YF®594 Click-iT EdU 流式检测试剂盒(红色荧光) 货号: C6021S/C6021M/C6021L 规格: 5T/20T/50T

YF®594 Click-iT EdU 流式检测试剂盒(红色荧光)

产品货号: C6021S/C6021M/C6021L

产品规格: 5T/20T/50T

目录价(元):431/1326/2947

推荐仪器:流式细胞仪

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产品概述:

产品内容

组分 5T 20T 50T 保存温度 稳定性
A. 10 mM EdU 100 µL 0.4 mL 1 mL -20℃ 按指定温度保存 可有效放置一年
B. YF® 488/555/594/647A Azide 25 µL 100 µL 250 µL -20℃,避光
C. 10× Click-iT EdU 反应缓冲液 500 µL 2×1 mL 5 mL 2-8℃
D. CuSO4 200 µL 0.8 mL 2× 1 mL 2-8℃
E. Click-iT EdU 缓冲液添加物 15 mg 60 mg 150 mg 2-8℃

储存条件
-20℃ 避光保存,有效期见外包装。开封后,保存温度详见说明书。

产品介绍
细胞增殖检测是评估细胞健康程度、遗传毒性及抗肿瘤药物效果的基础实验手段。检测细胞增殖最精确的方法是 BrdU 法。EdU 法检测试剂盒是BrdU法的革命性突破。EdU (5-乙炔基-2’-脱氧尿苷)是一种嘧啶类似物,在 DNA 合成期整合入 DNA 双链。EdU 法检测基于“点击”反应,一种由铜催化的叠氮化合物和炔烃作用发生共价反应,形成共价键。
本试剂盒中,EdU 含有炔烃,YF®488/555/647A Azide 染料含有叠氮化合物。点击法的 EdU 标记增殖快速有效,易于使用。BrdU 方法需要 DNA 变性(如酸变性、热变性或者用 DNase 消化)暴露出 BrdU,方便 BrdU 抗体结合;而 EdU 法只需标准化的多聚甲醛固定和 Triton X-100 促渗就可以使检测试剂进入细胞,只需少量的叠氮化染料即可非常有效地标记出整合的 EdU。
本试剂盒包含EdU法检测所需要的所有组分,可以用于体外培养细胞的增殖检测。
说明书:

YF®594 Click-iT EdU 流式检测试剂盒(红色荧光) 货号:               C6021S/C6021M/C6021L  规格:               5T/20T/50T UE-C6021S/C6021M/C6021L    
常见问题解答:

YF®488/555/594/647有什么区别?

主要就是检测EDU的物质带的荧光基团不同,检测时发射荧光的颜色不同。实验效果相同,可根据偏好或需求进行选择。

EdU试剂盒中,固定后3% BSA in PBS的作用是什么?
清洗步骤中,BSA可以终止掉未反应的甲醛。

能否在活细胞中进行Click-iT EdU检测?
不可以。虽然EdU是对活细胞进行代谢标记,但是叠氮化物检测试剂和缓冲液组分是细胞非透过型,检测信号时的Click反应必须在固定和通透的样品上进行。

质粒转染表达的荧光蛋白检测与Click反应兼容吗?检测顺序是什么?
本产品会影响GFP、RFP、mCherry等荧光蛋白的荧光,故染色后无法直接检测GFP,建议使用GFP抗体间接检测。

观测到较高的本底干扰,这是什么原因所致?如何减少本底干扰?
叠氮化物和炔烃类间Click反应非常有选择性,生物体内几乎不可能有副反应发生,所以本底较高一般是由洗涤不充分造成的。减少本底干扰的最佳方法是增加BSA洗涤的次数。同时,也可在同样的检测条件下设置一组同等处理的无染料或无Click反应对照,以排除自发荧光干扰。此外,您还可在无EdU 体系中进行完整的Click反应,验证Click反应信号的特异性。

为什么标记样品无信号或特异性信号非常低?如何提高信号? 
1.请保证试剂使用时为无色的状态,不要使用已经变黄的添加剂或缓冲液;
2.为确保Click反应试剂能够到达核内,细胞需要充分地固定和通透;
3.由于铜离子能结合到部分试剂上,这会导致催化Click反应的有效浓度降低。所以在Click反应前,不要在任何缓冲液或试剂中引入金属螯合剂(例如EDTA、EGTA、柠檬酸盐等),对某些含有这些物质的实验样品来说,进行Click反应前,可能需要增加额外的洗涤步骤;
4.当铜离子在合适的化合价时,Click反应才有效。Click反应中用到的铜离子为二价铜(Cu2+)。
5.延长Click反应的时间至超过30分钟也并不会提高信号。建议使用新鲜的Click反应试剂再次进行30分钟的孵育,可更有效地提高标记效率。

如何对细胞核进行复染?
试剂盒中配有Hoechst 33342,可以在Click反应后用于细胞核的染色,也可选择使用DAPI。

可以用于检测植物细胞核内的DNA复制吗? 
可以。EdU是小分子,可以穿透植物细胞的细胞壁。

YF®488 Click-iT EdU成像试剂盒(绿色荧光) 货号: C6015S/C6015M/C6015L/C6015XL 规格: 20T/100T/500T/1000T

YF®488 Click-iT EdU成像试剂盒(绿色荧光)

产品货号: C6015S/C6015M/C6015L/C6015XL

产品规格: 20T/100T/500T/1000T

目录价(元):212/811/1621/2653

推荐仪器:荧光显微镜

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产品概述:

产品货号及规格:

货号

产品名称

规格

C6015S

YF® 488 Click-iT EdU成像试剂盒(绿色荧光)

20T

C6015M

100T

C6015L

500T

C6015XL

1000T

C6016S

YF® 555 Click-iT EdU成像试剂盒(橙红色荧光)

20T

C6016M

100T

C6016L

500T

C6016XL

1000T

C6017S

YF® 594 Click-iT EdU成像试剂盒(红色荧光)

20T

C6017M

100T

C6017L

500T

C6017XL

1000T

C6018S

YF® 647A Click-iT EdU成像试剂盒(远红荧光)

20T

C6018M

100T

C6018L

500T

C6018XL

1000T

产品内容:

           规格

组分

20T

100T

500T

1000T

开封后保存温度

稳定性

A. 10 mM EdU

40 µL

0.2 mL

1 mL

2× 1 mL

-20℃

开封后按指定温度保存可有效放置一年

B. YF® 488/555/594/647A Azide

4 µL

20 µL

100 µL

200 µL

-20℃,避光

C. 10× Click-iT EdU反应缓冲液

200 µL

1 mL

5 mL

10 mL

2-8℃

D. CuSO4

100 µL

0.5 mL

2× 1.25 mL

5 mL

2-8℃

E. Click-iT EdU缓冲液添加物

6 mg

30 mg

150 mg

2 × 150 mg

2-8℃

F. Hoechst 33342

5 µL

25 µL

125 µL

250 µL

2-8℃

规格:上述反应次数针对96孔板培养的细胞,不同容器的具体用量可参考附表1
荧光光谱数据:YF® 488 Azide:495/519 nm;YF® 555 Azide:555/565 nm;YF®594 Azide:590/617 nm

                      YF® 647A Azide:650/670 nm;Hoechst 33342:350/461 nm(bound to DNA)


储存条件

-20℃避光保存,有效期见外包装。开封后,保存温度详见说明书。 

产品介绍

细胞增殖检测是评估细胞健康程度、遗传毒性及抗肿瘤药物效果的基础实验手段。检测细胞增殖最精确的方法是BrdU法。EdU法检测试剂盒是BrdU法的革命性突破。EdU(5-乙炔基-2’-脱氧尿苷)是一种嘧啶类似物,在DNA合成期整合入DNA双链。EdU法检测基于“点击”反应,一种由铜催化的叠氮化合物和炔烃作用发生共价反应,形成共价键。
本试剂盒中,EdU含有炔烃,YF® 488/555/594/647A Azide染料含有叠氮化合物。点击法的EdU标记增殖快速有效,易于使用。BrdU方法需要DNA变性(如酸变性、热变性或者用DNase消化)暴露出BrdU,从而方便BrdU抗体结合;而EdU法只需多聚甲醛固定和Triton X-100促渗就可以使检测试剂进入细胞,只需少量的叠氮化染料即可非常有效地标记出整合的EdU。
本试剂盒包含EdU法检测所需要的所有组分,可以用于体外培养细胞的增殖检测。

注意事项

1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
2. 荧光染料均存在淬灭问题,实验操作时请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
3. Click-iT EdU缓冲液添加物溶液最好现配现用,以保证最佳结果。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书:

YF®488 Click-iT EdU成像试剂盒(绿色荧光) 货号:               C6015S/C6015M/C6015L/C6015XL  规格:               20T/100T/500T/1000T UE-C6015S/C6015M/C6015L/C6015XL    
MSDS:

MSDS C6015 YF®488 Click-iT EdU Imaging Kits
常见问题解答:

YF®488/555/594/647有什么区别?

主要就是检测EDU的物质带的荧光基团不同,检测时发射荧光的颜色不同。实验效果相同,可根据偏好或需求进行选择。

EdU试剂盒中,固定后3% BSA in PBS的作用是什么?
清洗步骤中,BSA可以终止掉未反应的甲醛。

能否在活细胞中进行Click-iT EdU检测?
不可以。虽然EdU是对活细胞进行代谢标记,但是叠氮化物检测试剂和缓冲液组分是细胞非透过型,检测信号时的Click反应必须在固定和通透的样品上进行。

质粒转染表达的荧光蛋白检测与Click反应兼容吗?检测顺序是什么?
本产品会影响GFP、RFP、mCherry等荧光蛋白的荧光,故染色后无法直接检测GFP,建议使用GFP抗体间接检测。

观测到较高的本底干扰,这是什么原因所致?如何减少本底干扰?
叠氮化物和炔烃类间Click反应非常有选择性,生物体内几乎不可能有副反应发生,所以本底较高一般是由洗涤不充分造成的。减少本底干扰的最佳方法是增加BSA洗涤的次数。同时,也可在同样的检测条件下设置一组同等处理的无染料或无Click反应对照,以排除自发荧光干扰。此外,您还可在无EdU 体系中进行完整的Click反应,验证Click反应信号的特异性。

为什么标记样品无信号或特异性信号非常低?如何提高信号? 
1.请保证试剂使用时为无色的状态,不要使用已经变黄的添加剂或缓冲液;
2.为确保Click反应试剂能够到达核内,细胞需要充分地固定和通透;
3.由于铜离子能结合到部分试剂上,这会导致催化Click反应的有效浓度降低。所以在Click反应前,不要在任何缓冲液或试剂中引入金属螯合剂(例如EDTA、EGTA、柠檬酸盐等),对某些含有这些物质的实验样品来说,进行Click反应前,可能需要增加额外的洗涤步骤;
4.当铜离子在合适的化合价时,Click反应才有效。Click反应中用到的铜离子为二价铜(Cu2+)。
5.延长Click反应的时间至超过30分钟也并不会提高信号。建议使用新鲜的Click反应试剂再次进行30分钟的孵育,可更有效地提高标记效率。

如何对细胞核进行复染?
试剂盒中配有Hoechst 33342,可以在Click反应后用于细胞核的染色,也可选择使用DAPI。

可以用于检测植物细胞核内的DNA复制吗? 
可以。EdU是小分子,可以穿透植物细胞的细胞壁。


使用本产品的文献:

1.miR-146a-5p promotes epithelium regeneration against LPS-induced inflammatory injury via targeting TAB1/TAK1/NF-κB signaling pathway

Xingping Chen, Weite Li, Ting Chen, Xiaohui Ren, Jiahao Zhu, Fangxin Hu, Junyi Luo, Lipeng Xing, Hao Zhou, Jiajie Sun, Qingyan Jiang, Yongliang Zhang, Qianyun Xi
International Journal of Biological Macromolecules

参考文献
1.A rapid and robust assay for detection of S-phase cell cycle progression in plant cells and tissUEs by using ethynyl deoxyuridine
应用方向:植物细胞

2.A rapid non-radioactive techniqUE for measurement of repair synthesis in primary human fibroblasts by incorporation of ethynyl deoxyuridine (EdU)
应用方向:DNA修复

3.Chick Embryo Proliferation Studies Using EdU Labeling
应用方向:EdU(动物)细胞增殖检测

4.Visualization of Mitochondrial DNA Replication in Individual Cells by EdU Signal Amplification
应用方向:线粒体活性检测

5.A method for evaluating the host range of bacteriophages using phages fluorescently labeled with 5-ethynyl-2′-deoxyuridine (EdU)
应用方向:细胞成像&细胞流式

6.Human cytomegalovirus UL44 concentrates at the periphery of replication compartments, the site of viral DNA synthesis
应用方向:病毒活性检测

7.Labeling and Tracking of Mesenchymal Stem Cells with EdU
应用方向:细胞标记示踪

EDU( 5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷) 货号: E6032S/E6032M/E6032L 规格: 2 mg/10 mg/50 mg

EDU( 5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷)

产品货号: E6032S/E6032M/E6032L

产品规格: 2 mg/10 mg/50 mg

目录价(元):737/1695/2800

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产品概述:

产品参数
分子量:252.23
溶解性:可溶于水,PBS 或生理盐水
CAS号:61135-33-9

储存条件
-20℃ 储存,有效期见外包装。

产品介绍
EdU,即 5- 乙炔基 -2’- 脱氧尿嘧啶核苷(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)渗入正在复制的 DNA 分子中,通过基于 EdU 与 YF®系列荧光标记染料的特异性反应快速检测细胞 DNA 复制活性,可以快速准确检测细胞增殖能力。本产品系列适用于小鼠,大鼠及其他动物模型的各种组织器官(血管除外)的 EdU 细胞增殖检测。与 BrdU 检测方法相比,EdU 检测方法用量小得多,十分之一的用量即可获得与 BrdU 检测试剂盒相同甚至更好的检测结果,而且小分子化学反应检测方法反应快,效率高,反应时间仅需几分钟,不需要 DNA 变性、蛋白酶处理、抗原抗体过夜孵育,能够更好地保护细胞形态,更简单、更灵敏、更快速、更准确。
说明书:

EDU( 5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷) 货号:               E6032S/E6032M/E6032L  规格:               2 mg/10 mg/50 mg UE-E6032S/E6032M/E6032L    
MSDS:

MSDS E6032 EDU
使用本产品的文献:

参考文献
1.Topoisomerase II β Deficiency Enhances Camptothecin-induced Apoptosis
应用方向:Click-iT反应

YF®488 Click-iT EdU 通用款细胞增殖检测试剂盒(绿色荧光) 货号: C6043S/C6043M/C6043L/C6043XL 规格: 2-20T/10-100T/50-500T/100-1000T

YF®488 Click-iT EdU 通用款细胞增殖检测试剂盒(绿色荧光)

产品货号: C6043S/C6043M/C6043L/C6043XL

产品规格: 2-20T/10-100T/50-500T/100-1000T

目录价(元):212/811/1621/2653

推荐仪器:荧光显微镜、流式细胞仪

大包装询价


产品概述:

产品货号及规格:

货号

产品名称

规格

C6043S

YF®488 Click-iT EdU 通用款细胞增殖检测试剂盒(绿色荧光)

2-20T

C6043M

10-100T

C6043L

50-500T

C6043XL

100-1000T

C6044S

YF®555 Click-iT EdU 通用款细胞增殖检测试剂盒(橙红色荧光)

2-20T

C6044M

10-100T

C6044L

50-500T

C6044XL

100-1000T

C6045S

YF®594 Click-iT EdU 通用款细胞增殖检测试剂盒(红色荧光)

2-20T

C6045M

10-100T

C6045L

50-500T

C6045XL

100-1000T

C6046S

YF®647A Click-iT EdU 通用款细胞增殖检测试剂盒(远红荧光)

2-20T

C6046M

10-100T

C6046L

50-500T

C6046XL

100-1000T

产品内容:

组分

2-20T

10-100T

50-500T

100-1000T

开封后保存温度

稳定性

A. 10 mM EdU

40 µL

200 µL

1 mL

2× 1 mL

-20℃

开封后按指定温度保存可有效放置一年

B. YF® 488/555/594/647A Azide

10 µL

50 µL

250 µL

500 µL

-20℃,避光

C. 10× Click-iT EdU反应缓冲液

200 µL

1 mL

5 mL

10 mL

2-8℃

D. CuSO4

100 µL

500 µL

2× 1.25 mL

5 mL

2-8℃

E. Click-iT EdU缓冲液添加物

6 mg

30 mg

150 mg

2 × 150 mg

2-8℃

F. Hoechst 33342

5 µL

25 µL

125 µL

250 µL

2-8℃

规格:如果用于荧光显微镜检测,所能使用次数为上述各个规格的最大使用次数(针对96孔板培养的细胞),如C4043S可检测20个孔的样品(不同容器的具体用量可参考附表1);如果用于流式检测,所能使用次数为上述各个规格的最小使用次数,如C4043S可检测2个样品。
荧光光谱数据:YF® 488 Azide:495/519 nm;YF® 555 Azide:555/565 nm;YF®594 Azide:590/617 nm

  YF® 647A Azide:650/670 nm;Hoechst 33342:350/461 nm(bound to DNA)

储存条件

-20℃避光保存,有效期见外包装。开封后,保存温度详见说明书。 

产品介绍

细胞增殖检测是评估细胞健康程度、遗传毒性及抗肿瘤药物效果的基础实验手段。检测细胞增殖最精确的方法是

BrdU法。EdU法检测试剂盒是BrdU法的革命性突破。EdU(5-乙炔基-2’-脱氧尿苷)是一种嘧啶类似物,在DNA合成期整合入DNA双链。EdU法检测基于“点击”反应,一种由铜催化的叠氮化合物和炔烃作用发生共价反应,形成共价键。

本试剂盒中,EdU含有炔烃,YF® 488/555/594/647A Azide染料含有叠氮化合物。点击法的EdU标记增殖快速有效,易于使用。BrdU方法需要DNA变性(如酸变性、热变性或者用DNase消化)暴露出BrdU,从而方便BrdU抗体结合;而EdU法只需标准化的多聚甲醛固定和Triton X-100促渗就可以使检测试剂进入细胞,只需少量的叠氮化染料即可非常有效地标记出整合的EdU。

本试剂盒包含EdU法检测所需要的所有组分,可以用于体外培养细胞的增殖检测。


说明书:

YF®488 Click-iT EdU 通用款细胞增殖检测试剂盒(绿色荧光) 货号:               C6043S/C6043M/C6043L/C6043XL  规格:               2-20T/10-100T/50-500T/100-1000T UE-C6043S/C6043M/C6043L/C6043XL    
MSDS:

MSDS C6043 YF®488 Click-iT EdU Universal Cell Proliferation Detection Kit

常见问题解答:

YF®488/555/594/647有什么区别?

主要就是检测EDU的物质带的荧光基团不同,检测时发射荧光的颜色不同。实验效果相同,可根据偏好或需求进行选择。

EdU试剂盒中,固定后3% BSA in PBS的作用是什么?
清洗步骤中,BSA可以终止掉未反应的甲醛。

能否在活细胞中进行Click-iT EdU检测?
不可以。虽然EdU是对活细胞进行代谢标记,但是叠氮化物检测试剂和缓冲液组分是细胞非透过型,检测信号时的Click反应必须在固定和通透的样品上进行。

质粒转染表达的荧光蛋白检测与Click反应兼容吗?检测顺序是什么?
本产品会影响GFP、RFP、mCherry等荧光蛋白的荧光,故染色后无法直接检测GFP,建议使用GFP抗体间接检测。

观测到较高的本底干扰,这是什么原因所致?如何减少本底干扰?
叠氮化物和炔烃类间Click反应非常有选择性,生物体内几乎不可能有副反应发生,所以本底较高一般是由洗涤不充分造成的。减少本底干扰的最佳方法是增加BSA洗涤的次数。同时,也可在同样的检测条件下设置一组同等处理的无染料或无Click反应对照,以排除自发荧光干扰。此外,您还可在无EdU 体系中进行完整的Click反应,验证Click反应信号的特异性。

为什么标记样品无信号或特异性信号非常低?如何提高信号? 
1.请保证试剂使用时为无色的状态,不要使用已经变黄的添加剂或缓冲液;
2.为确保Click反应试剂能够到达核内,细胞需要充分地固定和通透;
3.由于铜离子能结合到部分试剂上,这会导致催化Click反应的有效浓度降低。所以在Click反应前,不要在任何缓冲液或试剂中引入金属螯合剂(例如EDTA、EGTA、柠檬酸盐等),对某些含有这些物质的实验样品来说,进行Click反应前,可能需要增加额外的洗涤步骤;
4.当铜离子在合适的化合价时,Click反应才有效。Click反应中用到的铜离子为二价铜(Cu2+)。
5.延长Click反应的时间至超过30分钟也并不会提高信号。建议使用新鲜的Click反应试剂再次进行30分钟的孵育,可更有效地提高标记效率。

如何对细胞核进行复染?
试剂盒中配有Hoechst 33342,可以在Click反应后用于细胞核的染色,也可选择使用DAPI。

可以用于检测植物细胞核内的DNA复制吗? 
可以。EdU是小分子,可以穿透植物细胞的细胞壁。

YF®555 Click-iT EdU 成像试剂盒(橙红色荧光) 货号: C6016S/C6016M/C6016L/C6016XL 规格: 20T/100T/500T/1000T

YF®555 Click-iT EdU 成像试剂盒(橙红色荧光)

产品货号: C6016S/C6016M/C6016L/C6016XL

产品规格: 20T/100T/500T/1000T

目录价(元):212/811/1621/2653

推荐仪器:荧光显微镜

大包装询价


产品概述:

储存条件
-20℃ 避光保存,有效期见外包装。开封后,保存温度详见说明书。

产品介绍
细胞增殖检测是评估细胞健康程度、遗传毒性及抗肿瘤药物效果的基础实验手段。检测细胞增殖最精确的方法是 BrdU 法。EdU 法检测试剂盒是 BrdU 法的革命性突破。EdU (5-乙炔基-2’-脱氧尿苷)是一种嘧啶类似物,在 DNA 合成期整合入 DNA 双链。EdU 法检测基于“点击”反应,一种由铜催化的叠氮化合物和炔烃作用发生共价反应,形成共价键。
本试剂盒中,EdU 含有炔烃,YF®488/555/647A Azide 染料含有叠氮化合物。点击法的 EdU 标记增殖快速有效,易于使用。BrdU 方法需要 DNA 变性(如酸变性、热变性或者 用 DNase 消化)暴露出 BrdU,从而方便 BrdU 抗体结合;而 EdU 法只需标准化的多聚甲醛固定和 Triton X-100 促渗就可以使检测试剂进入细胞,只需少量的叠氮化染料即可非常有效地标记出整合的 EdU。
本试剂盒包含EdU法检测所需要的所有组分,可以用于体外培养细胞的增殖检测。

说明书:

YF®555 Click-iT EdU 成像试剂盒(橙红色荧光) 货号:               C6016S/C6016M/C6016L/C6016XL  规格:               20T/100T/500T/1000T UE-C6016S/C6016M/C6016L/C6016XL    
常见问题解答:

YF®488/555/594/647有什么区别?

主要就是检测EDU的物质带的荧光基团不同,检测时发射荧光的颜色不同。实验效果相同,可根据偏好或需求进行选择。

EdU试剂盒中,固定后3% BSA in PBS的作用是什么?
清洗步骤中,BSA可以终止掉未反应的甲醛。

能否在活细胞中进行Click-iT EdU检测?
不可以。虽然EdU是对活细胞进行代谢标记,但是叠氮化物检测试剂和缓冲液组分是细胞非透过型,检测信号时的Click反应必须在固定和通透的样品上进行。

质粒转染表达的荧光蛋白检测与Click反应兼容吗?检测顺序是什么?
本产品会影响GFP、RFP、mCherry等荧光蛋白的荧光,故染色后无法直接检测GFP,建议使用GFP抗体间接检测。

观测到较高的本底干扰,这是什么原因所致?如何减少本底干扰?
叠氮化物和炔烃类间Click反应非常有选择性,生物体内几乎不可能有副反应发生,所以本底较高一般是由洗涤不充分造成的。减少本底干扰的最佳方法是增加BSA洗涤的次数。同时,也可在同样的检测条件下设置一组同等处理的无染料或无Click反应对照,以排除自发荧光干扰。此外,您还可在无EdU 体系中进行完整的Click反应,验证Click反应信号的特异性。

为什么标记样品无信号或特异性信号非常低?如何提高信号? 
1.请保证试剂使用时为无色的状态,不要使用已经变黄的添加剂或缓冲液;
2.为确保Click反应试剂能够到达核内,细胞需要充分地固定和通透;
3.由于铜离子能结合到部分试剂上,这会导致催化Click反应的有效浓度降低。所以在Click反应前,不要在任何缓冲液或试剂中引入金属螯合剂(例如EDTA、EGTA、柠檬酸盐等),对某些含有这些物质的实验样品来说,进行Click反应前,可能需要增加额外的洗涤步骤;
4.当铜离子在合适的化合价时,Click反应才有效。Click反应中用到的铜离子为二价铜(Cu2+)。
5.延长Click反应的时间至超过30分钟也并不会提高信号。建议使用新鲜的Click反应试剂再次进行30分钟的孵育,可更有效地提高标记效率。

如何对细胞核进行复染?
试剂盒中配有Hoechst 33342,可以在Click反应后用于细胞核的染色,也可选择使用DAPI。

可以用于检测植物细胞核内的DNA复制吗? 
可以。EdU是小分子,可以穿透植物细胞的细胞壁。


使用本产品的文献:

参考文献
1.A rapid and robust assay for detection of S-phase cell cycle progression in plant cells and tissUEs by using ethynyl deoxyuridine
应用方向:植物细胞

2.A rapid non-radioactive techniqUE for measurement of repair synthesis in primary human fibroblasts by incorporation of ethynyl deoxyuridine (EdU)
应用方向:DNA修复

3.Chick Embryo Proliferation Studies Using EdU Labeling
应用方向:EdU(动物)细胞增殖检测

4.Visualization of Mitochondrial DNA Replication in Individual Cells by EdU Signal Amplification
应用方向:线粒体活性检测

5.A method for evaluating the host range of bacteriophages using phages fluorescently labeled with 5-ethynyl-2′-deoxyuridine (EdU)
应用方向:细胞成像&细胞流式

6.Human cytomegalovirus UL44 concentrates at the periphery of replication compartments, the site of viral DNA synthesis
应用方向:病毒活性检测

7.Labeling and Tracking of Mesenchymal Stem Cells with EdU
应用方向:细胞标记示踪

YF®488 Click-iT EdU 流式检测试剂盒(绿色荧光) 货号: C6019S/C6019M/C6019L 规格: 5T/20T/50T

YF®488 Click-iT EdU 流式检测试剂盒(绿色荧光)

产品货号: C6019S/C6019M/C6019L

产品规格: 5T/20T/50T

目录价(元):431/1326/2947

推荐仪器:流式细胞仪

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产品概述:

储存条件
-20℃ 避光保存,有效期见外包装。开封后,保存温度详见说明书。 

组分

规格

5T

20T

50T

开封后保存温度

稳定性

A. 10 mM EdU

100 µL

0.4 mL

1 mL

-20℃

开封后按指定温度保存可有效放置一年

B. YF® 488/555/594/647A Azide

25 µL

100 µL

250 µL

-20℃,避光

C. 10× Click-iT EdU反应缓冲液

500 µL

2×1 mL

5 mL

2-8℃

D. CuSO4

200 µL

0.8 mL

2× 1 mL

2-8℃

E. Click-iT EdU缓冲液添加物

15 mg

60 mg

150 mg

2-8℃

规格:上述反应次数针对6孔板培养的细胞不同容器的具体用量可参考附表1
荧光光谱数据:YF® 488 Azide495/519 nmYF® 555 Azide555/565 nm
YF®594 Azide590/617 nm;YF® 647A Azide650/670 nm.

产品介绍
细胞增殖检测是评估细胞健康程度、遗传毒性及抗肿瘤药物效果的基础实验手段。检测细胞增殖最精确的方法是 BrdU 法。EdU 法检测试剂盒是BrdU法的革命性突破。EdU (5-乙炔基-2’-脱氧尿苷)是一种嘧啶类似物,在 DNA 合成期整合入 DNA 双链。EdU 法检测基于“点击”反应,一种由铜催化的叠氮化合物和炔烃作用发生共价反应,形成共价键。 
本试剂盒中,EdU 含有炔烃,YF®488/555/647A Azide 染料含有叠氮化合物。点击法的 EdU 标记增殖快速有效,易于使用。BrdU 方法需要 DNA 变性(如酸变性、热变性或者用 DNase 消化)暴露出 BrdU,方便 BrdU 抗体结合;而 EdU 法只需标准化的多聚甲醛固定和 Triton X-100 促渗就可以使检测试剂进入细胞,只需少量的叠氮化染料即可非常有效地标记出整合的 EdU。
本试剂盒包含EdU法检测所需要的所有组分,可以用于体外培养细胞的增殖检测。


说明书:

YF®488 Click-iT EdU 流式检测试剂盒(绿色荧光) 货号:               C6019S/C6019M/C6019L  规格:               5T/20T/50T UE-C6019S/C6019M/C6019L    
常见问题解答:

YF®488/555/594/647有什么区别?

主要就是检测EDU的物质带的荧光基团不同,检测时发射荧光的颜色不同。实验效果相同,可根据偏好或需求进行选择。

EdU试剂盒中,固定后3% BSA in PBS的作用是什么?
清洗步骤中,BSA可以终止掉未反应的甲醛。

能否在活细胞中进行Click-iT EdU检测?
不可以。虽然EdU是对活细胞进行代谢标记,但是叠氮化物检测试剂和缓冲液组分是细胞非透过型,检测信号时的Click反应必须在固定和通透的样品上进行。

质粒转染表达的荧光蛋白检测与Click反应兼容吗?检测顺序是什么?
本产品会影响GFP、RFP、mCherry等荧光蛋白的荧光,故染色后无法直接检测GFP,建议使用GFP抗体间接检测。

观测到较高的本底干扰,这是什么原因所致?如何减少本底干扰?
叠氮化物和炔烃类间Click反应非常有选择性,生物体内几乎不可能有副反应发生,所以本底较高一般是由洗涤不充分造成的。减少本底干扰的最佳方法是增加BSA洗涤的次数。同时,也可在同样的检测条件下设置一组同等处理的无染料或无Click反应对照,以排除自发荧光干扰。此外,您还可在无EdU 体系中进行完整的Click反应,验证Click反应信号的特异性。

为什么标记样品无信号或特异性信号非常低?如何提高信号? 
1.请保证试剂使用时为无色的状态,不要使用已经变黄的添加剂或缓冲液;
2.为确保Click反应试剂能够到达核内,细胞需要充分地固定和通透;
3.由于铜离子能结合到部分试剂上,这会导致催化Click反应的有效浓度降低。所以在Click反应前,不要在任何缓冲液或试剂中引入金属螯合剂(例如EDTA、EGTA、柠檬酸盐等),对某些含有这些物质的实验样品来说,进行Click反应前,可能需要增加额外的洗涤步骤;
4.当铜离子在合适的化合价时,Click反应才有效。Click反应中用到的铜离子为二价铜(Cu2+)。
5.延长Click反应的时间至超过30分钟也并不会提高信号。建议使用新鲜的Click反应试剂再次进行30分钟的孵育,可更有效地提高标记效率。

如何对细胞核进行复染?
试剂盒中配有Hoechst 33342,可以在Click反应后用于细胞核的染色,也可选择使用DAPI。

可以用于检测植物细胞核内的DNA复制吗? 
可以。EdU是小分子,可以穿透植物细胞的细胞壁。

YF®594 Click-iT EdU成像试剂盒(红色荧光) 货号: C6017S/C6017M/C6017L/C6017XL 规格: 20T/100T/500T/1000T

YF®594 Click-iT EdU成像试剂盒(红色荧光)

产品货号: C6017S/C6017M/C6017L/C6017XL

产品规格: 20T/100T/500T/1000T

目录价(元):212/811/1621/2653

推荐仪器:荧光显微镜

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产品概述:

产品内容

组分 20T 100T 500T 1000T 保存温度 稳定性
A. 10 mM EdU 40 µL 0.2 mL 1 mL 2× 1 mL -20℃ 按指定温度保 存可有效放置 一年
B. YF® 488/555/594/647A Azide 4 µL 20 µL 100 µL 200 µL -20℃,避光
C. 10× Click-iT EdU 反应缓冲液 2 200 µL 1 mL 5 mL 10 mL 2-8℃
D. CuSO4 100 µL 0.5 mL 2× 1.25 mL 5 mL 2-8℃
E. Click-iT EdU 缓冲液添加物 6 mg 30 mg 150 mg 2 × 150 mg 2-8℃
F. Hoechst 33342  5 µL 25 µL 125 µL 250 µL 2-8℃

储存条件
-20℃避光保存,有效期见外包装。开封后,保存温度详见说明书。

产品介绍
细胞增殖检测是评估细胞健康程度、遗传毒性及抗肿瘤药物效果的基础实验手段。检测细胞增殖最精确的方法是 BrdU 法。EdU 法检测试剂盒是 BrdU 法的革命性突破。EdU (5-乙炔基-2’-脱氧尿苷)是一种嘧啶类似物,在 DNA 合成期整合入 DNA 双链。EdU 法检测基于“点击”反应,一种由铜催化的叠氮化合物和炔烃作用发生共价反应,形成共价键。
本试剂盒中,EdU 含有炔烃,YF®488/555/647A Azide 染料含有叠氮化合物。点击法的 EdU 标记增殖快速有效,易于使用。BrdU 方法需要 DNA 变性(如酸变性、热变性或者用 DNase 消化)暴露出 BrdU,从而方便 BrdU 抗体结合;而 EdU 法只需标准化的多聚甲醛固定和 Triton X-100 促渗就可以使检测试剂进入细胞,只需少量的叠氮化染料即可非常有效地标记出整合的 EdU。
本试剂盒包含EdU法检测所需要的所有组分,可以用于体外培养细胞的增殖检测。
说明书:

YF®594 Click-iT EdU成像试剂盒(红色荧光) 货号:               C6017S/C6017M/C6017L/C6017XL  规格:               20T/100T/500T/1000T UE-C6017S/C6017M/C6017L/C6017XL    
常见问题解答:

YF®488/555/594/647有什么区别?

主要就是检测EDU的物质带的荧光基团不同,检测时发射荧光的颜色不同。实验效果相同,可根据偏好或需求进行选择。

EdU试剂盒中,固定后3% BSA in PBS的作用是什么?
清洗步骤中,BSA可以终止掉未反应的甲醛。

能否在活细胞中进行Click-iT EdU检测?
不可以。虽然EdU是对活细胞进行代谢标记,但是叠氮化物检测试剂和缓冲液组分是细胞非透过型,检测信号时的Click反应必须在固定和通透的样品上进行。

质粒转染表达的荧光蛋白检测与Click反应兼容吗?检测顺序是什么?
本产品会影响GFP、RFP、mCherry等荧光蛋白的荧光,故染色后无法直接检测GFP,建议使用GFP抗体间接检测。

观测到较高的本底干扰,这是什么原因所致?如何减少本底干扰?
叠氮化物和炔烃类间Click反应非常有选择性,生物体内几乎不可能有副反应发生,所以本底较高一般是由洗涤不充分造成的。减少本底干扰的最佳方法是增加BSA洗涤的次数。同时,也可在同样的检测条件下设置一组同等处理的无染料或无Click反应对照,以排除自发荧光干扰。此外,您还可在无EdU 体系中进行完整的Click反应,验证Click反应信号的特异性。

为什么标记样品无信号或特异性信号非常低?如何提高信号? 
1.请保证试剂使用时为无色的状态,不要使用已经变黄的添加剂或缓冲液;
2.为确保Click反应试剂能够到达核内,细胞需要充分地固定和通透;
3.由于铜离子能结合到部分试剂上,这会导致催化Click反应的有效浓度降低。所以在Click反应前,不要在任何缓冲液或试剂中引入金属螯合剂(例如EDTA、EGTA、柠檬酸盐等),对某些含有这些物质的实验样品来说,进行Click反应前,可能需要增加额外的洗涤步骤;
4.当铜离子在合适的化合价时,Click反应才有效。Click反应中用到的铜离子为二价铜(Cu2+)。
5.延长Click反应的时间至超过30分钟也并不会提高信号。建议使用新鲜的Click反应试剂再次进行30分钟的孵育,可更有效地提高标记效率。

如何对细胞核进行复染?
试剂盒中配有Hoechst 33342,可以在Click反应后用于细胞核的染色,也可选择使用DAPI。

可以用于检测植物细胞核内的DNA复制吗? 
可以。EdU是小分子,可以穿透植物细胞的细胞壁。


使用本产品的文献:

参考文献
1.Labeling and Tracking of Mesenchymal Stem Cells with EdU
应用方向:细胞标记示踪

2.Primary cilia control hedgehog signaling during muscle differentiation and are deregulated in rhabdomyosarcoma
应用方向动物细胞增殖分析

3.Silencing of STRN4 suppresses the malignant characteristics of cancer cells
应用方向动物细胞增殖检测

4.A rapid and robust assay for detection of S-phase cell cycle progression in plant cells and tissUEs by using ethynyl deoxyuridine
应用方向植物细胞增殖检测

5.A rapid non-radioactive techniqUE for measurement of repair synthesis in primary human fibroblasts by incorporation of ethynyl deoxyuridine (EdU)
应用方向DNA损伤修复

6.Visualization of Mitochondrial DNA Replication in Individual Cells by EdU Signal Amplification
应用方向线粒体活性检测

7.Human cytomegalovirus UL44 concentrates at the periphery of replication compartments, the site of viral DNA synthesis
应用方向病毒活性检测

YF®647A Click-iT EdU 成像试剂盒(远红荧光) 货号: C6018S/C6018M/C6018L/C6018XL 规格: 20T/100T/500T/1000T

YF®647A Click-iT EdU 成像试剂盒(远红荧光)

产品货号: C6018S/C6018M/C6018L/C6018XL

产品规格: 20T/100T/500T/1000T

目录价(元):212/811/1621/2653

推荐仪器:荧光显微镜

大包装询价


产品概述:

储存条件
-20℃ 避光保存,有效期见外包装。开封后,保存温度详见说明书。

组分

规格

20T

100T

500T

1000T

开封后保存温度

稳定性

A. 10 mM EdU

40 µL

0.2 mL

1 mL

2× 1 mL

-20℃

开封后按指定温度保存可有效放置一年

B. YF® 488/555/594/647A Azide

4 µL

20 µL

100 µL

200 µL

-20℃,避光

C. 10× Click-iT EdU反应缓冲液

200 µL

1 mL

5 mL

10 mL

2-8℃

D. CuSO4

100 µL

0.5 mL

2× 1.25 mL

5 mL

2-8℃

E. Click-iT EdU缓冲液添加物

6 mg

30 mg

150 mg

2 × 150 mg

2-8℃

F. Hoechst 33342

5 µL

25 µL

125 µL

250 µL

2-8℃

规格:上述反应次数针对96孔板培养的细胞不同容器的具体用量可参考附表1

荧光光谱数据:YF® 488 Azide495/519 nm;YF® 555 Azide555/565 nmYF®594 Azide590/617 nm

YF® 647A Azide650/670 nm;Hoechst 33342350/461 nm(bound to DNA)


产品介绍
细胞增殖检测是评估细胞健康程度、遗传毒性及抗肿瘤药物效果的基础实验手段。检测细胞增殖最精确的方法是 BrdU 法。EdU 法检测试剂盒是 BrdU 法的革命性突破。EdU (5-乙炔基-2’-脱氧尿苷)是一种嘧啶类似物,在 DNA 合成期整合入 DNA 双链。EdU 法检测基于“点击”反应,一种由铜催化的叠氮化合物和炔烃作用发生共价反应,形成共价键。
本试剂盒中,EdU 含有炔烃,YF®488/555/647A Azide 染料含有叠氮化合物。点击法的 EdU 标记增殖快速有效,易于使用。BrdU 方法需要 DNA 变性(如酸变性、热变性或者 用 DNase 消化)暴露出 BrdU,从而方便 BrdU 抗体结合;而 EdU 法只需标准化的多聚甲醛固定和 Triton X-100 促渗就可以使检测试剂进入细胞,只需少量的叠氮化染料即可非常有效地标记出整合的 EdU。
本试剂盒包含EdU法检测所需要的所有组分,可以用于体外培养细胞的增殖检测。

说明书:

YF®647A Click-iT EdU 成像试剂盒(远红荧光) 货号:               C6018S/C6018M/C6018L/C6018XL  规格:               20T/100T/500T/1000T UE-C6018S/C6018M/C6018L/C6018XL    
常见问题解答:

YF®488/555/594/647有什么区别?

主要就是检测EDU的物质带的荧光基团不同,检测时发射荧光的颜色不同。实验效果相同,可根据偏好或需求进行选择。

EdU试剂盒中,固定后3% BSA in PBS的作用是什么?
清洗步骤中,BSA可以终止掉未反应的甲醛。

能否在活细胞中进行Click-iT EdU检测?
不可以。虽然EdU是对活细胞进行代谢标记,但是叠氮化物检测试剂和缓冲液组分是细胞非透过型,检测信号时的Click反应必须在固定和通透的样品上进行。

质粒转染表达的荧光蛋白检测与Click反应兼容吗?检测顺序是什么?
本产品会影响GFP、RFP、mCherry等荧光蛋白的荧光,故染色后无法直接检测GFP,建议使用GFP抗体间接检测。

观测到较高的本底干扰,这是什么原因所致?如何减少本底干扰?
叠氮化物和炔烃类间Click反应非常有选择性,生物体内几乎不可能有副反应发生,所以本底较高一般是由洗涤不充分造成的。减少本底干扰的最佳方法是增加BSA洗涤的次数。同时,也可在同样的检测条件下设置一组同等处理的无染料或无Click反应对照,以排除自发荧光干扰。此外,您还可在无EdU 体系中进行完整的Click反应,验证Click反应信号的特异性。

为什么标记样品无信号或特异性信号非常低?如何提高信号? 
1.请保证试剂使用时为无色的状态,不要使用已经变黄的添加剂或缓冲液;
2.为确保Click反应试剂能够到达核内,细胞需要充分地固定和通透;
3.由于铜离子能结合到部分试剂上,这会导致催化Click反应的有效浓度降低。所以在Click反应前,不要在任何缓冲液或试剂中引入金属螯合剂(例如EDTA、EGTA、柠檬酸盐等),对某些含有这些物质的实验样品来说,进行Click反应前,可能需要增加额外的洗涤步骤;
4.当铜离子在合适的化合价时,Click反应才有效。Click反应中用到的铜离子为二价铜(Cu2+)。
5.延长Click反应的时间至超过30分钟也并不会提高信号。建议使用新鲜的Click反应试剂再次进行30分钟的孵育,可更有效地提高标记效率。

如何对细胞核进行复染?
试剂盒中配有Hoechst 33342,可以在Click反应后用于细胞核的染色,也可选择使用DAPI。

可以用于检测植物细胞核内的DNA复制吗? 
可以。EdU是小分子,可以穿透植物细胞的细胞壁。

YF®647A Click-iT EdU 流式检测试剂盒(远红荧光) 货号: C6022S/C6022M/C6022L 规格: 5T/20T/50T

YF®647A Click-iT EdU 流式检测试剂盒(远红荧光)

产品货号: C6022S/C6022M/C6022L

产品规格: 5T/20T/50T

目录价(元):431/1326/2947

推荐仪器:流式细胞仪

大包装询价


产品概述:

储存条件
-20℃ 避光保存,有效期见外包装。开封后,保存温度详见说明书。

组分

规格

5T

20T

50T

开封后保存温度

稳定性

A. 10 mM EdU

100 µL

0.4 mL

1 mL

-20℃

开封后按指定温度保存可有效放置一年

B. YF® 488/555/594/647A Azide

25 µL

100 µL

250 µL

-20℃,避光

C. 10× Click-iT EdU反应缓冲液

500 µL

2×1 mL

5 mL

2-8℃

D. CuSO4

200 µL

0.8 mL

2× 1 mL

2-8℃

E. Click-iT EdU缓冲液添加物

15 mg

60 mg

150 mg

2-8℃

规格:上述反应次数针对6孔板培养的细胞不同容器的具体用量可参考附表1
荧光光谱数据:YF® 488 Azide495/519 nmYF® 555 Azide555/565 nm;
YF®594 Azide590/617 nm;YF® 647A Azide650/670 nm.

产品介
细胞增殖检测是评估细胞健康程度、遗传毒性及抗肿瘤药物效果的基础实验手段。检测细胞增殖最精确的方法是 BrdU 法。EdU 法检测试剂盒是BrdU法的革命性突破。EdU (5-乙炔基-2’-脱氧尿苷)是一种嘧啶类似物,在 DNA 合成期整合入 DNA 双链。EdU 法检测基于“点击”反应,一种由铜催化的叠氮化合物和炔烃作用发生共价反应,形成共价键。
本试剂盒中,EdU 含有炔烃,YF®488/555/647A Azide 染料含有叠氮化合物。点击法的 EdU 标记增殖快速有效,易于使用。BrdU 方法需要 DNA 变性(如酸变性、热变性或者用 DNase 消化)暴露出 BrdU,方便 BrdU 抗体结合;而 EdU 法只需标准化的多聚甲醛固定和 Triton X-100 促渗就可以使检测试剂进入细胞,只需少量的叠氮化染料即可非常有效地标记出整合的 EdU。
本试剂盒包含EdU法检测所需要的所有组分,可以用于体外培养细胞的增殖检测。


说明书:

YF®647A Click-iT EdU 流式检测试剂盒(远红荧光) 货号:               C6022S/C6022M/C6022L  规格:               5T/20T/50T UE-C6022S/C6022M/C6022L    
常见问题解答:

YF®488/555/594/647有什么区别?

主要就是检测EDU的物质带的荧光基团不同,检测时发射荧光的颜色不同。实验效果相同,可根据偏好或需求进行选择。

EdU试剂盒中,固定后3% BSA in PBS的作用是什么?
清洗步骤中,BSA可以终止掉未反应的甲醛。

能否在活细胞中进行Click-iT EdU检测?
不可以。虽然EdU是对活细胞进行代谢标记,但是叠氮化物检测试剂和缓冲液组分是细胞非透过型,检测信号时的Click反应必须在固定和通透的样品上进行。

质粒转染表达的荧光蛋白检测与Click反应兼容吗?检测顺序是什么?
本产品会影响GFP、RFP、mCherry等荧光蛋白的荧光,故染色后无法直接检测GFP,建议使用GFP抗体间接检测。

观测到较高的本底干扰,这是什么原因所致?如何减少本底干扰?
叠氮化物和炔烃类间Click反应非常有选择性,生物体内几乎不可能有副反应发生,所以本底较高一般是由洗涤不充分造成的。减少本底干扰的最佳方法是增加BSA洗涤的次数。同时,也可在同样的检测条件下设置一组同等处理的无染料或无Click反应对照,以排除自发荧光干扰。此外,您还可在无EdU 体系中进行完整的Click反应,验证Click反应信号的特异性。

为什么标记样品无信号或特异性信号非常低?如何提高信号? 
1.请保证试剂使用时为无色的状态,不要使用已经变黄的添加剂或缓冲液;
2.为确保Click反应试剂能够到达核内,细胞需要充分地固定和通透;
3.由于铜离子能结合到部分试剂上,这会导致催化Click反应的有效浓度降低。所以在Click反应前,不要在任何缓冲液或试剂中引入金属螯合剂(例如EDTA、EGTA、柠檬酸盐等),对某些含有这些物质的实验样品来说,进行Click反应前,可能需要增加额外的洗涤步骤;
4.当铜离子在合适的化合价时,Click反应才有效。Click反应中用到的铜离子为二价铜(Cu2+)。
5.延长Click反应的时间至超过30分钟也并不会提高信号。建议使用新鲜的Click反应试剂再次进行30分钟的孵育,可更有效地提高标记效率。

如何对细胞核进行复染?
试剂盒中配有Hoechst 33342,可以在Click反应后用于细胞核的染色,也可选择使用DAPI。

可以用于检测植物细胞核内的DNA复制吗? 
可以。EdU是小分子,可以穿透植物细胞的细胞壁。

YF®555 Click-iT EdU 流式检测试剂盒(橙红色荧光) 货号: C6020S/C6020M/C6020L 规格: 5T/20T/50T

YF®555 Click-iT EdU 流式检测试剂盒(橙红色荧光)

产品货号: C6020S/C6020M/C6020L

产品规格: 5T/20T/50T

目录价(元):431/1326/2947

推荐仪器:流式细胞仪

大包装询价


产品概述:

储存条件
-20℃ 避光保存,有效期见外包装。开封后,保存温度详见说明书。

组分

规格

5T

20T

50T

开封后保存温度

稳定性

A. 10 mM EdU

100 µL

0.4 mL

1 mL

-20℃

开封后按指定温度保存可有效放置一年

B. YF® 488/555/594/647A Azide

25 µL

100 µL

250 µL

-20℃,避光

C. 10× Click-iT EdU反应缓冲液

500 µL

2×1 mL

5 mL

2-8℃

D. CuSO4

200 µL

0.8 mL

2× 1 mL

2-8℃

E. Click-iT EdU缓冲液添加物

15 mg

60 mg

150 mg

2-8℃

规格:上述反应次数针对6孔板培养的细胞不同容器的具体用量可参考附表1
荧光光谱数据:YF® 488 Azide495/519 nmYF® 555 Azide555/565 nm
YF®594 Azide590/617 nm;YF® 647A Azide650/670 nm.

产品介绍
细胞增殖检测是评估细胞健康程度、遗传毒性及抗肿瘤药物效果的基础实验手段。检测细胞增殖最精确的方法是 BrdU 法。EdU 法检测试剂盒是BrdU法的革命性突破。EdU (5-乙炔基-2’-脱氧尿苷)是一种嘧啶类似物,在 DNA 合成期整合入 DNA 双链。EdU 法检测基于“点击”反应,一种由铜催化的叠氮化合物和炔烃作用发生共价反应,形成共价键。
本试剂盒中,EdU 含有炔烃,YF®488/555/647A Azide 染料含有叠氮化合物。点击法的 EdU 标记增殖快速有效,易于使用。BrdU 方法需要 DNA 变性(如酸变性、热变性或者用 DNase 消化)暴露出 BrdU,方便 BrdU 抗体结合;而 EdU 法只需标准化的多聚甲醛固定和 Triton X-100 促渗就可以使检测试剂进入细胞,只需少量的叠氮化染料即可非常有效地标记出整合的 EdU。
本试剂盒包含EdU法检测所需要的所有组分,可以用于体外培养细胞的增殖检测。


说明书:

YF®555 Click-iT EdU 流式检测试剂盒(橙红色荧光) 货号:               C6020S/C6020M/C6020L  规格:               5T/20T/50T UE-C6020S/C6020M/C6020L    
常见问题解答:

YF®488/555/594/647有什么区别?

主要就是检测EDU的物质带的荧光基团不同,检测时发射荧光的颜色不同。实验效果相同,可根据偏好或需求进行选择。

EdU试剂盒中,固定后3% BSA in PBS的作用是什么?
清洗步骤中,BSA可以终止掉未反应的甲醛。

能否在活细胞中进行Click-iT EdU检测?
不可以。虽然EdU是对活细胞进行代谢标记,但是叠氮化物检测试剂和缓冲液组分是细胞非透过型,检测信号时的Click反应必须在固定和通透的样品上进行。

质粒转染表达的荧光蛋白检测与Click反应兼容吗?检测顺序是什么?
本产品会影响GFP、RFP、mCherry等荧光蛋白的荧光,故染色后无法直接检测GFP,建议使用GFP抗体间接检测。

观测到较高的本底干扰,这是什么原因所致?如何减少本底干扰?
叠氮化物和炔烃类间Click反应非常有选择性,生物体内几乎不可能有副反应发生,所以本底较高一般是由洗涤不充分造成的。减少本底干扰的最佳方法是增加BSA洗涤的次数。同时,也可在同样的检测条件下设置一组同等处理的无染料或无Click反应对照,以排除自发荧光干扰。此外,您还可在无EdU 体系中进行完整的Click反应,验证Click反应信号的特异性。

为什么标记样品无信号或特异性信号非常低?如何提高信号? 
1.请保证试剂使用时为无色的状态,不要使用已经变黄的添加剂或缓冲液;
2.为确保Click反应试剂能够到达核内,细胞需要充分地固定和通透;
3.由于铜离子能结合到部分试剂上,这会导致催化Click反应的有效浓度降低。所以在Click反应前,不要在任何缓冲液或试剂中引入金属螯合剂(例如EDTA、EGTA、柠檬酸盐等),对某些含有这些物质的实验样品来说,进行Click反应前,可能需要增加额外的洗涤步骤;
4.当铜离子在合适的化合价时,Click反应才有效。Click反应中用到的铜离子为二价铜(Cu2+)。
5.延长Click反应的时间至超过30分钟也并不会提高信号。建议使用新鲜的Click反应试剂再次进行30分钟的孵育,可更有效地提高标记效率。

如何对细胞核进行复染?
试剂盒中配有Hoechst 33342,可以在Click反应后用于细胞核的染色,也可选择使用DAPI。

可以用于检测植物细胞核内的DNA复制吗? 
可以。EdU是小分子,可以穿透植物细胞的细胞壁。