Tuner(DE3)感受态细胞

Tuner(DE3)感受态细胞

货号:
C1150

品牌:
Jinpan

产品简介
储存条件 -70℃
单位
规格 10×100μl
Tuner(DE3)为LacYZ突变型BL21(DE3)菌株。Tuner(DE3)菌株可利用IPTG的加入量来精准地控制重组蛋白的表达量,与pET系列载体联合使用,可以使得蛋白表达从低表达水平到高表达水平进行有效调控(使用低浓度的IPTG诱导重组蛋白低水平表达时,目的蛋白可能会具有更好的可溶性和生物活性)。该菌株含有λ噬菌体DE3区,可以表达T7 RNA聚合酶。Tuner(DE3)菌株属于B菌株,lon和ompT蛋白酶缺陷型。Tuner(DE3)感受态细胞由特殊工艺制成,pUC19质粒检测转化效率达107cfu/μg DNA。

高性能单细胞差异表达分析SMART-Seq v4 3’DE Kit酶试剂盒Takara Clontech

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高性能单细胞差异表达分析SMART-Seq v4 3’DE Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635040 SMART-Seq v4 3’ DE Kit 96 Rxns ¥50,508 高性能单细胞差异表达分析SMART-Seq v4 3’DE Kit 高性能单细胞差异表达分析SMART-Seq v4 3’DE Kit 高性能单细胞差异表达分析SMART-Seq v4 3’DE Kit
Clontech 635041 SMART-Seq v4 3’ DE Kit 192 Rxns ¥93,693 高性能单细胞差异表达分析SMART-Seq v4 3’DE Kit 高性能单细胞差异表达分析SMART-Seq v4 3’DE Kit 高性能单细胞差异表达分析SMART-Seq v4 3’DE Kit
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SMART-Seq v4 3’DE Kit—简便的高性能单细胞差异表达分析
· 升级的SMART技术—带有LNA修饰的SMART-Seq v4 oligo 加升级的配方带来更好的性能
   (灵敏度高,更好重复性,更多的GC-rich基因)
· 末端捕获流程—大部分reads集中于3’端,同时维持出色的灵敏度,缩减了差异表达分析需要
   的reads数
· 高达12个样品pool—内嵌的indexes作为细胞barcode,可以实现在每个测序lane中高达12个样品
   的pool,进一步缩短时间,降低成本
 
单细胞转录组研究对于研究细胞群内不同单细胞表达情况非常重要。Takara Clontech 研发了单细胞mRNA转录本末端捕获技术,该技术侧重于3’端的末端捕获,使您可以用更少的测序reads获得高品质测序数据。本试剂同样采用了领先的SMART-Seq v4 技术,结合了SMART (Switching Mechanism at 5’ End of RNA Template) 技术和LNA (Locked Nucleic Acid) 技术。
本试剂除了侧重于mRNA转录本3’端外,还包含了内嵌的indexes作为Read2的细胞barcode,可以实现在每个测序lane中高达12个样品的pool,进一步缩减了时间和研究成本。本试剂可以1–10.5 μl体系起始,依赖于Illumina Nextera® XT DNA Library Preparation Kit。本试剂设计并经验证可以用于以下测序平台的cDNA文库和测序文库制备:HiSeq®,NextSeq®,MiSeq®和MiniSeq®
 
高性能单细胞差异表达分析SMART-Seq v4 3’DE Kit
图1. 末端捕获方法简介
 
高性能单细胞差异表达分析SMART-Seq v4 3’DE Kit
表1. K562单细胞pool文库主要测序数据
 
高性能单细胞差异表达分析SMART-Seq v4 3’DE Kit
图2. 从K562单细胞中检测到的基因数
 
Technote:
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高性能单细胞差异表达分析SMART-Seq v4 3’DE Kit
 
产品详情请点击:高性能单细胞差异表达分析SMART-Seq v4 3’DE Kit
 
 

页面更新:2024-02-01 08:21:31

BL21 (DE3) E. coli 感受态细胞 #C2527H 20 x 0.05 ml-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 感受态细胞 – 蛋白表达菌株

BL21 (DE3) E. coli 感受态细胞                              收藏

货 号
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#C2527H
20 x 0.05 ml
3,749.00

#C2527I
6 x 0.2 ml
2,839.00

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NEB 表达 E. coli 感受态细胞 ( 高效级 )

单独出售的组份

SOC Outgrowth 培养基
#B9020S 4 x 25 ml . . . . . . ¥939

优点

 常规 T7 表达
 无动物来源产品
 蛋白酶缺陷型 B 菌株

概述

广泛应用的 T7 表达 E. coli 菌株。

基因型

fhuA2 [lon] ompT gal (λ DE3) [dcm] ΔhsdS λ DE3 = λ sBamHIo ΔEcoRI-B int::
(lacI::PlacUV5::T7 gene1) i21 Δnin5

特性

• Lon 和 OmpT 蛋白酶缺失
• 抗 T1 噬菌体感染(fhuA2

转化效率

1–5 x 107 cfu/µg pUC19 DNA

抗性

T1 噬菌体(fhuA2

敏感性

氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素、呋喃妥因、壮观霉素、链霉素、四环素

随产品提供

SOC Outgrowth 培养基
pUC19 对照 DNA

Lemo21(DE3) E. coli 感受态细胞 #C2528J 12 x 0.05 ml-NEB酶试剂 New England Biolabs

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Lemo21(DE3) E. coli 感受态细胞                              收藏

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#C2528J
12 x 0.05 ml
4,229.00

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优点

 表达问题蛋白
 表达膜蛋白
 细胞周质表达的理想选择
 表达毒性蛋白
 表达存在可溶性问题的蛋白

概述

Lemo21(DE3)E. coli 感受态细胞为 T7 可控表达菌株,专为表达具有挑战性的重组蛋白而设计。它作为 BL21(DE3)的衍生菌株,不仅继承了其特点,还能够通过改变 T7 溶菌酶(lysY)的水平以控制表达水平,T7 溶菌酶为 T7 RNA 聚合酶的天然抑制剂。对蛋白表达的精准控制使得 Lemo21(DE3)成为表达膜蛋白、毒性蛋白、分泌蛋白以及存在可溶性问题蛋白的理想选择。

基因型

fhuA2 [lon] ompT gal (λ DE3) [dcm]ΔhsdS/ pLemo(CamR) λ DE3 = λ sBamHIo ΔEcoRI-Bint::(lacI::PlacUV5::T7 gene1) i21 Δnin 5pLemo = pACYC184-PrhaBAD-lysY

特性

• BL21(DE3)源增强型菌株
• 精准的表达调控
• 在 T7 菌株中表达范围最宽(0-2,000 μM 鼠李糖)
• 消除了形成包涵体的潜在可能

转化效率

高效级:1–3 x 107 cfu/μg pUC19 DNA

抗性

T1 噬菌体(fhuA2),氯霉素

敏感性

 氨苄青霉素、卡那霉素、呋喃妥因、壮观霉素、链霉素、四环素

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Lemo21(DE3) E. coli 感受态细胞

随产品提供

 L-鼠李糖溶液

pUC19 对照 DNA

NiCo21(DE3) E. coli 感受态细胞 #C2529H 20 x 0.05 ml-NEB酶试剂 New England Biolabs

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NiCo21(DE3) E. coli 感受态细胞                              收藏

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#C2529H
20 x 0.05 ml
7,009.00

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相关产品

Lemo21(DE3) E. coli 感受态细胞

优点

 常规表达时 BL21(DE3)的卓越替代品
 通过 IMAC 分离的目的蛋白纯度更佳
 无动物来源产品

概述

利用固相金属离子亲和层析(IMAC)分离含多聚赖氨酸标签的重组蛋白时,目的蛋白经常被大量的 E. coli 内源金属结合蛋白所污染。蛋白表达菌 NiCo21(DE3)通过改造,使 IMAC 组分中的 E. coli 蛋白污染减少到最低:GlmS 在突变后消除了与 IMAC 树脂结合的能力,另外 3 种蛋白(SlyD、ArnA 与 Can)在加上重组标签后,能够通过几丁质亲和层析快速去除。

基因型

can::CBD fhuA2 [lon] ompT gal (λ DE3)[dcm] arnA::CBD slyD::CBD glmS6Ala ΔhsdS λ DE3= λ sBamHIo ΔEcoRI-B int::(lacI::PlacUV5::T7 gene1)i21 Δnin5

特性

• 与 BL21(DE3)的生长特点一致
• Lon 和 OmpT 蛋白酶缺失

转化效率

1–5 x 107 cfu/µg pUC19 DNA

抗性

T1 噬菌体(fhuA2

敏感性

氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素、呋喃妥因、壮观霉素、链霉素、四环素

随产品提供

SOC Outgrowth 培养基
pUC19 对照 DNA

DEAE纤维素DE-52

DEAE纤维素DE-52

货号:BS207-100g

规格:100g

品牌:Jinpan

产品简介:
DEAE 纤维素 DE-52,一种柱色谱使用的弱碱性阴离子交换纤维素。不溶于水、酸、
碱和乙醇。采用平均粒径为 50µm 的颗粒型亲水高分子聚合物,表面又用大分子糖链接
枝,使它有更高的比表面积和更好的生物兼容性,保持更高载量,同时又具有更好的分辨率。由于比表面积大,平衡和洗脱的时间也更短。它经过接枝即使是纯化病毒,质粒等超大分子的物质,载量基本保持不变。
别名:DEAE 纤维素 52;离子交换纤维素;DEAE 纤维素 DE52
CAS:9013-34-7
外观(性状):预溶胀微粒,白色
凝胶类型:纤维素凝胶,离子交换型
结构成分:高度交联纤维素
粒径:50um
配基密度:40umol/ml
吸附载量:180mg HSA/ml
单位:瓶
储存条件:4℃
有效期: 1 年
应用:DEAE-纤维素,它采用平均粒径为 50 um 的颗粒型亲水高分子聚合物,表面又用大分子糖链接枝,使它有更高的比表面积和更好的生物兼容性,它在高流水下保持更高载量,同时又具有更好的分辨率,用于分离生物高分子。
使用方法:
1 色谱柱装填
(1)所需要用到的材料的温度要与色谱操作的温度一样,液体最好做脱气处理。填料可
直接称量需要的量用缓冲液溶涨一小时装柱即可,如果不好溶胀,可适当加热。
(2)在柱子下端加入 20%乙醇,以除去柱子中的空气,关闭柱子出口,在柱内保留少
量的 20%乙醇。20%乙醇容易产生气泡,可以在里面加 1%吐温避免气泡产生。也可以换成纯水装柱子,但是需要把填料中的 20%乙醇也换成纯水,具体的方法取需要体积的填料在抽滤漏斗上进行,也可以小心倾去填料上的 20%乙醇,再换成 5 倍体积的纯水,反复沉淀去上清,5 次左右就可以用于装柱子。
(3)此填料颗粒比较细,所以一定要注意柱子要选择合适的筛网,也可以取点填料加到
筛网上试试,如果没有问题再将填料连续倒入柱子时,要用玻璃棒的紧靠柱子内壁引流,以减少气泡的产生,让填料先自然沉降到填料体积不再变化,而填料和上面的液体很好分层,上层溶液完全澄清,就可以开泵用适当的流速压柱子,填料体积不再变化后,再把转换头紧顶在填料上就可以平衡柱子使用。使用的流速要小于装柱子的流速。
(4)在装柱子前,填料从冰箱中取出至少要室温放置 2-3 个小时,这样避免装柱子时由
于温度变化而使柱子中产生气泡。
2 蛋白的结合
样品的盐浓度和 pH 要尽量和平衡柱子的缓冲液一致,盐浓度过高或者 pH 太低也许挂
不上,所以要根据自己的样品做适当调整。
3 蛋白的洗脱
填料如果采用线性梯度洗脱,柱子的直径和高度比最好是大于 10,数值越大越有利于
分离,而且样品最好别上太多,可以按约 10mg/ml 上样,如果采用阶段洗脱的方法,装短粗柱子就可以,上样量也没有限制。阶段洗脱容易放大,重复性好,如果洗脱条件好完全可以得到和线性梯度一样或者更好。
4 再生清洗
(1)每次用完最好用 0.1M NaOH 含 2M NaCl 洗 5 个柱床体积,再用水洗 5 个柱床体
积,然后用 20%乙醇保存,使用 3-5 次后在水洗之后再用 70%的乙醇或 30%异丙醇(含1%吐温)洗 5 个柱床体积,最后 20%的乙醇流洗 5 个柱床体积。
(2)有机溶剂和水混合很容易产生气泡,为了避免这样情况,可以将配好的有机溶剂在
室温放置过夜,再使用,这样可以避免气泡进柱子而导致柱子不能正常使用。
注意:
1. 将本品置于通风、干燥的地方保存,不能冷冻。
2. 在装柱、使用和保存柱子的时候,要避免柱子流干,气泡进入。
3. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。
4. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
货号 BS207-100g
规格 100g
品牌 Jinpan
说明书下载 点击下载

DEAE-纤维素 DE-32

DEAE-纤维素 DE-32

货号:
D8900

品牌:
Jinpan

产品简介
有效期 1年
英文名称 Cellulose DE-32
储存条件 2-8℃
外观(性状) 白色粉末
单位
规格 25g

DEAE-纤维素,它采用平均粒径为50µm的颗粒型亲水高分子聚合物,表面又用大分子糖链接枝,使它有更高的比表面积和更好的生物兼容性,保持更高载量,同时又具有更好的分辨率。由于比表面积大,平衡和洗脱的时间也更短。它经过接枝即使是纯化病毒,质粒等超大分子的物质,载量基本保持不变。

备注:产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。

BL21(DE3)感受态细胞

BL21(DE3)感受态细胞

货号:
C1400

品牌:
Jinpan

产品简介
英文名称 E.coli BL21(DE3) Competent Cells
储存条件 -70℃保存,液氮保存至少一年,-70℃保存至少6个月
外观(性状) 干冰运输,单加10kg干冰费
单位
规格 10*100ul 20*100ul

本公司生产的BL21(DE3)感受态细胞是采用大肠杆菌BL21(DE3)菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测,转化效率可达107,-70℃保存6个月转化效率不改变。

基因型:F_ ompT hsdSB(rB_mB_)dcm gal(DE3)

:该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。

操作方法:(以下各步骤均为无菌操作)

1、将感受态细胞置于冰上融化,以下实验以100ul感受态细胞为例。

2、向感受态细胞悬液中加入需转化的目的DNA,注意目的DNA的体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一,轻轻旋转离心管以混匀内容物,冰浴放置30分钟。

3、将离心管置于42℃水浴中放置60-90秒,然后快速转移到冰浴中放置2-3分钟,注意不要摇动离心管。

4、向离心管中加入500ul无菌无抗的SOC或LB培养基,37℃ 180rpm振荡培养1小时。目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达,使菌体复苏。

5、取适量已转化的感受态细胞涂布含相应抗生素的SOC或LB平板,37℃倒置培养12-16小时。涂布用量可根据具体实验来调整,如转化的DNA总量较多,可取100ul左右的转化产物涂板;反之,如转化的DNA总量较少,可取200-300ul的转化产物涂板。过多菌液可以抑制细菌生长。如果预计的克隆较少,可通过离心后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。涂布剩余的菌液可4℃保存,如果次日的转化菌落数过少可以将剩下的菌液再涂布新的平板。

注意事项:

1、感受态细胞应保存在-70℃,不可反复冻融,否则其转化效率将会降低。

2、实验过程中应严格无菌操作,防止其它DNA或杂菌的污染,避免为以后的筛选、鉴定带来影响。

3、转化时,转化效率与外源DNA的浓度在一定范围内成正比,但当加入的外源DNA量过多或体积过大反而会降低转化效率。转化时DNA体积要小于感受态细胞体积的十分之一。

4、转化率的计算:转化率=产生菌落的总数/铺板DNA总量。5、为防止转化实验不成功,可以保留部分连接产物,以重新转化,将损失降到最低。