DNA 聚合酶 I(E. coli) #M0209L 2,500 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – DNA 处理(DNA 标记、末端平齐化等)

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DNA 聚合酶 I(E. coli)                                    #M0209L 2,500 units DNA 聚合酶 I(E. coli)                                    #M0209L 2,500 units DNA 聚合酶 I(E. coli)                                    #M0209L 2,500 units DNA 聚合酶 I(E. coli)                                    #M0209L 2,500 units DNA 聚合酶 I(E. coli)                                    #M0209L 2,500 units

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特性

·DNA 切刻平移

·cDNA 第二条链的合成 

概述

DNA 聚合酶 I(E. coli)是依赖于 DNA 的 DNA 聚合酶,具有 3´→5´ 和 5´→3´ 核酸外切酶活性。该酶的 5´→3´ 核酸外切酶活性能够切除位于延伸链前端的核苷酸,从而使切刻平移成为可能。 

来源

重组 E. coli 菌株,携带有过表达的 polA 基因。 

浓度

10,000 units/ml。 

热失活

75℃ 20 分钟。 

注意事项

本品不含 DNase I,因此切刻平移反应时需额外添加 DNase I。 

参考文献

 

E. coli DNA 连接酶 #M0205L 1,000 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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E. coli DNA 连接酶                                   #M0205L 1,000 units E. coli DNA 连接酶                                   #M0205L 1,000 units E. coli DNA 连接酶                                   #M0205L 1,000 units E. coli DNA 连接酶                                   #M0205L 1,000 units

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特性

 dsDNA 切刻修复
 Okayama 和 Berg cDNA 克隆 

概述

催化双链 DNA 粘性末端的 5´ -磷酸和 3´ –羟基形成磷酸二酯键。不能有效连接平末端底物。E. coli DNA 连接酶以 NAD 为辅因子。在 4-37℃范围内,E. coli DNA 连接酶均有活性。

来源

纯化自重组 E. coli 菌株,该菌株携带 E. coli DNA 连接酶的编码基因。 

反应条件

1X E. coli DNA 连接酶缓冲液
[30 mM Tris-HCl(pH 8.0 @ 25℃),4 mM MgCl2,1 mM DTT,26 μM NAD+,50 μg/ml BSA],最适反应温度为16℃。 

热失活

65℃ 加热 20 分钟。 

质保声明

E. coli DNA 连接酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。  

单位定义

1 单位指在 20 μl 反应体系中,在 16℃ 反应条件下,30 分钟能使 50% 的经 HindIII 消化的 λDNA 片段 [5´ 端浓度为 0.12 μM(300 μg/ml)] 连接所需的酶量。单位活性检测条件请联系我们。 www.jinpanbio.cn 或 www.jinpanbio.com 

浓度

10,000 units/ml。 

注意事项

本酶以 NAD+(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)作为辅因子。
该酶对平末端片段的连接效率极低,平末端的连接请用平末端/TA 连接酶预混液(NEB #M0367)或快速连接试剂盒(NEB #M2200)。 

参考文献

关于该酶特性和产品应用的参考文献,请联系我们。  

核酸外切酶 III(E.coli) #M0206L 25,000 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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核酸外切酶 III(E.coli)                              收藏

核酸外切酶 III(E.coli)                                   #M0206L 25,000 units 核酸外切酶 III(E.coli)                                   #M0206L 25,000 units 核酸外切酶 III(E.coli)                                   #M0206L 25,000 units 核酸外切酶 III(E.coli)                                   #M0206L 25,000 units

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特性

 3´ →5´ 外切酶活性
 非定向巢式缺失
 定点突变
 链特异性探针的制备
 制备用于双脱氧测序的单链底物 

概述

该酶作用于双链 DNA,从 3´ OH 末端方向逐步切去单核苷酸。每次酶与底物结合催化,只有几个核苷酸被除掉,从而在 DNA 分子群内产生渐进缺失。
尽管可以作用于双链 DNA 的切刻产生单链缺口,但该酶最适底物是平齐末端或 3´ 凹陷末端 DNA。由于对单链 DNA 无活性,因此该酶无法切割 3´ 突出末端。3´ →5´ 外切酶活性对底物的切割程度随 3´ 突出末端的长度而变化,四碱基或更长的突出末端完全不能被切割。这种特性可以用于对一端为抗性位点(3´ 突出端),另一端是敏感位点(平端或 5´ 突出端)的线性 DNA 分子进行单方向切割。
核酸外切酶 III 的活性部分依赖螺旋结构,并根据序列的不同而有差异(C>A=T>G)。温度、盐浓度和酶与 DNA的比例对酶活性影响很大,应根据不同的反应调整反应条件。
据报道,核酸外切酶 III 也有 RNase H、3´ -磷酸酶和脱嘌呤/嘧啶-核酸内切酶活性。 

来源

纯化自 E. coli K-12,BE257/pSGR3 菌株(B.Weiss 惠赠)。 

反应条件

1X NEBuffer 1
[10 mM Bis Tris 丙烷-HCl,10 mM MgCl2,1 mM DTT(pH 7.0 @ 25℃)],37℃ 温育。
热失活:70℃ 加热 20 分钟。 

质保声明

核酸外切酶 III 经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。  

单位定义

1 单位指 50 μl 反应体系中,37℃ 条件下,30 分钟催化产生 1 nmol 酸溶性总核苷酸所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。  

浓度

100,000 units/ml。 

注意事项

核酸外切酶 III 不能切割硫代磷酸酯键。因此,也可以通过引入一个 α-硫代磷酸核苷酸将 DNA 分子的一端保护起来,以进行单向切割。 

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献,请联系我们。  

核酸外切酶 I(E. coli) #M0293L 15,000 unit-NEB酶试剂 New England Biolabs

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核酸外切酶 I(E. coli)                              收藏

核酸外切酶 I(E. coli)                                   #M0293L 15,000 unit 核酸外切酶 I(E. coli)                                   #M0293L 15,000 unit 核酸外切酶 I(E. coli)                                   #M0293L 15,000 unit 核酸外切酶 I(E. coli)                                   #M0293L 15,000 unit

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1,500 units
459.00

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特性

 3´ →5´ 单链外切酶活性
 PCR 扩增后降解引物 

概述

具有从 3´ →5´ 方向水解单链 DNA 的外切酶活性。 

来源

重组 E. coli 菌株,其携带有从 E. coli NM554 克隆的 exo I 基因。 

反应条件

1X 核酸外切酶 I 反应缓冲液
[67 mM Glycine-KOH(pH 9.5 @ 25℃),6.7 mM MgCl2 ,10 mM 2-巯基乙醇],37℃ 温育。
热失活:80℃ 加热 20 分钟。 

质保声明

核酸外切酶 I 经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。  

单位定义

1 单位指在 37℃ 条件下,30 分钟内催化释放 10 nmol 的酸溶性核苷释放所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。  

浓度

20,000 units/ml。 

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献,请联系我们。  

拓扑异构酶 I(E. coli) #M0301L 500 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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拓扑异构酶 I(E. coli)                              收藏

拓扑异构酶 I(E. coli)                                   #M0301L 500 units 拓扑异构酶 I(E. coli)                                   #M0301L 500 units 拓扑异构酶 I(E. coli)                                   #M0301L 500 units 拓扑异构酶 I(E. coli)                                   #M0301L 500 units

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特性

 识别错配 DNA
 催化负超螺旋 DNA 松弛 

概述

拓扑异构酶 I(E. coli)催化负超螺旋 DNA 的松弛。拓扑异构酶 I 也参与 DNA 螺旋化的形成和解旋以及将两条互补的单链 DNA 环耦合为双链 DNA 环。完整的全酶分子量为 97 kDa。 

来源

克隆有 topA 基因的重组 E. coli 菌株。 

反应条件

1X CutSmart 反应缓冲液
[50 mM KAc,20 mM Tris-Ac,10 mM Mg(Ac)2,100 μg/ml BSA(pH 7.9 @ 25℃)],37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。 

质保声明

拓扑异构酶 I 经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。  

单位定义

1 单位指在 25 μl 反应体系,37℃ 条件下,15 分钟内能催化超过 95% 的 0.5 μg pUC19 RF I 型(负超螺旋)DNA 松弛所需要的酶量。DNA 超螺旋化通过不含溴化乙啶的琼脂糖凝胶电泳来检测。 

浓度

5,000 units/ml 和 15,000 units/ml。 

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献,请联系我们。  

无机焦磷酸酶(E. coli) #M0361L 50 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 磷酸酶 & 硫酸化酶

无机焦磷酸酶(E. coli)                              收藏

无机焦磷酸酶(E. coli)                                  #M0361L 50 units 无机焦磷酸酶(E. coli)                                  #M0361L 50 units 无机焦磷酸酶(E. coli)                                  #M0361L 50 units

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809.00

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特性

 反转录反应中提高 RNA 产量
 增强 DNA 复制 

概述

无机焦磷酸酶(E. coli)催化无机焦磷酸盐水解生成正磷酸盐。

P207–4 + H20 → 2HP04–2 

来源

无机焦磷酸酶(大肠杆菌)纯化自携带 E.coli 无机焦磷酸酶基因的重组 E. coli 菌株。
 
无机焦磷酸酶(酵母)纯化自重组 E. coli 菌株,携带有从酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)克隆的 ppa 基因和蟾分枝杆菌(Mycobacterium xenopi)GyrA 内含肽的融合基因。由 Biohelix(现为 Quidel公司的全资子公司)研发,由 New England Biolabs生产。

质保声明

无机焦磷酸酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。更多信息请联系我们。 www.jinpanbio.com 或 www.jinpanbio.cn。 

单位定义

1 单位指标准反应条件下每分钟催化无机焦磷酸盐生成 1 μmol 磷酸盐所需的酶量。 

浓度

100 units/ml。 

参考文献

 

E.coli蛋白质表达感受态细胞TaKaRa Competent Cells BL21酶试剂盒Takara Clontech

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E.coli蛋白质表达感受态细胞TaKaRa Competent Cells BL21
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 9126 TaKaRa Competent Cell BL21 100 μl x 10 ¥357 E.coli蛋白质表达感受态细胞TaKaRa Competent Cells BL21 E.coli蛋白质表达感受态细胞TaKaRa Competent Cells BL21 E.coli蛋白质表达感受态细胞TaKaRa Competent Cells BL21
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■ 制品内容E.coli蛋白质表达感受态细胞TaKaRa Competent Cells BL21
TaKaRa Competent Cells BL21 10 × 100 μl
pUC19 DNA (0.1 ng/μl) 10 μl
SOC Medium* 10 × 1 ml
*SOC Medium:          2%
  Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
 10 mM   MgSO4
 10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
E.coli BL21来源于B株,为lon蛋白水解酶、ompT外膜蛋白水解酶缺陷型,因此表达的外源蛋白质在该体系中具有更高的稳定性。本制品有利于外源蛋白质的稳定表达。
本制品可用于pCold I-IV DNA 和pCold TF DNA的蛋白质表达,但不适合于启动子为T7的蛋白质表达体系,如pET系列,因为BL21宿主不表达T7 RNA聚合酶。另外,不建议使用此菌株构建或制备质粒,因为它不是recA基因缺失型菌株。
注意:本制品不可用于电击法转化。
 
■ 保存
-80℃。
注意:如果不是-80℃保存,转化效率将会降低。可使用附带的pUC19 DNA确认保存细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 质量控制
转入1 ng 的pUC19 DNA,涂于含有Amp+的选择培养基进行筛选。
转化效率 : ≥1×106 colonies /μg pUC19 DNA
 
■ Genotype
E.coli BL21: F, ompT, hsdSB (rBmB), gal, dcm
 
■ 注意事项
1. 将感受态细胞从-80℃冷冻取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。
2. 当使用100 μl感受态细胞时,加入不超过10 ng的高纯度质粒DNA。否则转化效率会降低。
3. 当改变感受态细胞数量或tubes类型时,适当调整反应条件。
4. 使用TE buffer溶解纯化的质粒DNA。DNA溶液如果盐浓度高,可能会降低转化效率。
5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基。此时,转化效率可能会降低。
  ·L-broth : Ingredient per liter water  
  Tryptone 10 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
  用1 N NaOH调整pH到7.5并高压灭菌。
  ·φb-broth: Ingredient per liter water  
  Tryptone 20 g  
  Yeast extract 5 g  
  MgSO4·7H2O 5 g  
    用1 N KOH调整pH到7.5并高压灭菌。
6. 稀释时,使用SOC培养基。
7. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是,如果再次冻结不可避免,将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻,置于-80℃保存。但是,转化效率可能会降低至少一个数量级。
 
 

页面更新:2023-12-21 14:55:12

E. coli Poly(A) 聚合酶 #M0276L 500 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 合成

E. coli Poly(A) 聚合酶                              收藏

E. coli Poly(A) 聚合酶                                  #M0276L 500 units E. coli Poly(A) 聚合酶                                  #M0276L 500 units E. coli Poly(A) 聚合酶                                  #M0276L 500 units

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相关产品

5´ -三磷酸腺苷(ATP)
小鼠 RNase 抑制剂

特性

 用 5´ 三磷酸化虫草素(cordycepin 5´-triphosphate)或 ATP 标记 RNA
 为 RNA 添加 Poly(A) 尾,用于克隆或亲和纯化
 提高转染至真核细胞中 RNA 的翻译效率 

概述

E. coli Poly(A) 聚合酶催化由 ATP 转化成的 AMP 添加到 RNA 3´ 端,该反应不依赖模板的存在。 

来源

重组 E. coli 菌株,携带克隆自大肠杆菌的 Poly(A) 聚合酶基因。 

反应条件

1X Poly(A) 聚合酶反应缓冲液
[50 mM Tris-HCl (pH 7.9 @ 25℃),250 mM NaCl,10 mM MgCl2],加入 1 mM ATP,37℃ 温育。
热失活:65℃ 20 分钟。 

随酶提供

10X Poly(A) 聚合酶反应缓冲液
10 mM ATP 

质保声明

无 DNase、RNase 和磷酸酶污染。 

单位定义

1 单位指 20 μl 反应体系中 37℃ 条件下, 10 分钟催化 1 nmol 的 AMP 掺入 RNA 所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。 www.jinpanbio.com 或 www.jinpanbio.cn。

浓度

5,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。 www.jinpanbio.com 或 www.jinpanbio.cn。 

无机焦磷酸酶(E. coli) #M0361L 50 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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无机焦磷酸酶(E. coli)                              收藏

无机焦磷酸酶(E. coli)                                  #M0361L 50 units 无机焦磷酸酶(E. coli)                                  #M0361L 50 units 无机焦磷酸酶(E. coli)                                  #M0361L 50 units

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特性

 反转录反应中提高 RNA 产量
 增强 DNA 复制 能力

概述

无机焦磷酸酶(PPase)催化无机焦磷酸盐水解生成正磷酸盐。
P207–4 + H20 → 2HP04–2 

 

来源

无机焦磷酸酶(E. coli)纯化自携带 E. coli 无机焦磷酸酶基因的重组 E. coli 菌株。
无机焦磷酸酶(酵母)纯化自重组 E. coli 菌株,携带有从酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)克隆的 ppa 基因和蟾分枝杆菌(Mycobacterium xenopi)GyrA 内含肽的融合基因。由 Biohelix 公司(现在是Quidel 公司的全资子公司)研发,由 New England Biolabs 生产。

质保声明

无机焦磷酸酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。更多信息请联系我们。 www.jinpanbio.com 或 www.jinpanbio.cn。 

单位定义

1 单位指标准反应条件下每分钟催化无机焦磷酸盐生成 1 μmol 磷酸盐所需的酶量。单位活性检测条件请联系我们。 www.jinpanbio.com 或 www.jinpanbio.cn。 

浓度

100 units/ml。 

参考文献

 

E. coli RNA 聚合酶,核心酶 #M0550S 100 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 合成

E. coli RNA 聚合酶,核心酶                              收藏

E. coli RNA 聚合酶,核心酶                                #M0550S 100 units

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E. coli RNA 聚合酶, 核心酶

E. coli RNA 聚合酶, 全酶

特性

 E. coli 启动子启动的 RNA 合成
 转录起始研究
 PURExpress 体外转录 

概述

E. coli RNA 聚合酶,核心酶由 5 种亚基组成,分别为 α、α、β´ 、β、和 ω。此酶无 σ 因子,因此不会对细菌和噬菌体 DNA 启动子特异性启动转录。本酶保留了从非特异性启动序列转录 RNA 的功能。添加 σ 因子后,本酶可从特定细菌和噬菌体的特异启动子启动合成 RNA。核心酶分子量约 400 kDa。
E. coli RNA 聚合酶,全酶由核心酶和 σ 因子 70 组成,能从 σ 因子 70 特定的细菌和噬菌体启动子处起始合成RNA。 

来源

大肠杆菌 RNA 聚合酶,核心酶是由大肠杆菌 BL21 分离而得。σ 因子 70 是由携带 σ 因子 70 克隆基因的大肠杆菌纯化而来。 

反应条件

40 mM Tris-HCl,pH 7.5,150 mM KCl,10 mM MgCl2,0.01% Triton-X-100,1 mM DTT,每种 rNTP 各 0.5 mM 和 DNA 模板。37℃ 温育。 

质保声明

无 DNA 内、外切酶和 RNase 污染。 

单位定义

1 单位是指在 37℃ 条件下,10 分钟内可将 1 nmol NTP 掺入 RNA 所需的酶量,单位活性检测条件请联系我们。 www.jinpanbio.com 或 www.jinpanbio.cn 。 

浓度

1,000 units/ml。