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Takara酶

核酸外切酶Exonuclease III酶试剂盒Takara Clontech

发表于2025年4月26日由上海金畔生物科技有限公司

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核酸外切酶Exonuclease III
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	2170A	Exonuclease III	5,000 U	￥216
Takara	2170B (A × 5)	Exonuclease III	5,000 U × 5	￥980

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■ 制品内容 (Code No.: 2170A)

Exonuclease III (200 U/μl) 5,000 U 10X Exonuclease III Buffer 1 ml

■ 制品说明

本酶具有作用于双链DNA的3’→5’外切酶活性。本酶对双链结构具有高度特异性，能降解平滑末端、3’凹陷末端及有切口的DNA，但是不能降解3’-突出末端。所以，可以用产生不同末端的限制酶通过双重降解 (Double digestion) 后，利用Exonuclease III的3’→5’的外切酶活性，从一端降解，得到互补的单链DNA和5’-P单核苷酸。 与BAL 31 Nuclease相比，本酶的碱基特异性较小，如在富含GC的位置上，由于反应停止的机率较低，可用于DNA的删除制作。   ■ 保存 -20℃。   ■ 起源 Escherichia coli BE257/pSGR 3   ■ 活性定义 以限制酶处理的小牛胸腺DNA为底物，在37℃、pH8.0的条件下，30分钟内产生1 nmol酸可溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位 (unit)。   ■ 用途 1. 通过部分降解双链DNA片段，产生一部分单链DNA片段，作DNA聚合酶的底物。生成的DNA可用于双脱氧法序列分析。 2. 与单链特异性核酸酶 (S1 Nuclease或Mung Bean Nuclease) 合用制作DNA缺失片段。本酶对双链结构DNA具有高度特异性，对于双酶切DNA片段 (例如EcoR I-Pst I Fragment) 能制作单向 (EcoR I 方向) 缺失的DNA。 3. DNA-蛋白质相互作用分析。   ■ 使用注意 1. 存放6个月以上应置于-80℃保存。 2. 该酶在性质上有这样一个特点：DNA即使具有3’突出末端，有时也因其末端及序列的不同而被作为底物降解。 例如： 一个碱基突出型 (Eam11051 I等) 二个碱基突出型 (Pvu I、Sac II等) 三个碱基突出型 (Sfi I等) 四个碱基突出型 (Apa I被确认，Ban II及BstX I也有可能)。

页面更新：2024-01-25 10:19:09

菌落PCR检测prey质粒Prey Rescue by Colony PCR酶试剂盒Takara Clontech

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菌落PCR检测prey质粒Prey Rescue by Colony PCR
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	630433	Matchmaker AD LD-Insert Screening Amplimer Set	100 Rxns	￥3,097
Clontech	630497	Matchmaker Insert Check PCR Mix 2	100 Rxns	￥2,094 ￥1480

*红字为促销价格，促销时间: 2024年3月1日-2024年4月30日

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酵母双杂筛选       互作蛋白质验证   →         ↓ 插入片段确认                   ↓     →               ↓                     ↓

■ 制品说明 菌落PCR检测prey质粒 Matchmaker Insert Check PCR Mix 2是2X预混液，可以简便快速地直接以酵母菌落为模板进行PCR扩增。这种完整的混合液专用于 Matchmaker Gold 酵母单杂交和双杂交筛选系统，可以快速地扩增、分选并分析文库筛选所获得的阳性克隆中prey/文库质粒的cDNA插入片段。混合液与用以下载体构建的GAL4 AD文库兼容：pGADT7、 pGADT7-Rec、pGADT7-Rec2、pGAD424、pACT、 pACT2、pGAD GH、 pGAD GL及pGAD10 。 Matchmaker Insert Check PCR Mix 2 包含PCR聚合酶、引物、dNTPs和缓冲液，仅仅需要将细胞添加到混合液中，然后进行30个循环PCR操作。 Matchmaker Insert Check PCR Mix 2是完整的混合液。但是若想单独购买引物，也有另外的选择。Matchmaker AD LD-Insert Screening Amplimer Set结合Advantage 2 PCR polymerase使用，可以从Matchmaker GAL4 激活结构域 (AD)载体上扩增插入片段。5'引物可作为测序引物使用。   ■ 制品特点 1. 简便快速——直接以酵母菌落为模板进行PCR扩增 2. 完整的预混液——包含引物，dNTPs和缓冲液，只需要加入细胞即可 3. 引物也可以单独购买   ■ 制品用途 1. 酵母双杂交筛选 2. 酵母单杂交筛选

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构建Illumina测序文库的index引物试剂盒SMARTer RNA Unique Dual Index Kit酶试剂盒Takara Clontech

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构建Illumina测序文库的index引物试剂盒SMARTer RNA Unique Dual Index Kit
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	634451	SMARTer® RNA Unique Dual Index Kit – 24U	96 Rxns	￥8,109
Clontech	634452	SMARTer® RNA Unique Dual Index Kit – 96U Set A	384 Rxns	￥25,098
Clontech	634457	SMARTer® RNA Unique Dual Index Kit – 96U Set B	384 Rxns	￥25,098

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SMARTer RNA unique dual index kits

– 提供兼容Illumina NGS文库的index – 最多可用于96个DNA-seq文库 – 尽可能的减少index的交叉污染和扩增造成误差

SMARTer RNA unique dual index kits含有PCR引物，可与SMARTer NGS RNA-Seq kits文库制备试剂盒搭配使用，用以构建Illumina测序文库的index引物试剂盒。这些试剂盒包含“IDT for Illumina UD”对应的index引物，用于样本混合测序时的区分。

本产品兼容：

· SMARTer Stranded RNA-Seq Kit（Code No. 634836～634839）

· SMARTer Stranded RNA-Seq Kit HT（Code No. 634862）

· SMARTer Stranded Total RNA Sample Prep Kit-Low Input Mammalian（Code No. 634861）

· SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit-Pico Input Mammalian（Code No. 635005～635007）

· SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2-Pico Input Mammalian（Code No. 634411～634414）

· SMART-Seq Stranded Kit（Code No. 634442～634444）

· SMARTer smRNA-Seq Kit for Illumina（Code No. 635029～635031）

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页面更新：2024-02-01 08:25:19

逆转录病毒包装试剂盒Retrovirus Packaging Kit Ampho酶试剂盒Takara Clontech

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逆转录病毒包装试剂盒Retrovirus Packaging Kit Ampho
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	6161	Retrovirus Packaging Kit Ampho	10 Rxns	￥2,063

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■ 制品内容

pGP Vector (1 μg/μl) 50 μl pE-ampho Vector (1 μg/μl) 50 μl Transfection Buffer 500 μl×10 支 2 M CaCl2 620 μl 25 mM Chloroquine 40 μl 本试剂盒中包含有2个病毒包装用质粒以及必要的转染用试剂。

■ 制品说明

Retrovirus Packaging Kit Ampho是逆转录病毒包装试剂盒，通过将插入有目的基因的逆转录病毒表达载体和2个特别设计的病毒包装用质粒通过磷酸钙法共转染到包装细胞中，可以得到高病毒滴度的逆转录病毒体。试剂盒中包含有表达gag-pol基因的质粒，pGP 质粒和表达amphotropic env基因的质粒及pE-ampho 质粒作为包装载体。使用本产品包装得到的逆转录病毒可以用于感染大多数的哺乳动物细胞。 试剂盒中特别设计的病毒包装用质粒上插入有逆转录病毒的结构基因，gag-pol和env基因，这两种基因是逆转录病毒构建和复制所必需的基因，但是质粒上缺少包装信号Ψ序列和LTR序列，因此包装用质粒本身是无法包装成逆转录病毒的，只有将其和包含Ψ序列和LTR序列的逆转录病毒表达载体共转染到HEK293或者HEK293T包装细胞中，才能包装得到逆转录病毒体。试剂盒中同时还包含基于磷酸钙转染方法的转染试剂，方便客户使用，一般转染后48小时就可以得到高病毒滴度的逆转录病毒。 试剂盒中包装用质粒已经纯化可以直接用于转染，同时质粒上除了gag-pol和env基因外，不包含其他任 何逆转录病毒来源的DNA序列，所以产生具有自我复制能力逆转录病毒的几率非常低。

■ 保存

-20℃。 Transfection Buffer、2 M CaCl2、25 mM Chloroquine融化后4℃保存。

页面更新：2024-02-29 10:21:28

DNA片段纯化试剂盒TaKaRa MiniBEST DNA Fragment Purification Kit Ver.4.0酶试剂盒Takara Clontech

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DNA片段纯化试剂盒TaKaRa MiniBEST DNA Fragment Purification Kit Ver.4.0
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	9761	TaKaRa MiniBEST DNA Fragment Purification Kit Ver.4.0	50 Rxns	￥454

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■ 制品内容 (50 次量)

本试剂盒分试剂Set 与Column Set两部分。 □ 试剂Set   Buffer DC*1 28 ml Buffer WB*2 24 ml Elution Buffer 2 ml × 2 *1 含有强变性剂，应避免与皮肤、衣物等接触。若不小心接触到眼睛或皮肤时，请立即到医院进行处理。 *2 首次使用前，向Buffer WB中添加56 ml的100%乙醇。   □ Column Set   Spin Columns 50 支 Collection tubes 50 支

■ 制品说明

本试剂盒是从PCR反应液或其它各种酶促反应液中纯化DNA片段的试剂盒，适用于从PCR反应液或其它各种酶促反应液中除去酶蛋白、DNA引物 (小于65 mers的引物都可以除去)、dNTP等。试剂盒采用了DNA制备膜技术，具有高效、快速、方便之特点，全套操作只需15分钟便可完成。使用本试剂盒每次可纯化多至20 μg的DNA片段 (50 bp～20 kb)，回收率高达70～95%，20-50 kb的DNA片段回收率较低。回收得到的DNA纯度高 (不含酶蛋白、DNA引物、dNTP等)，可直接用于各种分子生物学实验。   ■ 保存与运输 1. 本试剂盒可以在室温下 (15-25℃) 保存。 2. 本试剂盒于室温下 (15-25℃) 运输。   ■ 实验操作流程图   ■ 注意事项 1. 首次使用前，向Buffer WB中添加56 ml的100%乙醇。 2. 试剂中含有变性剂，操作时应佩戴手套等防护用具。

页面更新：2023-12-01 15:30:21

限制酶酶切底物λ DNA酶试剂盒Takara Clontech

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限制酶酶切底物λ DNA
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	3010	λ DNA	400 μg	￥363

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■ 制品内容 （8 OD）

□ 浓度 0.3-0.5 μg/μl □ 贮存溶液        Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM      EDTA 1 mM

■ 保存

-20℃。

■ 起源

Bacteriophage λcI857 Sam7

■ 链长

48,502 bp

■ 纯度

A260/A280=1.8-2.0

■ 用途

用于限制性内切酶的底物。

■ 使用注意事项

λDNA的末端之间经常由COS末端结合在一起，使用限制酶酶切后电泳时，在电泳前需要进行热处理 (60℃，5分钟) 。此时，如果没有盐离子存在，DNA的Tm (melting temperature) 值降低，某些经过酶切后的DNA片段可能因为Tm值降低而发生变性。热处理前请使用含盐离子的TE或TEN（TE+NaCl） buffer。

■ GenBank 登录

Entry Name： LAMBDA Accession No.：V00636, J02459, M17233, X00906

页面更新：2024-01-25 16:09:14

TaKaRa qPCR Salmonella Detection Kit China Standard酶试剂盒Takara Clontech

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TaKaRa qPCR Salmonella Detection Kit China Standard
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	RR264	TaKaRa qPCR Salmonella Detection Kit China Standard	40 Rxns	￥1,597

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■ 制品内容 (25 μl反应×40次量)
Premix Ex Taq™ (Probe qPCR) (2X Conc.)*1 500 μl ROX Reference Dye (50X Conc.)*2 20 μl ROX Reference Dye II (50X Conc.)*2 20 μl Salm P1 Primer (10 μM) 20 μl Salm P2 Primer (10 μM) 20 μl Probe for Salm (25X) 40 μl Salm Positive Control (5×105 copies/μl)*3 30 μl RNase Free dH2O 1 ml   *1 内含TaKaRa Ex Taq HS，dNTP Mixture，Mg2+, Tli RNaseH等。 *2 只使用在Life Technologies等的Real Time PCR扩增仪上，用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差。StepOnePlus Real-Time PCR System使用ROX Reference Dye，7500 Fast Real-Time PCR System使用ROX Reference Dye II 。使用Thermal Cycler Dice™ Real Time System II 时不必添加。 *3 Salm Positive Control仅作为反应性能监测的对照，浓度仅供参考。实验时请使用阳性标本提取的DNA作为阳性对照。
【各种引物序列】
引物名称 引物序列 Salm P1 Primer 5′- CTCACCAGGAGATTACAACATGG -3′ Salm P2 Primer 5′- AGCTCAGACCAAAAGTGACCATC -3′ Probe for Salm 5′- FAM-CACCGACGGCGAGACCGACTTT-TAMRA -3′
序列参考《SN/T 1059.7-2010 进出口食品中沙门氏菌检测方法 实时荧光PCR法》。
■ 制品说明
沙门氏菌(Salmonella) 是重要的肠道致病菌，这一类细菌在自然界中分布很广，其中有2,500多种被确认为血清型。近年来由于Salmonella Enteritidis引起的食物中毒急剧增加。本试剂盒是根据中华人民共和国出入境检验检疫行业标准《SN/T 1059.7-2010 进出口食品中沙门氏菌检测方法 实时荧光PCR法》开发的用于定性检测沙门氏菌的Real Time PCR试剂盒。试剂盒中采用一种 2X浓度的Premix Type试剂，进行实验时，PCR反应液的配制十分方便简单。制品中的DNA聚合酶使用了改良后的Hot Start法用 DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq HS，与Takara精心研制的Real Time PCR用Buffer组合使用，可以有效抑制非特异性的PCR扩增，大大提高PCR的扩增效率，能进行高灵敏度的Real Time PCR扩增反应。本检测无需电泳，简单快速，灵敏度高、特异性强。
■ 保存 -20℃ 注意： Premix Ex Taq（Probe qPCR）4℃保存（稳定性高达6个月）。 运输储存全程需要高度防污染。 收货后4℃保存。使用前轻轻颠倒以确保试剂完全溶解并充分混匀。 可在-20℃长期保存，一旦融解请于4℃保存，并在6个月之内使用完。
■ 注意事项
1. Real Time PCR扩增仪的使用请按照仪器说明书进行。
2. 判断为阳性的样品，要用微生物学方法进行再确认，参照SN0170。
3. PCR反应是灵敏度非常高的反应。为防止污染，建议从反应液的配制到检测的实验过程中，设定以下3个实验区域，并进行物理性隔离。
	区域1：反应液的配制及分装。此时不要开闭装有扩增产物或检测样品的Tube管。
	区域2：检测样品的制备。此时不要开闭装有扩增产物或检测样品的Tube管。
	区域3：向反应液中添加检测样品，进行反应、检出。
	由于本制品使用Real Time PCR法，扩增反应与检测同时进行，反应后的扩增产物不需要再进行电泳。为了避免污染，严禁从Tube管中取出扩增产物。
4. 本制品是使用Real Time PCR扩增仪对结果进行分析、判定。当Real Time PCR扩增仪的Auto功能不适合时，将会导致结果判定错误。此时可参照Real Time PCR扩增仪说明书进行手动设定。
5. 使用Premix Ex Taq (2X Conc.) 时，请上下颠倒轻轻混合均匀，避免起泡，经轻微离心后使用。试剂没有混匀时反应性能会有所下降，本制品不能用振荡器混匀。Premix Ex Taq (2X Conc.) 于-20℃保存时容易形成沉淀，此时，轻轻用手握一会儿或室温放置一段时间后，颠倒混匀可以完全融解。

页面更新：2019-06-18 15:49:26

Taq抗体Taq Antibody酶试剂盒Takara Clontech

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Taq抗体Taq Antibody
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	9002A	Taq Antibody	250 U	￥309
Takara	9002B (A × 4)	Taq Antibody	250 U × 4	￥1,114

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■ 制品内容 (Code No : 9002A)

Taq Antibody (5 U/μl) 50 μl

■ 制品说明

Taq Antibody是Hot Start PCR用抗Taq DNA聚合酶的单克隆抗体，其与Taq 酶结合后抑制DNA聚合酶活性，有效抑制引物的非特异性退火及引物二聚体引起的非特异性扩增。抗Taq抗体在PCR反应最初的DNA变性步骤中变性，因此使用本制品无需特殊的抗Taq抗体失活处理。Taq酶可以在常规PCR反应条件下使用。   ■ 保存 -20℃。   ■ 活性定义 Taq Antibody与Taq DNA Polymerase混合，25℃，10 min温浴后，在55℃，5 min条件下抑制90％以上的1 U 的Taq DNA Polymerase 活性的Taq Antibody量定义为1 U。

■ 用 途

Hot Start PCR法进行DNA扩增。

页面更新：2024-02-21 09:30:30

CRISPR全基因组sgRNA文库系统酶试剂盒Takara Clontech

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CRISPR全基因组sgRNA文库系统
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	632646	Guide-it CRISPR Genome-Wide sgRNA Library System	5 Screens	￥22,176
Clontech	632647	Guide-it CRISPR Genome-Wide sgRNA Library NGS Analysis Kit	10 Rxns	￥7,884
Clontech	632651	Guide-it CRISPR Genome-Wide Library PCR Kit	20 Rxns	￥3,681

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→ → → →     注意：购买632646产品时，需要填写专利确认书   CRISPR全基因组sgRNA文库系统 · 包含超过76,000条基于Brunello文库的sgRNAs，既可以实现更高的靶向特异性和靶向活性，    同时也可以保持很低的脱靶效应点击下载sgRNA representation data. · 每一个人类基因对应4条高活性sgRNAs, 可以通过单一模块进行筛选 · 优化后的sgRNA scaffold有助于加强Cas9-sgRNA之间的相互作用，实现高基因编辑效率 · 慢病毒sgRNA文库已与Lenti-X Packaging Single Shots和Xfect Transfection Reagent    配制在一起，因此只需要加入水就可以获得高效转染混合液，用于转染Lenti-X 293T cells    制备高滴度慢病毒sgRNA文库 · 自失活慢病毒载体保证慢病毒制备和使用过程中高水平的生物安全性   Guide-it CRISPR Genome-Wide sgRNA Library System可以使用CRISPR/Cas9在人细胞中轻松实现全基因组表型敲除筛选。Lenti-X Single Shots包含了全基因组sgRNA文库和Cas9表达系统，可方便制备出稳定表达Cas9和sgRNA文库的细胞系进行每一次筛选。该sgRNA文库是基于Brunello文库 (Doench et al. 2016; Doench, 2018) 所构建的，包含了超过76,000条向导RNA以及非靶向sgRNA对照，每一个人类基因对应4条高效率sgRNAs，可对大约19,000个基因进行有效筛选。文库筛选后，使用Guide-it CRISPR Genome-Wide sgRNA Library NGS Analysis Kit制备NGS样品进行新一代测序分析，此试剂盒包含了以sgRNA文库转导后的细胞来制备NGS样品所必需的引物和试剂。   我们精心构建这个sgRNA文库以确保其固有的sgRNA代表性。在文库合成、扩增、病毒制备和靶细胞转导每一步操作过程中，我们都会对sgRNA代表性进行检测。Guide-it CRISPR Genome-Wide sgRNA Library System包含经过验证的构建在慢病毒载体上的sgRNA文库和Lenti-X 293T cells，这个sgRNA文库以脱水形式提供。只需要添加水至冻干的文库混合物中就可以获得高效转染混合液，然后将混合物添加至293T细胞的培养液中进行转染就可以制备获得慢病毒粒子。每一批sgRNA文库都通过NGS进行了检测，确保超过90%的sgRNAs在10倍分布范围以内。我们也优化了pLVXS-sgRNA-mCherry-hyg载体中的sgRNA scaffold序列，有助于加强Cas9-sgRNA之间的相互作用，实现高基因编辑效率。本系统通过使用高滴度的慢病毒包装系统Lenti-X Packaging Single Shots，可以有效维持慢病毒sgRNA文库的代表性。   应用： · 人细胞全基因组表型筛选 · 功能缺失型遗传筛选   注意事项： · Guide-it CRISPR Genome-Wide Library PCR Kit (Code No. 632651) 包含了扩增sgRNA进行    NGS分析的所有引物和试剂，起始样品为从筛选出的细胞群分离提取的基因组DNA，    此试剂盒可用于制备10个测序文库（20 PCRs）。 · Guide-it CRISPR Genome-Wide sgRNA Library NGS Analysis Kit (Code No. 632647)包含    Guide-it CRISPR Genome-Wide Library PCR Kit和基因组DNA纯化试剂以及PCR产物纯化试剂。   参考文献： Doench, J.G. Am I ready for CRISPR? A user’s guide to genetic screens. Nat. Rev. Genet.19, 67 80 (2018). Doench, J.G. et al. Optimized sgRNA design to maximize activity and minimize off-target effects of CRISPR-Cas9. Nat. Biotechnol. 34, 184 191 (2016).   关联资料： 点击查看Guide-it™ CRISPR全基因组sgRNA文库系统宣传页   Technical Notes Performing a phenotypic screen using the Guide-it CRISPR Genome-Wide sgRNA Library System   CRISPR screening webinar Lentiviral CRISPR/Cas9 knockout screening made simple     实验例： 图1 Guide-it CRISPR sgRNA文库所使用的载体和sgRNA scaffold示意图。Panel A. 从pLVXS-EF1a-Cas9-PGK-Puro和pLVXS-sgRNA-mCherry-hyg 载体图谱中我们可以观察到所使用的慢病毒载体骨架。这些慢病毒载体经过了自失活处理，以提高病毒制备和使用过程中的生物安全性。pLVXS-sgRNA-mCherry-hyg载体包含一个IRES连接的双顺反子表达框，可以同时表达mCherry红色荧光标记和潮霉素抗性筛选标记。sgRNAs由人U6启动子表达，包含经过优化的scaffold序列，可以高效招募Cas9，实现更高的基因编辑效率(Panel B)。   图2 通过mCherry红色荧光判断慢病毒sgRNA文库的转导效率。按照用户手册的指导来制备慢病毒sgRNA文库，转染48小时后收集慢病毒粒子，以不同的MOIs转导表达Cas9的A375细胞。接种培养转导后的细胞，转导48小时后通过荧光显微镜和FACS 检测转导效率。   图3 Guide-it CRISPR Genome-Wide sgRNA Library System包含的sgRNA代表性分析。Panel A. 质粒文库中的sgRNA代表性分析。将基于Brunello的sgRNA文库克隆至pLVXS-sgRNA-mCherry-hyg载体并进行扩增，通过NGS验证这个质粒文库中的sgRNAs代表性。检测结果显示，这个文库中超过90%的sgRNAs在10倍分布范围以内。图表中的柱形表示具有特定读段数的sgRNA数量。Panel B. 比较质粒文库和转导细胞中的sgRNA代表性。以潮霉素为筛选标记，筛选出Cas9+/sgRNA+ A375细胞，提取基因组DNA并进行PCR扩增。测序分析PCR产物，检测PCR产物中每一个整合的sgRNA相对于起始质粒DNA文库的读数。Spearman和Pearson相关性分析结果显示这两者都具有强相关性，这说明这个系统无论是在经过转导的细胞中还是筛选后的细胞中都可以有效保持sgRNA的代表性。   图4 使用6-硫鸟嘌呤（6-TG，一种核苷酸类似物癌症治疗药物）作为筛选标记进行sgRNA文库筛选的操作流程示意图。sgRNA文库转导Cas9+ A375细胞后，进行潮霉素筛选、细胞扩培，之后将Cas9+/sgRNA+细胞传代至两个培养皿中。在其中一皿Cas9+/sgRNA+细胞培养液中添加6-TG，另外一皿细胞不添加6-TG使用常规培养条件进行培养。细胞扩培之后，使用Guide-it CRISPR Genome-Wide sgRNA Library NGS Analysis Kit提取基因组DNA并制备测序样品。   图5 从6-thioguanine (6-TG)筛选出的细胞中分离提取sgRNAs进行鉴定分析。Panel A. 比较用于制备慢病毒的原始质粒文库和转导后未经筛选/筛选后细胞中的sgRNA代表性。作用于HPRT（红点）和NUDT5的4条sgRNAs（黑点）均富集在6-TG筛选过的细胞中。在质粒文库（灰色）和转导后未经筛选的细胞（橘色）中，这些sgRNAs的表征也是可以检测到的。Panel B. 在经过6-TG筛选后的细胞中，sgRNA的代表性就发生了转变（蓝色）。在这个相关性分析中，重点标注出了被富集的单个sgRNAs（红点和橘点）。插图显示了与未经筛选的细胞相比，在筛选后的细胞中作用于HPRT的4条sgRNAs的富集倍数。   ■ 产品组份 Guide-it CRISPR Genome-Wide sgRNA Library System（Code No. 632646） Guide-it Cas9 Lentiviral Transfection Mix 5 vial Guide-it Lentiviral sgRNA Library Transfection Mix 5 vial × 2 pLVXS-sgRNA-mCherry-hyg Vector (0.5 μg/μl) 10 μl Lenti-X 293T Cell Line 1 ml Lenti-X GoStix Plus   · Chase Buffer 3 ml · Lenti-X GoStix Plus 3 testes · p24 Control 5 testes     Guide-it CRISPR Genome-Wide Library PCR Kit（Code No. 632651） LVXS P5 primer pool with index 1 (10 μM) 100 μl LVXS P7 primer with index 2 (10 μM) 100 μl LVXS P7 primer with index 3 (10 μM) 100 μl LVXS P7 primer with index 4 (10 μM) 100 μl LVXS P7 primer with index 5 (10 μM) 100 μl TaKaRa Ex Taq （5 U/μl) 30 μl 10X Ex Taq Buffer (Mg2+ plus) 500 μl dNTP Mixture (2.5 mM each) 400 μl     Guide-it CRISPR Genome-Wide sgRNA Library NGS Analysis Kit（Code No. 632647） Guide-it CRISPR Genome-Wide Library PCR Kit（Code No. 632651） NucleoBond CB 500（Code No. 740509） NucleoSpin Gel and PCR Clean-up (Code No. 740609.10）

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页面更新：2023-01-31 11:09:34

RNase抑制剂RNase Inhibitor (Porcine liver)酶试剂盒Takara Clontech

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RNase抑制剂RNase Inhibitor (Porcine liver)
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	2311A	RNase Inhibitor (Porcine liver)	5,000 U	￥485
Takara	2311B (A × 5)	RNase Inhibitor (Porcine liver)	5,000 U × 5	￥2,176

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■ 制品内容 (Code No.: 2311A)

Ribonuclease Inhibitor (Porcine liver) 5,000 U

■ 制品说明

本制品是利用固定化RNase A亲和层析的方法，从猪肝中提纯的。该酶的特征与人胎盘来源的此类酶相似，与RNase A形成1：1复合体，对RNase表现高度的非竞争性抑制 (Ki=4×10-10 M) 。该反应是可逆的，通过尿素及巯基类试剂能够解离复合体，使RNase复性而抑制剂不可逆失活。使用时可直接加入含有RNA的反应液中。本品属蛋白质性质，与其它竞争性抑制剂 (核酸类、无机磷酸类) 不同，可以很容易地通过苯酚处理将其从反应体系中除去。但不能抑制反转录酶的RNase H的活性。本品具有与人胎盘来源的酶相同的应用。   ■ 保存 -20℃。   ■ 起源 Porcine liver   ■ 活性定义 抑制5 ng RNase A活性的50%所需要的酶量定义为1个活性单位 (U)。(抑制活性通过抑制RNase A水解Cyclic2’,3’-CMP的能力确定) 。   ■ 使用注意 1. 抑制RNase活性的pH值范围较广，在pH7～8时表现最适范围。 2. RNase Inhibitor发挥活性作用需要至少1 mM的DTT。   ■ 用途 1. cDNA合成反应 (Ribonuclease Inhibitor, 反应量0.5 U/μl) 。 2. 体外翻译 (Ribonuclease Inhibitor, 反应量1 unit/μl) 。 3. 体外无细胞系统转录 (Ribonuclease Inhibitor, 反应量20 U/μl) 。 4. SP6或T7 RNA聚合酶的体外转录 (Ribonuclease Inhibitor,反应量1 unit/μl) 。 5. 多核糖体分离(RNase Inhibitor，反应量1 unit/μl)。

页面更新：2024-01-25 16:12:49