NEB10-beta感受态细胞

NEB10-beta感受态细胞

货号:
C1550

品牌:
Jinpan

产品简介
储存条件 -70℃
单位
规格 20*100ul

本公司生产的NEB 10-beta感受态细胞是采用大肠杆菌NEB 10-beta菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测,转化效率可达108 cfu/μg,-70℃保存6个月转化效率不发生改变。

NEB 表达 E. coli 感受态细胞 ( 高效级 ) #C2523H 20 x 0.05 ml-NEB酶试剂 New England Biolabs

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs(NEB)酶试剂全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – 感受态细胞 – 蛋白表达菌株

NEB 表达 E. coli 感受态细胞 ( 高效级 )                              收藏

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存
武汉库存

#C2523H
20 x 0.05 ml
3,779.00

#C2523I
6 x 0.2 ml
2,869.00

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相关产品

 

NEB 表达 E. coli 感受态细胞 ( 高效级 )

 

单独出售的组份

SOC Outgrowth 培养基
#B9020S 4 x 25 ml . . . . . . . . ¥939

优点

 BL21 源增强型菌株,最适于启动子为 Plac、Ptac、Ptrc 的表达载体
 菌落快速培养
 无动物来源产品
 蛋白酶缺陷型菌株

概述

全能型无 T7 表达菌株,为 pMAL 蛋白融合表达与纯化系统的推荐宿主菌株。

基因型

fhuA2 [lon] ompT gal sulA11 R(mcr- 73::miniTn10–TetS)2 [dcm] R(zgb-210::Tn10–TetS
endA/Δ(mcrC-mrr)114::IS10

特性

• Lon 和 OmpT 蛋白酶缺失
• 不受限于 DNA 是否甲基化

转化效率

高效级:0.6–1 x 109 cfu/μg pUC19 DNA

抗性

T1 噬菌体(fhuA2)、呋喃妥因

敏感性

氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素、四环素、壮观霉素、链霉素

随产品提供

SOC Outgrowth 培养基
pUC19 对照 DNA

感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells酶试剂盒Takara Clontech

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感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 9027 E.coli DH5α Electro-Cells 50 μl × 10 ¥446 感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells 感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells 感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells
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感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells 感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells 感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells 感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells 感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells
 
感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells
感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells  
感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells
 
 
■ 制品内容
E.coli DH5α Electro-Cells 50 μl × 10
pUC19 plasmid ( 10 pg/μl) 10 μl
SOC Medium* 1 ml × 10
*SOC Medium:      2%   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
  10 mM   MgSO4
10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
E. coli DH5α Electro-Cells是Takara Bio特别制备的适用于电穿孔法的制品。用高电压脉冲电流瞬间击穿细胞的细胞质膜,从而使外源DNA转入宿主细胞的转化方法称为电穿孔法。通过此种方法制备的感受态细胞转化效率高、产量大,尤其适合在短时间内将少量样品转入大肠杆菌内。
E.coli DH5α在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化时,利用β-半乳糖苷酶活性 (α-互补性) ,应用蓝白斑方法可以很容易鉴别重组体菌株。由于菌株无lacl q,故不需要IPTG。因此,当制作基因文库或进行亚克隆时,可以使用X-Gal筛选重组DNA或重组质粒。
X-Gal : 5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside
 
■ 细胞浓度
>1×1010 bacteria/ml
 
■ Genotype
E. coli DH5α:F-, φ80dlacZ Δ M15, Δ ( lacZYA -argF )U169, deoR , recA1 , endA1 , hsdR17 (rK-, mK+), phoA , supE44 , λ-, thi -1 , gyrA96 , relA1
 
■ 保存
-80℃。
注意: -80℃或更低温度下保存。如果保存温度不能恒定,转化降低将会降低。请使用附带的pUC19 对照质粒来确认保存细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 质量标准
1. 转化效率
转入10 pg 的pUC19,涂于含有A+ 的选择培养基进行筛选。
转化效率 : >1 x 109 transformants /μg pUC19
2. β-半乳糖苷酶的α-互补性
转化pUC19 DNA时,含有100 μg/ml ampicilin 和 60 μg/ml X-Gal的L-琼脂平板上出现蓝色菌落。
 
■ 注意事项
1. 将Electro-Cells从-80℃取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。
2. 当使用50 μl Electro-Cells时,添加不多于10 ng的高纯度样品DNA。否则会降低转化效率。
3. 导入分子量较大的DNA (>7 kb) 时,转化效率降低。
4. 当改变实验规模时,适当改变反应条件。
5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基。此时,转化效率可能会降低。
·L-broth:      Ingredient   per liter water
 Tryptone   10 g
 Yeast extract   5 g
 NaCl   5 g
用1 N NaOH调整pH到7.5并高压灭菌。
·φb-broth:      Ingredient   per liter water
 Tryptone   20 g
 Yeast extract   5 g
 MgSO4·7H2O   5 g
用1 N KOH调整pH7.5左右并高压灭菌。
6. 稀释时,使用“使用方法4”中加入的SOC培养基。
7. 当使用X-Gal时:
   ·将20 mg/ml X-Gal (溶解于二甲基甲酰胺) 按200~300 μl/100 ml的比例加入到agar medium中。
8. DH5α可作为M13mp载体的复制。但由于不携带F因子,因而不能形成菌斑。
9. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是,如果再次冻结不可避免,将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻,置于-80℃保存。但是,转化效率可能会降低至少一个数量级。
 

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感受态细胞E.coli HST08 Premium Competent Cells酶试剂盒Takara Clontech

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感受态细胞E.coli HST08 Premium Competent Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 9128 E.coli HST08 Premium Competent Cells 100 μl × 10 ¥413 感受态细胞E.coli HST08 Premium Competent Cells 感受态细胞E.coli HST08 Premium Competent Cells 感受态细胞E.coli HST08 Premium Competent Cells
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感受态细胞E.coli HST08 Premium Competent Cells 感受态细胞E.coli HST08 Premium Competent Cells 感受态细胞E.coli HST08 Premium Competent Cells 感受态细胞E.coli HST08 Premium Competent Cells 感受态细胞E.coli HST08 Premium Competent Cells
 
感受态细胞E.coli HST08 Premium Competent Cells
感受态细胞E.coli HST08 Premium Competent Cells  
感受态细胞E.coli HST08 Premium Competent Cells
 
 
■ 制品内容感受态细胞E.coli HST08 Premium Competent Cells
E.coli HST08 Premium Competent Cells 100 μl × 10
pUC19 plasmid (0.1 ng/μl) 10 μl
SOC Medium* 1 ml × 10
*SOC Medium:     2%   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
  10 mM   MgSO4
10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
Takara在Hanahan's method基础上进行了改良,制备出具有很高转化效率的E. coli HST08 Premium Competent Cells。另外,E.coli HST08是mrr, hsdRMS, mcrBC, mcrA (这些基因是大肠杆菌切除外源甲基化DNA所必需的基因) 缺失的菌株,这使得其可广泛应用于甲基化质粒的制备、基因文库的制作以及亚克隆。当和较大质粒一起使用时,也可维持较高转化效率和菌落生长率*。10 kb以上长片段DNA克隆和基因文库构建时,可与TaKaRa DNA Ligation Kit LONG (Code No. : 6024) 一起使用,效果很好。
*:与其他相同基因型的感受态细胞相比较。
对于pUC系列质粒,可通过β-半乳糖苷酶的α-互补性,在培养基中添加X-gal进行蓝白筛选,以筛选阳性克隆。
X-Gal:5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside
 
■ 细胞浓度
1-2×109 bacteria/ml
 
■ Genotype
E. coli HST08 Premium: F-, endA1 , supE44 , thi -1 , recA1 , relA1, gyrA96 , phoA , Φ80d lacZ ΔM15,Δ(lacZYA - argF)U169 , Δ(mrr - hsdRMS - mcrBC), ΔmcrA , λ-
 
■ 保存
-80℃。
注意: 如果不在-80℃下保存,转化效率将会降低。此时,在使用前,请使用附带的pUC19 对照质粒来确认细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 质量标准
[1] 转化效率
转入1 ng 的pUC19 plasmid,涂于含有ampicillin的L-plate进行筛选。
转化效率 : >1 x 108 colonies/μg pUC19 plasmid
[2] β-半乳糖苷酶的α-互补性
转化pUC19 DNA时,含有100 μg/ml ampicilin 和 60 μg/ml X-Gal的L-agar plate上出现蓝色菌落。
 
■ 注意事项
1. 将感受态细胞从-80℃冷冻取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。
2. 可使用1.5 ml microcentrifuge tubes代替14 ml 圆底 tubes (CORNING Code No. 352059 或 352057,等),但效率可能会降低。
3. 当使用100 μl感受态细胞时,加入不超过10 ng的高纯度DNA样品。否则转化效率会降低。
4. 当改变感受态细胞使用体积或tube类型时,适当调整反应条件。例如,当使用1.5 ml microcentrifuge tubes时,42℃放置60秒而不是45秒。
5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基,转化效率可能会降低。
  ·L-broth:10 g Tryptone, 5 g Yeast extract, 5 g NaCl,用1 N NaOH调整pH到7.5,使体系终体积为1 L,高压灭菌。
  ·φ b-broth:5 g Yeast extract, 20 g Tryptone, 5 g MgSO4·7H2O,用1 N KOH调整pH到7.5,使体系终体积为1 L,高压灭菌。
  ·L-plates: 10 g Tryptone, 5 g Yeast extract, 5 g NaCl,用1 N NaOH调整pH到7.5,添加agar到1.5%,使体系终体积为1 L,高压灭菌。
6. 当使用X-Gal 时,按照以下操作进行:
   将20 mg /ml X-Gal (溶解于二甲基甲酰胺) 按200-300 μl/100 ml 的比例加入到agar media中。
7. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是,如果再次冻结不可避免,将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻,置于-80℃保存。但是,转化效率可能会降低至少一个数量级。
 
 

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电转化感受态细胞E.coli HST08 Premium Electro-Cells酶试剂盒Takara Clontech

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电转化感受态细胞E.coli HST08 Premium Electro-Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 9028 E.coli HST08 Premium Electro-Cells 50 μl × 10 ¥655 电转化感受态细胞E.coli HST08 Premium Electro-Cells 电转化感受态细胞E.coli HST08 Premium Electro-Cells 电转化感受态细胞E.coli HST08 Premium Electro-Cells
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电转化感受态细胞E.coli HST08 Premium Electro-Cells 电转化感受态细胞E.coli HST08 Premium Electro-Cells 电转化感受态细胞E.coli HST08 Premium Electro-Cells 电转化感受态细胞E.coli HST08 Premium Electro-Cells 电转化感受态细胞E.coli HST08 Premium Electro-Cells
 
电转化感受态细胞E.coli HST08 Premium Electro-Cells
电转化感受态细胞E.coli HST08 Premium Electro-Cells  
电转化感受态细胞E.coli HST08 Premium Electro-Cells
 
 
■ 制品内容
E.coli HST08 Premium Electro-Cells 50 μl × 10
pUC19 plasmid ( 10 pg/μl) 10 μl
SOC Medium* 1 ml × 10
*SOC Medium:       2%   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
  10 mM   MgSO4
10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
E. coli HST08 Premium Electro-Cells是Takara Bio特别制备的适用于电穿孔法的制品。用高电压脉冲电流瞬间击穿细胞的细胞质膜,从而使外源DNA转入宿主细胞内的转化方法称为电穿孔法。通过此种方法制备的感受态细胞转化效率高、产量大,尤其适合在短时间内将少量样品转入大肠杆菌内。 E.coli HST08是mrr, hsdRMS, mcrBC, mcrA缺失的菌株,这使得其可广泛应用于甲基化质粒的制备、基因文库的制作以及BAC文库的构建。即便转化较大的质粒,也可维持较高的转化效率和菌落生长率*。10 kb以上长片段DNA克隆和构建基因文库时,可与Takara DNA Ligation Kit LONG (Code No. : 6024) 一起使用,效果很好。
*:与其他相同基因型的感受态细胞相比较。
对于pUC系列质粒,可通过β-半乳糖苷酶的α-互补性,在培养基中添加X-gal进行蓝白筛选,以筛选阳性克隆。
X-Gal:5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside
 
■ 细胞浓度
>1×1010 bacteria/ml
 
■ Genotype
E. coli HST08 Premium: F-, endA1 , supE44 , thi -1 , recA1 , relA1, gyrA96 , phoA , Φ80d lacZ ΔM15,Δ(lacZYA - argF)U169 , Δ(mrr - hsdRMS - mcrBC), ΔmcrA , λ-
 
■ 保存
-80℃。
注意: -80℃或更低温度下保存。如果保存温度不能恒定,转化效率将会降低。请使用附带的pUC19 对照质粒来确认保存细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 质量标准
[1] 转化效率
转入10 pg 的pUC19,涂于含有ampicillin的L-plate进行筛选。
转化效率 : >1 x 109 colonies/μg pUC19 plasmid
[2] β-半乳糖苷酶的α-互补性
转化pUC19 DNA时,含有100 μg/ml ampicilin 和 60 μg/ml X-Gal的L-agar plate上出现蓝色菌落。
 
■ 注意事项
1. 将Electro-Cells从-80℃取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。
2. 当使用50 μl Electro-Cells时,高纯度样品DNA添加量不要超过10 ng,否则会降低转化效率。
3. 当使用50 μl Electro-cells时,DNA溶液添加量不要超过5 μl,否则会降低转化效率。
4. 当改变实验规模时,适当改变反应条件。
5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基,但转化效率会降低。
  ·L-broth:10 g Tryptone, 5 g Yeast extract, 5 g NaCl/1 L water,用1 N NaOH调整pH7.5左右并高压灭菌。
  ·φ b-broth:5 g Yeast extract, 20 g Tryptone, 5 g MgSO4·7H2O/1 L water,用1 N KOH调整pH7.5左右并高压灭菌。
6. 当使用X-Gal时,按照以下操作进行:
  ·将20 mg /ml X-Gal (溶解于二甲基甲酰胺) 按200-300 μl/100 ml的比例加入到agar media中。
7. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是,如果再次冻结不可避免,将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻,置于-80℃保存。但是,转化效率可能会降低至少一个数量级。
 
 

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NEB® Stable E. coli 感受态细胞(高效级) #C3040H 20 x 0.05 ml-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 感受态细胞 – 克隆菌株

NEB® Stable E. coli 感受态细胞(高效级)                              收藏

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
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#C3040H
20 x 0.05 ml
5,849.00

#C3040I
6 x 0.2 ml
4,509.00

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NEB E. coli 稳定感受态细胞 (高效级)

单独出售的组份

NEB® 10-beta/Stable Outgrowth 培养基(NEB #B9035)
pUC19 载体(NEB #B9035)

优点

 抗噬菌体 T1 感染(fhuA)
 无动物来源产品

概述

化学感受态 E. coli 细胞适用于高效转化及含重复片段的质粒提取。

基因型

F´ proA+B+ lacIq Δ(lacZ)M15 zzf::Tn10 (TetR)/Δ(ara-leu) 7697 araD139 fhuA ΔlacX74 galK16 galE15
e14- f80dlacZΔM15 recA1 relA1 endA1 nupG rpsL (StrR) rph spoT1 Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)

特性

endA 突变,可用于制备高质量质粒
• 生长迅速的 recA 菌株

应用

• 不稳定插入片段的克隆
• 慢病毒及逆转录病毒克隆的分离及扩增
• 与 Gibson 组装反应及连接反应兼容

转化效率

 1–5 x 108 cfu/μg pUC19 DNA (NEB #C3040H)

> 1 x 109 cfu/μg pUC19 DNA (NEB #C3040I)

抗性

T1 噬菌体(fhuA)、链霉素、四环素

敏感性

氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素、呋喃妥因、壮观霉素

随产品提供

NEB® 10-beta/Stable Outgrowth 培养基(NEB #B9035)
pUC19 载体

感受态细胞E.coli JM109 Competent Cells酶试剂盒Takara Clontech

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感受态细胞E.coli JM109 Competent Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 9052 E.coli JM109 Competent Cells 100 μl × 10 ¥309 感受态细胞E.coli JM109 Competent Cells 感受态细胞E.coli JM109 Competent Cells 感受态细胞E.coli JM109 Competent Cells
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感受态细胞E.coli JM109 Competent Cells 感受态细胞E.coli JM109 Competent Cells 感受态细胞E.coli JM109 Competent Cells 感受态细胞E.coli JM109 Competent Cells 感受态细胞E.coli JM109 Competent Cells
 
感受态细胞E.coli JM109 Competent Cells
感受态细胞E.coli JM109 Competent Cells  
感受态细胞E.coli JM109 Competent Cells
 
 
■ 制品内容感受态细胞E.coli JM109 Competent Cells
E.coli JM109 Competent Cells 100 μl × 10
pBR322 plasmid ( 0.1 ng/μl) 10 μl
SOC Medium* 1 ml × 10
*SOC Medium:     2%   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
  10 mM   MgSO4
  10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
Takara在Hanahan's method基础上进行了改良,制备出E.coli JM109 Competent Cells。
由于E. coli JM109 Competent Cells含有F' 质粒,可以作为M13噬菌体载体的宿主细胞,也可用于制作DNA文库或进行亚克隆。当转化pUC载体或转染M13噬菌体载体DNA时,重组体可以利用感受态细胞的β-半乳糖苷酶的α-互补性,通过添加X-Gal和IPTG很容易地筛选出来。
X-Gal : 5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside
IPTG : Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside
 
■ 细胞浓度
1-2×109 bacteria/ml
 
■ Genotype
E. coli JM109: recA1 , endA1 , gyrA96 , thi-1 , hsdR17 (rk-mk+), e14-(mcrA- ) supE44 , relA1 , Δ(lac-proAB )/F'[traD36 , proAB+, lacIq, lacZΔM15]
 
■ 保存
-80℃。
注意: 如果不在-80℃下保存,转化效率将会降低。此时,在使用前,请使用附带的pBR332 对照质粒来确认细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 转化效率
转入1 ng 的pBR322,涂于含有Amp+ 的选择培养基进行筛选。
转化效率 : >1 x 108 transformants/μg pBR322
 
■ 注意事项
1. 将感受态细胞从-80℃冷冻取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。
2. 可使用1.5 ml的microcentrifuge tubes代替14 ml的圆底tubes (BD company Code: 352059 或 352057等),但效率可能会降低。
3. 当使用100 μl感受态细胞时,加入的高纯度DNA样品不超过10 ng。否则转化效率会降低。
4. 当改变感受态细胞数量或tubes类型时,适当调整反应条件。例如,当使用1.5 ml microcentrifuge tubes时,42℃放置60秒,而不是45秒。
5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基。此时,转化效率可能会降低。
    ·L-broth : Ingredient per liter water  
  Tryptone 10 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
    用1 N NaOH调整pH7.5并高压灭菌。
    ·φ b-broth: Ingredient per liter water  
  Tryptone 20 g  
  Yeast extract 5 g  
  MgSO4·7H2O 5 g  
    用1 N KOH调整pH7.5并高压灭菌。
6. YT soft agar: Ingredient per 100 ml water  
  Tryptone 0.8 g  
  Yeast extract 0.5 g  
  NaCl 0.5 g  
    用1 N NaOH调整pH7.6,添加agar至浓度为0.6%,并高压灭菌。
7. 制备宿主细胞。
8. L-plate: Ingredient per liter water  
  Tryptone 10 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
    用1 N NaOH调整pH到7.5,加入agar至浓度为1.5%,并高压灭菌。
9. 当加入X-Gal或IPTG时,按照以下方法操作:
   ·将100 mM IPTG按100-300 μl/100 ml的比例加入到agar medium 中,若使用soft agar,比例为 25 μl/3 ml。
   ·将20 mg /ml X-Gal(溶解于二甲基甲酰胺)按200-300 μl/100 ml的比例加入到agar medium中,若使用soft agar,比例为50 μl/3 ml。
10. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是,如果再次冻结不可避免,将细胞置于干冰/乙醇中快速冷冻,置于-80℃保存。但是,转化效率可能会降低至少一个数量级。
 
 

页面更新:2024-01-25 14:34:33

E.coli蛋白质表达感受态细胞TaKaRa Competent Cells BL21酶试剂盒Takara Clontech

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E.coli蛋白质表达感受态细胞TaKaRa Competent Cells BL21
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 9126 TaKaRa Competent Cell BL21 100 μl x 10 ¥357 E.coli蛋白质表达感受态细胞TaKaRa Competent Cells BL21 E.coli蛋白质表达感受态细胞TaKaRa Competent Cells BL21 E.coli蛋白质表达感受态细胞TaKaRa Competent Cells BL21
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■ 制品内容E.coli蛋白质表达感受态细胞TaKaRa Competent Cells BL21
TaKaRa Competent Cells BL21 10 × 100 μl
pUC19 DNA (0.1 ng/μl) 10 μl
SOC Medium* 10 × 1 ml
*SOC Medium:          2%
  Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
 10 mM   MgSO4
 10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
E.coli BL21来源于B株,为lon蛋白水解酶、ompT外膜蛋白水解酶缺陷型,因此表达的外源蛋白质在该体系中具有更高的稳定性。本制品有利于外源蛋白质的稳定表达。
本制品可用于pCold I-IV DNA 和pCold TF DNA的蛋白质表达,但不适合于启动子为T7的蛋白质表达体系,如pET系列,因为BL21宿主不表达T7 RNA聚合酶。另外,不建议使用此菌株构建或制备质粒,因为它不是recA基因缺失型菌株。
注意:本制品不可用于电击法转化。
 
■ 保存
-80℃。
注意:如果不是-80℃保存,转化效率将会降低。可使用附带的pUC19 DNA确认保存细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 质量控制
转入1 ng 的pUC19 DNA,涂于含有Amp+的选择培养基进行筛选。
转化效率 : ≥1×106 colonies /μg pUC19 DNA
 
■ Genotype
E.coli BL21: F, ompT, hsdSB (rBmB), gal, dcm
 
■ 注意事项
1. 将感受态细胞从-80℃冷冻取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。
2. 当使用100 μl感受态细胞时,加入不超过10 ng的高纯度质粒DNA。否则转化效率会降低。
3. 当改变感受态细胞数量或tubes类型时,适当调整反应条件。
4. 使用TE buffer溶解纯化的质粒DNA。DNA溶液如果盐浓度高,可能会降低转化效率。
5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基。此时,转化效率可能会降低。
  ·L-broth : Ingredient per liter water  
  Tryptone 10 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
  用1 N NaOH调整pH到7.5并高压灭菌。
  ·φb-broth: Ingredient per liter water  
  Tryptone 20 g  
  Yeast extract 5 g  
  MgSO4·7H2O 5 g  
    用1 N KOH调整pH到7.5并高压灭菌。
6. 稀释时,使用SOC培养基。
7. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是,如果再次冻结不可避免,将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻,置于-80℃保存。但是,转化效率可能会降低至少一个数量级。
 
 

页面更新:2023-12-21 14:55:12

NiCo21(DE3) E. coli 感受态细胞 #C2529H 20 x 0.05 ml-NEB酶试剂 New England Biolabs

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs(NEB)酶试剂全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – 感受态细胞 – 蛋白表达菌株

NiCo21(DE3) E. coli 感受态细胞                              收藏

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#C2529H
20 x 0.05 ml
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相关产品

Lemo21(DE3) E. coli 感受态细胞

优点

 常规表达时 BL21(DE3)的卓越替代品
 通过 IMAC 分离的目的蛋白纯度更佳
 无动物来源产品

概述

利用固相金属离子亲和层析(IMAC)分离含多聚赖氨酸标签的重组蛋白时,目的蛋白经常被大量的 E. coli 内源金属结合蛋白所污染。蛋白表达菌 NiCo21(DE3)通过改造,使 IMAC 组分中的 E. coli 蛋白污染减少到最低:GlmS 在突变后消除了与 IMAC 树脂结合的能力,另外 3 种蛋白(SlyD、ArnA 与 Can)在加上重组标签后,能够通过几丁质亲和层析快速去除。

基因型

can::CBD fhuA2 [lon] ompT gal (λ DE3)[dcm] arnA::CBD slyD::CBD glmS6Ala ΔhsdS λ DE3= λ sBamHIo ΔEcoRI-B int::(lacI::PlacUV5::T7 gene1)i21 Δnin5

特性

• 与 BL21(DE3)的生长特点一致
• Lon 和 OmpT 蛋白酶缺失

转化效率

1–5 x 107 cfu/µg pUC19 DNA

抗性

T1 噬菌体(fhuA2

敏感性

氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素、呋喃妥因、壮观霉素、链霉素、四环素

随产品提供

SOC Outgrowth 培养基
pUC19 对照 DNA

DB3.1 感受态细胞

DB3.1 感受态细胞

货号:
C1470

品牌:
Jinpan

产品简介
储存条件 -70℃
单位
规格 10*100ul 20*100ul

本公司生产的大肠杆菌DB3.1细胞含有gyrA462基因,对λ噬菌体的ccdB基因产物的毒性具有抵抗作用,特别适用于转化和扩增包含ccdB基因的质粒载体。使用pUC19质粒检测,转化效率可达107 cfu/μg,-70℃保存几个月转化效率不发生改变。每支感受态可以酌情分装使用,降低了实验的成本。质量稳定,使用方便,质优价廉。