CHIR-99021
货号：
IC1680
品牌：
Jinpan
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产品简介
| 含量 | HPLC≥98% |
| MDL | MFCD11846251 |
| EC | EINECS 809-015-4 |
| 别名 | CHIR99021 |
| CAS | 252917-06-9 |
| 分子式 | C22H18Cl2N8 |
| 分子量 | 465.34 |
| 纯度 | HPLC≥98% |
| 单位 | 支 |
| 生物活性 | CHIR-99021是 GSK-3α/β 抑制剂， IC50 分别为 10 nM，6.7 nM。 抑制 GSK-3α/β 比同源物 CDC2 和 ERK2 高 500 倍[1-4]。 |
| IC50 | GSK-3β:6.7 nM ; GSK-3α:10 nM [1-4] |
| In Vitro | CHIR 99021是一种小有机分子，通过竞争其ATP结合位点来抑制GSK3α和GSK3β。体外激酶检测显示CHIR 99021特异性抑制GSK3β（IC50 = ~5 nM）和GSK3α（IC50 = ~10 nM），对其他激酶的影响很小[2]。在CHIR-99021存在下，ES-D3细胞的存活率在2.5μM时降低24.7％，在5μM时降低56.3％，在7.5μM时降低61.9％，在10μMCHIR-99021时降低69.2％，IC50为4.9μM [3]。CHIR 99021抑制人GSK-3β，Ki值为9.8 nM [1]。 |
| In Vivo | 在照射前4小时给予CHIR99021（2mg/kg）一次，在14.5Gy腹部照射（ABI）后显著提高存活率。 CHIR99021处理显著阻断了隐窝细胞凋亡和p-H2AX +细胞的积累，并改善了隐窝再生和绒毛高度。 CHIR99021治疗通过阻断细胞凋亡来增加Lgr5 +细胞存活率，并且有效地防止Olfm4，Lgr5和CD44的减少早在4小时[4]。在ZDF大鼠中，单次口服剂量的CHIR 99021（16mg/kg或48mg/kg）迅速降低血浆葡萄糖，给药后3-4小时最大降低近150mg/dl [1]。 |
| 激酶实验 | 通过使用其His或Glu标签从SF9细胞中纯化激酶。纯化Glu标记的蛋白质，纯化His标记的蛋白质。激酶测定在96孔板中用适当的肽底物在300μL反应缓冲液中进行（50mM Tris-HCl，pH 7.5,10mM MgCl 2,1mM EGTA，1mM二硫苏糖醇，25mMβ-甘油磷酸盐，1mM的变化） NaF和0.01％牛血清白蛋白）。肽的Km值为1至100μM。将CHIR 99021或CHIR GSKIA加入3.5μLMe2SO中，然后加入ATP至终浓度为1μM。温育后，将三份100μL等分试样转移至含有100μL/孔50μMATP和20mM EDTA的Combiplate 8平板。 1小时后，用磷酸盐缓冲盐水冲洗孔5次，填充200μL闪烁液，密封，30分钟后在闪烁计数器中计数。所有步骤均为室温。抑制百分比计算为100×（抑制剂 – 无酶对照）/（Me2SO对照 – 无酶对照）[2]。 |
| SMILES | N#CC1=CC=C(N=C1)NCCNC2=NC=C(C(C3=CC=C(Cl)C=C3Cl)=N2)C4=NC=C(N4)C |
| 靶点 | GSK-3 |
| 动物实验 | 大鼠[1]制备重量<140g的雄性Sprague Dawley大鼠的原代肝细胞，并在分离后1-3小时使用。将等份的1×10 6个细胞在1mL DMEM/F12培养基加0.2％BSA和CHIR 99021（口服16或48mg/kg）或对照中在12孔板中在低速振荡器上于37℃孵育30分钟。在富含CO 2的气氛中，通过离心收集并在缓冲液A加0.01％NP40中冷冻/解冻裂解;再次进行GS测定。小鼠[4]使用6-10周龄的小鼠。对C57BL/6背景（F10）和Lgr5-EGFP（Lgr5-EGFP-IRES-creERT2）小鼠的PUMA +/+和PUMA -/- 同窝小鼠进行全身照射（TBI）或腹部照射（ABI）。在放射前4小时腹膜内（ip）注射2mg/kg CHIR99021或在放射前28小时和1小时/ 1mg SB415286注射小鼠。处死小鼠以收集小肠用于组织学分析和蛋白质印迹。在处死前，所有小鼠腹膜内注射100mg/kg BrdU。 |
| 细胞实验 | 使用MTT测定法在暴露于不同浓度的GSK3抑制剂三天后测定小鼠ES细胞的存活力。 MTT活性的降低是一种可靠的基于代谢的测试，用于量化细胞活力;这种减少与细胞活力的丧失相关。将2,000个细胞在含有LIF的ES细胞培养基中的明胶包被的96孔板上接种过夜。第二天，将培养基更换为不含LIF且血清浓度降低的培养基，并补充0.1-1μMBIO，或1-10μMSB-216763，CHIR-99021或CHIR-98014。不含GSK3抑制剂或DMSO的基础培养基用作对照。所有测试条件一式三份进行分析[3]。 |
| 数据来源文献 | [1]. Ring DB, et al. Selective glycogen synthase kinase 3 inhibitors potentiate insulin activation of glucose transport and utilization in vitro and in vivo. Diabetes. 2003 Mar;52(3):588-95. [2]. Bennett CN, et al. Regulation of Wnt signaling during adipogenesis. J Biol Chem. 2002 Aug 23;277(34):30998-1004. [3]. Naujok O, et al. Cytotoxicity and activation of the Wnt/beta-catenin pathway in mouse embryonic stem cells treated with four GSK3 inhibitors.BMC Res Notes. 2014 Apr 29;7:273. [4]. Wang X, et al. Pharmacologically blocking p53-dependent apoptosis protects intestinal stem cells and mice from radiation. Sci Rep. 2015 Apr 10;5:8566. |
| 规格 | 5mg |
是一种有效的选择性 GSK-3α/β 抑制剂，还是一种有效的 Wnt/β-catenin 信号通路激活剂。