尿嘧啶-DNA 糖基酶(UDG)(也称:尿嘧啶-DNA 糖基化酶) #M0280L 5,000 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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尿嘧啶-DNA 糖基酶(UDG)(也称:尿嘧啶-DNA 糖基化酶)                                   #M0280L 5,000 units 尿嘧啶-DNA 糖基酶(UDG)(也称:尿嘧啶-DNA 糖基化酶)                                   #M0280L 5,000 units 尿嘧啶-DNA 糖基酶(UDG)(也称:尿嘧啶-DNA 糖基化酶)                                   #M0280L 5,000 units 尿嘧啶-DNA 糖基酶(UDG)(也称:尿嘧啶-DNA 糖基化酶)                                   #M0280L 5,000 units

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相关产品

尿嘧啶糖基化酶抑制剂(UGI)
 

特性

 去除 PCR 残存污染
 去除单链或双链 DNA 尿嘧啶碱基
 

概述

尿嘧啶-DNA 糖酶(UDG),曾被称为:尿嘧啶-DNA 糖基化酶
 
E. coli 尿嘧啶-DNA 糖基化酶(UDG)催化从含尿嘧啶的 DNA 上释放尿嘧啶。UDG 能有效地水解单链或双链 DNA 上的尿嘧啶,但不能从 6 碱基或更少的寡核苷酸上水解尿嘧啶。 

来源

克隆有 E. coli UDG 基因的重组 E. coli 菌株。 

应用

在 37℃ 条件下,1 单位 UDG 与 0.1 μg 含尿嘧啶 DNA 温育 10 分钟后,此 DNA 不能再被 DNA 聚合酶复制。95℃ 加热 10 分钟可使该酶 95% 的活性丧失。由于 95℃ 热处理后该酶仍有部分活性,建议加入尿嘧啶糖基化酶抑制剂来阻止产物 DNA 的降解,也可以立即用酚/氯仿抽提反应产物。 

反应条件

1X UDG 反应缓冲液
[20 mM Tris-HCl,1 mM EDTA,1 mM DTT(pH 8.0 @ 25℃)],37℃ 温育。 

质保声明

尿嘧啶-DNA 糖基化酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。  

单位定义

1 单位指每分钟催化 60 pmol 尿嘧啶从含尿嘧啶的双链 DNA 上释放所需要的酶量。通过检测 37℃ 条件下,30 分钟从 50 μl 含 0.2 μg DNA(104~105 cpm/μg)的反应体系中释放 [3H]-尿嘧啶的量来确定活性。单位活性检测条件请联系我们。  

浓度

5,000 units/ml。 

注意事项

UDG 在较广的 pH 范围均内有活性,最适 pH 为 8.0,不需要二价阳离子。活性受高离子强度(> 200 mM)所抑制。 

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献,请联系我们。  

尿嘧啶糖基酶抑制剂(UGI)(也称:尿嘧啶糖基化酶抑制剂) #M0281L 1,000 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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尿嘧啶糖基酶抑制剂(UGI)(也称:尿嘧啶糖基化酶抑制剂)                              收藏

尿嘧啶糖基酶抑制剂(UGI)(也称:尿嘧啶糖基化酶抑制剂)                                   #M0281L 1,000 units 尿嘧啶糖基酶抑制剂(UGI)(也称:尿嘧啶糖基化酶抑制剂)                                   #M0281L 1,000 units 尿嘧啶糖基酶抑制剂(UGI)(也称:尿嘧啶糖基化酶抑制剂)                                   #M0281L 1,000 units 尿嘧啶糖基酶抑制剂(UGI)(也称:尿嘧啶糖基化酶抑制剂)                                   #M0281L 1,000 units

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描述

尿嘧啶糖酶抑制剂(UGI),曾被称为:尿嘧啶糖基化酶抑制剂

尿嘧啶糖基化酶抑制剂(UGI),来源于枯草芽孢杆菌噬菌体(Bacillus subtilis bacteriophage PBS1),蛋白分子量较小(9.5 kDa),可抑制大肠杆菌尿嘧啶 – DNA 糖基化酶(UDG)以及来源于其它物种的 UDGUDG UGI 11 比例进行可逆蛋白结合,发挥对 UDG 的抑制作用。UGI 可解离 UDG DNA 的复合物。

浓度

 2,000 units/ml

特点

·尿嘧啶糖基化酶抑制剂(UGI)蛋白分子量较小(9.5 kDa),可抑制大肠杆菌尿嘧啶 – DNA 糖基化酶(UDG)以及来源于其它物种的 UDG

·95℃ 热处理后该酶仍有部分活性。

·可用于阻止产物 DNA 的后续降解。

来源

 由携带有克隆自枯草芽孢杆菌噬菌体(Bacillus subtilis bacteriophage PBS1UGI 基因的大肠杆菌菌株表达纯化得来。

单位定义

 1 单位 UGI 指在 50 µl 反应体系中,37 条件下,1 小时抑制 1 单位大肠杆菌 UDG 酶所需的酶量。1 单位 UDG 是指每分钟从含尿嘧啶的双链 DNA 上催化解离 60 pmol 的尿嘧啶所需要的酶量。

反应条件

 1X UDG 反应缓冲液,37℃ 温育。

热失活

 不能热失活。

注意事项

 1由于 95 热处理后, UDG 酶仍有部分活性,建议加入尿嘧啶糖基化酶抑制剂(UGI)来阻止产物 DNA 的降解。

2、对 NEB 的大肠杆菌 UDG 酶有效(NEB #M0280)。

3、在原始反应中加入与 UDG 等量或者过量的 UGI

4、在四种 NEBuffer 中都有活性(NEB #B7001, NEB #B7002, NEB #B7003, NEB #B7004

5UGI 的热稳定性极高,煮沸 10 分钟仍具有 95% 以上的活性。

参考文献

 Lindahl,T.et al.(1977).J. Biol.Chem..252,3286-3294.

Wang,Z.,et al.(1991).Gene.99,31-37.

Bennett,S.E.and Mosbaugh,D.W.(1992).J.Biol.Chem..267,22512-22521.

WarmStart® Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶 (UDG) #M1282S 200 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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WarmStart® Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶 (UDG)                              收藏

WarmStart® Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶 (UDG)                                     #M1282S 200 units WarmStart® Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶 (UDG)                                     #M1282S 200 units WarmStart® Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶 (UDG)                                     #M1282S 200 units WarmStart® Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶 (UDG)                                     #M1282S 200 units WarmStart® Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶 (UDG)                                     #M1282S 200 units WarmStart® Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶 (UDG)                                     #M1282S 200 units

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产品特点

 WarmStart® Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶 (UDG)                                     #M1282S 200 units

·   闪烁古生球菌(Archaeoglobus fulgidus)尿嘧啶-DNA 糖基酶

·   该酶为耐热单功能 DNA 糖基酶,从含尿嘧啶的 DNA 上催化释放尿嘧啶,能有效地水解双链和单 DNA 上的尿嘧啶

·   WarmStart 技术抑制酶在42°C以下的活性,可用于在等温扩增反应后消除产物污染

·   从双链或单链 DNA 上切下尿嘧啶

概述

WarmStart Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶(UDG)来源于闪烁古生球菌(Archaeoglobus fulgidus),配方中加入了能够可逆结合的适配体,在低于 42℃ 条件下抑制酶活性。在 42℃ 以上具有活性,能有效地水解双链和单链 DNA 上的尿嘧啶。

产品描述

 图1.  WarmStart Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶(UDG)在低于 42℃ 的温度下未检测到活性。

 WarmStart® Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶 (UDG)                                     #M1282S 200 units

(A)Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶(UDG)(NEB #M0279)和WarmStart Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶(UDG)(NEB #M1282)的 UDG 酶活性温度曲线比较,结果显示 WarmStart在42ºC以下抑制 UDG 酶活性。在25-65ºC 的温度梯度下,分别用0.002 U Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶(UDG)或WarmStart Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶(UDG),与1.8 pmol 含有单个尿嘧啶且带有荧光标记的 47-mer 单链DNA孵育30分钟。尿嘧啶被水解后,生成的碱基缺失片段经碱裂解(1M NaOH, 85°C 10分钟)处理,再通过Applied Biosystems 3730xl Genetic Analyzer ( 96 capillary array ) 进行电泳分析。结果显示,在 65°C 时 WarmStart Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶(UDG)与Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶(UDG)活性相当,但在 25°C  时未检测到酶活性。 

(B) 在 30-45ºC 温度范围通过链置换反应技术(SDA),对 500bp 长度 λDNA
进行含有 dUTP 的扩增反应,分别在有 WarmStart Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶(UDG)(上图)、 Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶(UDG)(中图)和无 UDG(下图)的情况下进行。在没有 UDG的情况下(下图),SDA 在整个温度范围内均产生了 500 bp 的扩增条带。在含有 Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶(UDG)的反应中(中图),高于 31℃ 的温度时,SDA 反应被Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶(UDG)完全抑制。抑制的产生是由于Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶(UDG)在低温下的固有活性,将扩增子中的尿嘧啶水解产生碱基缺失位点,从而阻止其进一步扩增。然而,在 WarmStart Afu Uracil-DNA 糖基酶(UDG)存在时(上图),除了在 45℃ 左右的产物产量略有下降外,对其他温度条件下扩增几乎没有影响,这表明 WarmStart Afu Uracil-DNA 糖基酶(UDG)在 42℃ 以上才具有活性。
 
图2.  WarmStart Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶(UDG)在 65℃ 有效地消化含尿嘧啶的扩增产物。
 
WarmStart® Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶 (UDG)                                     #M1282S 200 units
 
(A)使用 WarmStart Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶(UDG)在 SDA 反应扩增后消除产物污染示意图。在不含 UDG 或者含有 WarmStart Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶(UDG)情况下,对 500bp 片段进行SDA 等温扩增,反应中含有 dUTP 底物,反应温度 34℃,在此温度下 WarmStart Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶(UDG)不发挥活性。SDA 反应后,将产物在 65℃ 孵育 20 分钟以消化产物中的尿嘧啶。含有碱基缺失的 DNA 链在碱性条件下 85ºC 孵育 10 分钟会被降解。

(B)在 65ºC 下处理 20 分钟后,不含UDG和含有 WarmStart Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶(UDG)样品的凝胶电泳结果显示,其 500 bp 扩增产物的产量相似。然后 85℃ 碱性条件下孵育 10 分钟,降解含有碱基缺失的 DNA 产物。经过处理,500 bp 的产物在不含 UDG 的反应中保持完整,而在含有 WarmStart Afu Uracil-DNA 糖基酶(UDG)的反应中变成较弱的条带或者弥散状产物。
 

Sce 假尿嘧啶合成酶 I #M0526S 5,000 pmol-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

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特性

 Ÿ   Sce PUS1 用于在体外将单链 RNA 中尿嘧啶转化为假尿嘧啶

Ÿ   Sce PUS1 是一款独立的酶,不需要 RNA 向导或辅助因子即可修饰 RNA

Ÿ   使用 Sce PUS1 对特定序列进行假尿苷修饰可以替代通过 RNA 聚合酶随机掺入修饰核苷酸的方法

产品说明

 该酶是创新酶(Enzyme for Innovation, EFI)。创新酶工程由 NEB 发起,旨在为科研界提供独一无二的酶,从而为新的创新应用的发现创造条件。这些酶均具有独特的功能和特性。

Sce 假尿嘧啶合成酶 ISce PUS1)可将单链 RNA 中尿嘧啶转化为假尿嘧啶,对单链 RNA 中尿嘧啶的转化率高于双链 RNA。最佳底物为≥15 nt无特殊结构的 RNA

Sce 假尿嘧啶合成酶 I                               #M0526S 5,000 pmol

EDU( 5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷) 货号: E6032S/E6032M/E6032L 规格: 2 mg/10 mg/50 mg

EDU( 5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷)

产品货号: E6032S/E6032M/E6032L

产品规格: 2 mg/10 mg/50 mg

目录价(元):737/1695/2800

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产品概述:

产品参数
分子量:252.23
溶解性:可溶于水,PBS 或生理盐水
CAS号:61135-33-9

储存条件
-20℃ 储存,有效期见外包装。

产品介绍
EdU,即 5- 乙炔基 -2’- 脱氧尿嘧啶核苷(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)渗入正在复制的 DNA 分子中,通过基于 EdU 与 YF®系列荧光标记染料的特异性反应快速检测细胞 DNA 复制活性,可以快速准确检测细胞增殖能力。本产品系列适用于小鼠,大鼠及其他动物模型的各种组织器官(血管除外)的 EdU 细胞增殖检测。与 BrdU 检测方法相比,EdU 检测方法用量小得多,十分之一的用量即可获得与 BrdU 检测试剂盒相同甚至更好的检测结果,而且小分子化学反应检测方法反应快,效率高,反应时间仅需几分钟,不需要 DNA 变性、蛋白酶处理、抗原抗体过夜孵育,能够更好地保护细胞形态,更简单、更灵敏、更快速、更准确。
说明书:

EDU( 5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷) 货号:               E6032S/E6032M/E6032L  规格:               2 mg/10 mg/50 mg UE-E6032S/E6032M/E6032L    
MSDS:

MSDS E6032 EDU
使用本产品的文献:

参考文献
1.Topoisomerase II β Deficiency Enhances Camptothecin-induced Apoptosis
应用方向:Click-iT反应

EdU(5-乙炔基-2-脱氧尿嘧啶核苷)

EdU(5-乙炔基-2-脱氧尿嘧啶核苷)

¥593.00

货号:BS975-100mg

规格:100mg

品牌:Jinpan

产品简介

EdU5-乙炔基-2′-脱氧尿嘧啶核苷)是一种含有一个乙炔基团的胸腺嘧啶脱氧核苷类似物。EdU可用于动物活体注射,对生物体无明显副作用且稳定性较好,当将其注射到动物体内,这些小分子在动物体内能够迅速扩散到各个器官组织,并渗入到细胞中,在细胞增殖时期代替胸苷(T)掺入到新合成的DNA中,随后可将目标组织制备为石蜡或冰冻组织切片后检测;EdU也适用于体外培养的细胞增殖检测,适用于小鼠,大鼠及其他动物模型的各种组织器官血管除外EdU细胞增殖检测。EdU分子中的乙炔基团能与荧光标记的叠氮化合物探针在铜离子催化下发生点击应形成稳定的三唑环,因此可以使新合成的DNA被相应的荧光探针所标记。

EdU检测法同放射性标记核苷掺入法相比,没有放射性污染等限制因素;同BrdU检测法相比,EdU检测法不需要DNA变性处理,也不依赖于抗原抗体反应,这大大减少了实验的复杂性和操作时间。EdU细胞增殖检测法已被广泛应用到体外细胞或组织细胞增殖检测中。

英文名:5-Ethynyl-2′-deoxyuridine

CAS61135-33-9

分子式:C11H12N2O5

分子量:252.23

储存条件:-20,干燥保存

外观(性状):棕色或棕褐色结晶粉末

有效期:1

 

使用方法:(根据实际需要参阅相关文献配制和使用)

1. 使用前低速离心,确保粉末充分沉降到管底后再打开盖口;

2. 推荐细胞增殖EdU孵育工作浓度为1-50μM,可使用DMSO配制成10-50mM可参考下表

终浓度

1 mM

5 mM

10 mM

25 mM

50 mM

EdU

10 mg

10 mg

10 mg

10 mg

10 mg

DMSO

39.65 mL

7.93 mL

3.96 mL

1.59 mL

0.79 mL

 

3. 推荐动物造模EdU注射量为5mg/kgEdU注射量与动物体重的比值),实际注射量和标记时间根据研究内容和动物情况而定,使用PBS或生理盐水配制成终浓度为0.5-1mg/mL

 

注意事项:

1. 该品对人体有害,应避免吸入本品的粉尘。

2. 本产品建议与 Click-iT EdU 细胞增殖检测试剂盒系列配套使用。

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

货号 BS975-100mg
规格 100mg
品牌 Jinpan
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Uracil;尿嘧啶

Uracil;尿嘧啶

货号:
IU0090

品牌:
Jinpan

Uracil;尿嘧啶

暂无详情
产品简介
MDL MFCD00006016
EC EINECS 200-621-9
InChIKey ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N
InChI InChI=1S/C4H4N2O2/c7-3-1-2-5-4(8)6-3/h1-2H,(H2,5,6,7,8)
PubChem CID 1174
别名 2,4-二羟基嘧啶
英文名称 Uracil
CAS 66-22-8
分子式 C4H4N2O2
分子量 112.09
纯度 HPLC≥98%
单位
SMILES O=C1NC(C=CN1)=O
靶点 Endogenous Metabolite
规格 100mg 10mM*1mL in DMSO 500mg

Uracil 是 RNA 核酸中的四个碱基之一。