DEAE纤维素DE-52

DEAE纤维素DE-52

货号:BS207-100g

规格:100g

品牌:Jinpan

产品简介:
DEAE 纤维素 DE-52,一种柱色谱使用的弱碱性阴离子交换纤维素。不溶于水、酸、
碱和乙醇。采用平均粒径为 50µm 的颗粒型亲水高分子聚合物,表面又用大分子糖链接
枝,使它有更高的比表面积和更好的生物兼容性,保持更高载量,同时又具有更好的分辨率。由于比表面积大,平衡和洗脱的时间也更短。它经过接枝即使是纯化病毒,质粒等超大分子的物质,载量基本保持不变。
别名:DEAE 纤维素 52;离子交换纤维素;DEAE 纤维素 DE52
CAS:9013-34-7
外观(性状):预溶胀微粒,白色
凝胶类型:纤维素凝胶,离子交换型
结构成分:高度交联纤维素
粒径:50um
配基密度:40umol/ml
吸附载量:180mg HSA/ml
单位:瓶
储存条件:4℃
有效期: 1 年
应用:DEAE-纤维素,它采用平均粒径为 50 um 的颗粒型亲水高分子聚合物,表面又用大分子糖链接枝,使它有更高的比表面积和更好的生物兼容性,它在高流水下保持更高载量,同时又具有更好的分辨率,用于分离生物高分子。
使用方法:
1 色谱柱装填
(1)所需要用到的材料的温度要与色谱操作的温度一样,液体最好做脱气处理。填料可
直接称量需要的量用缓冲液溶涨一小时装柱即可,如果不好溶胀,可适当加热。
(2)在柱子下端加入 20%乙醇,以除去柱子中的空气,关闭柱子出口,在柱内保留少
量的 20%乙醇。20%乙醇容易产生气泡,可以在里面加 1%吐温避免气泡产生。也可以换成纯水装柱子,但是需要把填料中的 20%乙醇也换成纯水,具体的方法取需要体积的填料在抽滤漏斗上进行,也可以小心倾去填料上的 20%乙醇,再换成 5 倍体积的纯水,反复沉淀去上清,5 次左右就可以用于装柱子。
(3)此填料颗粒比较细,所以一定要注意柱子要选择合适的筛网,也可以取点填料加到
筛网上试试,如果没有问题再将填料连续倒入柱子时,要用玻璃棒的紧靠柱子内壁引流,以减少气泡的产生,让填料先自然沉降到填料体积不再变化,而填料和上面的液体很好分层,上层溶液完全澄清,就可以开泵用适当的流速压柱子,填料体积不再变化后,再把转换头紧顶在填料上就可以平衡柱子使用。使用的流速要小于装柱子的流速。
(4)在装柱子前,填料从冰箱中取出至少要室温放置 2-3 个小时,这样避免装柱子时由
于温度变化而使柱子中产生气泡。
2 蛋白的结合
样品的盐浓度和 pH 要尽量和平衡柱子的缓冲液一致,盐浓度过高或者 pH 太低也许挂
不上,所以要根据自己的样品做适当调整。
3 蛋白的洗脱
填料如果采用线性梯度洗脱,柱子的直径和高度比最好是大于 10,数值越大越有利于
分离,而且样品最好别上太多,可以按约 10mg/ml 上样,如果采用阶段洗脱的方法,装短粗柱子就可以,上样量也没有限制。阶段洗脱容易放大,重复性好,如果洗脱条件好完全可以得到和线性梯度一样或者更好。
4 再生清洗
(1)每次用完最好用 0.1M NaOH 含 2M NaCl 洗 5 个柱床体积,再用水洗 5 个柱床体
积,然后用 20%乙醇保存,使用 3-5 次后在水洗之后再用 70%的乙醇或 30%异丙醇(含1%吐温)洗 5 个柱床体积,最后 20%的乙醇流洗 5 个柱床体积。
(2)有机溶剂和水混合很容易产生气泡,为了避免这样情况,可以将配好的有机溶剂在
室温放置过夜,再使用,这样可以避免气泡进柱子而导致柱子不能正常使用。
注意:
1. 将本品置于通风、干燥的地方保存,不能冷冻。
2. 在装柱、使用和保存柱子的时候,要避免柱子流干,气泡进入。
3. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。
4. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
货号 BS207-100g
规格 100g
品牌 Jinpan
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DEAE-纤维素 DE-32

DEAE-纤维素 DE-32

货号:
D8900

品牌:
Jinpan

产品简介
有效期 1年
英文名称 Cellulose DE-32
储存条件 2-8℃
外观(性状) 白色粉末
单位
规格 25g

DEAE-纤维素,它采用平均粒径为50µm的颗粒型亲水高分子聚合物,表面又用大分子糖链接枝,使它有更高的比表面积和更好的生物兼容性,保持更高载量,同时又具有更好的分辨率。由于比表面积大,平衡和洗脱的时间也更短。它经过接枝即使是纯化病毒,质粒等超大分子的物质,载量基本保持不变。

备注:产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。

BL21(DE3)感受态细胞

BL21(DE3)感受态细胞

货号:
C1400

品牌:
Jinpan

产品简介
英文名称 E.coli BL21(DE3) Competent Cells
储存条件 -70℃保存,液氮保存至少一年,-70℃保存至少6个月
外观(性状) 干冰运输,单加10kg干冰费
单位
规格 10*100ul 20*100ul

本公司生产的BL21(DE3)感受态细胞是采用大肠杆菌BL21(DE3)菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测,转化效率可达107,-70℃保存6个月转化效率不改变。

基因型:F_ ompT hsdSB(rB_mB_)dcm gal(DE3)

:该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。

操作方法:(以下各步骤均为无菌操作)

1、将感受态细胞置于冰上融化,以下实验以100ul感受态细胞为例。

2、向感受态细胞悬液中加入需转化的目的DNA,注意目的DNA的体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一,轻轻旋转离心管以混匀内容物,冰浴放置30分钟。

3、将离心管置于42℃水浴中放置60-90秒,然后快速转移到冰浴中放置2-3分钟,注意不要摇动离心管。

4、向离心管中加入500ul无菌无抗的SOC或LB培养基,37℃ 180rpm振荡培养1小时。目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达,使菌体复苏。

5、取适量已转化的感受态细胞涂布含相应抗生素的SOC或LB平板,37℃倒置培养12-16小时。涂布用量可根据具体实验来调整,如转化的DNA总量较多,可取100ul左右的转化产物涂板;反之,如转化的DNA总量较少,可取200-300ul的转化产物涂板。过多菌液可以抑制细菌生长。如果预计的克隆较少,可通过离心后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。涂布剩余的菌液可4℃保存,如果次日的转化菌落数过少可以将剩下的菌液再涂布新的平板。

注意事项:

1、感受态细胞应保存在-70℃,不可反复冻融,否则其转化效率将会降低。

2、实验过程中应严格无菌操作,防止其它DNA或杂菌的污染,避免为以后的筛选、鉴定带来影响。

3、转化时,转化效率与外源DNA的浓度在一定范围内成正比,但当加入的外源DNA量过多或体积过大反而会降低转化效率。转化时DNA体积要小于感受态细胞体积的十分之一。

4、转化率的计算:转化率=产生菌落的总数/铺板DNA总量。5、为防止转化实验不成功,可以保留部分连接产物,以重新转化,将损失降到最低。

BL21(DE3)受体菌

BL21(DE3)受体菌

货号:
C1410

品牌:
Jinpan

产品简介
储存条件 -20℃,有效期1年
单位
规格 1ml
特点:

该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3

区,该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。

BL21(DE3)pLysS感受态细胞

BL21(DE3)pLysS感受态细胞

货号:
C1500

品牌:
Jinpan

产品简介
英文名称 BL21(DE3)pLysS Competent Cells
储存条件 -70℃保存,液氮保存至少一年,-70℃保存至少6个月
外观(性状) 干冰运输,单加10kg干冰费
单位
规格 10*100ul 20*100ul

  本公司生产的BL21(DE3)pLysS感受态细胞是采用大肠杆菌BL21(DE3)pLysS菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测,转化效率可达107,-70℃保存6个月转化效率不发生改变。
基因型:F-, ompT, hsdSB(rB-mB-), dcm, gal(DE3), pLysS, Cmr
特  点:该菌株带有质粒pLysS,因此具有氯霉素抗性。质粒pLysS含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。

BL21(DE3)pLysS受体菌

BL21(DE3)pLysS受体菌

货号:
C1510

品牌:
Jinpan

产品简介
英文名称 BL21(DE3)pLysS受体菌
储存条件 -20℃,有效期1年
单位
规格 1ml
特点:

该菌株带有质粒pLysS,具有氯霉素抗性。该质粒含有表达T7溶菌酶的基因,T7溶菌酶能降低目的基因的背景表达水平,

但不干扰IPTG诱导的表达。该菌适合毒性蛋白和非毒性蛋白的表达。

OverExpressC43(DE3)感受态细胞

OverExpressC43(DE3)感受态细胞

货号:
C1140

品牌:
Jinpan

产品简介
储存条件 -70℃
单位
规格 10*100ul

OverExpressC43(DE3)菌株适用于毒性蛋白的表达,来源于OverExpressC41(DE3)菌株。OverExpress C41(DE3)是通过毒性蛋白在BL21(DE3)内过表达筛选实验得到的基因突变菌株,该菌株的基因突变降低了T7 RNA聚合酶的酶活性,下调毒性蛋白的表达量使细胞存活。OverExpress C43(DE3)菌株是通过另一个毒性蛋白对OverExpress C41(DE3)菌株再次进行毒性耐受性实验获得的,OverExpress C43(DE3)菌株比OverExpress C41(DE3)更加耐受毒性蛋白。OverExpress C43(DE3)菌株也可以表达常规蛋白,相同条件下,蛋白表达量略低于BL21(DE3)菌株。OverExpressC43(DE3)菌株属于B菌株,lon和ompT蛋白酶缺陷型。OverExpress C43(DE3)感受态细胞由特殊工艺制成,pUC19质粒检测转化效率可达1×107 cfu/μg DNA。