NEB 5-alpha E. coli 感受态细胞 (高效级) #C2987H 20 x 0.05 ml-NEB酶试剂 New England Biolabs

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs(NEB)酶试剂全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – 感受态细胞 – 克隆菌株

NEB 5-alpha E. coli 感受态细胞 (高效级)                              收藏

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存
武汉库存

#C2987H
20 x 0.05 ml
3,309.00

#C2987I
6 x 0.2 ml
2,549.00

#C2987P
1 x 96 孔板
8,379.00

#C2987R
1 x 384 孔板
18,309.00

#C2987U
96 x 50 μl/管
12,459.00

Download:       

  • isoschizomers     |
  • compatible ends     | 
  • single letter code

相关产品

NEB 5-alpha E. coli 感受态细胞 (高效级)
NEB 5-alpha E. coli 感受态细胞 (亚克隆效级)

NEB 5-alpha E. coli 电转级感受态细胞

单独出售的组份

SOC Outgrowth 培养基
#B9020S 4 x 25 ml . . . . . ¥939

优点

 DH5α 衍生物
 无动物来源产品

概述

NEB 5-alpha E. coli  感受态细胞为 DH5α 衍生物,为多功能克隆菌株

基因型

fhuA2Δ(argF-lacZ)U169 phoA glnV44 f80Δ(lacZ)M15 gyrA96 recA1 relA1 endA1 thi-1 hsdR17

特性

• 可高效转化 PCR、cDNA 或其它来源的(hsdR)非甲基化 DNA
• 可进行蓝/白斑筛选
• 缺失非特异性核酸内切酶 I(endA1)活性,可用于制备高质量质粒
• 可减少克隆 DNA 的重组反应(recA1

转化效率

高效级: 1–3 x 109 cfu/μg pUC19 DNA
亚克隆效级: > 1 x 106 cfu/μg pUC19 DNA
电转级: > 1 x 1010 cfu/μg pUC19 DNA

抗性

T1 噬菌体(fhuA2

敏感性

氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素、呋喃妥因、壮观霉素、链霉素、四环素

随产品提供

SOC Outgrowth 培养基
pUC19 对照 DNA

SHuffle T7 E. coli 感受态细胞 #C3026J 12 x 0.05 ml-NEB酶试剂 New England Biolabs

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs(NEB)酶试剂全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – 感受态细胞 – 蛋白表达菌株

SHuffle T7 E. coli 感受态细胞                              收藏

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存
武汉库存

#C3026J
12 x 0.05 ml
4,229.00

Download:       

  • isoschizomers     |
  • compatible ends     | 
  • single letter code

优点

 有助于细胞质中蛋白质二硫键的折叠
 T7 表达
 K12 菌株
 无动物来源产品

概述

T7 表达菌株,在细胞质中正确折叠含有多个二硫键重组蛋白的能力更强。

基因型

F´ lac, pro, lacIq / Δ(ara-leu)7697 araD13fhuA2 lacZ::T7 gene1 Δ(phoA)Pvull phoR ahpC* galE(or U) galKλatt::pNEB3-r1-cDsbC (SpecR, laclq) ΔtrxBrpsL150(StrR)Δgor Δ(malF)3

转化效率

1 x 106 cfu/μg pUC19 DNA

抗性

T1 噬菌体(fhuA2)、呋喃妥因、壮观霉素、链霉素

敏感性

氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素、四环素
* 可能观察到对低水平的链霉素存在抗性。

相关产品

SHuffle T7 E. coli 感受态细胞

感受态细胞E.coli HST16CR Competent Cells酶试剂盒Takara Clontech

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

感受态细胞E.coli HST16CR Competent Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 9131 E.coli HST16CR Competent Cells 100 μl×10 ¥619 感受态细胞E.coli HST16CR Competent Cells 感受态细胞E.coli HST16CR Competent Cells 感受态细胞E.coli HST16CR Competent Cells
收藏产品 加入购物车
 
■ 制品内容感受态细胞E.coli HST16CR Competent Cells
E.coli HST16CR Competent Cells 100 μl × 10
pUC19 plasmid (0.1 ng/μl) 10 μl
SOC media* 1 ml × 10
*SOC Media:     2%   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
  10 mM   MgSO4
10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
感受态细胞是具有摄取外源DNA能力的受体菌,可摄取基因重组质粒等,是转化时的重要工具。Takara在Hanahan’s method基础上进行了改良,制备出的E. coli HST16CR Competent Cells。
E. coli HST16CR Competent Cells是以E. coli HST08 Premium Competent Cells(Code No. 9128)为基础,获得的ColE1 ori的复制相关基因 pcnB缺失的具有高转化效率的菌株。由于pcnB基因的缺失,能够降低pUC系列载体的拷贝数,可有效用于难以克隆的含跨膜结构域蛋白质等、克隆基因对大肠杆菌生长有抑制作用的高拷贝载体克隆。
因为是以E. coli HST08 Premium Competent Cells为基础,缺失外源甲基化DNA的基因群(mrrmcrBChsdRMS )和mcrA,因此可用于甲基化DNA的克隆、基因组文库构建和常规亚克隆。另外,使用pUC系列载体转化时,可通过β-半乳糖苷酶的α-互补性,在培养基中添加X-gal进行蓝白筛选,以筛选重组体。
X-Gal:5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside
 
■ 细胞浓度
1-2×109 bacteria/ml
 
■ Genotype
E. coli HST16 CR: : F-, endA1 , supE44 , thi –1, recA 1, relA 1, gyrA 96, phoA ,Φ80d lacZ ΔM15,Δ( lacZYA – argFU169 , Δ ( mrr – hsdRMS – mcrBC ), ΔmcrA pcnB, λ
 
■ 保存
-80℃。
注意: 如果不在-80℃下保存,转化效率将会降低。此时,在使用前,请使用附带的pUC19 对照质粒来确认细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 质量标准
[1] 转化效率
转化质粒载体时,转入1 ng 的pUC19 plasmid,涂于Amp+ 的L-plate进行筛选。
转化效率 : >1 x 108 colonies/μg pUC19 plasmid
[2] β-半乳糖苷酶的α-互补性
转化pUC19 plasmid时,确认含100 μg/ml ampicilin 和 60 μg/ml X-Gal的L-agar plate上出现蓝色菌落。
 
■ 注意事项
1. 取出所需管数的感受态细胞后,搬运时请置于干冰/乙醇中。
2. 可使用1.5 ml microcentrifuge tubes代替14 ml 圆底 tubes (BD Code: 352059 或 352057,等),但效率可能会降低。
3. 当使用100 μl感受态细胞时,加入不超过10 ng的高纯度质粒DNA。增加DNA量转化效率会降低。
4. 当改变感受态细胞使用体积或tube类型时,需要研讨适当的反应条件。例如,当使用1.5 ml microcentrifuge tubes时,请42℃加热60秒。
5. 可以使用L-broth 或φb-broth替代SOC培养基。此时,转化效率可能会降低。
  ·L-broth:10 g Tryptone, 5 g Yeast extract, 5 g NaCl,用1 M NaOH调整pH到7.5,加水使终体积为1 L,高压灭菌。
  ·φ b-broth:5 g Yeast extract, 20 g Tryptone, 5 g MgSO4·7H2O,用1 M KOH调整pH到7.5,加水使终体积为1 L,高压灭菌。
  ·L-plate: 10 g Tryptone, 5 g Yeast extract, 5 g NaCl,用1 M NaOH调整pH到7.5,添加agar到1.5%,加水使终体积为1 L,高压灭菌。
6. 当加入X-Gal时,按照以下操作进行:
将 20 mg/ml X-Gal (溶解于二甲基甲酰胺) 按200-300 μl/100 ml 的比例加入到agar media中。
7. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是,如果再次冻结不可避免,将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻,置于-80℃保存。但是,转化效率可能会降低至少一个数量级。
 
 

页面更新:2024-01-31 15:28:56

K. lactis GG799 感受态细胞 #C1001S 5 次反应-NEB酶试剂 New England Biolabs

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs(NEB)酶试剂全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – 蛋白表达和纯化技术 – 表达系统 :酵母

K. lactis GG799 感受态细胞                              收藏

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存
武汉库存

#C1001S
5 次反应
7,429.00

Download:       

  • isoschizomers     |
  • compatible ends     | 
  • single letter code

相关产品

K. lactis 蛋白表达试剂盒 
SacII(星选酶)
K. lactis GG799 感受态细胞
酵母碳基础培养基

特性

 可克隆和表达对大肠杆菌有毒性的基因
 可同时表达多个基因
 无需昂贵的抗生素或甲醇
 易操作的实验步骤,适用于无酵母表达经验者
 有吸引力的商业授权 

pKLAC2 载体限制性酶切图谱请参见 351 页,序列信息请联系我们。 www.jinpanbio.com,www.jinpanbio.cn 查询。  

概述

K. lactis 蛋白表达试剂盒提供了一种在乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)中表达目的基因的简便方法。目的基因克隆到 pKLAC 系列整合载体中,既可表达胞内蛋白,亦可表达分泌型蛋白。与其它酵母和细菌表达系统相比,K. lactis 蛋白表达系统有着诸多优点。首先,乳酸克鲁维酵母具有高培养密度及整合多拷贝质粒的能力,使其可成功制备大量的高表达蛋白质;其次,pKLAC1 系列载体使用强 LAC4 启动子,该启动子经修饰,在大肠杆菌中无背景表达,因此,可用于对大肠杆菌有毒性的基因表达;再有,试剂盒提供高效转化的 K. lactis 感受态细胞,使得该系统适用于需要大量转化子的实验,比如利用 cDNA 文库进行表达克隆;另外,酵母转化子的筛选不需要昂贵的抗生素,培养基中也不需要甲醇;最后,K. lactis 细胞表达的蛋白质可以进行翻译后修饰,因而可成为细菌表达系统的有用替代。

pKLAC2 属于通用表达载体。利用这些载体既可使重组蛋白在细胞内表达,也能通过与 K. lactis α-factor 的融合实现分泌表达。pKLAC2 的多克隆位点与 NEB 其它表达系统相兼容。

GG799 是 K. lactis 蛋白表达试剂盒中提供的基础菌株。其特点是细胞生长密度与异源蛋白表达效率极高,GG799 细胞未经遗传修饰。

K. lactis GG799 感受态细胞                               #C1001S 5 次反应 
蛋白质的分泌过程。在细胞核中,整合表达载体编码了一个含有 ɑ-MF 结构域(蓝色)和目的蛋白(黑色)的融合蛋白。融合蛋白表达后,位于 ɑ-MF 上的信号肽就会指导融合蛋白转运至内质网(ER),信号肽即被信号肽酶(SP)切除。融合蛋白质转运至高尔基体,Kex 蛋白酶在此将 α-MF 结构域切除。随后,目的蛋白质被分泌到细胞外。

K. lactis GG799 感受态细胞                               #C1001S 5 次反应
K. lactis 的蛋白表达。SDS-PAGE 电泳分离检测分泌性表达的重组麦芽糖结合蛋白(MBP),菌体生长在富含蛋白胨(peptone)的培养基中,直接上样检测。考马斯亮蓝染色鉴定。泳道 1:蛋白分子量 Marker;泳道 2:野生型 K. lactis 细胞培养液(15 μl);泳道 3:整合有大肠杆菌 malE 基因表达框的 K. lactis 细胞培养液(15 μl)。

K. lactis 蛋白表达试剂盒包括

– pKLAC2 载体和 pKLAC1-malE 对照质粒
– SacII
– 整合测序引物套装
– K. lactis GG799 感受态细胞和转化试剂
– 酵母碳基础培养基与乙酰胺溶液   

参考文献

关于这些产品特点与应用的参考文献请联系我们。 www.jinpanbio.com,www.jinpanbio.cn。   

感受态细胞E.coli DH5α Competent Cells酶试剂盒Takara Clontech

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

感受态细胞E.coli DH5α Competent Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 9057 E.coli DH5α Competent Cells 100 μl × 10 ¥309 感受态细胞E.coli DH5α Competent Cells 感受态细胞E.coli DH5α Competent Cells 感受态细胞E.coli DH5α Competent Cells
收藏产品 加入购物车

无标题文档

 
 
感受态细胞E.coli DH5α Competent Cells 感受态细胞E.coli DH5α Competent Cells 感受态细胞E.coli DH5α Competent Cells 感受态细胞E.coli DH5α Competent Cells 感受态细胞E.coli DH5α Competent Cells
 
感受态细胞E.coli DH5α Competent Cells
感受态细胞E.coli DH5α Competent Cells  
感受态细胞E.coli DH5α Competent Cells
 
 
■ 制品内容感受态细胞E.coli DH5α Competent Cells
E.coli DH5α Competent Cells 100 μl × 10
pUC19 plasmid ( 0.1 ng/μl) 10 μl
SOC Medium* 1 ml × 10
*SOC Medium:       2%   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
  10 mM   MgSO4
10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
Takara在Hanahan's method基础上进行了改良,制备出E.coli DH5α Competent Cells。 E.coli DH5α Competent Cells在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化时,利用β-半乳糖苷酶活性 (α-互补性),通过蓝白斑方法可以很容易地鉴别重组体菌株。由于菌株无lac lq,故不需要IPTG。因此,当制作基因文库或进行亚克隆时,可以使用X-Gal筛选重组DNA或重组质粒。
X-Gal : 5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside
 
■ 细胞浓度
1 - 2×109 bacteria/ml
 
■ Genotype
E.coli DH5α : F-, φ 80dlacZ ΔM15, Δ(lacZYA -argF )U169, deoR , recA1 , endA1 , hsdR17 (rK-, mK+), phoA, supE44 , λ-, thi -1, gyrA96 , relA1
 
■ 保存
-80℃。
注意: -80℃或更低温度下保存。如果保存温度不能恒定,转化效率将会降低。请使用附带的pUC19 对照质粒来确认保存细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 质量控制
1. 转化效率
转入1 ng 的pUC19,涂于含有Amp+ 的选择培养基进行筛选。
转化效率 : >1 x 108 transformants/μg pUC19
 
2. β-半乳糖苷酶的α-互补性
当使用pUC19 plasmid进行转化时,含有100 μg/ml Ampicillin和60 μg/ml X-Gal的L-agar plate出现蓝色菌落。
 
■ 注意事项
1. 将感受态细胞从-80℃冷冻取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。
2. 可使用1.5 ml microcentrifuge tubes代替14 ml 圆底 tubes (BD company Code: 352059 或 352057,等),但效率可能会降低。
3. 当使用100 μl感受态细胞时,加入的高纯度DNA样品不要超过10 ng。否则转化效率会降低。
4. 当改变感受态细胞数量或tubes类型时,适当调整反应条件。例如,当使用1.5 ml microcentrifuge tubes时,42℃放置60秒而不是45秒。
5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基。此时,转化效率可能会降低。
    ·L-broth : Ingredient per liter water  
  Tryptone 10 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
    用1 N NaOH调整pH到7.5并高压灭菌。
    ·φ b-broth: Ingredient per liter water  
  Tryptone 20 g  
  Yeast extract 5 g  
  MgSO4·7H2O 5 g  
    用1 N KOH调整pH到7.5并高压灭菌。
6. 当加入X-Gal时,按照以下操作进行:
    ·将 20 mg/ml X-Gal (溶解于二甲基甲酰胺) 按200-300 μl/100 ml的比例加入到 agar培养基中。
7. DH5α可用于M13mp载体的复制。但由于其不携带F因子,因而不能形成菌斑。
8. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是,如果再次冻结不可避免,将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻,置于-80℃保存。但是,转化效率可能会降低至少一个数量级。
 
 

页面更新:2023-12-01 15:06:22

感受态细胞E.coli HST04 dam-/dcm- Competent Cells酶试剂盒Takara Clontech

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

感受态细胞E.coli HST04 dam/dcm Competent Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 9129 E.coli HST04 dam/dcm Competent Cells 100 μl × 10 ¥651 感受态细胞E.coli HST04 dam-/dcm- Competent Cells 感受态细胞E.coli HST04 dam-/dcm- Competent Cells 感受态细胞E.coli HST04 dam-/dcm- Competent Cells
收藏产品 加入购物车
 
■ 制品内容感受态细胞E.coli HST04 dam-/dcm- Competent Cells
E.coli HST04 dam/dcm Competent Cells 100 μl × 10
pUC19 plasmid (0.1 ng/μl) 10 μl
SOC Medium* 1 ml × 10
*SOC Medium:      2%   Ttryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
  10 mM   MgSO4
10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
Takara公司在Hanahan’s method基础上进行了改良,制备出E. coli HST04 dam/dcm Competent Cells,当用1 ng pUC19转化100 μl细胞时,转化效率>1×106 cfu/μg。
E.coli HST04 dam/dcm是甲基化基因dam、dcm缺失的菌株,使DNA不被甲基化。使用本菌株转化所得到的质粒,可以被对dam、dcm甲基化敏感的限制酶切割。
另外,dam、recA双重突变的菌株是致死的,本菌株为recA+菌株。因此,易与带有同源序列的外源DNA发生重组。本制品只适用于转化已经构筑好的质粒, 而不适用于常规的克隆转化。
 
■ 细胞浓度
1-2×109 bacteria/ml
 
■ Genotype
E. coli HST04 dam/dcm: F, ara, △(lac-proAB) [Φ80dlacZ△M15], rpsL( str), thi, △(mrr-hsdRMS-mcrBC), △mcrA, dam, dcm
 
■ 保存
-80℃。
注意: 如果不在-80℃下保存,转化效率将会降低。此时,在使用前,请使用附带的pUC19 对照质粒来确认细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 质量标准
转入1 ng 的pUC19 plasmid,涂于含有ampicillin的L-plate进行筛选。
转化效率 : >1 x 106 colonies/μg pUC19 plasmid
 
■ 注意事项
1. 将感受态细胞从-80℃冷冻取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。
2. 可使用1.5 ml microcentrifuge tubes代替14 ml 圆底 tubes (CORNING Code No. 352059 或 352057,等),但效率可能会降低。
3. 当使用100 μl感受态细胞时,加入的高纯度质粒DNA不要超过10 ng。否则转化效率会降低。
4. 当改变感受态细胞使用体积或tube类型时,适当调整反应条件。例如,当使用1.5 ml microcentrifuge tubes时,42℃放置60秒而不是45秒。
5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基,转化效率可能会降低。
  ·L-broth:10 g Tryptone, 5 g Yeast extract, 5 g NaCl,用1 N NaOH调整pH到7.5,使体系终体积为1 L,高压灭菌。
  ·φ b-broth:5 g Yeast extract, 20 g Tryptone, 5 g MaSO4·7H2O,用1 N KOH调整pH到7.5,使体系终体积为1 L,高压灭菌。
  ·L-plates: 10 g Tryptone,5 g Yeast extract,5 g NaCl/1 L water, 使用1 N NaOH调整pH到7.5,添加agar到1.5%,使体系终体积为1 L,高压灭菌。
6. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是,如果再次冻结不可避免,将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻,置于-80℃保存。但是,转化效率可能会降低至少一个数量级。
 
 

页面更新:2024-01-31 15:21:01

电转化感受态细胞E.coli JM109 Electro-Cells酶试剂盒Takara Clontech

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

电转化感受态细胞E.coli JM109 Electro-Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 9022 E.coli JM109 Electro-Cells 50 μl × 10 ¥1,043 电转化感受态细胞E.coli JM109 Electro-Cells 电转化感受态细胞E.coli JM109 Electro-Cells 电转化感受态细胞E.coli JM109 Electro-Cells
收藏产品 加入购物车

无标题文档

 
 
电转化感受态细胞E.coli JM109 Electro-Cells 电转化感受态细胞E.coli JM109 Electro-Cells 电转化感受态细胞E.coli JM109 Electro-Cells 电转化感受态细胞E.coli JM109 Electro-Cells 电转化感受态细胞E.coli JM109 Electro-Cells
 
电转化感受态细胞E.coli JM109 Electro-Cells
电转化感受态细胞E.coli JM109 Electro-Cells  
电转化感受态细胞E.coli JM109 Electro-Cells
 
 
■ 制品内容
E.coli JM109 Electro-Cells 50 μl × 10
pUC19 plasmid ( 10 pg/μl) 10 μl
SOC Medium* 1 ml × 10
*SOC Medium:      2%   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
  10 mM   MgSO4
10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
Electro-Cells是Takara Bio特别制备的适用于电穿孔法的制品。用高电压脉冲电流瞬间击穿细胞的细胞质膜,从而使外源DNA转入宿主细胞内的转化方法称为电穿孔法。通过此种方法制备的感受态细胞转化效率高、产量大,尤其适合在短时间内将少量样品转入大肠杆菌内。
由于E. coli JM109 Electro-Cells含有F' 质粒,可以作为M13噬菌体载体的宿主细胞,也可用于制作DNA文库或进行亚克隆。当转化pUC载体或转染M13噬菌体载体DNA时,重组体可以利用电转化细胞的β-半乳糖苷酶的α-互补性,通过添加X-Gal和IPTG很容易地筛选出来。
X-Gal : 5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside
IPTG : Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside
 
■ 细胞浓度
>1×1010 bacteria/ml
 
■ Genotype
E. coli JM109: recA1 , endA1 , gyrA96 , thi -1 , hsdR17 (rk-mk+), e14-(mcrA- ) supE44 , relA1 , Δ (lac-proAB )/F'[traD36 , proAB+, lacIq, lacZ ΔM15]
 
■ 保存
-80℃。
注意: -80℃或更低温度下保存。如果保存温度不能恒定,转化降低将会降低。请使用附带的pUC19 对照质粒来确认保存细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 质量标准
转入10 pg 的pUC19,涂于含有Amp+ 的选择培养基进行筛选。
转化效率 : >1 x 109 cfu/μg pUC19
 
■ 注意事项
1. 将Electro-Cells从-80℃取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。
2. 当使用50 μl Electro-Cells时,添加不多于10 ng的高纯度样品DNA。否则会降低转化效率。
3. 导入分子量较大的DNA (>7 kb) 时,转化效率降低。
4. 当改变实验规模时,适当改变反应条件。
5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基。此时,转化效率可能会降低。
    ·L-broth : Ingredient per liter water  
  Tryptone 10 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
    用1 N NaOH调整pH7.5并高压灭菌。
    ·φ b-broth: Ingredient per liter water  
  Tryptone 20 g  
  Yeast extract 5 g  
  MgSO4·7H2O 5 g  
    用1 N KOH调整pH7.5并高压灭菌。
6. 稀释时,使用“使用方法4”中加入的SOC培养基。
7. YT soft agar: Ingredient per 100 ml water  
  Tryptone 0.8 g  
  Yeast extract 0.5 g  
  NaCl 0.5 g  
    用1 N NaOH调整pH7.6,添加agar至浓度为0.6%,高压灭菌。
8. 制备感受态细胞。当DNA插入M13噬菌体载体克隆位点时,重组体可通过在YT-soft agar添加X-Gal 和IPTG进行筛选,因为非重组体存在于蓝斑中。
9. YT-plate: Ingredient per liter water  
  Tryptone 8 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
    用1 N NaOH调整pH7.6,添加agar至浓度为1.5%,高压灭菌。
10. 当加入X-Gal或IPTG时,按照以下方法操作:
   ·加入100 mM IPTG,100 μl-300μl IPTG/100 ml agar medium 和 25 μl IPTG /3 ml soft agar。
   ·加入20 mg/ml X-Gal(溶解于二甲基甲酰胺)到agar medium中,比例为200 μl-300 μl /100 ml。若使用 soft agar,比例为50 μl/3 ml。
11. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是,如果再次冻结不可避免,将细胞置于干冰/乙醇中快速冷冻,置于-80℃保存。但是,转化效率可能会降低至少一个数量级。
 
 

页面更新:2024-01-31 15:40:13

T7pLysY感受态细胞

T7pLysY感受态细胞

货号:
C1360

品牌:
Jinpan

产品简介
储存条件 -70℃
单位
规格 10*100ul

T7pLysY菌株为大肠杆菌BL21增强型菌株,为Lon和OmpT蛋白酶缺陷型,用于毒性或非毒性蛋白的表达。该菌株区别于BL21(DE3)pLysS和BL21(DE3)pLysE菌株的优势在于T7 RNA聚合酶基因整合在细菌染色体上的lac操纵子区域,基因组中无λ前噬菌体序列,LysY表达的T7溶菌酶保留了对T7 RNA聚合酶的抑制作用但缺失了水解细胞壁的酰胺酶活性,有利于降低基因的背景表达和避免诱导过程中细菌的裂解,菌株具有抗T1噬菌体感染等特点。T7pLysY表达感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率大于108 cfu/μg。

Stellar化学转化感受态细胞酶试剂盒Takara Clontech

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

Stellar化学转化感受态细胞
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 636763 Stellar Competent Cells 10 x 100 μl ¥2,467 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞
Clontech 636766 Stellar Competent Cells 50 x 100 μl ¥8,728 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞
Clontech 636767 Stellar Competent Cells (96-well plate) 96 x 20 μl ¥5,893 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞
Clontech 636764 Stellar Competent Cells (dam-/dcm-) 10 transformations ¥2,709 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞
收藏产品 加入购物车

无标题文档

 
 
Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞
 
Stellar化学转化感受态细胞
Stellar化学转化感受态细胞  
Stellar化学转化感受态细胞
 
 
Stellar Competent Cells属于E. coli HST08细胞系,具有很高的转化效率,可用于多种应用:cDNA或基因组DNA文库的制备,长片段基因组文库的构建,亚克隆,甚至甲基化DNA的克隆。Stellar Competent Cells缺失切断外源甲基化DNA的基因簇(mrr-hsdRMS-mcrBC and mcrA),所以可用于克隆甲基化DNA。 转化包含lacZ alpha基因的载体时,也可以使用Stellar Competent Cells进行蓝白筛选,例如alpha互补。 Stellar Competent Cells是Clontech's In-Fusion Cloning Kits配套使用的理想选择。
 
Stellar Competent Cells (dam/dcm)
Stellar Competent Cells (dam/dcm)属于E. coli HST04细胞系,缺失了甲基化DNA所必须的遗传因子(damdcm)。通常被dam或dcm甲基化而抑制的限制酶可以切断由该产品制备的质粒。
 
产品详情请点击:Stellar化学转化感受态细胞
 
 

页面更新:2019-11-05 09:50:57

NEB® PCR 克隆试剂盒(不含感受态细胞) #E1203S 20 次反应-NEB酶试剂 New England Biolabs

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs(NEB)酶试剂全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 克隆 & 合成生物学

NEB® PCR 克隆试剂盒(不含感受态细胞)                              收藏

NEB® PCR 克隆试剂盒(不含感受态细胞)                                #E1203S 20 次反应

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存
武汉库存

#E1203S
20 次反应
2,259.00

Download:       

  • isoschizomers     |
  • compatible ends     | 
  • single letter code

相关产品

NEB PCR 克隆试剂盒

特性

 含 SP6 和 T7 启动子,便于体外转录
 克隆所有类型的 PCR 产物更为简单,包括平末端和 TA 末端
 克隆速度快,连接仅需 5 分钟
 筛选简单,几乎没有克隆背景,不需要蓝白斑筛选
 无需纯化步骤,节约时间
 两侧的限制性内切酶酶切位点方便亚克隆,包含两种单酶切选择
 BsaI 位点的除去以便 Golden Gate 克隆

概述

NEB PCR 试剂盒提供:优化的 2X 克隆预混液(其中配有独特的连接增强剂)和线性载体。该线性载体利用最新技术抑制背景菌落生长,使背景值降为最低。本试剂盒能简单、快速克隆各种 PCR 产物。具有校读功能的聚合酶产生平末端扩增子(如:Q5 或者 Phusion),无校对功能的聚合酶产生单碱基突出末端的扩增子(如 Taq、OneTaq、LongAmp Taq)。2X 克隆预混液中包含有末端修复成份,可在连接反应步骤前进行末端平齐化,因此,无论扩增子是何种末端都能完成有效连接。此外,使用本试剂盒,PCR 产物无需纯化,PCR 引物也无需经过 5´ -磷酸基修饰。 

• 提供下游菌落 PCR 或测序引物
• 试剂盒包含 1 kb 扩增子对照和线性载体及一次用量的大肠杆菌感受态细胞
• 比其它商业化产品保质期长(12 个月) 

PCR 克隆试剂盒包含

– 克隆预混液
– 线性化 pMiniT™ 载体
– 对照扩增子
– 克隆检测正向引物
– 克隆检测反向引物
– NEB 10-beta E. coli 感受态细胞(克隆级)(仅在 NEB #E1202 提供)  

质保声明

NEB PCR 克隆试剂盒经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。 www.jinpanbio.cn,www.jinpanbio.com。