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Small RNA克隆Small RNA Cloning Kit酶试剂盒Takara Clontech

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Small RNA克隆Small RNA Cloning Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara RR065 Small RNA Cloning Kit 10 Rxns ￥3,765 Small RNA克隆Small RNA Cloning Kit Small RNA克隆Small RNA Cloning Kit Small RNA克隆Small RNA Cloning Kit
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Small RNA克隆Small RNA Cloning Kit  
 
 
■ 制品内容 (10 次量)
□ Package1 (-20℃保存)  
RNase Inhibitor (40 U/μl) 50 μl
10X BAP Buffer 200 μl
Alkaline Phosphatase (BAP) (0.4 U/μl) 20 μl
0.1%BSA 60 μl
3’Adaptor*1*2 10 μl
T4 RNA Ligation Buffer 600 μl
T4 RNA Ligase (40 U/μl) 20 μl
5X T4 PNK Buffer 100 μl
T4 Polynucleotide Kinase (T4 PNK) (10 U/μl) 10 μl
5’Adaptor*1 10 μl
5X RT Buffer 40 μl
dNTP Mixture (2.5 mM each) 90 μl
PCR-R & RT-Primer (50 pmol/μl)*1*3 20 μl
RTase (RNaseH free) (200 U/μl) 10 μl
2X PCR Buffer 250 μl
PCR Primer F (50 pmol/μl)*1 10 μl
TaKaRa Ex Taq HS (5 U/μl) 10 μl
Control RNA (5 pmol/μl)*4 10 μl
□ Package2 (4℃保存)  
3M Sodium Acetate (pH 5.2) 200 μl
Dr.GenTLE Precipitation Carrier*5 80 μl
2X B/W Buffer 2.7 ml
Magnosphere™ MS300/Streptavidin 100 μl
RNase free dH2O 10 ml
 
*1 3’Adaptor、5’Adaptor、PCR Primer F及PCR-R、RT-Primer上都带有Sse8387Ⅰ酶切位点，使用Sse8387Ⅰ酶切后的PCR产物可以与Pst I酶切的载体进行连接克隆。本试剂盒中不备有限制酶和克隆用载体，请另外准备。
*2 3’Adaptor已用生物素标记。
*3 PCR用的Reverse Primer，也可以作为反转录引物使用。
*4 Control RNA是一条21mer、5’端磷酸化的RNA。
*5 Dr. GenTLE Precipitation Carrier (Code No.: 9094)。
 
 
■ 制品说明
近几年的研究表明，在细胞内发现的RNA中有许多是非编码RNA，它们有着重要的功能，这些RNA被称为功能性RNA，其中倍受关注的是18-26 个碱基的低分子RNA，这些低分子RNA的功能有：
① mRNA水平抑制基因表达。
② 翻译水平抑制基因表达。
克隆是分析小RNA的有效方法之一。由于小RNA与mRNA不同，它不具有PolyA tail，因此，在克隆时，需在小RNA的5’端和3’端分别加上RNA接头或者RNA/DNA杂合形式的接头，经RT-PCR后进行PCR。
本试剂盒主要用于cDNA的合成和小RNA的克隆。
试剂盒通过简单的磁珠吸附操作即可纯化小RNA反转录得到的cDNA，省去了在接头连接之后切胶回收等复杂操作步骤。扩增得到的cDNA可以直接用于TA克隆，或者利用接头中带有的酶切位点进行克隆。
使用本试剂盒对小RNA (Small RNA) 进行克隆时的操作流程见图1。起始的Small RNA是由总RNA 经过电泳及切胶回收得到的。详细步骤如下：
1. 将Small RNA进行BAP处理，5’端去磷酸化。
2. 将带有生物素标记的RNA/DNA杂合形式的接头与BAP处理后的Small RNA的3’端进行连接。
3. 用标记Streptoavidin的磁珠，回收带有生物素标记接头的Small RNA，然后进行5’端磷酸化反应。
4. 将5’端连接上RNA/DNA嵌合的接头后，使用RT Primer和反转录酶进行反转录反应。
5. 从磁珠上回收合成的cDNA后，进行PCR反应。
6. PCR片段克隆。
 
■ 各种引物及Control RNA的碱基序列
名 称 切 点 酶 例
PCR-R & RT-Primer
    5’-GTCTCTAG CCTGCAGG ATCGATG-3’
反转录反应及PCR反应的Reverse引物，含有Sse8387Ⅰ的识别序列 (阴影部分)。
PCR-Primer F
5’-AAAGAT CCTGCAGG TGCGTCA-3’
PCR反应的Forward引物，含有Sse8387Ⅰ的识别序列 (阴影部分)。
Control RNA     5’p-AGAUGACGGCAACUACAAGAC-3’ 用于Control反应。
    
■ small RNA克隆流程图
Small RNA克隆Small RNA Cloning Kit
 
 

页面更新：2024-04-01 15:52:58

In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus酶试剂盒Takara Clontech

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In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 638910 In-Fusion® HD Cloning Plus(库存销售完毕即终卖) 50 Rxns ￥16,772 In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus
Clontech 638911 In-Fusion® HD Cloning Plus(库存销售完毕即终卖) 100 Rxns ￥28,914 In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus
Clontech 638920 In-Fusion® HD Cloning Plus(库存销售完毕即终卖) 96 Rxns ￥27,686 In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus
Clontech 638917 In-Fusion® HD Cloning Plus CE(库存销售完毕即终卖) 50 Rxns ￥17,489 In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus
Clontech 638918 In-Fusion® HD Cloning Plus CE(库存销售完毕即终卖) 100 Rxns ￥27,394 In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus
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  In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus
In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus  
In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus
 
 
In-Fusion克隆选择
制品名称 Code No. 除In-Fusion酶外，试剂盒中附带的制品
纯化用试剂 纯化用Column 高效感受态 高保真PCR酶
Cloning Enhancer NucleoSpin Stellar Competent Cell CloneAmp HiFi PCR Premix
In-Fusion® HD Cloning Kit 639649/50 - - - -
In-Fusion® HD Cloning Plus 638910/11/20 - √ √ √
In-Fusion® HD Cloning Plus CE 638917/18 √ - √ √
 
In-Fusion PCR Cloning Kits可以在15分钟反应内，将任一PCR片段或多个片段方向性地、无缝地克隆到任何线性载体上。无需对PCR片段进行其他的处理，例如限制酶切、连接、磷酸化或末端平滑化。 In-Fusion HD Cloning kits的效率可达95%。
 
In-Fusion PCR Cloning 是如何作用的
利用PCR产物和线性载体末端的15 bp重叠序列，In-Fusion酶可以高效准确地将PCR产物和线性载体融合在一起。可以通过设计引物来扩增得到15 bp重叠序列。该方法无需亚克隆即可将单片段或多片段克隆到单一载体。
 
In-Fusion HD Cloning Plus组分
所有In-Fusion HD Cloning Plus kits包含 In-Fusion HD enzyme premix和control实验的试剂。 In-Fusion HD Cloning Plus kits 还包括：
·CloneAmp HiFi High Fidelity PCR Premix
  CloneAmp HiFi PCR Premix 是方便的2× master mix，实现准确、高效、快速的DNA扩增。Premix
  中包含了dNTP和优化的buffer，PCR反应可以设置为快速反应，更便利地实现成功的克隆。
·Stellar Competent Cells
  Stellar Competent Cells属于E. coli HST08细胞系，具有大于5 × 108 cfu/μg的高转化效率，
  有助于 提高In-Fusion HD Cloning Plus kit的效率。
·Cloning Enhancer 或NucleoSpin Gel and PCR Clean-Up
  1.Cloning Enhancer (CE) 是易用型的酶premix，消除背景质粒DNA和PCR残留物，在克隆前无需进
  行PCR产物纯化。 In-Fusion HD Cloning Plus CE kits是PCR生成单一产物时的理想选择。
  2.如果PCR生成多于一条带，可以选择NucleoSpin Gel and PCR Clean-Up用于PCR纯化。
 
In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus

 
■ 点击图片查看相关资料
In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning PlusIn-Fusion
克隆技术指南
In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus克隆产品选择指南
In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning PlusIn-Fusion克隆FAQ
In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning PlusIn-Fusion克隆Tips
In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning PlusIn-Fusion
简易操作流程
In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning PlusIn-Fusion
多片段克隆protocol
In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning PlusIn-Fusion
引物设计工具
 
■ 相关视频
2分钟了解In-Fusion的操作流程
多才多艺的In-Fusion无缝克隆
2分钟看懂In-Fusion作用机制的与众不同
 
 
产品详情请点击：In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus
 
 
 

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TA克隆试剂盒Mighty TA-cloning Kit酶试剂盒Takara Clontech

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TA克隆试剂盒Mighty TA-cloning Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 6028 Mighty TA-cloning Kit 20 Rxns ￥825
￥619 		TA克隆试剂盒Mighty TA-cloning Kit TA克隆试剂盒Mighty TA-cloning Kit TA克隆试剂盒Mighty TA-cloning Kit

*红字为促销价格，促销时间: 2024年3月1日-2024年4月30日

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TA克隆试剂盒Mighty TA-cloning Kit
TA克隆试剂盒Mighty TA-cloning Kit  
TA克隆试剂盒Mighty TA-cloning Kit
 
 
■ 制品内容 (20 次量)
pMD20-T vector (50 ng/μl) 1 μg (20 μl)
Ligation Mighty Mix*1 50 μl × 2
Positive Control Insert*2 10 μl
   
*1: Ligation Mighty Mix与DNA Ligation Kit<Mighty Mix> (Code No.: 6023) 是同一种试剂。
*2: 3’端带有“A”突出端的DNA片段 (约200 bp)。 (以E.coli 基因组DNA为模板，使用TaKaRa Ex Taq 进行PCR反应得到的扩增产物。)(10 ng/μl)
 
■ 制品说明
使用Taq DNA聚合酶进行PCR反应，扩增获得的PCR产物3’端附有一个“A” 碱基。利用3’端附有“A” 碱基的PCR产物进行克隆时，与含有3’-T末端的载体通过T-A碱基互补配对原则进行克隆，此种方法被称为T-A克隆。
Mighty TA-cloning Kit是在短时间内快速地将PCR产物进行T-A克隆的试剂盒。连接反应使用DNA Ligation Kit<Mighty Mix>，操作简便，可在短时间内高效地进行连接反应。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 使用注意事项
1. Ligation Mighty Mix在冰上融解，轻轻混合后再使用。
2. 长片段PCR产物（2 kb以上）进行DNA克隆时，连接反应时间请延长至数小时。
3. 克隆时，根据插入片段的长度和方向，有时即使插入了DNA片段也会有不出现终止密码或读码框不改变的情况发生，在蓝白选择培养基上会形成淡蓝色菌落。出现这种现象时，建议进行菌落PCR确认插入片段。
4. 进行切胶回收纯化DNA片段时要避免UV照射时间过长。长时间照射，DNA会受到损伤，影响克隆效率。
5. PCR用质粒模板与克隆载体 (pMD20-T vector；具有Ampr) 有同样的选择标记基因时，为防止出现质粒模板自身的转化菌落，将PCR反应液凝胶电泳后回收目的片段，纯化后再进行克隆。
 
 

页面更新：2023-12-01 16:15:59

无缝克隆试剂盒In-Fusion HD Cloning kits酶试剂盒Takara Clontech

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无缝克隆试剂盒In-Fusion HD Cloning kits
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 639649 In-Fusion® HD Cloning Kit(库存销售完毕即终卖) 50 Rxns ￥7,034 无缝克隆试剂盒In-Fusion HD Cloning kits 无缝克隆试剂盒In-Fusion HD Cloning kits 无缝克隆试剂盒In-Fusion HD Cloning kits
Clontech 639650 In-Fusion® HD Cloning Kit(库存销售完毕即终卖) 100 Rxns ￥11,323 无缝克隆试剂盒In-Fusion HD Cloning kits 无缝克隆试剂盒In-Fusion HD Cloning kits 无缝克隆试剂盒In-Fusion HD Cloning kits
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    无缝克隆试剂盒In-Fusion HD Cloning kits
    无缝克隆试剂盒In-Fusion HD Cloning kits  
    无缝克隆试剂盒In-Fusion HD Cloning kits
     
     
    ■ 制品说明
    In-Fusion克隆技术凭借插入的目的DNA片段与载体末端的15个同源碱基序列就可以完成目的基因的定向克隆，操作简单快速。In-Fusion HD采用5×预混合酶试剂，大大缩短了反应时间，让您轻松操作。
    无缝克隆试剂盒In-Fusion HD Cloning kits
    无缝克隆试剂盒In-Fusion HD Cloning kits
     
    ■ 制品特点
    1. 设计随心而动：在任意载体位点插入任意基因片段
    2. 真实的表达：依据15 bp同源序列实现无缝克隆，消除冗余碱基
    3. 不只是简单的克隆：单片段插入，多片段克隆，定点突变
     
    无缝克隆试剂盒In-Fusion HD Cloning kits
     
     
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    PCR产物纯化-Cloning Enhancer酶试剂盒Takara Clontech

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    PCR产物纯化-Cloning Enhancer
    品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
    Clontech 639615 Cloning Enhancer(库存销售完毕即终卖) 200 μl ￥4,146 PCR产物纯化-Cloning Enhancer PCR产物纯化-Cloning Enhancer PCR产物纯化-Cloning Enhancer
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    Cloning Enhancer用于克隆前PCR产物的纯化，消除背景质粒DNA和PCR体系中杂质。Cloning Enhancer处理可大大增加重组克隆的数量。Cloning Enhancer与PCR反应液在同一tube进行反应，所以可降低胶纯化导致的紫外损伤或切口生成，无需单独的纯化流程，也就降低了纯化时PCR产物的损失。
     
    产品特点
    · 无需纯化，方便的PCR产物纯化方式。
    · 单管反应，避免样品损失。
    · 温和处理流程，不产生DNA损伤或切口。
    · 与不纯化插入片段相比，处理后效率可提高5倍。
     
     
    产品详情请点击：PCR产物纯化-Cloning Enhancer
     
     

    页面更新：2019-11-05 10:01:08

    In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus酶试剂盒Takara Clontech

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    In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus
    品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
    Clontech 638910 In-Fusion® HD Cloning Plus(库存销售完毕即终卖) 50 Rxns ￥16,772 In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus
    Clontech 638911 In-Fusion® HD Cloning Plus(库存销售完毕即终卖) 100 Rxns ￥28,914 In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus
    Clontech 638920 In-Fusion® HD Cloning Plus(库存销售完毕即终卖) 96 Rxns ￥27,686 In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus
    Clontech 638917 In-Fusion® HD Cloning Plus CE(库存销售完毕即终卖) 50 Rxns ￥17,489 In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus
    Clontech 638918 In-Fusion® HD Cloning Plus CE(库存销售完毕即终卖) 100 Rxns ￥27,394 In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus In-Fusion克隆试剂In-Fusion HD Cloning Plus
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    制品名称 Code No. 除In-Fusion酶外，试剂盒中附带的制品
    纯化用试剂 纯化用Column 高效感受态 高保真PCR酶
    Cloning Enhancer NucleoSpin Stellar Competent Cell CloneAmp HiFi PCR Premix
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    In-Fusion PCR Cloning Kits可以在15分钟反应内，将任一PCR片段或多个片段方向性地、无缝地克隆到任何线性载体上。无需对PCR片段进行其他的处理，例如限制酶切、连接、磷酸化或末端平滑化。 In-Fusion HD Cloning kits的效率可达95%。
     
    In-Fusion PCR Cloning 是如何作用的
    利用PCR产物和线性载体末端的15 bp重叠序列，In-Fusion酶可以高效准确地将PCR产物和线性载体融合在一起。可以通过设计引物来扩增得到15 bp重叠序列。该方法无需亚克隆即可将单片段或多片段克隆到单一载体。
     
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      中包含了dNTP和优化的buffer，PCR反应可以设置为快速反应，更便利地实现成功的克隆。
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      Stellar Competent Cells属于E. coli HST08细胞系，具有大于5 × 108 cfu/μg的高转化效率，
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