H]1C2=NN=C(N2C3=C(C(C4=CC=C(C=C4)Cl)=N1)C(C)=C(S3)C)C)OC(C)(C)C
靶点 Epigenetic Reader Domain
动物实验 小鼠[1]将具有确定肿瘤的小鼠的匹配群组随机化至用 (+) – JQ1 (50mg / kg) 或载体治疗, 通过每日腹膜内注射施用。对于静脉内尾静脉注射研究, 用5mg / kg的单剂量 (+) – JQ1处理雄性CD1小鼠 (24-29g) , 对于口服管饲研究, 用10mg / kg处理雄性CD1小鼠 (24-29g) 。在麻醉下用异氟醚以预定的时间间隔 (0.033, 0.083, 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 5, 8和24小时) 通过眼眶后穿刺从动物中取出约150μL血液。每个时间点分析三只动物。将血液样品置于冰上并离心以在取样后15分钟内获得血浆样品 (2000×g, 4℃下5分钟) 。将血浆样品储存在约-70℃直至进行分析。在整个研究过程中, 小鼠可以免费获得食物和水。大鼠[2]用载体或 (+) – JQ1 (10mg / kg) 处理成年雄性Sprague-Dawley大鼠。以1/100体重IP治疗。每天两次检查大鼠的死亡率并在第1, 3, 7, 14和21天称重。治疗方案使用每天施用50mg / kg JQ1的4天, 其余每天两次降至10mg / kg。该研究由于在一部分动物中出现不良反应。对于完成3周治疗的所有动物, 如小鼠研究所述测定睾丸质量, 精子活力和精子计数。简而言之, 睾丸固定在Bouin’s并为组织学做准备。另一半用温热的M16缓冲液切碎, 用于精子计数和运动性研究。
细胞实验 将NUT中线癌患者细胞系 (797和11060) 接种在T-25烧瓶中, 并在含有10％胎牛血清和1％青霉素/链霉素的DMEM (797) 或RPMI (11060) 中生长。用250nM (+) – JQ1, 250nM ( – ) – JQ1或等体积的DMSO (0.025％) 处理细胞。在所需的时间点, 将2×10 6个细胞在4℃以500×g旋转5分钟并用PBS洗涤。将沉淀重悬于1mL冷PBS中并逐滴加入, 同时在15mL聚丙烯离心管中轻轻涡旋至9mL 70％乙醇。然后将固定的细胞在-20℃下冷冻过夜。第二天, 将细胞在4℃下以500×g离心10分钟, 并用3mL冷PBS洗涤。将细胞重悬于500μL碘化丙锭染色溶液 (0.2mg / mL RNAse A, 0.02mg / mL碘化丙啶, 0.1％Triton-X的PBS溶液) 中, 并在37℃下孵育20分钟。然后将样品转移到冰上并在BD FACS Canto II上分析。生成直方图并使用FlowJo流式细胞术分析软件[1]进行细胞周期分析。
数据来源文献 [1]. Filippakopoulos P, et al. Selective inhibition of BET bromodomains. Nature. 2010 Dec 23; 468 (7327) :1067-73.

[2]. Matzuk MM, et al. Small-molecule inhibition of BRDT for male contraception. Cell. 2012 Aug 17; 150 (4) :673-84.

[3]. Peirs S, et al. Targeting BET proteins improves the therapeutic efficacy of BCL-2 inhibition in T-cell acute lymphoblastic leukemia. Leukemia. 2017 Feb 3.

[4]. T?gel L, et al. Dual Targeting of Bromodomain and Extraterminal Domain Proteins, and WNT or MAPK Signaling, Inhibits c-MYC Expression and Proliferation of Colorectal Cancer Cells. Mol Cancer Ther. 2016 Jun; 15 (6) :1217-26.

[5]. Sahni JM, et al. Bromodomain and Extraterminal Protein Inhibition Blocks Growth of Triple-negative Breast Cancers through the Suppression of Aurora Kinases. J Biol Chem. 2016 Nov 4; 291 (45) :23756-23768.

[6]. Nakamura Y, et al. Targeting of super-enhancers and mutant BRAF can suppress growth of BRAF-mutant colon cancer cells via repression of MAPK signaling pathway. Cancer Lett. 2017 Aug 28; 402:100-109.

[7]. Bhattacharyya S, et al. Altered hydroxymethylation is seen at regulatory regions in pancreatic cancer and regulates oncogenic pathways. Genome Res. 2017 Nov; 27 (11) :1830-1842.

[8]. Lv B, et al. Enhancement of adenovirus infection and adenoviral vector-mediated gene delivery by bromodomain inhibitor JQ1. Sci Rep. 2018 Aug 1; 8 (1) :11554. doi: 10.1038/s41598-018-28421-x.

[9]. Huang X, et al. Targeting Epigenetic Crosstalk as a Therapeutic Strategy for EZH2-Aberrant Solid Tumors. Cell. 2018 Sep 20; 175 (1) :186-199.e19. doi: 10.1016/j.cell.2018.08.058. Epub 2018 Sep 13.
备注 以上数据均来自公开文献, Jinpan暂未进行独立验证, 仅供参考。These protocols are for reference only. Jinpan does not independently validate these methods.
规格 5mg 10mg 25mg

(+)-JQ-1 是一种 BET bromodomain 抑制剂。

Baricitinib；巴瑞克替尼

发表于由

Baricitinib；巴瑞克替尼

货号：
IB1000

品牌：
Jinpan

Baricitinib；巴瑞克替尼

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产品简介
EC EINECS 691-421-4
别名 LY3009104;INCB028050
英文名称 Baricitinib
CAS 1187594-09-7
分子式 C16H17N7O2S
分子量 371.42
纯度 ≥98%
单位 瓶
生物活性 Baricitinib是选择性的 JAK1 和 JAK2 抑制剂, IC50 分别为5.9 nM 和 5.7 nM[1-3]。
IC50 JAK2:5.7 nM (IC50)

JAK1:5.9 nM (IC50)

Tyk2:53 nM (IC50)

JAK3:560 nM (IC50) [1-3]
In Vitro 在基于细胞的测定中, Baricitinib (INCB028050) 被证明是JAK信号传导和功能的有效抑制剂。在PBMC中, Baricitinib抑制IL-6刺激的经典底物STAT3 (pSTAT3) 的磷酸化和随后的趋化因子MCP-1的产生, IC50值分别为44nM和40nM。在分离的幼稚T细胞中, INCB028050还抑制IL-23刺激的pSTAT3 (IC50 = 20nM) 。重要的是, 这种抑制作用阻止了Th17细胞产生的两种致病细胞因子 (IL-17和IL-22) – 一种具有明显炎症和致病特性的辅助性T细胞亚型 – IC50值为50nM。与之形成鲜明对比的是, 结构相似但无效的JAK1 / 2抑制剂INCB027753和INCB029843在高达10μM的浓度下进行测试时, 在任何这些测定系统中均无显着影响[1]。
In Vivo 与载体相比, 巴西替尼 (INCB028050) 治疗在2周治疗期间抑制后爪体积增加50％, 剂量为1mg / kg, > 95％, 剂量为3或10mg / kg。因为基线爪体积测量是在具有显着疾病迹象的动物的治疗第0天进行的, 所以在肿胀中可能具有> 100％的抑制作用, 显示肿胀显着改善[1]。当与载体对照处理的小鼠相比时, 通过H＆E染色评估的Baricitinib (0.7mg /天) 处理的小鼠表现出显着减少的炎症, 降低的CD8浸润和降低的MHC I类和II类表达。与载体对照处理的小鼠相比, Baricitinib处理的小鼠中CD8 + NKG2D +细胞是鼠和人秃头症 (AA) 中疾病的关键效应物, 其大大减少[2]。
激酶实验 使用具有重组表位标记的激酶结构域的均相时间分辨荧光测定法 (JAK1, 837-1142; JAK2, 828-1132; JAK3, 718-1124; Tyk2, 873-1187) 或全长酶 (cMET) 进行酶测定。和Chk2) 和肽底物。每种酶反应在有或没有测试化合物 (11点稀释) , JAK, cMET或Chk2酶, 500nM (Chk2为100nM) 肽, ATP (对每种激酶特异性的Km或1mM) 下进行, 和在测定缓冲液中加入2.0％DMSO。计算的IC 50值是抑制50％荧光信号所需的化合物浓度。使用200nM的标准条件在Cerep进行另外的激酶测定。测试的酶包括：Abl, Akt1, AurA, AurB, CDC2, CDK2, CDK4, CHK2, c-kit, EGFR, EphB4, ERK1, ERK2, FLT-1, HER2, IGF1R, IKKα, IKKβ, JNK1, Lck, MEK1, p38α, p70S6K, PKA, PKCα, Src和ZAP70 [1]。
SMILES N#CCC1(N2N=CC(C3=C4C(NC=C4)=NC=N3)=C2)CN(S(=O)(CC)=O)C1
靶点 JAK;TYK2;AAK1
动物实验 大鼠[1]雌性大鼠 (每组性别n = 6) 给予10mg / kg Baricitinib剂量, 并通过口服强饲法以10mL / kg给予。前3只大鼠在0 (给药前) , 2小时, 8小时和24小时放血, 并且在给药后1, 4和12小时对第二只三只大鼠放血。 EDTA用作抗凝血剂, 离心样品以获得血浆。已经开发了用于定量INCB028050的分析方法并用于分析来自毒理学研究的样品。该方法将蛋白质沉淀萃取与10％甲醇在乙腈中进行结合并进行LC / MS / MS分析。该方法使用0.1mL研究样品证明线性测定范围为1-5000nM。使用Analyst 1.3.1处理数据。使用加权线性回归 (1 / x2) 从峰面积比对浓度确定标准曲线。小鼠[2] AA的C3H / HeJ移植受体小鼠模型用于这些实验。简言之, 将来自自发性脱发的C3H / HeJ小鼠的脱发性皮肤移植到没有疾病的8-10周龄C3H / HeJ小鼠上。在移植时, 植入渗透泵, 其施用约0.7mg /天的Baricitinib或安慰剂。渗透泵每月更换一次。进行间隔删失数据的时间 – 事件生存分析。 R中的生存和间隔包用于执行对数秩检验。在 (n = 10) Baricitinib治疗小鼠和 (n = 10) 安慰剂治疗小鼠中存活分布相等的假设在5％水平被拒绝, 使用Sun的评分进行精确的对数秩双样本检验p值为0.0035。
细胞实验 通过白细胞分离术分离人PBMC, 然后进行Ficoll-Hypaque离心。为了测定IL-6诱导的MCP-1产生, 在存在或不存在各种浓度的INCB028050 (1 nM, 10 nM, 100 nM) 的情况下, 将PBMC以每孔3.3×10 5个细胞接种于RPMI 1640 + 10％FCS中。 , 1μM和10μM) 。在室温下与化合物预温育10分钟后, 通过向每个孔中加入10ng / mL人重组IL-6来刺激细胞。将细胞在37℃, 5％CO 2下孵育48小时。收获上清液并通过ELISA分析人MCP-1的水平。 INCB028050抑制IL-6诱导的MCP-1分泌的能力被报道为50％抑制所需的浓度 (IC50) 。使用Cell-Titer Glo [1]在3天内进行Ba / F3-TEL-JAK3细胞的增殖。
数据来源文献 [1]. Fridman JS, et al. Selective inhibition of JAK1 and JAK2 is efficacious in rodent models of arthritis: preclinical characterization of INCB028050. J Immunol. 2010 May 1; 184 (9) :5298-307.

[2]. Jabbari A, et al. Reversal of Alopecia Areata Following Treatment With the JAK1/2 Inhibitor Baricitinib. EBioMedicine. 2015 Feb 26; 2 (4) :351-5.

[3]. Khan IM, et al. Intermuscular and perimuscular fat expansion in obesity correlates with skeletal muscle T cell and macrophage infiltration and insulin resistance. Int J Obes (Lond) . 2015 Nov; 39 (11) :1607-18
备注 以上数据均来自公开文献, Jinpan暂未进行独立验证, 仅供参考。
These protocols are for reference only. Jinpan does not independently validate these methods.
规格 5mg 10mg
Baricitinib是选择性， JAK1 和 JAK2 抑制剂。

依鲁替尼

发表于由

依鲁替尼

货号：
II0810

品牌：
Jinpan

依鲁替尼

暂无详情
产品简介
含量 HPLC≥98%
EC EINECS 805-642-2
别名 伊鲁替尼;PCI32765
CAS 936563-96-1
分子式 C25H24N6O2
分子量 440.5
纯度 HPLC≥98%
单位 支
生物活性 Ibrutinib (PCI-32765) 是选择性, 不可逆的 Btk 抑制剂, IC50 值为 0.5 nM。
IC50 IC50: 0.5 nM (Btk)
In Vitro 依鲁替尼 (PCI-32765) 选择性抑制B细胞信号传导和激活。它抑制Btk的自身磷酸化 (IC50 = 11 nM) , Btk生理底物PLCγ的磷酸化 (IC50 = 29 nM) , 以及进一步下游激酶ERK的磷酸化 (IC50 = 13 nM) [1]。依鲁替尼 (PCI-32765) 抑制BCR活化的原代B细胞增殖 (IC50 = 8nM) 。在FcγR刺激后, 依鲁替尼 (PCI-32765) 抑制原代单核细胞中TNFα, IL-1β和IL-6的产生 (IC50分别为2.6, 0.5, 3.9nM) [3]。
In Vivo 依鲁替尼 (PCI-32765) (3.125-50 mg / kg, po) 降低循环自身抗体的水平, 并完全抑制胶原诱导的关节炎小鼠的疾病。依鲁替尼 (PCI-32765) 抑制MRL-Fas (lpr) 狼疮模型中的自身抗体产生和肾病的发展。依鲁替尼 (PCI-32765) (3.125-50 mg / kg, po) 可减少MRL-Fas (lpr) 小鼠的肾脏疾病和自身抗体产生[1]。依鲁替尼 (PCI-32765) (0.1μM) 抑制激活诱导的CLL细胞增殖, 诱导B细胞选择性细胞毒性, 与T细胞相比, 但改变激活诱导的T细胞细胞因子的产生[2]。依鲁替尼 (PCI-32765) 剂量依赖性地且有效地逆转治疗性CIA模型中的关节炎性炎症, ED50为2.6mg / kg /天。依鲁替尼 (PCI-32765) 也可预防CAIA模型中的临床关节炎[3]。
SMILES C=CC(N1C[C@H](N2N=C(C3=CC=C(OC4=CC=CC=C4)C=C3)C5=C(N)N=CN=C52)CCC1)=O
靶点 Btk
动物实验 在第0天和第21天用含有牛II型胶原的弗氏’完全佐剂注射雄性DBA1 / 10laHsd小鼠。在第21天至第35天, 当每只动物的平均临床评分为1.5 (以5的等级) 时, 将小鼠随机分入治疗组。入选后开始依鲁替尼 (PCI-32765) 治疗 (1.56-12.5mg / kg, 口服) 并持续18天。每只爪子每天给予每只小鼠临床评分。使用以下标准进行临床评分评估：0 =正常; 1 =一只后爪或前爪关节受影响或最小弥漫性红斑和肿胀; 2 =两个后爪或前爪关节受累或轻度弥漫性红斑和肿胀; 3 =三个后爪或前爪关节受累或中度弥漫性红斑和肿胀; 4 =明显弥漫性红斑和肿胀或四位关节受影响; 5 =严重的弥漫性红斑和整个爪子严重肿胀, 无法弯曲数字。
细胞实验 通过Ficoll-Hypaque梯度分离从健康人志愿者的外周血单核细胞分离原代人B细胞, 然后使用人Miltenyl人B细胞分离试剂盒II进行阴性选择。在0.2 mL RPMI加10％FBS中, 100, 000克B细胞用依鲁替尼 (PCI-32765) (0.3 nM-10μM) 在一式三份孔中或载体对照中以0.1％DMSO终浓度在37°C下处理30分钟, 5％ CO2, 然后用10μg/ mL抗IgM F (ab’) 2, 5μg/ mL抗CD3 / CD28作为阴性对照或0.5μg/ mL PMA (Phorbal 12-myristate 13-acetate) 刺激细胞积极的控制。在37℃, 5％CO 2下刺激B细胞72小时。用Cell Titer Glo试剂测量增殖并在发光计上测量。
数据来源文献 [1]. Honigberg LA, et al. The Bruton tyrosine kinase inhibitor PCI-32765 blocks B-cell activation and is efficacious in models of autoimmune disease and B-cell malignancy. Proc Natl Acad Sci U S A. 2010 Jul 20; 107 (29) :13075-80.

[2]. Herman SE, et al. Bruton tyrosine kinase represents a promising therapeutic target for treatment of chronic lymphocytic leukemia and is effectively targeted by PCI-32765. Blood. 2011 Jun 9; 117 (23) :6287-96.

[3]. Chang BY, et al. The Bruton tyrosine kinase inhibitor PCI-32765 ameliorates autoimmune arthritis by inhibition of multiple effector cells. Arthritis Res Ther. 2011 Jul 13; 13 (4) :R115.

[4]. Wu H, et al. Irreversible inhibition of BTK kinase by a novel highly selective inhibitor CHMFL-BTK-11 suppresses inflammatory response in rheumatoid arthritis model. Sci Rep. 2017 Mar 28; 7 (1) :466.
备注 以上数据均来自公开文献, Jinpan暂未进行独立验证, 仅供参考。These protocols are for reference only. Jinpan does not independently validate these methods.
规格 10mg 10mM*1mL in DMSO 50mg 100mg

依鲁替尼是一种小分子的 BTK 抑制剂，可与BTK 活性位点上的半胱氨酸残基（ Cys-481）选择性地共价结合，不可逆地抑制 BTK 的活性，进而抑制 BCR 信号通路的激活。

Acetaminophen 对乙酰氨基酚

发表于由

Acetaminophen 对乙酰氨基酚

货号：
IA0030

品牌：
Jinpan

Acetaminophen 对乙酰氨基酚

暂无详情
产品简介
MDL MFCD00002328
EC EINECS 203-157-5
别名 4-乙酰胺基苯酚; ?对羟基乙酰苯胺
CAS 103-90-2
分子式 C8H9NO2
分子量 151.16
纯度 HPLC≥98%
单位 瓶
生物活性 Acetaminophen (paracetamol) 是选择性环氧合酶-2 (COX-2) 的抑制剂[1-3]。
IC50 IC50: COX-2:25.8 μM[1-3]IC50: COX-1:113.7 μM ) [1-3]
In Vitro 在体外, 对乙酰氨基酚引起对COX-2抑制的4.4倍选择性 (COX-1的IC50为113.7μM; COX-2的IC50为25.8μM) 。口服给药后, 最大离体抑制为56％ (COX-1) 和83％ (COX-2) 。在给药后至少5小时, 对乙酰氨基酚血浆浓度保持在COX-2的体外IC 50之上。离体IC 50值 (COX-1：105.2μM; COX-2：26.3μM) 的对乙酰氨基酚与其体外IC 50值相比是有利的。与先前的概念相反, 对乙酰氨基酚抑制COX-2超过80％, 即与非甾体抗炎药 (NSAID) 和选择性COX-2抑制剂相当的程度。然而, 没有达到> 95％COX-1阻断与抑制血小板功能有关[1]。 MTT测定显示, 50mM剂量的对乙酰氨基酚 (APAP) 显着 (p <0.001) 使细胞活力降低至61.5±6.65％。有趣的是, 与对乙酰氨基酚处理的细胞相比, 在对乙酰氨基酚/ HV110共处理细胞中观察到细胞存活率显着 (p <0.01) 增加至79.7±2.47％[2]。
In Vivo 对小鼠施用对乙酰氨基酚 (250 mg / kg, 口服) 导致肝脏损伤和细胞坏死显着 (p <0.001) , 血清肝酶丙氨酸氨基转移酶 (ALT) , 氨基转移酶 (AST) , 碱性磷酸酶 (ALP) 升高证明和γ-谷氨酰转移酶 (γGT) 与正常组比较。相反, 不同剂量柠檬醛 (125, 250和500 mg / kg) 预处理的效果显示ALT血清活性显着 (p <0.05) 降低 (分别为91.79％, 93.07％和95.61％) , AST (分别为93.40％, 91.89％和96.52％) , ALP (分别为39.29％, 37.07％和59.80％) 和γGT (分别为92.83％, 91.59％和93.0％) , 与对乙酰氨基酚组相比。 SLM预处理对ALT活性 (95.90％) , AST (95.03％) , ALP (70.52％) 和γGT (92.69％) 的影响相似[3]。
SMILES O=C(C)NC1=CC=C(O)C=C1
靶点 COX
动物实验 小鼠[3]使用雄性Swiss小鼠 (30-40g) 。将实验动物分成六组, 每组五只动物。首先, 每组在7天内口服接受以下治疗：第I组：小鼠未接受任何治疗 (正常) 。第II组：小鼠接受柠檬醛载体 (0.1％吐温80溶液) 。组III-V：小鼠分别以125, 250和500mg / kg的剂量用柠檬醛预处理。第VI组：用保肝标准药物水飞蓟素 (SLM) (200mg / kg) 预处理小鼠。此后, 动物禁食8小时, 然后在第7天以250mg / kg的剂量在组II-VI中接受口服对乙酰氨基酚。组I口服接受含有0.1％吐温80溶液 (对乙酰氨基酚载体) 的盐水。将储备溶液用作50mg / mL的第一浓度, 然后在0.1％吐温80溶液中稀释以制备25和12.5mg / mL的溶液。给予对乙酰氨基酚12小时后, 收集血清样品和肝组织, 然后进行生物化学和组织学分析。
细胞实验 人肝癌细胞系HepG2在补充有10％胎牛血清 (FBS) , 100U / mL青霉素和100μg/ mL链霉素和2mM L-谷氨酰胺的低葡萄糖DMEM中培养。将细胞保持在37cm的75cm 2烧瓶中, 在含有5％CO 2的潮湿气氛中, 并且每5天以80％汇合度分开。将细胞接种在24孔板 (2×10 5个细胞) 中, 并在37℃下孵育过夜, 然后用含有高葡萄糖浓度的完全DMEM预处理细胞, 以下调自噬。 6小时后, 用从发酵乳杆菌BGHV110菌株 (HV110) 获得的不同浓度的后生物处理细胞, 以选择合适的剂量用于进一步的实验。将生物素溶解在完全DMEM培养基中并以特定的最终浓度添加到细胞中。在所有其他实验中, 接种细胞用50mM对乙酰氨基酚单独处理或用50mM对乙酰氨基酚和选定剂量的冻干HV110共处理。为了分析自噬通量, 在处理的同时, 将细胞暴露于浓度为25μM的溶酶体药物氯喹, 以抑制自噬体 – 溶酶体融合[2]。
数据来源文献 [1]. Hinz, B, et al. Acetaminophen (paracetamol) is a selective cyclooxygenase-2 inhibitor in man. FASEB J, 2008. 22 (2) : p. 383-90.

[2]. Dini? M, et al. Lactobacillus fermentum Postbiotic-induced Autophagy as Potential Approach for Treatment ofAcetaminophen Hepatotoxicity. Front Microbiol. 2017 Apr 6; 8:594.

[3]. Uchida NS, et al. Hepatoprotective Effect of Citral on Acetaminophen-Induced Liver Toxicity in Mice. Evid Based Complement Alternat Med. 2017; 2017:1796209
备注 以上数据均来自公开文献, Jinpan暂未进行独立验证, 仅供参考。These protocols are for reference only. Jinpan does not independently validate these methods.
规格 100mg 500mg

Acetaminophen是选择性环氧合酶-2 (COX-2) 的抑制剂，还是一种有效的肝N-乙酰转移酶 2 (NAT2) 抑制剂。

AGI-6780

发表于由

AGI-6780

货号：
IA4620

品牌：
Jinpan

AGI-6780

暂无详情
产品简介
有效期 2年
MDL MFCD26097285
别名 2-(仲丁基二硫基)-1H-咪唑
英文名称 AGI-6780
CAS 1432660-47-3
分子式 C21H18F3N3O3S2
分子量 481.51
储存条件 2-8℃
纯度 ≥98%
外观（性状） Powder
单位 瓶
生物活性 AGI-6780 有效且选择性抑制肿瘤相关突变体 IDH2R140Q，IC50 为 23±1.7 nM。AGI-6780 对 IDH2WT 的作用效果微弱，IC50 为 190±8.1 nM。[1]
IC50 23±1.7 nM (IDH2R140Q), 190±8.1 nM (IDH2WT)[1]
In Vitro AGI-6780在表达IDH2R140Q的人胶质母细胞瘤U87和TF-1细胞以及IDH1R132H孵育48小时后进行测试，IC50分别为11±2.6 nM，18±0.51 nM和> 1 mM。具有AGI-6780的TF-1R140Q细胞，在2HG降至接近正常生理水平的浓度下，恢复HBG和KLF1基因的表达以及与分化相关的颜色变化。 AGI-6780可逆转IDH2R140Q诱导的TF-1细胞分化阻滞。用AGI-6780（0.2μM和1μM）预处理显著降低TF1R140Q细胞中（R）-2-羟基戊二酸的细胞内浓度，并恢复其经历EPO诱导分化的能力[1]。
激酶实验 将AGI-6780制备成DMSO中的10mM原液，并在DMSO中稀释至50X终浓度，得到50μL反应混合物。使用NADPH耗尽测定法测量将α-酮戊二酸转化为2-羟基戊二酸的IDH酶活性。在测定中，在反应结束时测量剩余的辅因子，加入催化过量的心肌黄酶和刃天青，以产生与剩余的NADPH量成比例的荧光信号。通过直接偶联NADPH产生与通过心肌黄酶将刃天青转化为试卤灵来测量在异柠檬酸至α-酮戊二酸转化方向上的IDH酶活性。
SMILES O=S(C1=CC=C(C2=CSC=C2)C(NC(NC3=CC=CC(C(F)(F)F)=C3)=O)=C1)(NC4CC4)=O
靶点 IDH2 R140Q mutant
细胞实验 使用MoFlow细胞分选仪在用PE-CD34，APC-CD38，PE-CD14，FITC-CD3（克隆HIT3a）和PECy7-CD19（克隆SJ25C1）抗体标记后，从新鲜或冷冻的骨髓抽吸物和血液样品中分选细胞。将未分级的有核血液或骨髓细胞以104细胞/皿接种在Methocult H4434甲基纤维素培养基中，每种条件下一式两份。将AGI-6780（5mM）直接加入培养基中。将培养皿在37℃的潮湿培养箱中培养，并在13天后计数含有至少30个细胞的菌落[1]。
数据来源文献 [1]. Wang F, et al. Targeted inhibition of mutant IDH2 in leukemia cells induces cellular differentiation. Science. 2013 May 3;340(6132):622-6.
规格 2mg 5mg 10mg

AGI-6780是新型，高效且选择性的肿瘤相关突变IDH2（异柠檬酸脱氢酶2）R140Q抑制剂。

AMG319

发表于由

AMG319

货号：
IA2160

品牌：
Jinpan

AMG319

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产品简介
别名 (ALPHAS)-7-氟-ALPHA-甲基-N-9H-嘌呤-6-基-2-(2-吡啶基)-3-喹啉甲胺
英文名称 AMG319
CAS 1608125-21-8
分子式 C21H16FN7
分子量 385.4
纯度 ≥98%
单位 瓶
生物活性 AMG319是一种有效的选择性PI3Kδ抑制剂，IC50为18 nM，选择性比作用于其他PI3Ks高47倍多。[1]
In Vitro AMG319抑制抗- IgM/CD40L-诱导的B细胞增殖，IC50为8.6 nM，并降低pAkt水平，IC50为1.5 nM。AMG319也会抑制HWB中抗- IgD-诱导的CD-69表达。[1]
In Vivo 在雌性Lewis大鼠中，AMG319 (3 mg/kg, p.o.)抑制KLH-诱导的88%的炎症反应。在转基因(IgMm)小鼠中，AMG319 (, p.o.)抑制体内pAKT，IC50为1.9 nM。[1]
激酶实验 PI3K Enzyme Assays: A PI3K Alphascreen assay is used to measure the activity of a panel of four phosphoinositide 3-kinases: PI3Kα, PI3Kβ, PI3Kγ, and PI3Kδ. Enzyme reaction buffer is prepared using sterile water and 50 mM Tris-HCl, pH 7, 14 mM MgCl2, 2 mM sodium cholate, and 100 mM NaCl. 2 mM DTT is added fresh on the day of the experiment. The Alphascreen buffer is made using sterile water and 10 mM Tris-HCl, pH 7.5, 150 mM NaCl, 0.10% Tween 20, and 30 mM EDTA. Then 1 mM DTT is added fresh on the day of the experiment. Compound source plates used for this assay are 384-well Greiner clear polypropylene plates containing test compounds at 5 mM and diluted 1:2 over 22 concentrations. Columns 23 and 24 contained only DMSO, as these wells comprised the positive and negative controls, respectively. Source plates are replicated by transferring 0.5 μL per well into 384-well Optiplates. Each PI3K isoform is diluted in enzyme reaction buffer to 2× working stocks. PI3Kα is diluted to 1.6 nM, PI3Kβ is diluted to 0.8 nM, PI3Kγ is diluted to 15 nM, and PI3Kδ is diluted to 1.6 nM. PI(4,5)P2 is diluted to 10 μM, and ATP was diluted to 20 μM. This 2× stock is used in the assays for PI3Kα and PI3Kβ. For assay of PI3Kγ and PI3Kδ, PI(4,5)P2 is diluted to 10 μM and ATP was diluted to 8 μM to prepare a similar 2× working stock. Alphascreen reaction solutions are made using beads from the anti-GST Alphascreen kit. Two 4× working stocks of the Alphascreen reagents are made in Alphascreen reaction buffer. In one stock, biotinylated-IP4 is diluted to 40 nM and streptavadin-donor beads are diluted to 80 μg/mL. In the second stock, PIP3-binding protein is diluted to 40 nM and anti-GST-acceptor beads were diluted to 80 μg/mL. As a negative control, a reference inhibitor at a concentration ?Ki (40 μM) is included in column 24 as a negative (100% inhibition) control. Using a 384-well Multidrop, 10 μL/well of 2× enzyme stock is added to columns 1–24 of the assay plates for each isoform. An amount of 10 μL/well of the appropriate substrate 2× stock (containing 20 μM ATP for the PI3Kα and -β assays and containing 8 μM ATP for the PI3Kγ and -δ assays) is then added to columns 1–24 of all plates. Plates are then incubated at room temperature for 20 min. In the dark, 10 μL/well of the donor bead solution is added to columns 1–24 of the plates to quench the enzyme reaction. The plates are incubated at room temperature for 30 min. Still in the dark, 10 μL/well of the acceptor bead solution is added to columns 1–24 of the plates. The plates are then incubated in the dark for 1.5 h. The plates are read on an Envision multimode plate reader using a 680 nm excitation filter and a 520–620 nm emission filter.[1]
SMILES C[C@H](NC1=C2N=CNC2=NC=N1)C3=CC4=CC=C(F)C=C4N=C3C5=NC=CC=C5
靶点 PI3K
数据来源文献 [1] Cushing TD, et al. J Med Chem. 2015, 58(1), 480-511.
规格 5mg 10mg 50mg

AMG319是一种有效的选择性PI3Kδ抑制剂。

Evacetrapib

发表于由

Evacetrapib

货号：
IE1680

品牌：
Jinpan

Evacetrapib

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产品简介
有效期 2年
描述 是一种有效的选择性的 CETP 抑制剂。
MDL MFCD00941390
别名 LY-2484595
英文名称 Evacetrapib
CAS 1186486-62-3
分子式 C31H36F6N6O2
分子量 638.65
储存条件 2-8℃
纯度 ≥98%
外观（性状） Solid
单位 瓶
生物活性 Evacetrapib 是一种有效的选择性的 CETP 抑制剂，在人血浆中，抑制人重组 CETP 蛋白 (IC50 为 5.5 nM) 和 CETP 活性，IC50 为 36 nM。[1]
IC50 5.5 nM (CETP)[1]
In Vitro Evacetrapib是一种基于苯并氮杂的新型CETP抑制剂。在缓冲液CETP测定中，化合物的绝对效力为5.5nM。在人血浆CETP测定中，CETP浓度为约2μg/ mL（25nM），并且36nM IC50值再次表明Evacetrapib是针对来自人血浆的重组蛋白或CETP的有效CETP抑制剂。 Evacetrapib显然比Dalcetrapib更有效[1]。
In Vivo 在表达人CETP和apoAI的双转基因小鼠中，Evacetrapib在口服剂量后8小时表现出小于5mg / kg的离体CETP抑制ED50和显著升高的HDL胆固醇。重要的是，与阳性对照torcetrapib相比，在以高暴露倍数给予Evacetrapib的大鼠中未观察到血压升高。以30mg / kg口服施用的Evacetrapib分别在给药后4,8和24小时对CETP活性的抑制率分别为98.4％，98.6％和18.4％。 Evacetrapib以30 mg / kg口服给药导致口服给药后8 h内HDL-C增加129.7％[1]。
激酶实验 从人肝cDNA文库扩增人CETP cDNA，证实该序列与公开的序列相同。在CMV启动子的控制下将cDNA亚克隆到pcDNA3.1载体中。在CV1细胞中建立稳定系，其中上述构建体用于表达重组人CETP。培养基含有分泌的重组CETP蛋白，并通过ELISA试剂盒定量（19ng /μL）。然后将培养基等分到0.2％BSA中并储存在-80℃。在使用前，将原种CETP蛋白在CETP缓冲液（10mM Tris，150mM NaCl和2mM EDTA）中稀释150倍。将测定设置在96孔板中。每孔接受97.5μL稀释的CETP蛋白（终浓度7nM）和2.5μL化合物原液。在37℃温育30分钟后，加入5μL底物原液（与人血浆CETP测定中使用的相同原液），0.16μLVLDL原液（2.5mg / mL，Intracel）和145μLCETP缓冲液，继续培养4小时。读取人血浆CETP测定的信号[1]。
SMILES O=C([C@H]1CC[C@H](CN2C3=C(C)C=C(C)C=C3[C@@H](N(CC4=CC(C(F)(F)F)=CC(C(F)(F)F)=C4)C5=NN(C)N=N5)CCC2)CC1)O
靶点 CETP
动物实验 大鼠[1]使用遥测的男性肥胖Zucker糖尿病大鼠（ZDF fa / fa大鼠，到达时8周龄; n = 4）进行血压研究。所有大鼠都进行了遥测发射器的手术植入，以在整个研究中连续监测血液动力学参数。使大鼠适应Purina 5008食物和自由饮水，直至11周龄。在即将施用化合物之前的24小时期间的平均每日血压作为基线血压。在实验当天，通过口服强饲法施用单次160mg / kg剂量（在10％金合欢中）作为赖氨酸盐的Evacetrapib，并且药物作用被视为在该期间的平均日平均动脉压（MAP）。剂量后24小时。数据表示为MAP与基线的变化。在血压监测的最后一天之后，在给药后1,2,4,8和24小时从眼眶窦收集样品到含有EDTA的管中并加工成血浆。使用液相色谱串联质谱法测量Evacetrapib的血浆浓度。
数据来源文献 [1]. Cao G, et al. Evacetrapib is a novel, potent, and selective inhibitor of cholesteryl ester transfer protein that elevates HDL cholesterol without inducing aldosterone or increasing blood pressure. J Lipid Res. 2011 Dec;52(12):2169-76.
规格 1mg 2mg

Cyclopamine 环巴胺

发表于由

Cyclopamine 环巴胺

货号：
IC0640

品牌：
Jinpan

Cyclopamine 环巴胺

暂无详情
产品简介
MDL MFCD01735266
别名 Alkaloidv
CAS 4449-51-8
分子式 C27H41NO2
分子量 411.62
纯度 HPLC≥98%
单位 瓶
生物活性 Cyclopamine 是 Hedgehog 通路的拮抗剂, 在细胞实验中的 IC50 为 46 nM[1]。
IC50 IC50: 46 nM (Hedgehog, in Hh cell assay) [1]
In Vitro 用小分子Hh抑制剂如HhAntag和天然产物Cyclopamine (均与Smo结合) 治疗可诱导成神经管细胞瘤基因小鼠模型的肿瘤缓解[1]。环巴胺是一种Hedgehog (Hh) 通路拮抗剂。环巴胺抑制细胞生长。环巴胺 (3μM) 抑制Hh通路活性和消化道肿瘤细胞系的生长与PTCHmRNA的表达相关[2]。 Cyclopamine是一种甾体生物碱, 通过与Smo的直接相互作用抑制Hh信号传导[3]。
In Vivo 环巴胺导致异种移植肿瘤持续消退。环巴胺治疗动物的肿瘤完全消退12天[2]。环巴胺 (1.2 mg) 治疗在移植入裸鼠后阻断人胰腺癌细胞的肿瘤形成[3]。
SMILES CC1=C2[C@@]([C@@]3([H])[C@]([C@@]4(C(C[C@@H](O)CC4)=CC3)C)([H])C2)([H])CC[C@@]15[C@@H]([C@@]6([H])[C@](C[C@H](C)CN6)([H])O5)C
靶点 Hedgehog/Smoothened
动物实验 小鼠[3]将总共0.1mL Hanks’平衡盐溶液和含有2×106个细胞的基质胶 (1：1) 皮下注射到CD-1裸鼠中。使肿瘤生长4天至最小体积125mm 3; 对所有受试者同时开始治疗。每天皮下注射小鼠皮下注射载体 (三油酸甘油酯：乙醇4：1v / v) 或环巴胺悬浮液 (每小鼠1.2mg三油酸甘油酯：乙醇4：1v / v) , 持续7天。在治疗期结束时, 从小鼠切下肿瘤, 称重, 然后在4℃下用4％多聚甲醛固定3小时, 包埋在石蜡中并切片 (6μm) 。使用重组Tdt通过TUNEL鉴定凋亡细胞。然后将切片用曙红复染。从随机选择对应于两个对照和两个环巴胺处理的肿瘤的外部, 中间和内部的区域的8×20-放大的视野。我们手动计算了TUNEL阳性细胞核的数量。进行苏木精/伊红染色。
细胞实验 将细胞在96孔板中一式三份培养在测定培养基中, 在0h以正文中指出的浓度加入5E1单克隆抗体, ShhNp和/或环巴胺 (3μM) 。使用CellTiter96比色测定, 通过在490nm (OD490) 在2天和4天的光密度测量来确定活细胞质量。相对生长计算为OD (第4天) -OD (第2天) / OD (第2天) [2]。
数据来源文献 [1]. Peukert S, et al. Identification and structure-activity relationships of ortho-biphenyl carboxamides as potent Smoothened antagonists inhibiting the Hedgehog signaling pathway. Bioorg Med Chem Lett, 2009, 19 (2) , 328-331.

[2]. Berman DM, et al. Widespread requirement for Hedgehog ligand stimulation in growth of digestive tract tumours. Nature, 2003, 425 (6960) , 846-851.

[3]. Thayer SP, et al. Hedgehog is an early and late mediator of pancreatic cancer tumorigenesis. Nature, 2003, 425 (6960) , 851-856.

[4]. Ma W, et al. Reduced Smoothened level rescued Aβ-induced memory deficits and neuronal inflammation in animal models of Alzheimer’s disease. J Genet Genomics. 2018 May 20; 45 (5) :237-246
备注 以上数据均来自公开文献, Jinpan暂未进行独立验证, 仅供参考。These protocols are for reference only. Jinpan does not independently validate these methods.
规格 5mg 10mM*1mL in DMSO 10mg 20mg

是一种特异性Hedgehog信号通路拮抗剂

尼拉帕尼

发表于由

尼拉帕尼

货号：
IN1480

品牌：
Jinpan

尼拉帕尼

暂无详情
产品简介
别名 MK4827
英文名称 Niraparib
CAS 1038915-60-4
分子式 C19H20N4O
分子量 320.39
储存条件 -20℃
纯度 ≥98%
单位 瓶
生物活性 Niraparib (MK-4827) 是高效的 PARP1 和 PARP2 抑制剂, IC50 分别为 3.8 nM 和 2.1 nM[1-3]。
IC50 PARP-2:2.1 nM (IC50) PARP-1:3.8 nM (IC50) V-PARP:330 nM (IC50) TANK-1:570 nM (IC50) PARP-3:1300 nM (IC50) [1-3]
In Vitro 在全细胞试验中, Niraparib (MK-4827) 抑制PARP活性, EC50 = 4nM, EC90 = 45nM。 MK-4827用突变体BRCA-1和BRCA-2抑制癌细胞的增殖, CC50在10-100nM范围内。 MK-4827显示出优异的PARP1和2抑制, IC50分别为3.8和2.1nM, 并且在全细胞试验中[1]。为了验证Niraparib (MK-4827) 抑制这些细胞系中的PARP, 用1μMMK-4827处理A549和H1299细胞不同时间并使用化学发光测定法测量PARP酶活性。结果显示, Niraparib (MK-4827) 在处理后15分钟内抑制PARP, 在1小时时A549细胞抑制约85％, H1299细胞在1小时抑制约55％[2]。
In Vivo Niraparib (MK-4827) 具有良好的耐受性, 并且在BRCA-1缺陷型癌症的异种移植模型中显示出作为单一药剂的功效。 Niraparib (MK-4827) 在体内具有良好的耐受性, 并且在BRCA-1缺陷型癌症的异种移植模型中显示出作为单一药剂的功效。 Niraparib (MK-4827) 的特点是大鼠的药代动力学可接受, 血浆清除率为28 (mL / min) / kg, 分布容积非常高 (Vdss = 6.9 L / kg) , 终末半衰期长 (t1 / 2 = 3.4 h) , 和优异的生物利用度, F = 65％[1]。在两种情况下, Niraparib (MK-4827) 均可增强p53突变Calu-6肿瘤的放射反应, 每天两次给药的单剂量50 mg / kg比25 mg / kg更有效[3]。
SMILES NC(C1=CC=CC2=CN(C3=CC=C([C@H]4CNCCC4)C=C3)N=C21)=O
靶点 PARP
动物实验 小鼠[3]将雌性裸鼠 (Ncr Nu / Nu) 随机分配到治疗组, 每组由5至8只小鼠组成, 当肿瘤直径增大至6.0mm时, 此时开始用Niraparib (MK-4827) 治疗。 Niraparib (MK-4827) 以25mg / kg的剂量每日两次或50mg / kg每天一次给药21天, 或者在肿瘤直径达到8mm的第9天停药。当肿瘤直径达到8.0mm (7.7-8.2mm) 时, 给予分次局部肿瘤照射 (XRT) 。使用由两个平行相对的137Cs源组成的小动物辐照器, 每天一次连续14天或每天两次将辐射 (每个部分2Gy) 递送至小鼠的肿瘤腿部连续14天或连续7天, 剂量率为5戈瑞/分钟。在照射期间, 将未麻醉的小鼠机械固定在夹具中, 使得肿瘤在3.0cm直径的辐射场内居中, 并且动物的身体避免辐射暴露。在给予Niraparib和放射的那天, 在当天的第一次辐射剂量之前1小时施用药物。
细胞实验 使用HT Universal Chemiluminescent PARP Assay Kit在A549和H1299细胞中分析PARP的抑制。简言之, 将细胞用DMSO或1μM镍吡啶 (MK-4827) 处理15, 30, 60或120分钟, 胰蛋白酶消化, 并转移至预冷管中。用冰冷的PBS洗涤细胞两次, 并重悬于冷的PARP提取缓冲液中。将细胞悬浮液在冰上孵育30分钟, 周期性涡旋以破坏细胞膜。离心悬浮液, 将上清液转移到冰上预冷的管中。将96孔板的组蛋白包被孔用1X PARP缓冲液再水化, 并在室温下孵育30分钟。除去PARP缓冲液, 并将通过Bio-Rad蛋白质测定法测定的20μg蛋白质加入每个孔中, 然后加入稀释的PARP-HSA酶和1X PARP缓冲液。然后将条带孔在室温下孵育60分钟, 用含有0.1％Triton X-100的PBS洗涤两次, 然后用PBS洗涤。将稀释的Strep-HRP加入到条带孔中并在室温下孵育60分钟。如前所述再次洗涤孔。将等体积的PeroxyGlow A和B组合并添加到孔中, 并使用读板器立即获得化学发光读数[2]。
数据来源文献 [1]. Jones P, et al. Discovery of 2-{4-[ (3S) -piperidin-3-yl]phenyl}-2H-indazole-7-carboxamide (MK-4827) : a novel oral poly (ADP-ribose) polymerase (PARP) inhibitor efficacious in BRCA-1 and -2 mutant tumors. J Med Chem. 2009 Nov 26; 52 (22) :7170-85.[2]. Bridges KA, et al. Niraparib (MK-4827) , a novel poly (ADP-Ribose) polymerase inhibitor, radiosensitizes human lung and breast cancer cells. Oncotarget. 2014 Jul 15; 5 (13) :5076-86.[3]. Wang L, et al. MK-4827, a PARP-1/-2 inhibitor, strongly enhances response of human lung and breast cancer xenografts to radiation. Invest New Drugs. 2012 Dec; 30 (6) :2113-20
备注 以上数据均来自公开文献, Jinpan暂未进行独立验证, 仅供参考。These protocols are for reference only. Jinpan does not independently validate these methods.
规格 5mg 10mg 25mg
Niraparib是选择性PARP-1和PARP-2抑制剂。

GSK3235025

发表于由

GSK3235025

货号：
IG2250

品牌：
Jinpan

GSK3235025

暂无详情
产品简介
有效期 2年
别名 EPZ-015666
英文名称 GSK3235025
CAS 1616391-65-1
分子式 C20H25N5O3
分子量 383.44
储存条件 -20℃
纯度 ≥98%
外观（性状） Solid
单位 瓶
生物活性 EPZ015666 是有口服活性的 PRMT5抑制剂，IC50 为 22 nM。[1-2]
IC50 22 nM (PRMT5)[1]
In Vitro 用EPZ015666处理MCL细胞系导致SmD3甲基化和细胞死亡的抑制，IC50值在纳摩尔范围内[1]。 EPZ015666，一种有效的肽竞争性和SAM合作抑制剂，相对于其他甲基转移酶，对PRMT5具有> 10,000倍的特异性[2]。
In Vivo EPZ015666是口服生物可利用的并且适合于体内研究。我们对携带皮下Z-138和Maver-1异种移植物的严重联合免疫缺陷（SCID）小鼠进行了21天的功效研究，每天两次（BID）口服给药4个剂量组：每公斤25,50,100和200毫克体重（mg / kg）。在连续给药21天后，对动物实施安乐死，并分析血液和组织以确定甲基标记药效学和肿瘤生长抑制（TGI）之间的关系。在两种MCL模型中，EPZ015666在21天后显示剂量依赖性暴露和TGI。与载体治疗的肿瘤相比，在第21天测量的所有EPZ015666剂量组中的肿瘤显示出重量，体积和肿瘤生长的统计学显著差异。以200mg / kg BID给药诱导Z-138细胞中的肿瘤停滞，21天后具有> 93％TGI，而Maver-1细胞显示> 70％TGI。另外，使用Granta-519细胞系测试第三次MCL异种移植物，该细胞系是在第18天达到终点的快速生长模型，并且在200mg / kg组中显示出剂量依赖性功效，45％TGI。 EPZ015666在所有三种模型中都具有良好的耐受性，在200mg / kg剂量组中体重损失最小，没有其他临床观察[1]。
激酶实验 将EPZ015666从1,000至0.051nM连续稀释三倍，并点样到384孔聚丙烯V底微孔板中。将3H-SAM在测定缓冲液中连续稀释两倍，用于七浓度稀释系列，最高浓度为700nM（最终测定浓度）。通过添加4nM酶和40nM肽（两者的最终测定浓度）开始反应。将反应温育60分钟，并通过在测定缓冲液中加入10μL/孔的600μM未标记的SAM（最终测定浓度）来猝灭。对于肽竞争，EPZ015666从1,000至0.051nM连续稀释三倍，并点样到384孔聚丙烯V底微孔板中。将肽在测定缓冲液中连续稀释两倍，得到七峰稀释系列，最高浓度为480nM（最终测定浓度）。通过加入4nM酶和75nM 3H-SAM（两者的最终测定浓度）引发反应。将反应物温育60分钟，并通过在测定缓冲液中加入10μL每孔600μM未标记的SAM（最终测定浓度）来淬灭反应[1]。
SMILES O=C(NC[C@H](O)CN1CCC(C=CC=C2)=C2C1)C3=CC(NC4COC4)=NC=N3
靶点 PRMT5
动物实验 小鼠[1]雄性CD-1小鼠（25-40g; n = 6，每个时间点3只）用单剂量的EPZ015666以2mg / kg静脉尾静脉注射和10mg / kg口服强饲法给药，两种剂量均配制在20％NN-二甲基乙酰胺的水溶液中。将动物禁食过夜并在给药当天给药前称重。通过下颌下或眼眶后出血以预先指定的时间间隔（7个时间点）从动物中取出约30μL血液。对于最后一个时间点（24小时），在动物麻醉（70％CO 2：30％O 2）的同时通过心脏穿刺收集样品。将血液样品转移到K2-EDTA管中并置于湿冰上，然后在4℃（3,000g，15分钟）离心以在样品收集后30分钟内获得血浆。在蛋白质沉淀和LC-MS / MS分析之前，将血浆样品储存在-70±10℃。我们通过分析一系列含有100 ng / mL拉贝洛尔作为内标的对照血浆等分试样和1-3,000 ng / mL EPZ015666来构建标准校准曲线。分析中还包括四个级别的质量控制（3-2,400 ng / mL EPZ015666）。
细胞实验 线性/对数生长的培养细胞在2-20mL培养基中分裂成2×10 5个细胞/ mL的接种密度，这取决于生长期结束时所需的产量。将化合物在DMSO中稀释并加入到每个培养容器中，DMSO的最终浓度为0.2％。使细胞不受干扰地生长96小时。在每个处理期结束时，通过离心（5分钟，1,200rpm）收获细胞，并用PBS冲洗细胞沉淀一次，然后在干冰上冷冻，等待进一步处理。对所有MCL系进行长期增殖测定，根据每种细胞系的生长特征对初始接种密度稍作调整。所有测定均进行12天[1]。
数据来源文献 [1]. Chan-Penebre E, et al. A selective inhibitor of PRMT5 with in vivo and in vitro potency in MCL models. Nat Chem Biol. 2015 Jun;11(6):432-7.
[2]. Kryukov GV, et al. MTAP deletion confers enhanced dependency on the PRMT5 arginine methyltransferase in cancer cells. Science. 2016 Mar 11;351(6278):1214-8
规格 2mg 5mg

是一种有效的，选择性的 PRMT5 抑制剂。