感受态细胞E.coli JM109 Competent Cells酶试剂盒Takara Clontech

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感受态细胞E.coli JM109 Competent Cells
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Takara 9052 E.coli JM109 Competent Cells 100 μl × 10 ¥309 感受态细胞E.coli JM109 Competent Cells 感受态细胞E.coli JM109 Competent Cells 感受态细胞E.coli JM109 Competent Cells
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感受态细胞E.coli JM109 Competent Cells
感受态细胞E.coli JM109 Competent Cells  
感受态细胞E.coli JM109 Competent Cells
 
 
■ 制品内容感受态细胞E.coli JM109 Competent Cells
E.coli JM109 Competent Cells 100 μl × 10
pBR322 plasmid ( 0.1 ng/μl) 10 μl
SOC Medium* 1 ml × 10
*SOC Medium:     2%   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
  10 mM   MgSO4
  10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
Takara在Hanahan's method基础上进行了改良,制备出E.coli JM109 Competent Cells。
由于E. coli JM109 Competent Cells含有F' 质粒,可以作为M13噬菌体载体的宿主细胞,也可用于制作DNA文库或进行亚克隆。当转化pUC载体或转染M13噬菌体载体DNA时,重组体可以利用感受态细胞的β-半乳糖苷酶的α-互补性,通过添加X-Gal和IPTG很容易地筛选出来。
X-Gal : 5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside
IPTG : Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside
 
■ 细胞浓度
1-2×109 bacteria/ml
 
■ Genotype
E. coli JM109: recA1 , endA1 , gyrA96 , thi-1 , hsdR17 (rk-mk+), e14-(mcrA- ) supE44 , relA1 , Δ(lac-proAB )/F'[traD36 , proAB+, lacIq, lacZΔM15]
 
■ 保存
-80℃。
注意: 如果不在-80℃下保存,转化效率将会降低。此时,在使用前,请使用附带的pBR332 对照质粒来确认细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 转化效率
转入1 ng 的pBR322,涂于含有Amp+ 的选择培养基进行筛选。
转化效率 : >1 x 108 transformants/μg pBR322
 
■ 注意事项
1. 将感受态细胞从-80℃冷冻取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。
2. 可使用1.5 ml的microcentrifuge tubes代替14 ml的圆底tubes (BD company Code: 352059 或 352057等),但效率可能会降低。
3. 当使用100 μl感受态细胞时,加入的高纯度DNA样品不超过10 ng。否则转化效率会降低。
4. 当改变感受态细胞数量或tubes类型时,适当调整反应条件。例如,当使用1.5 ml microcentrifuge tubes时,42℃放置60秒,而不是45秒。
5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基。此时,转化效率可能会降低。
    ·L-broth : Ingredient per liter water  
  Tryptone 10 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
    用1 N NaOH调整pH7.5并高压灭菌。
    ·φ b-broth: Ingredient per liter water  
  Tryptone 20 g  
  Yeast extract 5 g  
  MgSO4·7H2O 5 g  
    用1 N KOH调整pH7.5并高压灭菌。
6. YT soft agar: Ingredient per 100 ml water  
  Tryptone 0.8 g  
  Yeast extract 0.5 g  
  NaCl 0.5 g  
    用1 N NaOH调整pH7.6,添加agar至浓度为0.6%,并高压灭菌。
7. 制备宿主细胞。
8. L-plate: Ingredient per liter water  
  Tryptone 10 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
    用1 N NaOH调整pH到7.5,加入agar至浓度为1.5%,并高压灭菌。
9. 当加入X-Gal或IPTG时,按照以下方法操作:
   ·将100 mM IPTG按100-300 μl/100 ml的比例加入到agar medium 中,若使用soft agar,比例为 25 μl/3 ml。
   ·将20 mg /ml X-Gal(溶解于二甲基甲酰胺)按200-300 μl/100 ml的比例加入到agar medium中,若使用soft agar,比例为50 μl/3 ml。
10. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是,如果再次冻结不可避免,将细胞置于干冰/乙醇中快速冷冻,置于-80℃保存。但是,转化效率可能会降低至少一个数量级。
 
 

页面更新:2024-01-25 14:34:33

NEB 5-alpha E. coli 电转级感受态细胞 #C2989K 6 x 0.1 ml-NEB酶试剂 New England Biolabs

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TG1感受态细胞

TG1感受态细胞

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C1170

品牌:
Jinpan

产品简介
储存条件 -70℃
单位
规格 10*100ul

TG1菌株来源于大肠杆菌K-12,主要用于噬菌体展示(Phage Display),也可进行M13噬菌体相关的实验,也可用于普通质粒的克隆构建及提取。lacZΔM15的存在可进行α互补原理上的蓝白斑筛选实验。由于该菌株不含核酸酶endA1突变,提取的质粒中核酸酶含量较高,需用去蛋白液处理。TG1感受态细胞由特殊工艺制成,经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg DNA。

T7 表达 E. coli 感受态细胞 ( 高效级 ) #C2566H 20 x 0.05 ml-NEB酶试剂 New England Biolabs

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T7 表达 E. coli 感受态细胞 ( 高效级 )

 

单独出售的组分

SOC Outgrowth 培养基
#B9020S 4 x 25 ml . . . . . . . . ¥939

优点

 BL21 源增强型菌株
 最常用的 T7 表达菌株
 菌落快速培养
 无动物来源产品

概述

为 BL21 源增强型菌株,用于 T7 表达。

基因型

fhuA2 lacZ::T7 gene1 [lon] ompT gal sulA11 R(mcr-73::miniTn10–TetS)2 [dcm] R(zgb-210::Tn10– TetS)endA1 Δ(mcrC-mrr)114::IS10

特性

• 在 lac 操纵子上有 T7 RNA 聚合酶,无 λ 前噬菌体
• Lon 和 OmpT 蛋白酶缺失
• 不受限于 DNA 是否甲基化

转化效率

高效级:0.6–1 x 109 cfu/μg pUC19 DNA

抗性

T1 噬菌体(fhuA2)、呋喃妥因

敏感性

氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素、壮观霉素、链霉素、四环素

随产品提供

SOC Outgrowth 培养基
pUC19 对照 DNA

NEB10-beta感受态细胞

NEB10-beta感受态细胞

货号:
C1550

品牌:
Jinpan

产品简介
储存条件 -70℃
单位
规格 20*100ul

本公司生产的NEB 10-beta感受态细胞是采用大肠杆菌NEB 10-beta菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测,转化效率可达108 cfu/μg,-70℃保存6个月转化效率不发生改变。

DH5α-T1感受态细胞

DH5α-T1感受态细胞

货号:
C1180

品牌:
Jinpan

产品简介
储存条件 -70℃
单位
规格 10*100ul

DH5α-T1为常规DH5α改进型菌株。缺失核酸酶(endA1)基因,提高质粒的产量和质量;重组酶缺陷型(recA1)减少插入片段的同源重组概率,保证了插入DNA的稳定性。由于lacZΔM15的存在以及lacIq基因的缺失,故不需要加IPTG,只需要添加X-gal就可以进行基于α互补原理上的蓝白斑筛选实验。DH5α-T1在基因组tonA区域的突变使菌株获得抵抗T1和T5噬菌体感染的能力。DH5α-T1感受态细胞由特殊工艺制成,pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg DNA。

dam–/dcm– E. coli 感受态细胞 #C2925H 20 x 0.05 ml-NEB酶试剂 New England Biolabs

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#C2925H
20 x 0.05 ml
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6 x 0.2 ml
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dam–/dcm– E. coli 感受态细胞

单独出售的组份

SOC Outgrowth 培养基
#B9020S 4 x 25 ml . . . . . . ¥939

优点

 适用于培养无 Dam 和 Dcm 甲基化的质粒
 无动物来源产品

概述

甲基转移酶缺失的 E. coli 感受态细胞,适用于无 Dam 和 Dcm 甲基化质粒的生长。

基因型

ara-14 leuB6 fhuA31 lacY1 tsx78 glnV44 galK2 galT22 mcrA dcm-6 hisG4 rfbD1 R(zgb210::Tn10) Tet S  endA1 rspL136 (Str R) dam13::Tn9 (CamR) xylA-5 mtl-1 thi-1 mcrB1 hsdR2

特性

• 适用于无 Dam 和 Dcm 甲基化质粒的培养
• 缺失非特异性核酸内切酶 I(endA1)活性,可用于制备高质量质粒

转化效率

1–3 x 106 cfu/µg pUC19 DNA

抗性

T1 噬菌体(fhuA31)、氯霉素、呋喃妥因、链霉素

敏感性

氨苄青霉素、卡那霉素、壮观霉素、四环素

随产品提供

SOC Outgrowth 培养基
pUC19 对照 DNA

SHuffle T7 E. coli 感受态细胞 #C3026J 12 x 0.05 ml-NEB酶试剂 New England Biolabs

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#C3026J
12 x 0.05 ml
4,229.00

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优点

 有助于细胞质中蛋白质二硫键的折叠
 T7 表达
 K12 菌株
 无动物来源产品

概述

T7 表达菌株,在细胞质中正确折叠含有多个二硫键重组蛋白的能力更强。

基因型

F´ lac, pro, lacIq / Δ(ara-leu)7697 araD13fhuA2 lacZ::T7 gene1 Δ(phoA)Pvull phoR ahpC* galE(or U) galKλatt::pNEB3-r1-cDsbC (SpecR, laclq) ΔtrxBrpsL150(StrR)Δgor Δ(malF)3

转化效率

1 x 106 cfu/μg pUC19 DNA

抗性

T1 噬菌体(fhuA2)、呋喃妥因、壮观霉素、链霉素

敏感性

氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素、四环素
* 可能观察到对低水平的链霉素存在抗性。

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Stellar化学转化感受态细胞酶试剂盒Takara Clontech

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Stellar化学转化感受态细胞
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
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Clontech 636766 Stellar Competent Cells 50 x 100 μl ¥8,728 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞
Clontech 636767 Stellar Competent Cells (96-well plate) 96 x 20 μl ¥5,893 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞
Clontech 636764 Stellar Competent Cells (dam-/dcm-) 10 transformations ¥2,709 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞
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Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞
 
Stellar化学转化感受态细胞
Stellar化学转化感受态细胞  
Stellar化学转化感受态细胞
 
 
Stellar Competent Cells属于E. coli HST08细胞系,具有很高的转化效率,可用于多种应用:cDNA或基因组DNA文库的制备,长片段基因组文库的构建,亚克隆,甚至甲基化DNA的克隆。Stellar Competent Cells缺失切断外源甲基化DNA的基因簇(mrr-hsdRMS-mcrBC and mcrA),所以可用于克隆甲基化DNA。 转化包含lacZ alpha基因的载体时,也可以使用Stellar Competent Cells进行蓝白筛选,例如alpha互补。 Stellar Competent Cells是Clontech's In-Fusion Cloning Kits配套使用的理想选择。
 
Stellar Competent Cells (dam/dcm)
Stellar Competent Cells (dam/dcm)属于E. coli HST04细胞系,缺失了甲基化DNA所必须的遗传因子(damdcm)。通常被dam或dcm甲基化而抑制的限制酶可以切断由该产品制备的质粒。
 
产品详情请点击:Stellar化学转化感受态细胞
 
 

页面更新:2019-11-05 09:50:57

NiCo21(DE3) E. coli 感受态细胞 #C2529H 20 x 0.05 ml-NEB酶试剂 New England Biolabs

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NiCo21(DE3) E. coli 感受态细胞                              收藏

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Lemo21(DE3) E. coli 感受态细胞

优点

 常规表达时 BL21(DE3)的卓越替代品
 通过 IMAC 分离的目的蛋白纯度更佳
 无动物来源产品

概述

利用固相金属离子亲和层析(IMAC)分离含多聚赖氨酸标签的重组蛋白时,目的蛋白经常被大量的 E. coli 内源金属结合蛋白所污染。蛋白表达菌 NiCo21(DE3)通过改造,使 IMAC 组分中的 E. coli 蛋白污染减少到最低:GlmS 在突变后消除了与 IMAC 树脂结合的能力,另外 3 种蛋白(SlyD、ArnA 与 Can)在加上重组标签后,能够通过几丁质亲和层析快速去除。

基因型

can::CBD fhuA2 [lon] ompT gal (λ DE3)[dcm] arnA::CBD slyD::CBD glmS6Ala ΔhsdS λ DE3= λ sBamHIo ΔEcoRI-B int::(lacI::PlacUV5::T7 gene1)i21 Δnin5

特性

• 与 BL21(DE3)的生长特点一致
• Lon 和 OmpT 蛋白酶缺失

转化效率

1–5 x 107 cfu/µg pUC19 DNA

抗性

T1 噬菌体(fhuA2

敏感性

氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素、呋喃妥因、壮观霉素、链霉素、四环素

随产品提供

SOC Outgrowth 培养基
pUC19 对照 DNA