标签归档：感受态

感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells酶试剂盒Takara Clontech

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 9027 E.coli DH5α Electro-Cells 50 μl × 10 ￥446 感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells 感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells 感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells
收藏产品 加入购物车

无标题文档

 
 
感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells → 感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells → 感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells → 感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells → 感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells
 
感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells
感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells  
感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells
 
 
■ 制品内容
E.coli DH5α Electro-Cells 50 μl × 10
pUC19 plasmid ( 10 pg/μl) 10 μl
SOC Medium* 1 ml × 10
*SOC Medium:      2%   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
  10 mM   MgSO4
10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
E. coli DH5α Electro-Cells是Takara Bio特别制备的适用于电穿孔法的制品。用高电压脉冲电流瞬间击穿细胞的细胞质膜，从而使外源DNA转入宿主细胞的转化方法称为电穿孔法。通过此种方法制备的感受态细胞转化效率高、产量大，尤其适合在短时间内将少量样品转入大肠杆菌内。
E.coli DH5α在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化时，利用β-半乳糖苷酶活性 (α-互补性) ，应用蓝白斑方法可以很容易鉴别重组体菌株。由于菌株无lacl q，故不需要IPTG。因此，当制作基因文库或进行亚克隆时，可以使用X-Gal筛选重组DNA或重组质粒。
X-Gal : 5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside
 
■ 细胞浓度
>1×1010 bacteria/ml
 
■ Genotype
E. coli DH5α：F-, φ80dlacZ Δ M15, Δ ( lacZYA -argF )U169, deoR , recA1 , endA1 , hsdR17 (rK-, mK+), phoA , supE44 , λ-, thi -1 , gyrA96 , relA1
 
■ 保存
-80℃。
注意： -80℃或更低温度下保存。如果保存温度不能恒定，转化降低将会降低。请使用附带的pUC19 对照质粒来确认保存细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 质量标准
1. 转化效率
转入10 pg 的pUC19，涂于含有A+ 的选择培养基进行筛选。
转化效率 : >1 x 109 transformants /μg pUC19
2. β-半乳糖苷酶的α-互补性
转化pUC19 DNA时，含有100 μg/ml ampicilin 和 60 μg/ml X-Gal的L-琼脂平板上出现蓝色菌落。
 
■ 注意事项
1. 将Electro-Cells从-80℃取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。
2. 当使用50 μl Electro-Cells时，添加不多于10 ng的高纯度样品DNA。否则会降低转化效率。
3. 导入分子量较大的DNA (＞7 kb) 时，转化效率降低。
4. 当改变实验规模时，适当改变反应条件。
5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基。此时，转化效率可能会降低。
·L-broth:      Ingredient   per liter water
 Tryptone   10 g
 Yeast extract   5 g
 NaCl   5 g
用1 N NaOH调整pH到7.5并高压灭菌。
·φb-broth:      Ingredient   per liter water
 Tryptone   20 g
 Yeast extract   5 g
 MgSO4·7H2O   5 g
用1 N KOH调整pH7.5左右并高压灭菌。
6. 稀释时，使用“使用方法4”中加入的SOC培养基。
7. 当使用X-Gal时：
   ·将20 mg/ml X-Gal (溶解于二甲基甲酰胺) 按200～300 μl/100 ml的比例加入到agar medium中。
8. DH5α可作为M13mp载体的复制。但由于不携带F因子，因而不能形成菌斑。
9. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是，如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。
 

页面更新：2024-01-25 14:30:36

NEB 5-alpha F´ Iq E. coli 感受态细胞 （高效级） #C2992H 20 x 0.05 ml-NEB酶试剂 New England Biolabs

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – 感受态细胞 – 克隆菌株

NEB 5-alpha F´ Iq E. coli 感受态细胞 （高效级）                              收藏

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存
武汉库存

#C2992H
20 x 0.05 ml
3,609.00
无
无
无
无
无
无

#C2992I
6 x 0.2 ml
2,819.00
无
无
无
无
无
无

Download:       

  • isoschizomers     |
  • compatible ends     | 
  • single letter code

相关产品

 
 

NEB 5-alpha F´ Iq E. coli 感受态细胞 （高效级） 

单独出售的组份

SOC Outgrowth 培养基
#B9020S 4 x 25 ml. . . . . . ¥939

优点

 严谨的表达调控（lacI q）
 克隆毒性基因
 含 F´ 因子的菌株，具有极高的转化效率
 DH5α 衍生物
 无动物来源产品

概述

该菌株含 F´因子，转化效率极高，适于克隆毒性基因。

基因型

F´proA+B+ lacIq Δ(lacZ)M15 zzf::Tn10 (TetR) / fhuA2Δ(argF-lacZ)U169 phoA glnV44 f80 Δ(lacZ)M15 gyrA96 recA1 endA1 thi-1 hsdR17

特性

• 可高效转化 PCR、cDNA 或其它来源的（hsdR）非甲基化 DNA
• 可进行蓝/白斑筛选
• 缺失非特异性核酸内切酶 I（endA1）活性，可用于制备高质量质粒
• 可减少克隆 DNA 的重组反应（recA1）
• 适用于 M13 噬菌体克隆的繁殖

转化效率

高效级： 1–3 x 109 cfu/μg

抗性

T1 噬菌体（fhuA2）、四环素

敏感性

氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素、呋喃妥因、壮观霉素、链霉素

随产品提供

SOC Outgrowth 培养基
pUC19 对照 DNA

Turbo 感受态细胞

发表于由

Turbo 感受态细胞

货号：
C1330

品牌：
Jinpan

产品简介
储存条件 -70℃
单位 支
规格 10×100μl
本公司生产的Turbo感受态细胞是采用大肠杆菌Turbo菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞。Turbo菌株是生长最快的大肠杆菌菌株，菌株平板上6.5小时可见克隆，摇菌4-6小时可提取质粒。核酸内切酶 (endA1)基因的缺失有利于提高质粒DNA的产量和质量。菌株的LacIq基因的表达受到严格控制，可克隆毒性基因。ΔlacZM15基因的存在可用于蓝白斑筛选。菌株还具有抗T1噬菌体感染的特点。Turbo感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率大于109 cfu/μg DNA。

BL21 E. coli 感受态细胞 #C2530H 20 x 0.05 ml-NEB酶试剂 New England Biolabs

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – 感受态细胞 – 蛋白表达菌株

BL21 E. coli 感受态细胞                              收藏

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存
武汉库存

#C2530H
20 x 0.05 ml
3,749.00
无
无
无
无
无
无

Download:       

  • isoschizomers     |
  • compatible ends     | 
  • single letter code

相关产品

 
 

BL21 E. coli 感受态细胞

单独出售的组份

SOC Outgrowth 培养基
#B9020S 4 x 25 ml . . . . . . ¥939

优点

 Plac, Ptac, Ptrc, ParaBAD 等表达载体的理想选择
 抗噬菌体 T1 感染（fhuA2）
 蛋白酶缺陷型
 无动物来源产品

概述

为广泛使用的无 T7 E. coli 表达菌株，适用于高效转化与蛋白表达实验，此菌株不表达 T7 RNA 聚合酶。

基因型

 fhuA2 [lon] ompT gal [dcm] ΔhsdS

特性

• Lon 和 OmpT 蛋白酶缺失

转化效率

1–5 x 107 cfu/µg pUC19 DNA

抗性

 T1 噬菌体 (fhuA2 )

敏感性

氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素、呋喃妥因、壮观霉素、链霉素、四环素

随产品提供

SOC Outgrowth 培养基
pUC19 对照 DNA

感受态细胞E.coli HST04 dam-/dcm- Competent Cells酶试剂盒Takara Clontech

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

感受态细胞E.coli HST04 dam–/dcm– Competent Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 9129 E.coli HST04 dam–/dcm– Competent Cells 100 μl × 10 ￥651 感受态细胞E.coli HST04 dam-/dcm- Competent Cells 感受态细胞E.coli HST04 dam-/dcm- Competent Cells 感受态细胞E.coli HST04 dam-/dcm- Competent Cells
收藏产品 加入购物车
 
■ 制品内容感受态细胞E.coli HST04 dam-/dcm- Competent Cells
E.coli HST04 dam–/dcm– Competent Cells 100 μl × 10
pUC19 plasmid (0.1 ng/μl) 10 μl
SOC Medium* 1 ml × 10
*SOC Medium:      2%   Ttryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
  10 mM   MgSO4
10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
Takara公司在Hanahan’s method基础上进行了改良，制备出E. coli HST04 dam–/dcm– Competent Cells，当用1 ng pUC19转化100 μl细胞时，转化效率＞1×106 cfu/μg。
E.coli HST04 dam–/dcm–是甲基化基因dam、dcm缺失的菌株，使DNA不被甲基化。使用本菌株转化所得到的质粒，可以被对dam、dcm甲基化敏感的限制酶切割。
另外，dam、recA双重突变的菌株是致死的，本菌株为recA+菌株。因此，易与带有同源序列的外源DNA发生重组。本制品只适用于转化已经构筑好的质粒, 而不适用于常规的克隆转化。
 
■ 细胞浓度
1-2×109 bacteria/ml
 
■ Genotype
E. coli HST04 dam–/dcm–： F–, ara, △(lac-proAB) [Φ80dlacZ△M15], rpsL( str), thi, △(mrr-hsdRMS-mcrBC), △mcrA, dam, dcm
 
■ 保存
-80℃。
注意： 如果不在-80℃下保存，转化效率将会降低。此时，在使用前，请使用附带的pUC19 对照质粒来确认细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 质量标准
转入1 ng 的pUC19 plasmid，涂于含有ampicillin的L-plate进行筛选。
转化效率 : >1 x 106 colonies/μg pUC19 plasmid
 
■ 注意事项
1. 将感受态细胞从-80℃冷冻取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。
2. 可使用1.5 ml microcentrifuge tubes代替14 ml 圆底 tubes (CORNING Code No. 352059 或 352057,等)，但效率可能会降低。
3. 当使用100 μl感受态细胞时，加入的高纯度质粒DNA不要超过10 ng。否则转化效率会降低。
4. 当改变感受态细胞使用体积或tube类型时，适当调整反应条件。例如，当使用1.5 ml microcentrifuge tubes时，42℃放置60秒而不是45秒。
5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基，转化效率可能会降低。
  ·L-broth：10 g Tryptone, 5 g Yeast extract, 5 g NaCl，用1 N NaOH调整pH到7.5，使体系终体积为1 L，高压灭菌。
  ·φ b-broth：5 g Yeast extract, 20 g Tryptone, 5 g MaSO4·7H2O，用1 N KOH调整pH到7.5，使体系终体积为1 L，高压灭菌。
  ·L-plates： 10 g Tryptone，5 g Yeast extract，5 g NaCl/1 L water, 使用1 N NaOH调整pH到7.5，添加agar到1.5%，使体系终体积为1 L，高压灭菌。
6. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是，如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。
 
 

页面更新：2024-01-31 15:21:01

电转化感受态细胞Agrobacterium tumefaciens LBA4404 Electro-Cells酶试剂盒Takara Clontech

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

电转化感受态细胞Agrobacterium tumefaciens LBA4404 Electro-Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 9115 Agrobacterium tumefaciens LBA4404 Electro-Cells 40 μl × 5 ￥616 电转化感受态细胞Agrobacterium tumefaciens LBA4404 Electro-Cells 电转化感受态细胞Agrobacterium tumefaciens LBA4404 Electro-Cells 电转化感受态细胞Agrobacterium tumefaciens LBA4404 Electro-Cells
收藏产品 加入购物车
 
■ 制品内容
Agrobacterium tumefaciens LBA4404 Electro-Cells 40 μl×5
pRI 900 DNA*1(1 ng/μl) 10 μl×1
SOC Medium*2 1 ml×10
   
*1: pRI 900 DNA : 去除了pRI 910 DNA (Code No.: 3261) 上多克隆位点的DNA。
*2: SOC Medium 
 2%   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
10 mM   MgSO4
10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
根癌农杆菌 (Rhizobium radiobactor) 可转化自身Ti质粒的T-DNA (transfer DNA) 进入宿主植物细胞，并将此DNA插入植物染色体DNA。T-DNA上的插入基因表达后，转入到被称为Crown gall的肿瘤细胞。利用这种基因转化机制，发明了用于植物转化的binary vector method。这种体系中，Ti质粒中T-DNA上的致病基因被选择性标记基因和外源目的基因所取代，通过农杆菌介导的基因转移将目的基因引入到植物染色体DNA中。
Agrobacterium tumefaciens strain LBA4404以及binary vector method首先在荷兰的Leiden University被Dr. P. J. J. Hooykaas发现。Agrobacterium tumefaciens含有pAL4404质粒，其只含有T-DNA vir区域 (vir基因诱导和T-DNA转移)，是一种广泛用于植物细胞转化实验的菌株。
本制品是电转化的感受态细胞。使用A. tumefaciens和binary vector method，可以进行各种植物细胞的感染 (转染) 实验。
 
■ 保存
-80℃。
注意：-80℃保存。如果保存温度不恒定，转化效率将会降低。可使用附带的pRI 900 DNA 确定细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 质量标准
根据使用方法，转入1 ng pRI 900 DNA，涂于含有卡那霉素和链霉素的平板上进行筛选。
转化效率 : >5×106 colonies/μg pRI 900 DNA
 
 

页面更新：2024-01-31 15:21:33

感受态细胞E.coli CJ236 Competent Cells酶试剂盒Takara Clontech

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

感受态细胞E.coli CJ236 Competent Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 9053 E.coli CJ236 Competent Cells 100 μl × 10 ￥517 感受态细胞E.coli CJ236 Competent Cells 感受态细胞E.coli CJ236 Competent Cells 感受态细胞E.coli CJ236 Competent Cells
收藏产品 加入购物车
 
■ 制品内容感受态细胞E.coli CJ236 Competent Cells
E.coli CJ236 Competent Cells 100 μl × 10
pUC119 plasmid ( 0.1 ng/μl) 10 μl × 1
SOC Medium* 1 ml × 10
*SOC Medium:      2%   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
 10 mM   MgSO4
10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
Takara公司在Hanahan’s method基础上进行了改良，制备出E.coli CJ236 Competent Cells，当1 ng pUC119转化100 μl 细胞时，转化效率可达1×107 cfu/μg。
E. coli CJ236 Competent Cells适用于制备含有dU的ssDNA。通过CJ236转化后富集的ssDNA，可用于Kunkel法进行定点突变。
 
■ 细胞浓度
1 – 2×109 Bacteria/ml
 
■ Genotype
E. coli CJ236 : dut1, ung1, thi-1, recA1 / pCJ105 (F’ camr)
 
■ 保存
-80℃。
注意：如果不在-80℃下保存，转化效率将会降低。此时，在使用前，请使用附带的pUC119对照质粒来验证细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 转化效率
转入1 ng 的pUC119，涂于含有Amp+ 的选择培养基进行筛选。
转化效率 : >1 x 107 cfu/μg pUC119
 
■ 注意事项
1. 将感受态细胞从-80℃冷冻取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。
2. 可使用microcentrifuge tubes代替Falcon tubes (CORNING #352059或352057)，但效率可能会降低。
3. 当使用100 μl感受态细胞时，加入不超过10 ng的高纯度DNA样品。否则转化效率会降低。
4. 当改变感受态细胞数量或tubes类型时，适当调整反应条件。例如，当使用microcentrifuge tubes时，42℃放置60秒。
5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基。此时，转化效率可能会降低。
   ·L-broth : Ingredient per liter water  
  Tryptone 10 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
    用1 N NaOH调整pH到7.5并高压灭菌。
   ·φ b-broth: Ingredient per liter water  
  Tryptone 20 g  
  Yeast extract 5 g  
  MgSO4·7H2O 5 g  
    用1 N KOH调整pH到7.5并高压灭菌。
6. 稀释时使用SOC培养基。
7. 建议在选择培养基中加入 Chloramphenicol (30 μg/ml) 以保证F’ 质粒稳定。
8. YT soft agar: Ingredient per 100 ml water  
  Tryptone 0.8 g  
  Yeast extract 0.5 g  
  NaCl 0.5 g  
    用1 N NaOH调整pH到7.6，加入agar至浓度为0.6%，并高压灭菌。
9. YT-plate: Ingredient per liter water  
  Tryptone 8 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
    用1 N NaOH调整pH到7.5，加入agar至浓度为1.5%，并高压灭菌。
10. 制备感受态细胞。
11. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是，如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。
 
 

页面更新：2024-01-31 15:19:49

OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感受态细胞

发表于由

OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感受态细胞

货号：
C1440

品牌：
Jinpan

产品简介
储存条件 -70℃
单位 支
规格 10×100μl
本公司生产的OmniMAX2-T1感受态细胞是采用大肠杆菌OmniMAX2-T1菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测，转化效率可达108 cfu/μg，-70℃保存几个月转化效率不发生改变。每支感受态可以酌情分装使用，降低了实验的成本。质量稳定，使用方便，质优价廉。

TOP10感受态细胞

发表于由

TOP10感受态细胞

货号：
C1200

品牌：
Jinpan

产品简介
英文名称 E.coli TOP10 Competent Cells
储存条件 -70℃保存，液氮保存至少一年，-70℃保存至少6个月
外观（性状） 干冰运输，单加10kg干冰费
单位 袋
规格 10*100ul 20*100ul

本公司生产的TOP10感受态细胞是采用大肠杆菌TOP10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测，转化效率可达108，-70℃保存六个月转化效率不发生改变。

基因型：F_ mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC) φ80 lacZΔM15△lacⅩ74 recA1 deoR araD139Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL (StrR) endA1 nupG

特 点：一种用于铺制与培养质粒平板和粘粒平板的重级缺陷的抑制型菌株。其中φ80 lacZΔM15基因的产物可与pUC载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补，可用于蓝白斑筛选。该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。

操作方法：（以下各步骤均为无菌操作）

1，将感受态细胞置于冰上融化，以下实验以100ul感受态细胞为例。

2、向感受态细胞悬液中加入需转化的目的DNA，注意目的DNA的体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一，轻轻旋转离心管以混匀内容物，冰浴放置30分钟。

3、将离心管置于42℃水浴中60-90秒，然后快速转移到冰浴中放置2-3分钟，注意不要摇动离心管。

4、向离心管中加入500ul无菌无抗的SOC或LB培养基，37℃ 180rpm振荡培养1小时。目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。

5、取适量已转化的感受态细胞涂布含相应抗生素的SOC或LB平板，37℃倒置培养12-16小时。涂布用量可根据具体实验来调整，如转化的DNA总量较多，可取100ul左右的转化产物涂板；反之，如转化的DNA总量较少，可取200-300ul的转化产物涂板。过多菌液可以抑制细菌生长。如果预计的克隆较少，可通过离心后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。涂布剩余的菌液可4℃保存，如果次日的转化菌落数过少可以将剩下的菌液再涂布新的平板。

注意事项：

1、感受态细胞应保存在-70℃，不可反复冻融，否则其转化效率将会降低。

2、实验过程中应严格无菌操作，防止其它DNA或杂菌的污染，避免为以后的筛选、鉴定带来影响。

3、转化时，转化效率与外源DNA的浓度在一定范围内成正比，但当加入的外源DNA量过多或体积过大反而会降低转化效率。转化时DNA体积要小于感受态细胞体积的十分之一。

4、转化率的计算：转化率＝产生菌落的总数/铺板DNA总量。

5、为防止转化实验不成功，可以保留部分连接产物，以重新转化，将损失降到最低。

伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series酶试剂盒Takara Clontech

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 9120 Chaperone Competent Cells BL21 Set 1 Set ￥2,691 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series
Takara 9121 Chaperone Competent Cell pG-KJE8/BL21 100 μl × 10 ￥787 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series
Takara 9122 Chaperone Competent Cell pGro7/BL21 100 μl × 10 ￥551 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series
Takara 9124 Chaperone Competent Cell pG-Tf2/BL21 100 μl × 10 ￥1,139 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series
收藏产品 加入购物车

无标题文档

 

 
■ 制品内容伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series（Code No.: 9120：100 μl × 3 × 6 种）
● Chaperone Competent Cells BL21 Set (Code No.: 9120)
1. Chaperone Competent Cells pG-KJE8/BL21 3 × 100 μl
2. Chaperone Competent Cells pGro7/BL21 3 × 100 μl
3. Chaperone Competent Cells pKJE7/BL21 3 × 100 μl
4. Chaperone Competent Cells pG-Tf2/BL21 3 × 100 μl
5. Chaperone Competent Cells pTf16/BL21 3 × 100 μl
6. TaKaRa Competent Cell BL21 3 × 100 μl
7. pUC19 DNA (0.1 ng/μl) 1× 10 μl
8. SOC medium* 18 × 1 ml
   
● Chaperone Competent Cells pG-KJE8/BL21 (Code No.: 9121)
● Chaperone Competent Cells pGro7/BL21 (Code No.: 9122)
● Chaperone Competent Cells pG-Tf2/BL21 (Code No.: 9124)
1. Competent Cell 10 × 100 μl
2. pUC19 DNA (0.1 ng/μl) 1× 10 μl
3. SOC medium* 10 × 1 ml
*SOC medium:       2%   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
 10 mM   MgSO4
 10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
     
 
■ 制品说明
Chaperone Competent Cell BL21 Series是由五种分别转化一种伴侣蛋白质粒 (Chaperone Plasmid Set (Code No.: 3340)) 的Escerichia coli BL21制成的感受态细胞。
众所周知，分子伴侣参与蛋白质折叠过程，且人们已经通过大量的实验研究来表明体内蛋白折叠机理。 本制品中含有五种类型的质粒(pG-KJE8、pGro7、pKJE7、pG-Tf2、pTf16)，每一种质粒都是能有效表达一组协同作用、共同参与蛋白折叠的被称作“Chaperone team”的分子伴侣。靶蛋白与其中一种“Chaperone team”共同表达，便可增加可溶性蛋白质的回收比率，而用通常方法，由于包涵体的形成，这些表达蛋白质常常是不可回收的。
E.coli BL21来源于B株，为Lon蛋白水解酶、ompT外膜蛋白水解酶缺陷型。因此，表达的外源蛋白质在该体系中有更高的稳定性。
当进行靶蛋白与“Chaperone team”共表达实验时，通常需要三步：
1. 用伴侣蛋白质粒转化宿主E.coli； 2. 用转化体制备感受态细胞；3. 用质粒转化感受态细胞并表达靶蛋白。如果使用本产品，只需一步转化就可构建靶蛋白与“Chaperone team”的共表达体系，因为使用的E.coli BL21感受态细胞已转化有一种伴侣蛋白质粒。另外，此感受态细胞有五种质粒，不含有伴侣蛋白质粒的TaKaRa Competent BL21也可作为对照。
每种E.coli BL21感受态细胞包括一种伴侣蛋白质粒，非常适合pCold DNA系列的表达。但该产品不适合于启动子为T7的蛋白质表达体系，如pET系列，因为，宿主E.coli BL21菌株不表达T7 RNA聚合酶。
注意：本产品不可用于电击法转化。
 
■ DNA序列
  pG-KJE8 DNA (Fasta形式的txt文件)
  pGRO7 DNA (Fasta形式的txt文件)
  pG-TF2 DNA (Fasta形式的txt文件)
  pKJE7 DNA (Fasta形式的txt文件)
  pTf16 DNA (Fasta形式的txt文件)
 
■ 保存
-80℃。
注意：如果不是-80℃保存，转化效率将会降低。此时，可在使用前用附带的pUC19做转化实验，确认转化效率。不能保存在液氮中。
 
■ 转化效率
Chaperone competent cells：转化1 ng pUC19，涂于Cm+和Amp+平板上进行筛选。
TaKaRa competent cell BL21：转化1 ng pUC19，涂于Amp+平板上进行筛选。
转化效率≥1×106 cfu/μg pUC19
 
■ Genotype
E.coli BL21 : F–, ompT, hsdSB (rB–mB–), gal, dcm
 
■ 注意事项
1. 从-80℃中只取出实验所用的感受态细胞，然后立即放入干冰/EtOH bath。开始实验前不要取出。
2. 可使用1.5 ml microtube替代FALCON tube，但可能会降低效率。
3. 使用100 μl感受态细胞转化时，高纯度DNA使用量不要超过10 ng，否则转化效率会降低。
4. 转化体系改变 (如感受态细胞使用量发生改变) ,或换用了其它tube等，需研讨转化条件 (如使用一般的1.5 ml tube时，请于42℃保温60秒)。
5. 除SOC培养基外，L-broth及φb-broth也可使用，但转化效率会有所下降。
6. 稀释时，使用SOC培养基。
7. L-broth plate : 成份 per liter  
  Tryptone 10 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
    用1N NaOH调整到pH7.5，添加agar到1.5%，高压灭菌。
8. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。
9. 本制品中含有的伴侣蛋白质粒带有来源于pACYC的复制起点和氯霉素抗性基因 (Cmr)，E.coli表达系统中可以使用常用的ColE1型、具氨苄抗性 (Ampr)筛选标记的表达载体，但不可与含有氯霉素抗性基因的表达质粒共同使用。
 

页面更新：2023-12-01 16:19:25