一步法RT-PCR试剂盒One Step PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time)酶试剂盒Takara Clontech

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一步法RT-PCR试剂盒One Step PrimeScript RT-PCR Kit (Perfect Real Time)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara RR064A One Step PrimeScript RT-PCR Kit (Perfect Real Time) 100 Rxns ¥2,399
¥1236
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Takara RR064B (A × 5) One Step PrimeScript RT-PCR Kit (Perfect Real Time) 100 Rxns × 5 ¥10,797
¥5561
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*红字为促销价格,促销时间: 2024年3月1日-2024年4月30日

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一步法RT-PCR试剂盒One Step PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time) 一步法RT-PCR试剂盒One Step PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time) 一步法RT-PCR试剂盒One Step PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time) 一步法RT-PCR试剂盒One Step PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time)
 
 
■ 制品内容 (Code No.: RR064A: 50 μl反应×100次)
2X One Step RT-PCR Buffer Ⅲ*1 840 μl × 3 支
TaKaRa Ex Taq HS (5 U/ μl) 100 μl
PrimeScript RT Enzyme Mix Ⅱ*2 100 μl
RNase Free dH2O 1.25 m l × 2 支
ROX Reference Dye (50X)*3 100 μl
ROX Reference Dye II (50X)*3 100 μl
 
*1 内含dNTP Mixture,Mg2+等。
*2 内含RNase Inhibitor。
*3 用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差。Applied Biosystems 7300 Real-Time PCR System使用ROX Reference Dye(50X),7500 Real-Time PCR System使用ROX Reference Dye II(50X),Thermal Cycler Dice Real Time System和Smart Cycler System、LightCycler等Real Time PCR扩增仪不必使用。
 
 
■ 制品说明
本制品是采用探针法进行Real Time One Step RT-PCR的专用试剂。使用本制品进行Real Time RT-PCR反应可在同一反应管内连续进行,操作简单,并能有效防止污染。本反应体系由于可以对扩增产物进行实时监测,大大提高了检测灵敏度,并省略了PCR反应后的电泳步骤,非常适合于RNA病毒等微量RNA的检测。
本制品中使用了适合于Real Time RT-PCR的反转录酶PrimeScript RTase和具有高扩增效率和高扩增特异性的TaKaRa Ex Taq HS,能进行稳定高效的Real Time One Step RT-PCR反应。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 试剂盒特长
1. 通过Real Time One Step RT-PCR反应,可以快速、准确地对RNA病毒等微量RNA 进行分析。
2. PCR用DNA聚合酶使用了TaKaRa Ex Taq HS,可以进行Hot Start法PCR 反应,再与Takara特别开发的Buffer系统相结合,具有高扩增效率,高扩增灵敏度,高扩增特异性之特点。
3. One Step RT-PCR Buffer III是一种2X浓度的Premix Type试剂,操作简单,能有效避免污染。
 
■ 使用注意
1. 当同时需要进行数次Real Time One Step RT-PCR反应时,应先配制各种试剂的混合液 (Master Mix;其中包括RNase Free dH2O、Buffer、各种酶等),然后再分装到每个反应管中。这样,可使所取的试剂体积更准确,减少试剂损失,避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验样品之间产生的误差。
2. 使用TaKaRa Ex Taq HS、PrimeScript RT Enzyme Mix Ⅱ时,应轻轻混匀,避免起泡;分取之前要小心地离心收集到反应管底部;由于酶保存液中含有50%的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。
3. 2X One Step RT-PCR Buffer Ⅲ 融解后如有不溶物请充分混合。配制Real Time One Step RT-PCR反应液时应避免强光照射。
4. 反应液的配制、分装请一定使用新的 (无污染的) 枪头、Microtube等,尽量避免污染。
5. 本制品只能使用特异性反转录引物,不能使用Random Primer 和Oligo dT Primer 等进行反转录反应。
 
 
Technote:
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一步法RT-PCR试剂盒One Step PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time)
 

页面更新:2023-12-01 15:06:56

SuperRT III一步法反转录-荧光定量PCR试剂盒-染料法

SuperRT III一步法反转录-荧光定量PCR试剂盒-染料法

¥579.00

货号:BL1023A

规格:100rnx

品牌:biosharp

SuperRT III一步法反转录荧光定量PCR试剂盒染料法

产品编号

产品名称

规格

BL1023A

SuperRT III一步法反转录荧光定量PCR试剂盒染料法

100 rxn

BL1023B

SuperRT III一步法反转录荧光定量PCR试剂盒染料法

1000 rxn

 

产品简介:

一步法 qRT-PCR 检测试剂盒以 RNA 为模板,通过 PCR 技术,在 DNA 聚合酶配合优化的 Buffer 作用下,利用基因特异性引物,于同一反应体系中一步完成反转录和荧光定量 PCR 的反应,无需额外开管和移液操作,操作简便快捷,提高检测通量,最大限度地减少人为误差和人工操作时间,并减少污染风险。

本产品是基于 SuperRT III 反转录酶、抗体型热启动 Taq DNA 聚合酶、配合优化的 Buffer 体系,采用 SYBR Green I 嵌合荧光法进行一步法实时荧光定量检测的专用试剂盒。对于二级结构复杂和 GC 含量高的 RNA 模板扩增效果好,非常适合于 RNA 病毒等微量目标基因的检测ROX Reference Dye 用以校正定量 PCR 仪孔与孔之间产生的荧光信号误差,不同的荧光定量 PCR 仪对 ROX 的要求不同,根据不同荧光定量 PCR 仪选择使用所需 ROX 类型。

 

产品组分

组分名称

BL1023A

BL1023B

SuperRT III One-Step SYBR Enzyme Mix

100 μl

1 ml

2×One-Step SYBR SuperRT III Buffer

1 ml

5 ml×2

Nuclease-free Water

1 ml

5 ml×2

High ROX Reference Dye

40 μl

400 μl

Low ROX Reference Dye

40 μl

400 μl

注:不同仪器所需 ROX Reference Dye 不同: 需加 High ROX Reference Dye 的机型:ABI Prism7000/7300/7700/7900HT 和 ABI Step One /ABI Step One Plus。 需加 Low ROX Reference Dye 的机型:ABI Prism7500/7500 Fast, MJ Research Chromo4, Opticon (II) , Corbett Rotor Gene 3000。 无需加 ROX Reference Dye 的机型: Thermal Cycler Dice Real Time System , LightCycler , Smart Cycler SystemCorbett Rotor-gene 6000, Agilent Technologies Mx3000P 等荧光定量 PCR 仪。

 

使用方法:

详见说明书。

 

注意事项:

1.  实验所用的离心管、枪头等耗材均需保证 RNase-free

2.  各个组分在使用之前请完全溶解并充分混匀,以防因盐离子浓度不均影响实验结果

3.  如果扩增片段较长或者 RNA 结构复杂,可以将 RNA 单独置于 65℃加热 5-10 min 后再加入体系

4.  制品只能使用特异性反转录引物,不能使用 Random Primer 和 Oligo18 (dT)等进行反转录反应。

5.  使用 StarRT III One-Step SYBR Enzyme Mix 时,应轻轻混匀,避免起泡;分取之前要小心地离心收集到反应管 底部;由于酶保存液中含有 50%的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。-20℃保存,使用后立即放回冰箱。

6.  本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。

7.  为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

有效期

-20℃避光保存,保质期 12 个月。

货号 BL1023A
规格 100rnx
品牌 biosharp
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LunaScript® 一步法多重 RT-PCR 试剂盒 #E1555L 250 reactions-NEB酶试剂 New England Biolabs

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs(NEB)酶试剂全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – RT-PCR

LunaScript® 一步法多重 RT-PCR 试剂盒                              收藏

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
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苏州库存
武汉库存

#E1555L
250 reactions
10,709.00

#E1555S
50 reactions
2,749.00

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产品特性

·有独特的 Luna WarmStart 反转录酶和 Q5 热启动超保真 DNA 聚合酶
·可检测低至 0.01 pg 的人总 RNA
·多重检测能力适用于 ARTIC 测序方案
·适配体酶控技术为室温下建立反应体系及保持 24 小时的持久稳定打下基础
·在单独的闭合试管中一步完成 RT-PCR,即能节省时间、减少塑料用量,又能最大限度地减少污染。

产品概述

 LunaScript 一步法多重 RT-PCR 试剂盒为 cDNA 合成和 PCR 扩增提供了简化方案。其中的 5X 反应预混液含有 dNTPs,经优化适用于多重靶标检测,且操作便捷。其中的 25X 酶预混液含有 Luna WarmStart 反转录酶和 Q5 热启动超保真 DNA 聚合酶。适配体抑制酶活技术可对上述两种酶活进行双重温控,因此可室温建立反应体系,且预混体系可室温稳定保存 24 小时。该试剂盒具备强大的多重靶标扩增能力,适用于诊断、病原体检、病毒基因组测序等多种应用(例如:ARTIC SARS-CoV-2 测序方案,每个反应扩增 ~50 个扩增子)。

 
图 1:在单个 RT-PCR 反应中进行多重 RNA 靶标检测和鉴定
LunaScript® 一步法多重 RT-PCR 试剂盒                               #E1555L 250 reactions
LunaScript 一步法多重 RT-PCR 试剂盒 (NEB #E1555) 仅需添加 RNA 模板和基因特异性引物,即可在一次反应中对多个 cDNA 靶标进行合成和扩增。扩增后的 cDNA 产物可通过下游应用进行检测或鉴定,包括:二代测序、DNA 芯片、片段分析、电泳和传统的克隆/测序。
 
图 2:LunaScript 一步法多重 RT-PCR 试剂盒的灵敏度和多重检测性能卓越
LunaScript® 一步法多重 RT-PCR 试剂盒                               #E1555L 250 reactions
使用 LunaScript 一步法多重 RT-PCR 试剂盒 (NEB #E1555) 或 SuperScript IV One-Step RT-PCR System (Thermo Fisher Scientific) 对人脾总 RNA 的 7 个靶标(185–776 bp)进行扩增。取 40% 的 RT-PCR 反应产物进行琼脂糖凝胶(2%)电泳检测。LunaScript 使用标准反应条件:引物终浓度为 1 μM,退火时间为 1 分钟。SSIV 使用推荐反应条件无法扩增所有条带,因此还测试了其它关键参数:改变引物浓度和退火时间。结果显示:LunaScript 一步法多重 RT-PCR 试剂盒可成功扩增不同起始量 RNA 模板中的所有 7 个靶标,但 SuperScript IV One-Step RT-PCR System 经调整反应条件,甚至增模板量,都无法扩增所有靶标。
 
图 3:LunaScript 一步法多重 RT-PCR 试剂盒可完成 ARTIC SARS-CoV-2 测序方案
 LunaScript® 一步法多重 RT-PCR 试剂盒                               #E1555L 250 reactions
 使用 LunaScript 一步法多重 RT-PCR 试剂盒和来自 NEB (A) 或 IDT (B) ARTIC V3 引物进行多重扩增,扩增模板为 1000 拷贝 SARS-CoV-2 病毒 gRNA (ATCC VR-1986),该模板掺入到 100 ng 通用人类参考 RNA(Thermo Fisher Scientific®,QS0639)中使用。将 cDNA 合成体系一式两份成 12.5 μl 体系,分别使用引物库 1 和 2 进行扩增。反应条件为:55℃ 20 分钟(反转录),98℃ 1 分钟(RT 灭活/初始变性),之后进行 35 个循环的扩增:95℃ 15 秒,63℃ 5 分钟(退火和延伸)。

使用 NEBNext® ARTIC SARS-CoV-2 FS 文库制备试剂盒(适用于 Illumina 平台)和 1.3 μl 的上述扩增产物进行文库构建,使用 MiSeq® 仪器 (2X75 bp) 测序。为每个文库绘制每个扩增子的测序  Reads。使用 seqtk(250,000 read pairs)向下抽样 Reads 数,并使用 Bowtie 2 比对至 SARS-CoV-2 参考基因组(NCBI,NC_045512)。参考线表示 100 reads 的典型质量阈值。
 
图 4:试剂可室温放置长达 24 小时,RNA 的检测效果仍然灵敏和稳健
 LunaScript® 一步法多重 RT-PCR 试剂盒                               #E1555L 250 reactions
使用 LunaScript 一步法多重 RT-PCR 试剂盒 (NEB #E1555) 对 GAPDH 靶标(570 bp)进行扩增,样品为 0.01 ng-10 ng 的 Jurkat 总 RNA。反应体系在冰上建立并立即运行(对照)或在热循环前室温放置 1、4 或 24 小时。每种条件下都设有无模板对照(NTC)。结果显示:所有上样量均完成了高度灵敏和特异的靶标扩增,预混体系室温放置长达 24 小时后也达到了同样的效果。
 
图 5:LunaScript 与 OneTaq 一步法 RT-PCR 试剂盒的比较
 
 LunaScript® 一步法多重 RT-PCR 试剂盒                               #E1555L 250 reactions

 

 

Mirus Label IT®——高效、一步法用于In vitro 及 in vivo的多种核酸的新型标记技术

Mirus Label IT®——高效、一步法用于In vitro 及 in vivo的多种核酸的新型标记技术

细胞转染这一环节,在科学实验中扮演着十分重要的角色,但也最容易被忽略的一环。转染或递转效率不仅影响实验结果,并且,最终得到的实验结果也可能是无效的。在多种类型核酸的细胞转染实验中,研究者们常需要进一步优化转染条件以达到最优的转染效率,特别是较难转染的细胞,而针对特定细胞类型选择对应专业化的转染试剂只是迈向转染实验成功的第一步。

成立于1995年的Mirus Bio,专注及深耕核酸递转领域多年,从最早具有低毒性的TransI®-LT1到GMP级别、可用于AAV和LV生产的TransIT-VirusGEN®(产品年鉴请见图1)。直至文稿发布时,使用Mirus产品发表文章已超过1万篇,并且发表文章及Mirus数据库涵盖了超过1千2百种细胞类型。

① Mirus 产品年鉴

Mirus Label IT®——高效、一步法用于In vitro 及 in vivo的多种核酸的新型标记技术

在细胞转染实验中,研究者们常忽略转染效率/成功率的评估,那么是否有对应技术或者方法允许实时监测DNA/RNA的成功递送以及细胞内的分布状态呢?Mirus Bio Label IT®核酸标记试剂盒为广大的科研工作者提供了一个方向。Label IT®核酸标记试剂盒可对任何类型核酸,进行高效、直接的标记,并且为on-step的实验操作。基于非酶反应的标记方法,在不损伤核酸完整性、不影响基因表达的前提下,将选择的标记 (荧光、生物素、地高辛等)以共价的方式连接到核酸上。

Label IT®试剂盒有多种标签可供选择,包括 Cy®3、Cy®5、CX-罗丹明、TM-罗丹明、荧光素、MFP488、地高辛、生物素和二硝基苯基(DNP)。Label IT®核酸修饰试剂盒(胺)也可用于基于胺的功能基团进行 DNA 或 RNA修饰。产品特点如下:

● 可用于标记任何 DNA 或 RNA 模板

适用于多种应用 (In vitro & in vivo),如Crispr基因编辑、核酸递转、RNA干扰/表达实验、FISH、Microarray等;

● 一步法标记

简单、轻松即可完成稳定的模版标记反应;

● 可根据实验需求或应用,调节标记的密度

以获得最佳检测标记 DNA 或RNA 的灵敏度;

● 基于共价化学反应

对核酸残基的修饰为永久性、无损伤的,是多种科研应用的理想选择。

► 什么是核酸标记?如何标记核酸?如何检测? 

绝大多数基于分子和生物学的In vitro 及 in vivo研究都依赖于核酸的标记或标签,理想情况下,此类标记或标签不会影响核酸功能以及研究结果。因此,也发展出来多种核酸标记方式,大致可以归为以下两类:

Mirus Label IT®——高效、一步法用于In vitro 及 in vivo的多种核酸的新型标记技术

化学标记法:基于结合核酸的反应基团,比如Mirus Label IT®核酸标记试剂盒属于此类,并且整个反应过程并不需要酶的参与。

Label IT®化学标记试剂由三个部分组成:

① 标签/标记 (绿色区域);

② Linker,与核酸进行静电相互作用 (黄色区域);

③ Label IT®试剂以共价形式连接到核酸中活性杂原子的烷基化基团(蓝色区域)。

 

基于酶反应标记法:通过酶促反应,在该反应过程中加入标记修饰的核酸。

当待研究的核酸加入标记后,可通过以下两种方式进行检测:

直接检测:这时,标记的核酸中包含了可用于光学、发光或产生荧光信号的报告分子。

间接检测:标记的核酸带有标签或标记,该标记需要特异性的结合报告偶联分子,如生物素结合带有荧光标记的链霉亲和素,地高辛结合带有荧光标记的特异性抗体等。

 

► Label IT®核酸标记试剂盒——不改变核酸结构功能 

基因沉默相关功能研究在分子和细胞生物学中发挥着重要作用,化学转染也在该研究领域扮演者重要角色。小干扰 RNA (Small interfering RNAs, siRNA),常作为研究各种类型细胞中蛋白功能核酸类型,有效的knockdown从而影响基因表达。那么,加入Label IT®标记的核酸,是否会改变核酸结构,从而影响到后续实验结果呢?

评估测试使用Label IT®siRNA Tracker™ 试剂盒,将相同siRNA加入不同标记 (CyTM3, CyTM5, 荧光素, CX-罗丹明 )以及没有标记siRNA,转染后,可通过荧光显微镜观察到带有标记的siRNA。基因表达结果显示,带有不同标记的siRNA,其目的基因表达水平近似,意味着加入Label IT®标记的核酸,并不影响目的基因表达及功能 (图2)。

 Label IT®siRNA Tracker™ 试剂盒评估测试

Mirus Label IT®——高效、一步法用于In vitro 及 in vivo的多种核酸的新型标记技术 

► Label IT®核酸标记试剂盒——前沿应用举例 

应用一:使用Label IT®技术,富集CRISPR’d细胞

Nasri 和 Mir 等人在文章中阐述了如何通过 Label IT®技术,富集 CRISPR/Cas编辑成功的细胞。基因组编辑实验面临最大的挑战之一是如何从未编辑的细胞中成功的筛选/富集出成功编辑的细胞,特别当未被编辑的细胞相对于成功编辑的细胞,具有生长/增殖优势,使得细胞筛选变得更加困难。

为了高效的区分经过基因编辑及未编辑的细胞,作者在CRISPR引导RNA ( gRNA) 与 Cas9 形成复合物及转染细胞前,使用Label IT®对gRNA进行了荧光标记,实验流程示意图如下:

Mirus Label IT®——高效、一步法用于In vitro 及 in vivo的多种核酸的新型标记技术

研究结果表明,使用Label IT®标记的gRNA 不会影响基因编辑效率,并且可通过荧光分选/富集成功编辑的细胞群。进一步地,研究者们将该 CRISPR 实验流程应用于针对多种细胞类型的GADD45B基因编辑实验。根据细胞类型的不同,经过Label IT®标记的细胞亚群中,其成功编辑细胞占比相对于总细胞群体提了15-40%。

发表文章信息:

标题: Fluorescent labeling of CRISPR/Cas9 RNP for gene knockout in HSPCs and iPSCs reveals an essential role for GADD45b in stress response
作者: Masoud Nasri, Perihan Mir et al.
杂志: Blood Adv, Volume 3(1), Jan 2019.
DOI: 10.1182/bloodadvances.2017015511

 

应用二:使用Label IT®技术,聚焦于免疫系统研究

Label IT®核酸标记技术可用于一种新型疫苗注射方法-微针阵列(microneedle array, MNA)的表征研究。传统的疫苗注射方法是通过 3 厘米以上长度的针头进行皮下注射,而微针阵列则是由微米级针头所组成(示意图如下),以无痛的方式细微的的穿透皮肤,进入到富含免疫细胞群,可减少患者的不适感。

Mirus Label IT®——高效、一步法用于In vitro 及 in vivo的多种核酸的新型标记技术

为了提高疫苗的效力(efficacy),通常会将免疫刺激分子或 “激动剂(agonists) “与疫苗的靶标或抗原一同加入疫苗制剂中。Edwards 等人的研究表明,双链 polyIC RNA 和单链 CpG DNA 寡核苷酸可作为微阵列中的激动剂(agonists)。并且,研究者们认为带负电荷的核酸激动剂(agonists)和带正电荷的抗原之间的静电相互作用,帮助了微阵列的组装。通过使用 Label IT®Cy®3 和 Cy®5 ,分别针对以上两种核酸类型进行荧光标记,方便用于查看标记核酸在微针上的分布,这样就允许了研究者们按照所需要的特定比例,将两种激动剂均一的加入到微阵中,从而使得精确的调整微针阵列 MNA 疫苗的免疫反应成为可能。

发表文章信息:

标题: Tuning innate immune function using microneedles containing multiple classes of toll-like receptor agonists
作者: Camilla Edwards, Robert Oakes et al.
杂志: Nanoscale, Volume 15, Apr 2023.
DOI: 10.1039/D3NR00333G


► Label IT®核酸标记试剂盒-产品选择 

● Label IT®试剂盒共有以下四种形式可供选择,以应对研究人员核酸标记实验的不同应用场景需求:

● Label IT®Nucleic Acid Labeling Kits

● Label IT®Tracker™ Intracellular Nucleic Acid Localization Kits

● Label IT®siRNA Tracker™ Intracellular Localization Kits

●Label IT®Nucleic Acid Modifying Kits

下表总结了不同种类Label IT®试剂盒区别:

Label IT®Nucleic Acid Labeling

Label IT®Tracker™

Label IT®siRNA Tracker™

Label IT®Nucleic Acid Labeling Modifying

应用

in vitro & in vivo应用的多种类型核酸标记

in vitro & in vivo质粒追踪实验

in vitro & in vivo siRNA追踪实验

DNA氨基修饰

试剂盒组分

Label IT®Reagent Reconstitution Solution

10X Labeling Buffer

Reagent D1& Buffer N1

G50 Microspin Columns

Label IT®Reagent Reconstitution Solution

10X Labeling Buffer

Label IT®Reagent Reconstitution Solution

10X Labeling Buffer

siRNA Dilution Buffer

Label IT®Reagent Reconstitution Solution

10X Labeling Buffer

Reagent D1& Buffer N1

G50 Microspin Columns

Label IT® : 

核酸比例

1µl  : 1µg

0.5 µl  : 1µg

1µl  : 1µg

0.5µl  : 1µg

标记密度

20-60bp 1个标记

60-140bp 1个标记

15-40bp 1个标记

20-6 bp 1个标记

Cy®3

Cy®5

荧光素

CX-罗丹明

TM-罗丹明

生物素

MFP488

地高辛

DNP

Cy®3

Cy®5

荧光素

CX-罗丹明

TM-罗丹明

生物素

Cy®3

Cy®5

荧光素

CX-罗丹明

TM-罗丹明

生物素

氨基

试剂盒规格

25µl

100µl

50µl

50µl

25µl

100µl

更多有关产品常疑问FAQ,请查看官网链接


► Label IT®核酸标记试剂盒-实验优化之核酸标记密度 

理想的密度取决于被标记的核酸类型及后续下游应用。在需要直接追踪核酸的实验中,更适合较高的核酸标记密度;而在想要维持/完整的还原标记核酸的生物学功能的实验中,则更加适合较低的标记密度。使用 Label IT®核酸标记技术,可以轻松调整到理想的标记密度。

Label IT®试剂与核酸的比例(v:w)的改变与标记密度呈线性相关性(图 3)。例如,按照说明的初次实验建议,需加入 5 µl Label IT®试剂标记 5 µg DNA,此时v:w比例为1:1。在保证孵育时间和 DNA 量不变的条件下,如将 Label IT®试剂的量降低为 2.5 µl 或 增加到10 µl,标记密度将分别降低一半或增加一倍。

实验Tips:使用过高的 Label IT®试剂量(超过建议量的 4 倍),可能会导致核酸裂解或引起 Label IT®荧光基团淬灭。

 Label IT®核酸标记密度与所使用的 Label IT®试剂量/孵育时间线性相关

核酸标记密度与所使用的 Label IT®试剂量及反应的孵育时间呈正线性相关。可通过调整反应中 Label IT®试剂的用量或反应的孵育时间 (孵育温度仍为37°C),可轻松灵活的调整到所需要的理想标记密度。

Mirus Label IT®——高效、一步法用于In vitro 及 in vivo的多种核酸的新型标记技术

实验Tips:如何计算核酸标记密度,详细实验步骤及方法请见“Calculate Nucleic Acid Labeling Density”

 

Mirus Bio公司介绍 

Mirus成立于1995年,始终秉承着为基因递转提供最佳方法及最高效的工具。凭借超过 25 年转染领域的深根细作,获得了多项技术突破,已成为核酸递送领域的全球领导者和值得信赖的品牌。Mirus科学家团队不断突破转染技术的极限,推出了VirusGEN®转染试剂与RevIT™增强剂,进一步提升AAV/Lv产量,助力推动生物治疗药物的降本增效,为CGT领域客户赋能。


 

更多详情请咨询 Mirus 全国一级代理-上海金畔生物

Instant“一步法”快速ELISA试剂盒

Instant“一步法”快速ELISA试剂盒

Instant ELISA™即一步法ELISA,是eBioscience公司在常规ELISA的基础上开发的更简便、更精确的快速ELISA产品,它大大减少了操作步骤和缩短的操作时间。只需加入样本即可开始检测。无需费力的准备试剂、系列稀释标准品、以及把它们顺次加入反应孔内。与传统ELISA板相比,Instant ELISA®板包含了包被抗体和冻干的检测抗体、Streptavidin-HRP和样本稀释液。另外在单独提供的32微孔内预先冻干(已按比例稀释)标准品蛋白,以便制备标准曲线。


Instant ELISA™三大优势:
1. 简化了复杂的操作流程:由传统ELISA的17个操作步骤简化到7个步操,只需1步孵育步骤,无需稀释生物素标记的抗体和streptavidin-HRP,无需倍比释标准品。

2. 极大的缩短了实验的时间:与常规ELISA相比,缩短了将近1个小时。
3. 实验结果更精: 标准曲线是ELISA中最重要的一个环节,标准品的保存和稀释则是关键, eBioscience公司率先将不同浓度的标准品以冻干粉形式冻干于微孔中,将吸量误差降至最低。


产品名称 灵敏度 检测范围 产品编号
Human BAFF Instant ELISA 0.13 ng/mL  0.31 – 20.0 ng/mL  BMS2007INST*
Human CRP Instant ELISA 3.0 pg/mL  78 – 5,000 pg/mL  BMS288INSTCE*
Human C-reactive Protein Instant ELISA 3.0 pg/mL  78 – 5,000 pg/mL  BMS288INST*
Human Caspase-3 Instant ELISA 0.12 ng/mL  0.16 – 10.0 ng/mL  BMS2012INST*
Human sCD27 Instant ELISA 0.264 U/mL  0.31 – 20.0 U/mL  BMS286INST*
Human sCD30 Instant ELISA 0.33 ng/mL  1.6 – 100 ng/mL  BMS240INST*
Human sCD30 Instant ELISA 0.33 ng/mL  1.6 – 100 ng/mL  BMS240INSTCE*
Human sCD40L Instant ELISA 0.062 ng/mL  0.16 – 10.0 ng/mL  BMS239INST*
Human sCD40L Instant ELISA 0.062 ng/mL  0.16 – 10.0 ng/mL  BMS239INSTCE*
Human sCD44std Instant ELISA 0.016 ng/mL  62.5 – 4,000 pg/mL  BMS209INST*
Human sCD44var (v5) Instant ELISA 0.01 ng/mL  0.16 – 10.0 ng/mL  BMS220INST*
Human sCD44var (v6) Instant ELISA 0.06 ng/mL  0.16 – 10.0 ng/mL  BMS210INST*
Human sCD80 Instant ELISA 0.10 ng/mL  0.31 – 20.0 ng/mL  BMS291INST*
Human sCD105 (Endoglin) Instant ELISA 2.60 pg/mL  15.6 – 1000 pg/mL  BMS2105INST*
Human sE-selectin Instant ELISA 0.33 ng/mL  1.56 – 50 ng/mL  BMS205INSTCE*
monkey sE-selectin Instant ELISA 0.6 U/mL  1.88 – 60 U/mL  BMS649INST*
Human sE-selectin Instant ELISA 0.33 ng/mL  1.56 – 50 ng/mL  BMS205INST*
Human EGF Instant ELISA 0.26 pg/mL  3.91 – 250 pg/mL  BMS2070INST*
Human G-CSF Instant ELISA 11.0 pg/mL  39.1 – 2,500 pg/mL  BMS2001INST*
Human G-CSF Instant ELISA 11.0 pg/mL  39.1 – 2,500 pg/mL  BMS2001INSTCE*
Human GM-CSF Instant ELISA 0.6 pg/mL  7.8 – 500 pg/mL  BMS283INST*
Human GM-CSF Instant ELISA 0.6 pg/mL  7.8 – 500 pg/mL  BMS283INSTCE*
Human sHER-2 Instant ELISA 0.06 ng/mL  0.16 – 10.0 ng/mL  BMS207INST*
Human sHER-2 Instant ELISA 0.06 ng/mL  0.16 – 10.0 ng/mL  BMS207INSTCE*
Human HGF Instant ELISA 5.5 pg/mL  63 – 4000 pg/mL  BMS2069INST*
Monkey sICAM-1 Instant ELISA 1.05 U/mL  1.56 – 100 U/mL  BMS648INST*
Human sICAM-3 Instant ELISA 0.38 ng/mL  0.78 – 50.00 ng/mL  BMS218INST*
Human IFN-alpha Instant ELISA 3.3 pg/mL  39 – 2,500 pg/mL  BMS216INST*
Human IFN-alpha Instant ELISA 3.3 pg/mL  39 – 2,500 pg/mL  BMS216INSTCE*
Mouse IFN-gamma Instant ELISA 4.0 pg/mL  15.6 – 1,000 pg/mL  BMS606INST*
Mouse IL-1beta Instant ELISA 3.0 pg/mL  3.9 – 250 pg/mL  BMS6002INST*
Human IL-1beta Instant ELISA 0.7 pg/mL  7.8 – 500 pg/mL  BMS224INSTCE*
Human IL-1 beta Instant ELISA 0.7 pg/mL  7.8 – 500 pg/mL  BMS224INST*
Human IL-2 Instant ELISA 2.3 pgml  18.8 – 1,200 pg/mL  BMS221INSTCE*
Human IL-2 Instant ELISA 2.3 pg/mL  18.8 – 1,200 pg/mL  BMS221INST*
Human sIL-2R Instant ELISA 0.21 ng/mL  0.31 – 20.0 ng/mL  BMS212INSTCE*
Human sIL-2R Instant ELISA 0.21 ng/mL  0.31 – 20.0 ng/mL  BMS212INST*
Mouse IL-4 Instant ELISA 0.6 pg/mL  3.9 – 250 pg/mL  BMS613INST*
Human IL-4 Instant ELISA 0.66 pg/mL  7.8 – 500 pg/mL  BMS225INST*
Human IL-4 Instant ELISA 0.66 pg/mL  7.8 – 500 pg/mL  BMS225INSTCE*
Human IL-5 Instant ELISA 1.45 pg/mL  7.8 – 500 pg/mL  BMS278INST*
Human IL-5 Instant ELISA 1.45 pg/mL  7.8 – 500 pg/mL  BMS278INSTCE*
Monkey IL-6 Instant ELISA 1.05 U/mL  1.9 – 120 U/mL  BMS641INST*
Human IL-6 Instant ELISA 0.92 pg/mL  3.1 – 200 pg/mL  BMS213INST*
Human IL-6 Instant ELISA 0.92 pg/mL  3.1 – 200pg/mL  BMS213INSTCE*
Human sIL-6R Instant ELISA 0.01 ng/mL  78 – 5,000 pg/mL  BMS214INST*
Human sIL-6R Instant ELISA 0.01 ng/mL  78 – 5,000 pg/mL  BMS214INSTCE*
Human IL-8 Instant ELISA 1.3 pg/mL  15.6 – 1,000 pg/mL  BMS204/3INSTCE*
Human IL-8 Instant ELISA 1.3 pg/mL  15.6 – 1,000 pg/mL  BMS204/3INST*
Monkey IL-8 Instant ELISA 1.5 U/mL  19.5 – 1,250 U/mL  BMS640/3INST*
Mouse IL-10 Instant ELISA 5.28 pg/mL  39.1 – 2,500 pg/mL  BMS614INST*
Human IL-10 Instant ELISA 0.66 pg/mL  3.1 – 200 pg/mL  BMS215INST*
Human IL-10 Instant ELISA 0.66 pg/mL  3.1 – 200 pg/mL  BMS215INSTCE*
Monkey IL-10 Instant ELISA 1.32 U/mL  3.9 – 250 U/mL  BMS642INST*
Human IL-13 Instant ELISA 0.99 pg/mL  3.13 – 200 pg/mL  BMS231INST*
Human IL-18 Instant ELISA 9.2 pg/mL  78 – 5,000 pg/mL  BMS267INST*
Human IL-18 Instant ELISA 9.2 pg/mL  78 – 5,000 pg/mL  BMS267INSTCE*
Human IP-10 Instant ELISA 1.0 pg/mL  3.1 – 200 pg/mL  BMS284INST*
Human Iso-Insulin Instant ELISA 16.6 pg/mL  31.3 – 2,000 pg/mL  BMS2003INST*
Human sL-selectin Instant ELISA 0.19 ng/mL  0.39 – 25.0 ng/mL  BMS206INST*
Human sL-selectin Instant ELISA 0.19 ng/mL  0.39 – 25.0 ng/mL  BMS206INSTCE*
Human Leptin Instant ELISA 20.0 pg/mL  63 – 4,000 pg/mL  BMS2039INST*
Human MCP-1 Instant ELISA 2.3 pg/mL  15.6 – 1,000 pg/mL  BMS281INST*
Rat MCP-1 Instant ELISA 4.7 pg/mL  7.8 – 500 pg/mL  BMS631INST*
Human MCP-1 Instant ELISA 2.3 pg/mL  15.6 – 1,000 pg/mL  BMS281INSTCE*
Mouse MCP-3 Instant ELISA 2.6 pg/mL  15.6 – 1,000 pg/mL  BMS6006INST*
Mouse MCP-5 Instant ELISA 2.3 pg/mL  15.6 – 1,000 pg/mL  BMS6007INST*
Human MIG Instant ELISA 4.0 pg/mL  31.3 – 2,000 pg/mL  BMS285INST*
Human MIP-1alpha Instant ELISA 6.0 pg/mL  15.6 – 1,000 pg/mL  BMS2029INST*
Human MIP-1beta Instant ELISA 3.0 pg/mL  7.8 – 500 pg/mL  BMS2030INST*
Human MPO Instant ELISA 0.03 ng/mL  0.16 – 10.0 ng/mL  BMS2038INST*
Human Osteocalcin Instant ELISA 0.2 ng/mL  1.2 – 75 ng/mL  BMS2020INST*
Human Osteoprotegerin Instant ELISA 2.5 pg/mL  15.6 – 1,000 pg/mL  BMS2021INST*
Monkey sPECAM-1 Instant ELISA 0.06 U/mL  0.48 – 30.0 U/mL  BMS651INST*
Human sPECAM-1 Instant ELISA 0.06 ng/mL  0.47 – 30.0 ng/mL  BMS229INST*
Human RANTES Instant ELISA 4.2 pg/mL  31.3 – 2,000 pg/mL  BMS287/2INST*
Mouse RANTES Instant ELISA 1.2 pg/mL  7.8 – 500 pg/mL  BMS6009INST*
Human sICAM-1 Instant ELISA 2.17 ng/mL  1.56 – 100 ng/mL  BMS201INSTCE*
Human sICAM-1 Instant ELISA 2.17 ng/mL  1.56 – 100 ng/mL  BMS201INST*
Human TNF-alpha Instant ELISA 1.65 pg/mL  7.8 – 500 pg/mL  BMS223INSTCE*
Mouse TNF-alpha Instant ELISA 4.0 pg/mL  31.3 – 2,000 pg/mL  BMS607/2INST*
Human TNF-alpha Instant ELISA 1.65 pg/mL  7.8 – 500 pg/mL  BMS223INST*
Human TNF-beta Instant ELISA 4.6 pg/mL  15.6 – 1,000 pg/mL  BMS202INSTCE*
Human TNF-beta Instant ELISA 4.6 pg/mL  15.6 – 1,000 pg/mL  BMS202INST*
Human sTNF-R (60kDa) Instant ELISA 53 pg/mL  0.078 – 5.0 ng/mL  BMS203INST*
Human sTNF-R (60kDa) Instant ELISA 53 pg/mL  0.078 – 5.0 ng/mL  BMS203INSTCE*
Monkey sTNF-RI Instant ELISA 0.059 U/mL  0.09 – 6.0 U/mL  BMS653INST*
Mouse sTNF-R II Instant ELISA 0.6 pg/mL  7.8 – 500 pg/mL  BMS6003INST*
Human TWEAK Instant ELISA 9.7 pg/mL  15.6 – 1,000 pg/mL  BMS2006INST*
Human VE-Cadherin Instant ELISA 0.05 ng/mL  0.16 – 10.0 ng/mL  BMS253INST*

Titanium一步法 RT-PCR 试剂盒酶试剂盒Takara Clontech

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

Titanium一步法 RT-PCR 试剂盒
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 639503 Titanium One-Step RT-PCR Kit 30 Rxns ¥3,171 Titanium一步法 RT-PCR 试剂盒 Titanium一步法 RT-PCR 试剂盒 Titanium一步法 RT-PCR 试剂盒
Clontech 639504 Titanium One-Step RT-PCR Kit 100 Rxns ¥7,340 Titanium一步法 RT-PCR 试剂盒 Titanium一步法 RT-PCR 试剂盒 Titanium一步法 RT-PCR 试剂盒
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Code No. 产品名称
639503   Titanium® One-Step RT-PCR Kit
639504   Titanium® One-Step RT-PCR Kit
 
Titanium One-Step RT-PCR Kit是易于使用、简单操作的一步法RT-PCR试剂盒。 整个反应在单个管中进行,避免了交叉污染。 除了易于使用之外,该试剂盒提供较高的灵敏度和效率,是比较不同样品基因表达水平的理想选择。 凭借其高灵敏度,使用Titanium One-Step RT-PCR Kit进行RT-PCR相关分析性应用。
 
产品特点
· 定性分析多个样品的基因表达
· 总RNA起始量少至10 pg
· 方便易用型
· 避免交叉污染
 
 
产品详情请点击:Titanium一步法 RT-PCR 试剂盒
 
 

页面更新:2019-11-05 09:04:46

SuperRT III一步法反转录-荧光定量PCR试剂盒-染料法

SuperRT III一步法反转录-荧光定量PCR试剂盒-染料法

¥4626.00

货号:BL1023B

规格:1000rnx

品牌:biosharp

SuperRT III一步法反转录荧光定量PCR试剂盒染料法

产品编号

产品名称

规格

BL1023A

SuperRT III一步法反转录荧光定量PCR试剂盒染料法

100 rxn

BL1023B

SuperRT III一步法反转录荧光定量PCR试剂盒染料法

1000 rxn

 

产品简介:

一步法 qRT-PCR 检测试剂盒以 RNA 为模板,通过 PCR 技术,在 DNA 聚合酶配合优化的 Buffer 作用下,利用基因特异性引物,于同一反应体系中一步完成反转录和荧光定量 PCR 的反应,无需额外开管和移液操作,操作简便快捷,提高检测通量,最大限度地减少人为误差和人工操作时间,并减少污染风险。

本产品是基于 SuperRT III 反转录酶、抗体型热启动 Taq DNA 聚合酶、配合优化的 Buffer 体系,采用 SYBR Green I 嵌合荧光法进行一步法实时荧光定量检测的专用试剂盒。对于二级结构复杂和 GC 含量高的 RNA 模板扩增效果好,非常适合于 RNA 病毒等微量目标基因的检测ROX Reference Dye 用以校正定量 PCR 仪孔与孔之间产生的荧光信号误差,不同的荧光定量 PCR 仪对 ROX 的要求不同,根据不同荧光定量 PCR 仪选择使用所需 ROX 类型。

 

产品组分

组分名称

BL1023A

BL1023B

SuperRT III One-Step SYBR Enzyme Mix

100 μl

1 ml

2×One-Step SYBR SuperRT III Buffer

1 ml

5 ml×2

Nuclease-free Water

1 ml

5 ml×2

High ROX Reference Dye

40 μl

400 μl

Low ROX Reference Dye

40 μl

400 μl

注:不同仪器所需 ROX Reference Dye 不同: 需加 High ROX Reference Dye 的机型:ABI Prism7000/7300/7700/7900HT 和 ABI Step One /ABI Step One Plus。 需加 Low ROX Reference Dye 的机型:ABI Prism7500/7500 Fast, MJ Research Chromo4, Opticon (II) , Corbett Rotor Gene 3000。 无需加 ROX Reference Dye 的机型: Thermal Cycler Dice Real Time System , LightCycler , Smart Cycler SystemCorbett Rotor-gene 6000, Agilent Technologies Mx3000P 等荧光定量 PCR 仪。

 

使用方法:

详见说明书。

 

注意事项:

1.  实验所用的离心管、枪头等耗材均需保证 RNase-free

2.  各个组分在使用之前请完全溶解并充分混匀,以防因盐离子浓度不均影响实验结果

3.  如果扩增片段较长或者 RNA 结构复杂,可以将 RNA 单独置于 65℃加热 5-10 min 后再加入体系

4.  制品只能使用特异性反转录引物,不能使用 Random Primer 和 Oligo18 (dT)等进行反转录反应。

5.  使用 StarRT III One-Step SYBR Enzyme Mix 时,应轻轻混匀,避免起泡;分取之前要小心地离心收集到反应管 底部;由于酶保存液中含有 50%的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。-20℃保存,使用后立即放回冰箱。

6.  本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。

7.  为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

有效期

-20℃避光保存,保质期 12 个月。

货号 BL1023B
规格 1000rnx
品牌 biosharp
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Luna® 探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液(含 UDG) #M3019E 2000 rxns-NEB酶试剂 New England Biolabs

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs(NEB)酶试剂全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – qPCR & RT-qPCR

Luna® 探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液(含 UDG)                              收藏

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存
武汉库存

#M3019E
2000 rxns
28,699.00

#M3019L
500 rxns
9,239.00

#M3019S
200 rxns
4,099.00

#M3019X
1000 rxns
16,419.00

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特性

 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG 可精准检测目标 RNA,多重扩增检测性能优异,一次可检测多达 5 个靶标。

 •  单管预混液剂型使反应体系的建立更便捷

   4X 浓度的预混液可增加样品加入量,提高 RT-qPCR 灵敏度

   一次可检测多达 5 个靶标,增加检测通量

   Luna 温启动反转录酶与 Taq 热启动 DNA 聚合酶联合使用,提高反应特异性及稳定性并可室温建立体系

 •  预混液中包含 UDG dUTP防止模板残留污染 

 •  无干扰的可见示踪染料避免加样错误 

 •  点击 COVID-19 research 了解 NEB 如何将多种 RT-qPCR 病毒检测方法用于新冠研究

产品说明

  Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG 用于探针法实时荧光定量检测靶标 RNA。首先反转录酶将 RNA 转化为 cDNA,然后 DNA 聚合酶对 cDNA 进行扩增,完成靶标的实时荧光定量 PCR(qPCR),整个过程在单管内一次性完成。基于探针法的 qPCR / RT-qPCR 原理是利用聚合酶的 5´ → 3´ 外切酶活性,将淬灭的目标特异性探针切断发出荧光,并实时监测荧光值的增加,以测量每个循环中的 DNA 扩增。在荧光信号显著超过背景荧光的位置,可以确定 Cq 值。Cq 值可用于评估两个或多个样品的靶基因相对丰度。


该预混液基于探针法化学原理,采用一步法 RT-qPCR 流程,因此可与 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒(NEB #E3006)进行对比
 
 1:用于一步法 RT-qPCR 实验的新产品
 Luna® 探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液(含 UDG)                               #M3019E 2000 rxns
 
Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 预混液,含 UDG 为 4X 浓度,因此在靶标 RNA 量极低的应用中(例如:病原体检测),可提高样品加入量。通过对 个靶标进行不同浓度的线性、灵敏度检测,显示该产品在多重检测中性能更优。该预混液将一步法 RT-qPCR 所需组分整合到单个试管中,包括:Luna 温启动反转录酶、Taq 热启动 DNA 聚合酶、dNTP 和小鼠 RNase 抑制剂。Taq 热启动 DNA聚合酶与新型温启动反转录酶联合使用,可通过基于适配体的可逆抑制来双重控制酶的活性。这种温控活化机制可避免热循环前的非特异扩增,从而让室温建立体系更安全。经改造的 Luna 温启动反转录酶具有更高的热稳定性,最佳反应温度为 55°C。此外,预混液还添加了独特矫对染料,可与多种 qPCR 仪器兼容,包括需要高 ROX 或低 ROX 参比信号的仪器。

图 2:使用 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG 对不同 RNA 病毒进行检测显示性能卓越
 
 Luna® 探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液(含 UDG)                               #M3019E 2000 rxns
使用 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG 对 SARS-CoV-2N1)和流感病毒 H1N1HA)进行  RT-qPCR。反应体系为 20 ul,对 5-log 浓度梯度样品进行扩增性能评估,使用两台荧光定量仪器进行平行测试。(A10–100,000 拷贝合成 SARS-CoV-2 RNA 对照 2Twist BiosciencesSKU102024)溶于 10 ng Jurkat 总 RNA 中(BioChain,#R1255815-50)。(B12.4–124,000 拷贝甲型流感病毒(H1N1RNAATCC®VR-95DQ)溶于 10 ng Jurkat 总 RNA 中。结果显示两个病毒靶标扩增的灵敏度和线性度都很理想。
 
图 3:使用 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG 进行多重检测(个靶标)
 
Luna® 探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液(含 UDG)                               #M3019E 2000 rxns

 
使用 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG 对 5-log 浓度梯度的 Jurkat 总 RNA100 ng-10 pg)进行多重 RT-qPCR,实验仪器为 Bio-Rad CFX96 荧光定量仪。结果显示了 个人源靶基因的扩增标准曲线和扩增效率。反应体系(20 μl)中引物和探针浓度均为 200 nM,反应设置为产品推荐的循环条件。在该多重反应中,个靶标均检测到良好的线性度、扩增效率和 R2 值。
 
 4Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG 性能优于其它品牌
Luna® 探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液(含 UDG)                               #M3019E 2000 rxns

两位实验人员按照操作说明书,在几天的时间内,使用 Applied Biosystems™ QuantStudio™ 6 实时 PCR 系统,用两种荧光定量试剂盒分别对 8 个不同丰度、长度和 GC 含量的靶标(通过不同颜色显示)进行一步法 RT-qPCR 测试。反应结果就以下方面进行评估:扩增效率、低样品量检测能力及无模板扩增值(ΔCq=无模板对照的平均 Cq-最低起始量的平均 Cq)。此外,基于前面的度量值(质量得分)还评估了扩增结果的一致性、可重复性和总体曲线质量。结果显示:参与测试的两种试剂均表现不错,但 NEB 测试结果落在绿框里的数量更多,因此 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG 性能优于 TaqPath 1-Step RT-qPCR预混液。

RT-qPCR 的高灵敏度使得避免 DNA 污染尤为重要。由于先前扩增产物可作为后续反应的底物,因此反应体系加入 dUTP 和热敏 UDG 可防止模板残留污染。热敏 UDG 超过50°C时会完全失活,因此对 qPCR 性能没有影响。

 
图 5RT-qPCR 避免模板残留污染的评估
 
Luna® 探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液(含 UDG)                               #M3019E 2000 rxns
为了评估不同试剂盒对去除模板残留物的能力,首先使用 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒制备含 U RT-qPCR 产物。然后使用三种不同的 RT-qPCR 预混液(均包含 UDG),将~105 拷贝的含 U 产物作为模板进行 qPCR。按照各品牌的操作说明,在第二个反应开始时进行 25°C 孵育使 UDG 降解含 dU 样品,以降低其产生(假)阳性信号的能力。ΔCq 是进行残留处理及未处理的循环数的差值。ΔCq 值越大说明去除残留产物的效率越高。使用 Luna 预混液去除污染后,一个样品中含 U 产物完全消化,另一个样品 ΔCq 较大。注意:在真实污染案例中,污染的 DNA 量很难评估/预测。

该预混液包含无荧光的可见蓝色示踪染料,有助于透明管加样。该示踪染料与 qPCR 常用荧光基团的光谱没有重叠,也不会干扰实时检测。

Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG 包含无干扰的可见蓝色示踪染料可避免加样错误

Luna® 探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液(含 UDG)                               #M3019E 2000 rxns

 
 
 

 

一步法RT-qPCR探针法检测试剂盒One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG)酶试剂盒Takara Clontech

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

一步法RT-qPCR探针法检测试剂盒One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix (or with UNG)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara RR600A One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix 200 Rxns ¥2,878
¥1483
一步法RT-qPCR探针法检测试剂盒One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) 一步法RT-qPCR探针法检测试剂盒One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) 一步法RT-qPCR探针法检测试剂盒One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG)
Takara RR600B (A × 5) One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix 200 Rxns × 5 ¥13,670
¥7041
一步法RT-qPCR探针法检测试剂盒One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) 一步法RT-qPCR探针法检测试剂盒One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) 一步法RT-qPCR探针法检测试剂盒One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG)
Takara RR601A One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix, with UNG 200 Rxns ¥3,118
¥1606
一步法RT-qPCR探针法检测试剂盒One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) 一步法RT-qPCR探针法检测试剂盒One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) 一步法RT-qPCR探针法检测试剂盒One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG)
Takara RR601B (A × 5) One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix, with UNG 200 Rxns × 5 ¥14,810
¥7628
一步法RT-qPCR探针法检测试剂盒One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) 一步法RT-qPCR探针法检测试剂盒One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) 一步法RT-qPCR探针法检测试剂盒One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG)

*红字为促销价格,促销时间: 2024年3月1日-2024年4月30日

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一步法RT-qPCR探针法检测试剂盒One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) 一步法RT-qPCR探针法检测试剂盒One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) 一步法RT-qPCR探针法检测试剂盒One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) 一步法RT-qPCR探针法检测试剂盒One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG)
 
 
· 完全premix型、操作简单、probe法One Step RT-qPCR。
· 卓越的抗反应阻碍物能力、粗提样品可以使用本产品
· 新增UNG版本,可防止假阳性产生
 
■ 制品内容
One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix (Code No.: RR600A,200次,25 μl反应体系)
1. One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix(2×)
625 μl × 4
2. RNase Free Water 1.25 ml × 2
3. ROX Reference Dye(50×conc.)* 100 μl
4. ROX Reference Dye II(50×conc.)* 100 μl
 
One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix with UNG (Code No.: RR601A,200次,25 μl反应体系)
1. One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix, with UNG(2×) 625 μl × 4
2. RNase Free Water 1.25 ml × 2
3. ROX Reference Dye(50×conc.)* 100 μl
4. ROX Reference Dye II(50×conc.)* 100 μl
 
* 使用Applied Biosystems Real-Time PCR仪器等,需要进行孔与孔之间的荧光信号校正时添加该试剂。
 
◆ 需要使用ROX Reference Dye (50×) 校正的仪器
Applied Biosystems 7900HT/7300 Real-Time PCR System
StepOnePlus Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)
◆ 需要使用ROX Reference Dye II (50×) 校正的仪器
Applied Biosystems 7500/7500 Fast Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)
◆ 不需要使用ROX Reference Dye校正的仪器
Thermal Cycler Dice Real Time System系列
LightCycler/LightCycler 480 system (Roche Diagnostics)
CFX96 Real-Time PCR Detection System (Bio-Rad)
 
■ 制品说明
本制品是采用探针法进行1 Step Real Time RT-PCR的专用premix试剂。本制品将反转录酶和PCR酶及反应用buffer预先配制成premix形式,由于RT-PCR反应在单个反应管中连续进行,因而,操作更简便,同时降低了污染的风险。反转录酶采用了耐热性高的PrimeScript III RTase,且即使在反应阻害物存在的情况下也能够有效合成cDNA。此外,使用该试剂,也可以实现多个反应同时进行的多重qPCR。为防止PCR反应时的【carryover contamination】,可以使用添加有UNG的One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix, with UNG (Code No. RR601A/B)。通过使用该制品,能够更简便、准确地实现RNA/DNA病毒的快速检出及mRNA的表达分析。
 
本制品适用于Takara公司Thermal Cycler Dice Real Time System仪器,已确认以下Real Time PCR仪器都适用。
· Thermal Cycler Dice Real Time System III(Code No. TP950/TP970/TP980/TP990)
· Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific)
· LightCycler 96 System(Roche Diagnostics)
· CFX96 Real-Time PCR Detection System(Bio-Rad)等
 
注:采用嵌合荧光法(TB Green)进行1 Step Real Time RT-PCR时,
请使用:One Step TB Green PrimeScript PLUS RT-PCR Kit (Perfect Real Time)(Code No. RR096A)
或:One Step TB Green PrimeScript RT-PCR Kit II (Perfect Real Time)(Code No. RR086A)
 
■ 特点
1. 通过One Step RT-qPCR可快速且准确地进行RNA病毒等的分析
2. 由于本制品对各种反应阻害物有很高的耐受性,多数情况下简易提取的粗提RNA起始也能够检出。但是,需要注意的是如果出现不能检出的情况或需要更高准确度及更稳定的分析结果时,需要使用纯度更高的RNA样品。培养细胞及组织样品起始的高纯度total RNA的制备推荐以下kit:TaKaRa MiniBEST Universal RNA Extraction Kit(Code No. 9767)、RNAiso Plus(Code No. 9108/9109)、TaKaRa MiniBEST Viral RNA/DNA Extraction Kit Ver.5.0(Code No. 9766)等
 
 

页面更新:2023-12-01 15:58:57

SuperRT III一步法RT-PCR试剂盒(染料)

SuperRT III一步法RT-PCR试剂盒(染料)

¥1188.00

货号:BL1021B

规格:200rnx

品牌:biosharp

商品详情:

SuperRT III 一步法RT-PCR试剂盒(染料)

产品编号

产品名称

规格

BL1021A

SuperRT III一步法RT-PCR试剂盒(染料)

50 rxn

BL1021B

SuperRT III一步法RT-PCR试剂盒(染料)

200 rxn

 

产品简介:

本试剂盒采用一步法高效地将 RNA 反转录成第一链 cDNA,并进行 PCR 扩增。通过 PCR 技术,以RNA 为模板,利用基因特异性引物、SuperRT III One-Step RT Enzyme Mix 2×SuperRT III One-Step RT Buffer 合成第一链 cDNA 后,在热启动 DNA 聚合酶的作用下检测目的基因的含量。本产品包含了一步法 RT-PCR 反应所必须的酶和反应体系,配合经过优化的缓冲体系,最大程度的减少反转录酶对扩增反应的抑制,RT-PCR 检测灵敏度可达到 1 pg  RNA,并可扩增长达 10 kb 的片段。

 

产品组分

组分名称

BL1021A

BL1021B

SuperRT III One-Step RT Enzyme Mix

50 μl

200 μl

2×SuperRT III One-Step RT Buffer (Dye)

500μl

1 ml×2

Nuclease-free Water

1 ml

1.5ml

 

使用方法:

详见说明书。

 

注意事项:

1.  实验所用的离心管、枪头等耗材均需保证 RNase-free

2.  各个组分在使用之前请完全溶解并充分混匀,以防因盐离子浓度不均影响实验结果

3.  如果扩增片段较长或者 RNA 结构复杂,可以将 RNA 单独置于 65℃加热 5-10 min 后再加入体系

4.  本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。

5.  为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

有效期

-20℃保存,保质期 12 个月。

货号 BL1021B
规格 200rnx
品牌 biosharp