DEAE纤维素DE-52
货号:BS207-100g
规格:100g
品牌:Jinpan
货号 | BS207-100g |
规格 | 100g |
品牌 | Jinpan |
说明书下载 | 点击下载 |
DEAE纤维素DE-52
货号:BS207-100g
规格:100g
品牌:Jinpan
货号 | BS207-100g |
规格 | 100g |
品牌 | Jinpan |
说明书下载 | 点击下载 |
DEAE-纤维素 DE-32
有效期 | 1年 |
英文名称 | Cellulose DE-32 |
储存条件 | 2-8℃ |
外观(性状) | 白色粉末 |
单位 | 瓶 |
规格 | 25g |
DEAE-纤维素,它采用平均粒径为50µm的颗粒型亲水高分子聚合物,表面又用大分子糖链接枝,使它有更高的比表面积和更好的生物兼容性,保持更高载量,同时又具有更好的分辨率。由于比表面积大,平衡和洗脱的时间也更短。它经过接枝即使是纯化病毒,质粒等超大分子的物质,载量基本保持不变。
备注:产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。
BL21(DE3)感受态细胞
英文名称 | E.coli BL21(DE3) Competent Cells |
储存条件 | -70℃保存,液氮保存至少一年,-70℃保存至少6个月 |
外观(性状) | 干冰运输,单加10kg干冰费 |
单位 | 包 |
规格 | 10*100ul 20*100ul |
本公司生产的BL21(DE3)感受态细胞是采用大肠杆菌BL21(DE3)菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测,转化效率可达107,-70℃保存6个月转化效率不改变。
基因型:F_ ompT hsdSB(rB_mB_)dcm gal(DE3)
特 点:该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。
操作方法:(以下各步骤均为无菌操作)
1、将感受态细胞置于冰上融化,以下实验以100ul感受态细胞为例。
2、向感受态细胞悬液中加入需转化的目的DNA,注意目的DNA的体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一,轻轻旋转离心管以混匀内容物,冰浴放置30分钟。
3、将离心管置于42℃水浴中放置60-90秒,然后快速转移到冰浴中放置2-3分钟,注意不要摇动离心管。
4、向离心管中加入500ul无菌无抗的SOC或LB培养基,37℃ 180rpm振荡培养1小时。目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达,使菌体复苏。
5、取适量已转化的感受态细胞涂布含相应抗生素的SOC或LB平板,37℃倒置培养12-16小时。涂布用量可根据具体实验来调整,如转化的DNA总量较多,可取100ul左右的转化产物涂板;反之,如转化的DNA总量较少,可取200-300ul的转化产物涂板。过多菌液可以抑制细菌生长。如果预计的克隆较少,可通过离心后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。涂布剩余的菌液可4℃保存,如果次日的转化菌落数过少可以将剩下的菌液再涂布新的平板。
注意事项:
1、感受态细胞应保存在-70℃,不可反复冻融,否则其转化效率将会降低。
2、实验过程中应严格无菌操作,防止其它DNA或杂菌的污染,避免为以后的筛选、鉴定带来影响。
3、转化时,转化效率与外源DNA的浓度在一定范围内成正比,但当加入的外源DNA量过多或体积过大反而会降低转化效率。转化时DNA体积要小于感受态细胞体积的十分之一。
4、转化率的计算:转化率=产生菌落的总数/铺板DNA总量。5、为防止转化实验不成功,可以保留部分连接产物,以重新转化,将损失降到最低。
BL21(DE3)受体菌
储存条件 | -20℃,有效期1年 |
单位 | 袋 |
规格 | 1ml |
该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3
BL21(DE3)pLysS感受态细胞
英文名称 | BL21(DE3)pLysS Competent Cells |
储存条件 | -70℃保存,液氮保存至少一年,-70℃保存至少6个月 |
外观(性状) | 干冰运输,单加10kg干冰费 |
单位 | 包 |
规格 | 10*100ul 20*100ul |
本公司生产的BL21(DE3)pLysS感受态细胞是采用大肠杆菌BL21(DE3)pLysS菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测,转化效率可达107,-70℃保存6个月转化效率不发生改变。
基因型:F-, ompT, hsdSB(rB-mB-), dcm, gal(DE3), pLysS, Cmr
特 点:该菌株带有质粒pLysS,因此具有氯霉素抗性。质粒pLysS含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。
BL21(DE3)pLysS受体菌
英文名称 | BL21(DE3)pLysS受体菌 |
储存条件 | -20℃,有效期1年 |
单位 | 支 |
规格 | 1ml |
该菌株带有质粒pLysS,具有氯霉素抗性。该质粒含有表达T7溶菌酶的基因,T7溶菌酶能降低目的基因的背景表达水平,
DE-B缓冲溶液
英文名称 | DE-BbufferforAP-GX-250,165mL |
单位 | 瓶 |
规格 | 1 |
DE-A缓冲溶液
英文名称 | DE-AbufferforAP-GX-250,165mL |
单位 | 瓶 |
规格 | 1 |
Rosetta (DE3) 感受态细胞
英文名称 | Rosetta (DE3) |
储存条件 | -70℃保存,液氮保存至少一年,-70℃保存至少6个月 |
外观(性状) | 干冰运输,需加干冰费。 |
单位 | 包 |
规格 | 10*100ul 20*100ul |
OverExpressC43(DE3)感受态细胞
储存条件 | -70℃ |
单位 | 支 |
规格 | 10*100ul |
OverExpressC43(DE3)菌株适用于毒性蛋白的表达,来源于OverExpressC41(DE3)菌株。OverExpress C41(DE3)是通过毒性蛋白在BL21(DE3)内过表达筛选实验得到的基因突变菌株,该菌株的基因突变降低了T7 RNA聚合酶的酶活性,下调毒性蛋白的表达量使细胞存活。OverExpress C43(DE3)菌株是通过另一个毒性蛋白对OverExpress C41(DE3)菌株再次进行毒性耐受性实验获得的,OverExpress C43(DE3)菌株比OverExpress C41(DE3)更加耐受毒性蛋白。OverExpress C43(DE3)菌株也可以表达常规蛋白,相同条件下,蛋白表达量略低于BL21(DE3)菌株。OverExpressC43(DE3)菌株属于B菌株,lon和ompT蛋白酶缺陷型。OverExpress C43(DE3)感受态细胞由特殊工艺制成,pUC19质粒检测转化效率可达1×107 cfu/μg DNA。