丙烯葡聚糖凝胶S-300

丙烯葡聚糖凝胶S-300

货号:
S7370

品牌:
Jinpan

产品简介
有效期 2年
单位
规格 25mL 100ml 500ml

丙烯葡聚糖凝胶系列填料是烯丙基葡聚糖和 N,N'-亚甲基双丙烯酰胺的交联共聚物,平均粒径为 50μm,同时增加了基体的刚性,确保快速流动特性和高分辨率。

分离范围

1×104~1.5×106(球蛋白)   2×103~4×105

贮存条件

产品应密封贮存在 4℃~25℃(保存溶液为 20%乙醇)通风、干燥、清洁的地方,不能冷冻。用过的柱子贮存在 4℃(20%乙醇),保质期:2 年。

用途

分离填料,用于蛋白等物质的纯化分离。本品仅供科研,不得用于其它用途。

操作步骤

1 装柱 

(1)让所有的材料和试剂均平衡至层析实验的温度。配制缓冲液,对所有的缓冲液进行脱气处理。 

(2)检查层析柱所有部件,特别是过滤网,密封圈,螺旋塞是否紧密,玻璃管是否干净和完整。 

(3)根据需要量取相应量的凝胶,用去离子水清洗掉 20%乙醇。 

(4)将柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位,务必使底端无气泡。 

(5)用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内,注意勿使产生气泡。打开柱子出液口,使凝胶 在柱内自由沉降,连结好柱子顶端柱头。 

(6)打开蠕动泵,让缓冲液用使用时流速的 1.33 倍的流速流过,使柱床稳定(注意压力不要超过填 料最大耐压)。 

2 平衡 

上样前平衡层析柱至少 5-10 个柱体积,直到记录仪基线变得平稳为止(流出液的 pH 值和电导值等于 上柱 Buffer 的 pH 值和电导值)。 

3 上样 

(1)样品用平衡液配制,样品一定要离心或过滤后上样(0.45um 滤膜),如果样品盐浓度太大,则需要处理后再上样。 

(2)推荐的上样量不超过柱体积的 5%。

4 洗脱 用缓冲液洗脱,洗脱中保持流速、缓冲液组成不变。 

5 再生 一般用缓冲液洗到平衡,可再次使用。在一些应用中,诸如变性蛋白质或脂质体物质在再生过程中洗 脱不掉。出现下面这些情况,是必须需要清洗再生的: (1)背压增加; (2)色谱柱顶部的颜色变化; (3)分辨率降低; (4)转换接头和凝胶表面之间出现空隙。 

如果观察到压力增大,在开始柱清洁程序之前先检查管路中的各个过滤阀、过滤膜是否被污染,然后 通过用 0.1M NaOH 洗涤柱子,除去沉淀的蛋白质,非特异性结合的蛋白质和脂蛋白。

注意事项

(1)上样之前,样品必须经过膜过滤及去除色素,否则杂质及色素会被吸附到填料上,影响填料的

正常使用。所有的缓冲液均需要用 0.45um 的过滤器过滤。

 (2)在使用过程中,避免使用高浓度的强酸强碱,酸和碱的浓度应低于 0.1 摩尔。碱会使流速变慢。

 (3)不同的样品,吸附和洗脱方法不相同,可以根据相关的文献进行。