RevertAid RT Reverse Transcription Kit
货号：
K1691
品牌：
MBI
产品简介
| 单位 | 支 |
| 规格 | 500 rxns |
应用：DNA&基因组测序分析、PCR
标签归档：rt
TaqMan One Step RT-qPCR Kit
TaqMan One Step RT-qPCR Kit
货号：
T2210
品牌：
Jinpan
产品简介
| 别名 | Taqman一步法荧光定量PCR试剂盒 一步法实时荧光定量试剂盒 |
| 英文名称 | TaqMan One Step RT-qPCR Kit |
| 储存条件 | -20℃ |
| 单位 | 支 |
| 规格 | 50T 200T |
本产品是采用探针法（TaqMan，Molecular Beacon等）进行一步法Real-Time RTqPCR的专用试剂盒。使用本产品进行RealTime RT-qPCR反应时，逆转录和定量PCR在同一反应体系中进行，反应过程中无需添加试剂，无需打开管盖，避免了污染的同时提高了实验效率。本产品的检测灵敏度高，荧光信号强，信噪比高，非常适合于RNA病毒等微量RNA的检测。其所包含的特殊缓冲系统能使逆转录酶与DNA聚合酶同时发挥最大功效，提高反应效率。使用本产品可以得到更宽广的线性范围，对目的基因定量更准确，重复性好，可信度高。
IKA艾卡 磁力加热搅拌器 RT10
IKA艾卡 磁力加热搅拌器 RT10
产品编号：
市场价：￥0.00元
会员价：￥0.00元
品牌：IKA仪科
生产厂家：IKA艾卡
- 产品概览
- 技术参数
- 订购信息
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RT 10
10点数显型加热磁力搅拌器，适用于同步搅拌和加热应用。磁力线圈技术提供多点一致的无噪音搅拌。加热盘面温度无级可调最高达120 °C, 使样品温度最高可加热至 70 °C (具体情况取决于容器类型). 转速恒定，即便承载重量发生变化。
- 加热板温度分布均匀
- 可调正反转运作
- 经济模式加热盘面可自动低温加热
- 无磨损磁力线圈
- 错误代码显示功能
- 触摸式按键操作简便
- 适合持续操作
- 转速可调，每步长为10 rpm
交货清单
- RT 10
-
技术参数
搅拌点位数目 10 搅拌点位间距 90 mm 单个搅拌点位的转速偏差 0 % 最大搅拌量 (H2O) 0.4 l 转速控制 10 RPM Steps 速度范围 0 – 1000 rpm 搅拌子长度 25 – 30 mm 加热输出功率 375 W 加热温度范围 室温 – 120 °C 加热温度控制 LED 加热速度 3 K/min 可调安全温度回路最小值 50 – 150 °C 工作盘材质 铝合金 工作盘外形尺寸 180 x 495 mm 外形尺寸 190 x 60 x 610 mm 重量 7.5 kg 允许环境温度 5 – 40 °C 允许相对湿度 80 % DIN EN 60529 保护方式 IP 40 电压 230 / 115 / 100 V 频率 50/60 Hz 仪器输入功率 410 W Fuse 2x T4A 250V
IKA仪科 高效多点加热磁力搅拌器 RT15
IKA仪科 高效多点加热磁力搅拌器 RT15
IKA仪科 高效多点加热磁力搅拌器 RT15-IKA仪科-RT15
- 是否加热:是
- 点位:15
- 最大搅拌量:3～10L
- 最高加热温度（℃ ）:101~200
- 品牌属性:进口
实验室常用设备|||混合分离|||磁力搅拌器|||IKA仪科高效多点加热磁力搅拌器RT15
进口实验室多点带加热搅拌器 多位加热磁力搅拌器 多点位磁力加热搅拌器
IKA仪科 高效多点加热磁力搅拌器 RT15 仪器特点：
高效15点加热磁力搅拌器，内置温度控制板。加热板温度分布均匀，搅拌速度一致，便于确保在同一条件下进行系列实验。
1、搅拌子同时运转
2、提供样品绝对相同的反应条件
商品属性
- 是否加热:是
- 点位:15
- 最大搅拌量:3～10L
- 最高加热温度（℃ ）:101~200
- 品牌属性:进口
| 商品属性 | |
|---|---|
| 商品名称 | IKA仪科 高效多点加热磁力搅拌器 RT15-RT15-IKA仪科 |
| 型号 | RT15 |
| 类别 | 实验室常用设备|||混合分离|||磁力搅拌器|||IKA仪科高效多点加热磁力搅拌器RT15 |
| 品牌 | IKA仪科 |
| 品牌简介 | IKA仪科 |
| 关键字 | 进口实验室多点带加热搅拌器 多位加热磁力搅拌器 多点位磁力加热搅拌器,搅拌器,多点,磁力,高效,温度,均匀 |
LunaScript® 一步法多重 RT-PCR 试剂盒 #E1555L 250 reactions-NEB酶试剂 New England Biolabs
上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。
产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – RT-PCR
LunaScript® 一步法多重 RT-PCR 试剂盒 收藏
货 号
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价 格(元)
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#E1555L
250 reactions
10,709.00
无
无
无
无
无
无
#E1555S
50 reactions
2,749.00
有
无
无
无
无
无
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产品特性
·有独特的 Luna WarmStart 反转录酶和 Q5 热启动超保真 DNA 聚合酶
·可检测低至 0.01 pg 的人总 RNA
·多重检测能力适用于 ARTIC 测序方案
·适配体酶控技术为室温下建立反应体系及保持 24 小时的持久稳定打下基础
·在单独的闭合试管中一步完成 RT-PCR，即能节省时间、减少塑料用量，又能最大限度地减少污染。
产品概述
LunaScript 一步法多重 RT-PCR 试剂盒为 cDNA 合成和 PCR 扩增提供了简化方案。其中的 5X 反应预混液含有 dNTPs，经优化适用于多重靶标检测，且操作便捷。其中的 25X 酶预混液含有 Luna WarmStart 反转录酶和 Q5 热启动超保真 DNA 聚合酶。适配体抑制酶活技术可对上述两种酶活进行双重温控，因此可室温建立反应体系，且预混体系可室温稳定保存 24 小时。该试剂盒具备强大的多重靶标扩增能力，适用于诊断、病原体检、病毒基因组测序等多种应用（例如：ARTIC SARS-CoV-2 测序方案，每个反应扩增 ~50 个扩增子）。
图 1：在单个 RT-PCR 反应中进行多重 RNA 靶标检测和鉴定
LunaScript 一步法多重 RT-PCR 试剂盒 (NEB #E1555) 仅需添加 RNA 模板和基因特异性引物，即可在一次反应中对多个 cDNA 靶标进行合成和扩增。扩增后的 cDNA 产物可通过下游应用进行检测或鉴定，包括：二代测序、DNA 芯片、片段分析、电泳和传统的克隆/测序。
图 2：LunaScript 一步法多重 RT-PCR 试剂盒的灵敏度和多重检测性能卓越
使用 LunaScript 一步法多重 RT-PCR 试剂盒 (NEB #E1555) 或 SuperScript IV One-Step RT-PCR System (Thermo Fisher Scientific) 对人脾总 RNA 的 7 个靶标（185–776 bp）进行扩增。取 40% 的 RT-PCR 反应产物进行琼脂糖凝胶（2%）电泳检测。LunaScript 使用标准反应条件：引物终浓度为 1 μM，退火时间为 1 分钟。SSIV 使用推荐反应条件无法扩增所有条带，因此还测试了其它关键参数：改变引物浓度和退火时间。结果显示：LunaScript 一步法多重 RT-PCR 试剂盒可成功扩增不同起始量 RNA 模板中的所有 7 个靶标，但 SuperScript IV One-Step RT-PCR System 经调整反应条件，甚至增模板量，都无法扩增所有靶标。
图 3：LunaScript 一步法多重 RT-PCR 试剂盒可完成 ARTIC SARS-CoV-2 测序方案
使用 LunaScript 一步法多重 RT-PCR 试剂盒和来自 NEB (A) 或 IDT (B) ARTIC V3 引物进行多重扩增，扩增模板为 1000 拷贝 SARS-CoV-2 病毒 gRNA (ATCC VR-1986)，该模板掺入到 100 ng 通用人类参考 RNA（Thermo Fisher Scientific®，QS0639）中使用。将 cDNA 合成体系一式两份成 12.5 μl 体系，分别使用引物库 1 和 2 进行扩增。反应条件为：55℃ 20 分钟（反转录），98℃ 1 分钟（RT 灭活/初始变性），之后进行 35 个循环的扩增：95℃ 15 秒，63℃ 5 分钟（退火和延伸）。
使用 NEBNext® ARTIC SARS-CoV-2 FS 文库制备试剂盒（适用于 Illumina 平台）和 1.3 μl 的上述扩增产物进行文库构建，使用 MiSeq® 仪器 (2X75 bp) 测序。为每个文库绘制每个扩增子的测序 Reads。使用 seqtk（250,000 read pairs）向下抽样 Reads 数，并使用 Bowtie 2 比对至 SARS-CoV-2 参考基因组（NCBI，NC_045512）。参考线表示 100 reads 的典型质量阈值。
图 4：试剂可室温放置长达 24 小时，RNA 的检测效果仍然灵敏和稳健
使用 LunaScript 一步法多重 RT-PCR 试剂盒 (NEB #E1555) 对 GAPDH 靶标（570 bp）进行扩增，样品为 0.01 ng-10 ng 的 Jurkat 总 RNA。反应体系在冰上建立并立即运行（对照）或在热循环前室温放置 1、4 或 24 小时。每种条件下都设有无模板对照（NTC）。结果显示：所有上样量均完成了高度灵敏和特异的靶标扩增，预混体系室温放置长达 24 小时后也达到了同样的效果。
图 5：LunaScript 与 OneTaq 一步法 RT-PCR 试剂盒的比较
WarmStart® 荧光 LAMP/RT-LAMP 试剂盒 #E1700L 500次反应-NEB酶试剂 New England Biolabs
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#E1700L
500次反应
11,469.00
有
有
有
无
无
无
#E1700S
100次反应
2,869.00
有
有
有
无
有
无
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特性
·RNA 和 DNA 模板的 LAMP 扩增反应
·优化预混液，提高了 LAMP 反应的特异性和灵敏性
·独特的双热启动机制支持室温建立反应体系
·适用多种检测方法：荧光检测、浊度分析、变色检测和电泳检测等
概述
（LAMP）环介导等温扩增反应是一种核酸扩增技术，广泛用于目标 DNA 或 RNA 的检测。WarmStart LAMP 试剂盒（DNA & RNA）环介导等温扩增反应提供简单、一步解决方案，适用于检测 DNA 和 RNA 的 LAMP 和 RT-LAMP 实验。LAMP和 RT-LAMP 是常见的等温扩增技术，使用 LAMP 特异性引物（用户自己提供）和链置换聚合酶快速检测目标核酸。该试剂盒是 WarmStart LAMP 2X 预混液，包含 Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶、WarmStartRTx 反转录酶和优化的 LAMP 缓冲液。经基因工程改造，显著提高了 Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶和WarmStart RTx 反转录酶在 LAMP 和 RT-LAMP 实验中的扩增能力。同时提供荧光染料，用于实时定量荧光检测。WarmStart LAMP 试剂盒可以兼容多种检测方法，包括浊度检测、实时荧光检测（当使用LAMP 荧光染料时）和反应结束可视法。
WarmStart LAMP 试剂盒组成：
– WarmStart LAMP 2X 预混液
– LAMP 荧光染料（50X）
WarmStart® 荧光 LAMP/RT-LAMP 试剂盒（含 UDG） #E1708L 500 rxns-NEB酶试剂 New England Biolabs
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#E1708L
500 rxns
13,759.00
无
无
无
无
无
无
#E1708S
100 rxns
3,439.00
有
有
有
无
无
无
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产品特点
设计 LAMP 引物，请使用 NEB LAMP Primer Design Tool
·为环介导等温扩增（LAMP）提供便捷的一步法解决方案，可用于 DNA 或 RNA（RT-LAMP）样品
·预混液含热敏 UDG 和 dUTP，降低残留污染风险
·包含荧光染料，可对 LAMP/RT-LAMP 反应进行实时荧光测量
·温启动技术可在室温下抑制酶活性
·如需了解使用 RT-LAMP 进行 COVID-19 快速筛查，请点击 Learn more
·试剂盒中的预混液（NEB #M1708）和 LAMP 荧光染料（NEB #B1700）可单独提供
产品描述
WarmStart 荧光 LAMP/RT-LAMP 试剂盒（含 UDG）为 LAMP/RT-LAMP 的实时荧光检测提供了便捷的一步法解决方案。LAMP 和 RT-LAMP 是一种常用等温扩增技术，通过使用 LAMP 特异性引物（用户自备）和链置换 DNA 聚合酶进行靶标核酸的快速检测。该试剂盒包含的 WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（含 UDG）（NEB #M1708），是在优化后 LAMP 缓冲液中混入了 Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶和 WarmStart RTx 反转录酶。Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶和 WarmStart RTx 反转录酶均经过基因工程改造，提高了在 LAMP 和 RT-LAMP 反应中的性能。试剂盒还提供 50X LAMP 荧光染料，用于实时荧光检测。
由于先前扩增的产物会无意中成为后续反应的底物造成污染，因此预混液中的 dUTP 和热敏 UDG 可有效降低残留污染风险。热敏 UDG 在温度＞50℃时可完全失活，因此对反应没有影响。
图 1：LAMP/RT-LAMP 预混液和适用样品类型
NEB 基于 pH 变化的 WarmStart 变色LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（含/不含 UDG）（NEB #M1804）（NEB# M1800）缓冲力低，因此可使用 pH 敏感染料进行可视化扩增检测。基于 pH 值改变而产生的颜色变化（如粉红变黄色）所需缓冲力要低，高缓冲力样品或酸性样品可能会影响颜色变化，因此，这种方法限制了检测样品的种类。WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（含/不含 UDG）（NEB #M1708，NEB #E1708）（NEB #E1700）是完全缓冲的，可检测所有样品类型，适用于多种检测方法，包括荧光或其它变色染料（例如：羟基萘酚蓝）
图 2：WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（含 UDG）对人 DNA 和 RNA 靶标进行稳健检测
使用 WarmStart 荧光 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（不含 dUTP/UDG）（NEB #M1700 试剂盒中的组分）和 WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（含 UDG）（NEB #M1708）进行 RT-LAMP（RNA 靶标）或 LAMP（DNA 靶标）实验。反应加入 1X LAMP 引物和 1X LAMP 荧光染料后，分别加入三个数量级的 Jurkat RNA 或 Jurkat DNA （10 ng-0.1 ng）和无模板对照（NTC），每个样品做 4 个重复，形成 25 µl 反应体系，置于 96 孔板中 65℃孵育 40 分钟。使用实时热循环仪（Bio-Rad® CFX96）中的 SYBR/FAM 通道进行 15 秒一次的荧光检测。每个点代表荧光信号超过仪器阈值的时间。除了个别说明外，每个样品都检测到所有 4 个重复（注：如果各重复的检测时间相似，则检测点重叠）。总体而言，各样品检测结果显示：NEB #M1700 和 NEB #M1708 性能一致。无模板对照均无扩增。
图 3：WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（含 UDG）与自动化反应装置兼容
通过手动或 TEMPEST® 自动化液体处理工作站（96 孔，25 µl 反应）建立针对于合成 SARS-CoV-2 RNA 样品的 LAMP 检测体系。检测样品为：阳性样品（人总 RNA 混入 5,000、500 或 50 拷贝的合成 SARS-CoV-2 RNA）或无模板对照（NTCs）。经 65℃ 孵育 40 分钟，使用 1X LAMP 荧光染料在实时荧光仪器（Bio-Rad CFX96）中的 SYBR/FAM 通道检测。结果显示：两种体系的检测时间和最低检出限（LOD）结果一致。
Luna® 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒 #E3005E 2500次反应-NEB酶试剂 New England Biolabs
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价 格(元)
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#E3005E
2500次反应
23,439.00
无
无
无
无
无
无
#E3005L
500次反应
6,149.00
有
无
无
无
无
无
#E3005S
200次反应
2,729.00
有
无
无
无
无
无
#E3005X
1000次反应
10,649.00
无
无
无
无
无
无
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相关产品
南极热敏 UDG
特性
概述
一步法 RT-qPCR 为 RNA 检测和定量提供了方便、强大的方法。首先，RNA 在反转录酶的作用下被反转录为 cDNA，然后 cDNA 在 DNA 聚合酶的扩增作用下通过 qPCR 完成定量检测，而这一切都是在一管内完成。
Luna RT-qPCR 试剂盒包含一种新型的、应用核酸适配体技术设计的反转录酶，经基因工程改造提高其反应能力。Luna 温启动反转录酶及 Taq 热启动 DNA 聚合酶以及其试剂盒利用一种对温度敏感、可逆的适配体，在低于 45℃ 条件下，抑制其活性。因此，可以在室温下建立反应并抑制非特异性扩增。此外，温启动反转录酶具有更高的热稳定性，提升了在高温中的反应性能。
NEB Luna 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒经过优化，可以对目标 RNA 序列进行染料法实时荧光定量检测，该试剂盒适用于具有 SYBR/FAM 通道的大部分 qPCR 仪器。
NEB Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒经过优化，使用水解探针法对目标 RNA 序列进行实时荧光定量检测。
Luna RT-qPCR 试剂盒中含有热启动 Taq DNA 聚合酶及独特校正染料，与多种 qPCR 仪器兼容，包括需要 ROX 校正的仪器，实验操作过程中不需要额外添加染料。预混液中包含 dUTP，qPCR 前使用NEB 的南极热敏 UDG 进行预处理以防止产物残留污染。预混液中还加有肉眼可见的蓝色染料，在向透明多孔 PCR 板中加样时起指示作用。快速、灵敏、精确的 Luna qPCR 产品必将成为您实时定
量实验的首选。
Luna 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒组成：
Luna 通用一步法反应混合液
– Luna WarmStart 反转录酶混合液
– 无核酸酶污染的水
Luna® 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒 #E3006E 2500次反应-NEB酶试剂 New England Biolabs
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#E3006E
2500次反应
21,149.00
有
有
有
无
有
无
#E3006L
500次反应
5,529.00
有
无
无
无
无
无
#E3006S
200次反应
2,469.00
有
有
有
无
无
无
#E3006X
1000次反应
9,699.00
无
无
无
无
无
无
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相关产品
南极热敏 UDG
性能与使用
概述
一步法 RT-qPCR 为 RNA 检测和定量提供了方便、强大的方法。首先，RNA 在反转录酶的作用下被反转录为 cDNA，然后 cDNA 在 DNA 聚合酶的扩增作用下通过 qPCR 完成定量检测，而这一切都是在一管内完成。
Luna RT-qPCR 试剂盒包含一种新型的、应用核酸适配体技术设计的反转录酶，经基因工程改造提高其反应能力。Luna 温启动反转录酶及 Taq 热启动 DNA 聚合酶以及其试剂盒利用一种对温度敏感、可逆的适配体，在低于 45℃ 条件下，抑制其活性。因此，可以在室温下建立反应并抑制非特异性扩增。此外，温启动反转录酶具有更高的热稳定性，提升了在高温中的反应性能。
NEB Luna 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒经过优化，可以对目标 RNA 序列进行染料法实时荧光定量检测，该试剂盒适用于具有 SYBR/FAM 通道的大部分 qPCR 仪器。
NEB Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒经过优化，使用水解探针法对目标 RNA 序列进行实时荧光定量检测。
Luna RT-qPCR 试剂盒中含有热启动 Taq DNA 聚合酶及独特校正染料，与多种 qPCR 仪器兼容，包括需要 ROX 校正的仪器，实验操作过程中不需要额外添加染料。预混液中包含 dUTP，qPCR 前使用NEB 的南极热敏 UDG 进行预处理以防止产物残留污染。预混液中还加有肉眼可见的蓝色染料，在向透明多孔 PCR 板中加样时起指示作用。快速、灵敏、精确的 Luna qPCR 产品必将成为您实时定
量实验的首选。
Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒组成：
– Luna 一步法酶混合液
– Luna 一步法反应混合液
– 无核酸酶污染的水
Luna® 探针一步法 RT-qPCR 试剂盒（无 ROX） #E3007E 2,500 rxns-NEB酶试剂 New England Biolabs
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产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – qPCR & RT-qPCR
Luna® 探针一步法 RT-qPCR 试剂盒（无 ROX） 收藏
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#E3007E
2,500 rxns
25,199.00
无
无
无
无
无
无
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特性
使用探针法 qPCR，快速、灵敏、精准的对目标 RNA 进行检测和定量
选择更简单
·适用于不需要 ROX 染料校正的仪器
·预混液试剂和便捷的操作的流程使反应体系的建立更便捷
·无干扰的可见示踪染料可避免加样错误
产品性能优异
· Luna® 系列产品均经过严格测试，以优化产品的特异性、灵敏度、准确性和重复性
· 该产品对于不同来源的样品性能稳定
· 通过与市面上其它 qPCR 和 RT-qPCR 试剂的综合评测，展现了 Luna 产品的卓越性能
使用 Luna 温启动反转录酶优化您的 RT-qPCR 实验
· 新型、热稳定反转录酶（RT）有效改善实验表现
· 温启动反转录酶和热启动 Taq 酶共同提升反应特异性和功效
概述
Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒（无 ROX）经过优化，适用于水解探针法的 RNA 实时定量。一步法 RT-qPCR 为 RNA 检测和定量提供了一种便捷、强大的方法。在同一管中，RNA 首先由反转录酶转化为 cDNA，然后使用 DNA 依赖型 DNA 聚合酶扩增 cDNA，从而可以进行 qPCR 定量。基于探针法的 qPCR / RT-qPCR 原理是利用聚合酶的 5´ → 3´ 外切酶活性，将淬灭的目标特异性探针切断发出荧光，并实时监测荧光值的增加，以测量 PCR 每个循环中的 DNA 扩增。在荧光信号显著超过背景荧光的位置，可以确定 Cq 值。Cq 值可用于评估两个或多个样品的靶基因相对丰度，通过已知稀释浓度样品的标准曲线，可对靶基因进行绝对定量。
在 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒（无 ROX）中，热启动 Taq DNA 聚合酶与新型温启动反转录酶联合使用，利用可逆结合的核酸适配体抑制剂控制这两种酶的活性。这种温度依赖型激活可避免热循环之前的非特异性扩增，从而可以放心的在室温下建立反应体系。改造过的 Luna 温启动反转录酶的热稳定性比许多其它反转录酶更高，其最佳反应温度为 55℃。对于困难模板，可以升高反应温度至 60°C，且不会影响 Luna 性能。
注意：为确保 Luna 温启动反转录酶的完全激活，建议孵育温度不低于 50℃
Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒（无 ROX）浓度为 2×，包含热启动 Taq DNA聚合酶、dNTP 和所有必需的缓冲液成分。配方中不含校正染料，与不需要 ROX 校正的仪器兼容（如果需要 ROX 校正，可自行添加 ROX 染料）。反应预混液中的 dUTP 用于防止模板残留污染，非荧光可见示踪染料让反应的建立可视化。该可见染料与 qPCR 常用荧光基团的光谱没有重叠，因此不会干扰 qPCR 检测。
Luna 温启动反转录酶预混液的浓度为 20×，其中包含 Luna 温启动反转录酶以及用于防止 RNA 降解的小鼠 RNase 抑制剂（详情请见产品手册中的模板制备）。适用于各种 RNA 样品类型（总 RNA，poly（A）-RNA 等）和来源
图 1：Luna RT-qPCR 产品具有更高灵敏度、可重复性及更优异的表现。
使用 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 产品检测人 GAPDH 基因，模板为 8 个 10 倍梯度稀释的
Jurkat 总 RNA（1 μg– 0.1 pg），每个浓度的样品做 8 个重复。实验按照试剂盒建议的操作流程进行，反应中包含一个 55℃ 温育 10 分钟的反转录步骤以便于 Luna WarmStart 反转录酶发挥作用。NTC = 无模板对照。
图 2：NEB 的 Luna RT-qPCR 产品在多重检测中功效强大
使用 Luna Universal Probe One-Step RT-qPCR Kit 分别检测 GAPDH 基因、核糖体蛋白 L32g 和 PI-3 激酶相关的 SMG1 基因的表达情况。模板为 7 个分别 10 倍稀释的 Jurkat 总 RNA （1 μg – 1 pg），每个浓度的样品做 4 个重复。实验结果如上图所示，左边是叠加的结果，右边是每个基因单独的检测结果。无论是单重还是多重 qPCR，低拷贝的模板（SMG1）使用的引物浓度为 0.4 μM，高拷贝的模板（L32G 和 GAPDH）使用的引物浓度为 0.2 μM。单重 qPCR 可以直接比较，多重 qPCR 可以比较拷贝数的差异。NTC = 阴性对照
图 3：通过与市场上探针法 RT-qPCR 试剂相比，Luna 产品展现出更好的稳定性和特异性
使用市售的 RT-qPCR 试剂对 7 个靶标（丰度、长度和 GC 含量不同）进行测试。测试均根据产品说明书进行，数据来源于两个实验人员。实验结果对扩增效率、低起始量和缺乏无模板对照的扩增进行了评估（ΔCq = 无模板对照的平均 Cq – 最低起始量的平均 Cq）。此外，还评估了稳定性、可重复性、所有扩增曲线质量（质量分数）。柱状图展示了达到可接受的性能标准的目标百分比。图中展示了 NEB 和其它供应商的结果：Quanta，qScript™ XLT 1-Step RT-qPCR ToughMix®；ABI，TaqMan® RNA-to-Ct 1-Step Kit；QIAGEN，QuantiFast® Probe RT-PCR Kit；Bio-Rad，iTaq™ Universal Probes One-Step Kit；Promega®，GoTaq® Probe 1-Step RT-qPCR System。NEB 的 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒*性能优于其它测试试剂。
*数据来源于 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒（NEB #E3006）。Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒（无 ROX）（NEB #E3007）的性能与之相同
试剂盒组分
以下试剂随产品提供
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储存温度 （°C） |
浓度 |
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Luna® Probe One-Step Reaction Mix （No ROX） |
-20 |
2 X |
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Luna® WarmStart® RT Enzyme Mix |
-20 |
20 X |
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Nuclease-free Water |
-20 |
储存温度
-20°C