NEBNext® 5hmC 甲基化建库酶学转化法模块 #E3365L 96 次反应-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 用于二代测序的 NEBNext® 试剂 – 适用于Illumina测序平台: 模块和酶

NEBNext® 5hmC 甲基化建库酶学转化法模块                              收藏

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#E3365L
96 次反应
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#E3365S
24 次反应
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产品特点

• 卓越的 5hmC 检测灵敏度

• 起始量范围广：0.1 – 200 ng
• 转化效率高
• 最大限度地减少对 DNA 的损伤
• 可单独购买包含文库制备试剂的 NEBNext® 酶学转化法 5hmC 甲基化建库试剂盒（NEB #E3350）
 

产品概述：

 NEBNext® 酶学转化法 5hmC 甲基化建库试剂盒（E5hmC-seq™）是一种在单碱基水平上特异性检测 5hmC 位点的新方法。使用酶学转化法能最大限度地减少对 DNA 的损伤，并可区分 5hmC 与 5mC 和胞嘧啶。

NEBNext® 5hmC 甲基化建库酶学转化法模块使用高效的酶学转化法，实现在单碱基水平上特异性检测 5hmC 位点。在 E5hmC-seq 两步酶法转化过程中，T4-BGT 对 5hmC 进行糖基化，使得 5hmC 在下一步 APOBEC 脱氨基反应中被保护了起来。T4-BGT 不保护 5mC 和未甲基化的胞嘧啶，它们被 APOBEC 脱氨基为尿嘧啶。
在针对 Illumina® 测序平台制备 E5hmC-seq 文库时,推荐您使用 NEBNext® 酶学转化法 5hmC 甲基化建库试剂盒（NEB #E3350），而不是使用该转化模块。试剂盒中包含 E5hmC-seq 接头和 NEBNext Ultra™ II 文库制备试剂，而该转化模块中并不含有。
 
 
E5hmC-seq 转化原理
NEBNext® 5hmC 甲基化建库酶学转化法模块 #E3365L 96 次反应
 
为了实现特异性的 5hmC 检测，首先使用 T4-BGT 对 5hmC 进行糖基化。然后，5mC 和未修饰的胞嘧啶在 APOBEC 的作用下，分别脱氨基生成胸腺嘧啶和尿嘧啶，而受保护的 5hmC 则未被转化。