呼吸道合胞病毒研究

呼吸道合胞病毒研究

人类呼吸道合胞病毒 (Human Respiratory Syncytial Virus (RSV))是一种不容易检出的呼吸道病原体。经常导致婴儿、小孩、老人等免疫力较为低下或是需要长期照护的人群的死亡。RSV主要透过气溶胶或是近距离接触感染。一般人大多在出生后的两年内受到首次RSV感染,尔后在小孩与成人时期经常会发生再次感染。虽然与流行感冒病毒相比,RSV在临床上的症状没那么严重,但依然造成了全球每年约250,000名大人与60,000名儿童的死亡。

RSV属于肺炎病毒科(Pneumoviridae family),和同科病毒一样,外观型态多样(可能是长条型或球型)且外层包覆有套膜。其15.2kb的基因体搭载于负链单股RNA上,包含可翻译为11个蛋白质的10个基因(1),包括: 位于外层套膜上的用于附着的G蛋白(attachment glycoprotein,附着糖蛋白)、协助与宿主细胞膜进行融合的F蛋白(fusion glycoprotein,融合糖蛋白)以及SH蛋白(small hydrophobic protein,小疏水蛋白);位于内层套膜上的M蛋白(matrix protein, 基质蛋白);组成核壳体(ribonucleocapsid) 的N蛋白(nucleoprotein, 核蛋白)、P蛋白(phosphoprotein, 磷酸蛋白)与L蛋白(large protein, 大蛋白)、M2-1转录因子蛋白;另外还有M2-2调控蛋白以及非结构蛋白NS-1与NS-2。

RSV可分为A、B两个主要的抗原群体,两群体在蛋白质的表现上多有差异,其中主要用来定义抗原群体分类的是帮助附着宿主用的G蛋白。有趣的是,在激活中和抗体与制造有效疫苗对抗A和B两种RSV的试验中,反倒是融合前型态的F蛋白的theta位点被证明是最佳的RSV免疫抗原因子(2)。虽然价格高昂且半衰期短,但能对抗F蛋白的palivizuma是当下唯一获得核可上市的RSV治疗用单株抗体,主要施打对象为具有感染高风险性的婴幼儿。为了弥补当下治疗方法的不足,有许多直接对抗融合前型态F蛋白的单株抗体也加入了研发试验的行列中。

除了治疗方法之外,RSV检验方法也是临床科研的重点之一。尽管目前有数个用于检出RSV的方法,其中最值得信赖的还是相对耗时的鼻腔黏膜样本核酸测试(RT-PCR)。利用抗体测试进行实时检验,除了可以更快速的帮助诊断之外,未来也能协助进行更有效率的早期干预。因此,为了支持RSV基础科研,GeneTex开拓了一系列对抗G蛋白、F蛋白、N蛋白与M2蛋白的单克隆与多克隆抗体清单。另外,为了优化整体项目并增强未来RSV检出功效,GeneTex更进一步研发相关的重组兔单克隆抗体,如N蛋白抗体。这些N蛋白抗体不只具有优异的抗原亲和力,而且也通过了酶联免疫吸附测定(ELISA)、夹心法酶联免疫吸附测定(sandwich ELISA)以及侧向层析(lateral flow assay)的验证。此外,这些抗体还适用于Western blot、免疫沉淀(immunoprecipitation)与免疫组化(immunocytochemistry)等实验应用。

详情请参见下方重点产品与信息,也欢迎联系我们或代理商上海金畔生物。

精选呼吸道合胞病毒抗体

目录号

产品名

应用

GTX70381

Respiratory Syncytial virus A2 G protein antibody

WB, ELISA, IHC

GTX70382

Respiratory Syncytial virus B1 G protein antibody

WB, ELISA

GTX80785

Respiratory Syncytial virus Fusion protein antibody [0641]

ICC/IF, ELISA, Neutralizing/Inhibition, Sandwich ELISA

GTX39261

Respiratory Syncytial virus Fusion protein antibody [631]

ICC/IF, ELISA, Lateral Flow, Sandwich ELISA

GTX40697

Respiratory Syncytial virus Fusion protein antibody [RSV3216(B016)]

WB, ICC/IF, FACS, IP, ELISA, EM

GTX70383

Respiratory Syncytial virus M2 antibody

WB, ELISA

GTX39255

Respiratory Syncytial virus Nucleoprotein antibody [25-2]

Dot, Lateral Flow

GTX39250

Respiratory Syncytial virus Nucleoprotein antibody [671]

ICC/IF, ELISA

 

精选重组呼吸道合胞病毒抗体

目录号

产品名

应用

GTX636648

Respiratory Syncytial Virus Nucleoprotein antibody [HL1246]

WB, ICC/IF, IP, ELISA, Lateral Flow,

Sandwich ELISA

GTX636649

Respiratory Syncytial Virus Nucleoprotein antibody [HL1247]

WB, ELISA, Lateral Flow, Sandwich ELISA

GTX636650

Respiratory Syncytial Virus Nucleoprotein antibody [HL1248]

WB, ICC/IF, IP, ELISA, Lateral Flow, Sandwich ELISA

GTX636705

Respiratory Syncytial Virus Nucleoprotein antibody [HL1291]

WB, ELISA, Sandwich ELISA

GTX636709

Respiratory Syncytial Virus Nucleoprotein antibody [HL1295]

WB, ICC/IF, ELISA, Sandwich ELISA

GTX636710

Respiratory Syncytial Virus Nucleoprotein antibody [HL1296]

WB, ICC/IF, ELISA, Sandwich ELISA

GTX636711

Respiratory Syncytial Virus type A Nucleoprotein antibody [HL1297]

WB, ICC/IF, IP, ELISA, Sandwich ELISA

推荐使用于夹心酶联吸附分析之呼吸道合胞病毒抗体配对

呼吸道合胞病毒研究


GeneTex重组呼吸道合胞病毒抗体与他牌高引用克隆抗体之比较

呼吸道合胞病毒研究

呼吸道合胞病毒研究

使用间接酶联吸附分析演示不同抗体对于A型 (图A) 与B型 (图B) 呼吸道合胞病毒核衣壳蛋白敏感度的比较: (1)蓝色系线条: GeneTex重组呼吸道合胞病毒核衣壳蛋白抗体GTX636648、 GTX636649以及GTX636650。(2)红色系线条: 他牌呼吸道合胞病毒高引用克隆抗体。

推荐使用于夹心酶联吸附分析之呼吸道合胞病毒抗体配对

呼吸道合胞病毒研究

Capture Antibody :

GTX636649 [HL1247]

Detection Antibody :

GTX636648 [HL1246]

呼吸道合胞病毒研究

Capture Antibody :

GTX636650 [HL1248]

Detection Antibody : 

GTX636648 [HL1246]

重组呼吸道合胞病毒抗体之结合亲和力

目录号

克隆

EC50 RSV A NP(GTX136751-pro)

EC50 RSV B NP(GTX136931-pro)

GTX636648

HL1246

13.6 pM

15.4 pM

GTX636649

HL1247

  3.8 pM

15.9 pM

GTX636650

HL1248

  8.9 pM

10.1 pM

GTX636705

HL1291

10.7 pM

19.0 pM

GTX636709

HL1295

19.8 pM

105.4 pM

GTX636710

HL1296

29.0 pM

170.8 pM

GTX636711*

HL1297

16.7 pM

2854.8 pM

* GTX636711为A型呼吸道合胞病毒核衣壳蛋白之专一抗体


呼吸道合胞病毒重组核衣壳蛋白

目录号

产品名

应用

GTX136751-pro

Respiratory Syncytial Virus type A Nucleoprotein, DDDDK tag

WB, ELISA, Lateral Flow, Sandwich ELISA

GTX136931-pro

Respiratory Syncytial Virus type B Nucleoprotein, DDDDK tag

WB, ELISA, Sandwich ELISA


 重点产品

呼吸道合胞病毒研究

Respiratory Syncytial Virus type A Nucleoprotein, DDDDK tag (GTX136751-pro)

Respiratory Syncytial Virus type BNucleoprotein, DDDDK tag (GTX136931-pro)

呼吸道合胞病毒研究

Respiratory Syncytial Virus Nucleoprotein antibody [HL1248] (GTX636650)

Respiratory Syncytial Virus type A Nucleoprotein antibody [HL1297] (GTX636711)

参考文献

Nat Rev Microbiol. 2019 Apr;17(4):233-245.

Pathogens. 2022 Nov 11;11(11):1324.


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登革热病毒抗体推荐

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The Dengue virus (DEN) is of the genus Flavivirus and possesses a positive-strand RNA genome of approximately 10.6 kb that contains a single open-reading frame encoding for a polyprotein, which can be further cleaved by cellular and viral proteases into three structural proteins (capsid protein C, membrane protein M, envelope protein E), and seven non-structural proteins (NS 1, NS2a, NS2b, NS3, NS4a, NS4b, NS5). There are four serotypes (DEN 1-4), though there is certainly genotypic variability in individual viral genomes within each serotype. This variability is thought to have minimal clinical significance , as human infection from any of the four serotypes results in long-term immunity to that serotype . However, cross-immunity between serotypes is of much shorter duration , meaning that many people are victims of sequential infection by different serotypes. This is clinically very important, as sequential infection appears to be a risk factor for more serious disease manifestations.


登革热病毒抗体推荐

Dengue Virus Protein Schematic Diagram (Non-Structural Proteins (Orange)

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Dengue virus 1, 2, 3 & 4 antibody [D1-11 (3)] (GTX29202)                                NS1 (Dengue virus ) antibody [GT1 061] (GTX630SS7)
Dengue virus antibody detects Dengue virus 1 protein at                                 NS1 antibody detects NS1 (Dengue virus) protein at 
cytoplasm by immunofluorescent analysis                                                          cytoplasm by immunofluorescent analysis
登革热病毒抗体推荐

Envelope protein (Dengue virus) antibody [GT214] (GTX629116)                   WB analysis for all blots
Envelope protein antibody detects Envelope protein (Dengue                         A: BHK-21; B: DEN2-infecled BHK-21; C: JEV-infecled BHK
virus) protein at cytoplasm by immunofluorescent analysis                             -21 Blols probed wilh Rb pAb 10 (Ieft 10 righl): NS1 (GTX124
                                                                                                                                      280);
 NS2B (GTX124246); NS3 (GTX124252); NS4B (GTX124
                                                                                                                                      250); NS5 (GTX124253)

 

 Cat.NO
 Product
 Reactivity
 Host&Clonality
 Application
GTX29202
Dengue Virus 1, 2, 3 & 4 antibody [D1-11(3)]
DEN
Ms mAb IgG2a
Dot blot, ELlSA, ICC/IF, WB
GTX41428
 Dengue Virus Type 2 antibody [NYRDeng2]
DEN2
Ms mAb IgG1
ELISA. WB
GTX43295
 Dengue Types 1,2,3,4 antibody [BDI419]
DEN
Ms mAb IgG2a
Dot blot, ELlSA, ICC川F
GTX41437
 Dengue Virus antibody [5161]
DEN
Ms mAb IgG2a
ELISA
GTX41430 
 Dengue Virus Type 2 antibody [3H5.1]
DEN2
Ms mAb IgG1
ICC/IF
GTX43296
 Dengue Type 2, envelope antibody [B932M]
DEN2
Ms mAb IgG1
ICC/IF
GTX124247
Capsid Protein (Dengue Virus) antibody
Capsid (DEN)
Rb pAb
WB
GTX103343
Capsid Protein (Dengue Virus) antibody
Capsid (DEN)
Rb pAb
ICC/IF. WB
GTX128092
PrM (Dengue Virus) antibody
PrM (DEN)
Rb pAb
WB
GTX128093
PrM (Dengue Virus) antibody
PrM (DEN)
Rb pAb
WB
GTX127277
Envelope protein (Dengue Virus) antibody
Envelope (DEN)
Rb pAb
ICC/IF. WB
GTX629116
Envelope protein (Dengue Virus) antibody [GT214]
Envelope (DEN)
Ms mAb IgG2a
ICC/IF. WB
GTX629117
Envelope protein (Dengue Virus) antibody [GT643]
Envelope (DEN)
Ms mAb IgG2b
ICC/IF. WB
GTX630557
NS1 (Dengue virus) antibody [GT1061]
NS1 (DEN)
Ms mAb IgG1(NEW Producr)
ICC/IF. WB
GTX630556
NS1 (Dengue virus) antibody [GT4212]
NS1 (DEN)
Ms mAb IgG2a(NEW Producr)
ICC/IF. WB
GTX103346
NS1 (Dengue Virus 2) antibody
NS1 (DEN2)
Rb pAb
ICC/IF. WB
GTX124280
NS1 (Dengue Virus) antibody
NS1 (DEN)
Rb pAb
ICC/IF. WB
GTX124246
NS2B (Dengue Virus) antibody
NS2B (DEN)
Rb pAb
ICC/IF. WB
GTX124252
NS3 (Dengue Virus) antibody
NS3 (DEN)
Rb pAb
ICC/IF. WB
GTX629477
NS3 (Dengue Virus) antibody [GT2811]
NS3 (DEN)
Ms mAb IgG1
ICC/IF. WB
GTX124249
NS4A (Dengue Virus) antibody
NS4A (DEN)
Rb pAb
WB
GTX103349
NS4B (Dengue Virus) antibody
NS4B (DEN)
Rb pAb
ICC/IF. WB
GTX124250
NS4B (Dengue Virus) antibody
NS4B (DEN)
Rb pAb
ICC/IF. WB
GTX103350
NS5 (Dengue Virus) antibody
NS5 (DEN)
Rb pAb
ICC/IF. WB
GTX124253
NS5 (Dengue Virus) antibody
NS5 (DEN)
Rb pAb
ICC/IF. WB
GTX629446
NS5 (Dengue Virus 2) antibody [GT353]
NS5 (DEN)
Ms mAb IgG2b
ICC/IF. WB
GTX629447
NS5 (Dengue Virus 2) antibody [GT361]
NS5 (DEN)
Ms mAb IgG1
ICC/IF. WB

Dengue infections are caused by four closely related viruses named DEN-1, DEN-2, DEN-3, and DEN-4. These four viruses are called
serotypes. All four dengue serotypes circulate together in tropical and subtropical regions around the world.

登革热病毒抗体推荐

The Viral genome is translated as a single, long polypeptide and then cut into ten proteins.
登革热病毒抗体推荐
Three are structural proteins: the capsid (C), envelope (E), and membrane (M) proteins. Seven are nonstructural proteins: NS1, NS2A, 
NS2B, NS3, NS4A, NS4B, and NS5. These nonstructural proteins play roles in viral replication and assembly.


 Proteins  Functions  GeneTex Antibodies
 Structure  
 Proteins
 Capsid  Encapsidation of the RNA genome. May regulate host 
 cell apoptosis through stabilizing P53
 GTX124247, GTX103343
 Envelope  Allowing virus to enter host cells. Essential target of  
 antiviral vaccine ★. 
 GTX43296
 Membrane  Compose viral membrane structure  GTX127277, GTX629116, 
 GTX629117,
 Non-Structure  
 Proteins
 NS1  Essential for virus replication, as a target of humural 
 immunity.
 GTX630556,
 GTX630557, GTX103346,    
 GTX124280,
 NS2A, 2B  Viral RNA synthesis, virion assembly/maturation, and 
 antagonizes the host immune response
 GTX124246 (2B)
 NS3  Protease/ nucleotide triphosphatases and helicase  
 activity used for viral RNA synthesis. 
 GTX124252, GTX629477,
 NS4A, 4B  Blocking IFNa/b signaling and involved in STAT pathway  
 in host cells.
 GTX124249 (4A), GTX103349 (4B), 
 GTX124250 (4B)
 NS5  Viral RNA polymerase and methyltransferase.   GTX103350, GTX124253,  
 GTX629446, GTX629447
 GeneTex Antibodies against whole 
 virons
 GTX29202, GTX41428, GTX43295, GTX41437, GTX41430


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临床前研究和早期临床实验中大规模生产重组腺相关病毒/慢病毒的理想工具

临床前研究和早期临床实验中大规模生产重组腺相关病毒/慢病毒的理想工具

Mirus公司最新推出的适用于临床前研究和早期临床实验中大规模生产重组腺相关病毒和慢病毒转染试剂TransIT-VirusGEN®SELECT Transfection Reagent面世了,TransIT-VirusGEN®系列转染试剂旨在提高载体DNA转染到悬浮和贴壁HEK293细胞的转染效率,并增加重组腺相关病毒和慢病毒的产量。并可提供BSE TSE Statement 和质量控制的相关文件,以简化辅助材料的资质认证过程,节省时间和成本,确保从研发到大规模生产的无缝衔接,成为临床前研究和早期临床实验中大规模生产重组腺相关病毒/慢病毒的理想工具。

产品特点:

高效转染DNA,适用于临床前研究和早期临床实验中重组腺相关病毒

和慢病毒的大规模生产;

质控严格,包括产品性能、批次重复性、无菌性、内毒素及支原体含

量测试;

灵活性好,兼容不同的病毒生产平台并且允许重复过滤;

无动物源成分,保证全合成制剂成分清晰。

验证实例:

临床前研究和早期临床实验中大规模生产重组腺相关病毒/慢病毒的理想工具 临床前研究和早期临床实验中大规模生产重组腺相关病毒/慢病毒的理想工具
图1. TransIT-VirusGEN® Reagent和 VirusGEN® AAV Transfection Kit能产生更高的AAV滴度。

A.在Expi293 Expression Media(Thermo Fisher)中生长的Expi293F细胞(Thermo Fisher)使用TransIT-VirusGEN®转染试剂(1.5:1 reagent-to-DNA ratio (vol:wt), Mirus Bio LLC),VirusGEN®AAV转染试剂盒(Mirus Bio LLC),PEIpro (1:1,Polyplus)和FectoVIR®-AAV (1:1, Polyplus)的瞬时 转 染 来 产 生 重 组 AAV2。AAV2是 通 过 转 染 pAAV-hrGFP、pAAV-RC和 pAAV-Helper质 粒(1:1:1的DNA比例,每瓶2 μg/ml-2 mg,Agilent Technologies)产生的。1L的2×106细胞/ml密度在2.8L 的Thomson shake flask中转染。在转染后72小时使用化学裂解收获AAV2。通过转导HT1080细胞来测定功能性滴度,并在转导后48小时使用Guava®easyCyte 5HT流式细胞仪测量绿色荧光蛋白的表达。用少于20% GFP阳性细胞的病毒稀释液测量AAV功能滴度。基因组拷贝通过使用引物和靶向CMV启动子的 探针的ddPCR测 定 。B. 使 用 AAV2 Titration ELISA Kit(Progen)测定总组装衣壳,通过将基因组拷贝数除以每种条件下的总组装衣壳来确定GC/capsid ratio。误差线代表duplicate flasks的范围。

图2. 在不同的悬浮细胞类型和培养基配方中TransIT-VirusGEN® Reagen和VirusGEN®AAV Transfection Kit在AAV生产中的表现优于基于PEI的试剂。(A) Expi293F细胞(ThermoFisher)或(B)病毒生产细胞(ThermoFisher)在转染前适应或生长在Expi293培养基 (Thermofisher)、LV-MAX (Thermofisher)、FreeStyle™ F17 (ThermoFisher)或BalanCD HEK293 (Irvine Scientific)培养基。使用TransIT-VirusGEN®转染试剂(2:1reagent-to-DNA ratio (vol:wt)(体 积 :重 量 ), Mirus Bio LLC),VirusGEN® AAV Transfection Kit(Mirus Bio LLC)的 AAV生 产 与 PEIpro (1:1reagent-to-DNA ratio(vol:wt),Polyplus)和PEI MAX (2:1reagent-to-DNA ratio (vol:wt),Polysciences)进行比较。AAV2是通过转染pAAV-hrGFP、pAAV-RC和pAAV-Helper质粒(1:1:1 DNA比例,1.5μg/ml = 3μg/孔,Agilent Technologies)产生的。细胞以200万细胞/ml的细胞密度转染。收获的病毒用于转导HT1080细胞,并在转导后48小时使用Guava® easyCyte™5HT流式细胞仪测量绿色荧光蛋白的表达。用少于20% GFP阳性细胞的病毒稀释液测量AAV功能滴度。误差线代表重复孔的范围。
临床前研究和早期临床实验中大规模生产重组腺相关病毒/慢病毒的理想工具 图3. TransIT-VirusGEN® Reagent和VirusGEN® LV Transfection Kit在多种慢病毒包装系统方面优于基于PEI的试剂。使用TransIT-VirusGEN®转染试剂 +/-将 VirusGEN® LV Enhancer与 PEIpro (2:12:1 reagent-to-DNA ratio,Polyplus)和PEI MAX (4:12:1 reagent-to-DNA ratio,Polysciences)进行比较。慢病毒是通过用两种不同的LV载体混合物(1μg/ml,2μg/ml)转染在Expi293表达培养基(Thermo Fisher)中生长的Expi293细胞而产生的,包括:(A)第三代载体pALD-LentiEGFP-A转移载体和pALD-VSV-G-A、pALDRev-A、pALD-GagPol-A包 装 载 体 (3:0.5:0.5:2 DNA比 例 , Aldevron)或(B)第 三 代 载 体 pLKO.1-puro-CMV-TurboGFP™ transfer vector(MilliporeSigma) 和 ViraSafe™ Pantropic Packaging mix (pRSV-Rev,pCMV-VSV-G, pCgpV, CellBio Labs) 以 3:0.5:0.5:2 DNA比例转染。在转染后18小时,将VirusGEN® LV Enhancer加入到TransIT-VirusGEN®中。含病毒的上清液用于转导293T/17细胞,并在转导后72小时使用Guava®easyCyte™ 5HT流式细胞仪测量绿色荧光蛋白的表达。慢病毒功能滴度是从含有少于20%GFP阳性细胞的病毒稀释液中测定的。误差线代表重复孔的范围。
临床前研究和早期临床实验中大规模生产重组腺相关病毒/慢病毒的理想工具 临床前研究和早期临床实验中大规模生产重组腺相关病毒/慢病毒的理想工具
图4. TransIT-VirusGEN® Reagent和VirusGEN® LV Transfection Kit可与多种细胞系和培养基配方兼容,用于在悬浮293细胞中生产慢病毒。在LV-MAX生产培养基(ThermoFisher)中生长的病毒生产细胞(293-VP)、在Expi293表达培养基(ThermoFisher)中生长的Expi293细胞或在FreeStyle™F17 (ThermoFisher)中生长的FreeStyle™ 293-F细胞在转染前以4×10^6细胞/ml接种(2ml/未处理的6孔 板 )。使用 TransIT-VirusGEN 转 染 试 剂 +/- VirusGEN LV Enhancer(Mirus Bio,3:1 reagent-to-DNA ratio(wt:vol))生产慢病毒。通过以3:0.5:0.5:2的DNA比例(Aldevron,25μg/瓶(1μg/ml最终浓度 ))转染第三代载体 ALD-LentiEGFP-A转移载体和 pALD-VSV-G-A、pALD-RevA、pALD-GagPol-A包装载体来生产慢病毒。转染后18小时加入 VirusGEN® LV Enhancer。在转导 293T/17细胞后,测量含病毒上清液的功能滴度,并在转导后72小时,使用Guava easyCyte™5HT流式细胞仪测量绿色荧光蛋白的表达。慢病毒功能滴度是从含有少于 20% GFP阳性细胞的病毒稀释液中测定的。误差条代表三个孔的标准偏差 图5. TransIT-VirusGEN转染试剂可以多次过滤且对试剂性能没有影响。

(A)使用在FreeStyle™ F17培养基中生长的悬浮FreeStyle™ 293-F细胞生产慢病毒,并用第三代载体pLKO.1-puro-CMV-TurboGFP转移载体(Sigma)和ViraSafe™ Pantropic Packaging mix (pRSV-Rev, pCMV-VSV-G, pCgpV, Cell Bio Labs)以 3:0.5:0.5:2的DNA比例转染,总质粒1ug/ml,使用TransIT-VirusGEN转染试剂(3:1,体积:重量),TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent (3:1, vol:wt)通 过 0.22 um polyethersulfone(PES)过滤装置(Millipore Sigma)过滤指定次数。使用通过含病毒的上清液转导 ® 293T/17细胞,并在转导后72小时使用Guava easyCyte™ 5HT流式细胞仪测量绿色荧光蛋白的表达。

(B)AAV2是通过在FreeStyle™ F17培养基中生长的悬浮FreeStyle™ 293-F细胞产生的,使用TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent (2:1, vol:wt)转 染 pAAVhrGFP、pAAV-RC和 pAAV-Helper质 粒 (1:1:1DNA ratio,1.5u g/ml,AgilentT ® echnologies)。收获的病毒用于转导HT1080细胞,并在转导后48小时使用Guava easyCyte™ 5HT Flow Cytometer.流式细胞仪测量绿色荧光蛋白的表达。对于慢病毒和AAV病毒,功能滴度都是从含有少于20% GFP阳性细胞的病毒稀释液中测定的。误差条代表三个孔的标准偏差。

验证实例

用途
科研 临床前和早期临床实验 后期临床试验和商业生产
名称

TransIT-VirusGEN®

临床前研究和早期临床实验中大规模生产重组腺相关病毒/慢病毒的理想工具

TransIT-VirusGEN® SELECT

临床前研究和早期临床实验中大规模生产重组腺相关病毒/慢病毒的理想工具

TransIT-VirusGEN® GMP

成分
相同的TransIT-VirusGEN® 试剂配方可随时使用,化学成分明确,不含动物源,含有77.5%乙醇

是否提供

LV 和 AAV

Enhancer Kits

提供 即将推出 提供
货号 名称 货号 名称
MIR 6750 VirusGEN® AAV Transfection Kit MIR 6815-GMP VirusGEN® GMP AAV Transfection Kit
MIR 6760 VirusGEN® LV Transfection Kit MIR 6825-GMP VirusGEN® GMP LV Transfection Kit
质检标准 Functional AAV titer assay Functional AAV titer assay

Formulation Identity

Appearance

Sterility per USP<71>

Bacterial endotoxin per USP<85>

Mycoplasma per USP<63>

Validated Formulation Identity Assay

Appearance Sterility per USP<71>

Bacterial endotoxin per USP<85>

Mycoplasma per USP<63>

货号与规格

MIR 6703

MIR 6704

MIR 6700

MIR 6705

MIR 6706

MIR 6720

0.3 ml vial

0.75 ml vial

1.5 ml vial

5 x 1.5 ml vials

10 x 1.5 ml vials

30ml 

MIR 6730  

MIR 6735

30ml bottle

(for 10 L of cell culture)

150ml bottle

(for 50 L of cell culture)

MIR 6845-GMP

150 ml bottle

(for 50 L of cell culture)

提供文件材料 Certificate of Analysis Certificate of Origin

Certificate of Analysis Certificate of Origin

TSE/BSE Statement

Certificate of Analysis Certificate of Origin with TSE/BSE Statement DMF Available in 2022 with Quality Agreement

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病毒系统酶试剂盒Takara Clontech

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

病毒系统
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631074 Lenti-X ProteoTuner Shield System C Each ¥9,625 病毒系统 病毒系统 病毒系统
Clontech 632173 Lenti-X ProteoTuner Shield System N Each ¥9,625 病毒系统 病毒系统 病毒系统
Clontech 632175 Lenti-X ProteoTuner Shield System N (w/ ZsGreen1) Each ¥9,625 病毒系统 病毒系统 病毒系统
Clontech 632171 Retro-X ProteoTuner Shield System N Each ¥9,734 病毒系统 病毒系统 病毒系统
Clontech 632167 Retro-X ProteoTuner Shield System N (w/ ZsGreen1) Each ¥9,734 病毒系统 病毒系统 病毒系统
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注意:购买以上产品(除632171外),需要填写专利确认书
 
■ 制品说明
ProteoTuner慢病毒和逆转录病毒系统可以通过快速改变蛋白质本身的丰度来直接研究特定目的蛋白质的功能。该系统利用配体依赖性去稳定结构域 (destabilization domain, DD)和Shield1配体,以一种可预测和剂量依赖的方式可逆地调节DD标签蛋白质的稳定性。在目的蛋白质上连接DD标签,通过在培养基中添加Shield1配体来迅速使DD融合蛋白质稳定下来。除了病毒载体外,ProteoTuner表达系统还有质粒载体可供选择。
病毒系统
图1 目标蛋白质的配体依赖性可逆稳定过程。去稳定结构域(DD;灰色)与目的蛋白质融合,具有膜通透性的小分子配体Shield1(黑色)与DD结合,保护DD融合蛋白质免受蛋白酶体降解。然而,如果移除Shield1,则会导致整个融合蛋白质的快速降解。ProteoTuner Shield Systems会默认降解DD标签蛋白质,除非有Shield1来稳定它。
 
■ 制品特点
1. 快速动力学:可以通过蛋白质水平在几分钟内的变化进行精细的功能分析
2. 精密调节:通过控制Shield1的剂量精密控制蛋白质水平
3. 可逆控制:从“protein on”到“protein off”,使基因功能研究更有说服力
4. 制品组分:每个试剂盒都包含一个质粒载体和一份Shield1
5. 搭配使用Retro-X Universal Packaging System,可用于逆转录病毒制备
6. 搭配使用Lenti-X Packaging Single Shots,可用于慢病毒制备
 
■ 制品应用
1. 通路中的蛋白质功能研究
2. 蛋白质复合物亚基的功能分析
3. 关键蛋白质的功能分析
 
■ 保存
-20℃
 
 
产品详情请点击:病毒系统
 
 

页面更新:2021-06-21 15:55:31

蛋白质/病毒生产转染试剂 — MirusBio

蛋白质/病毒生产转染试剂 — MirusBio

MirusBio公司是世界上最早开发高效、低细胞毒性转染试剂的公司之一,同时也是目前该类试剂最主要的供应商之一。本文主要给大家提供MirusBio蛋白质/病毒生产转染试剂产品列表,如您需要购买下列产品或MirusBio公司其它产品,请联系代理商上海金畔生物。

蛋白质/病毒生产转染试剂产品列表:

产品名称

产品货号

规格

品牌

TransIT-PRO® Transfection Kit (includes PRO Boost Reagent)/适用于悬

浮CHO及HEK293细胞系的DNA高效转染和蛋白表达(含转染增强辅助试剂)

MIR 5700

1 ml

Mirusbio

TransIT-PRO® Transfection Reagent/适用于悬浮CHO及HEK293细胞系的

DNA高效转染和蛋白表达

MIR 5740

1 ml

Mirusbio

TransIT-PRO® Transfection Reagent/适用于悬浮CHO及HEK293细胞系的

DNA高效转染和蛋白表达

MIR 5750

10 ml

Mirusbio

TransIT-PRO® Transfection Kit (includes PRO Boost Reagent)/适用于悬浮

CHO及HEK293细胞系的DNA高效转染和蛋白表达(含转染增强辅助试剂)

MIR 5760

10 ml

Mirusbio

flashBAC™ Baculovirus Expression System/flashBAC™杆状病毒表达系统

MIR 6115

5 Reactions

Mirusbio

flashBAC™ Baculovirus Expression System/flashBAC™杆状病毒表达系统

MIR 6120

24 Reactions

Mirusbio

flashBAC™ ULTRA Baculovirus Expression System/flashBAC™ ULTRA

杆状病毒表达系统

MIR 6135

5 Reactions

Mirusbio

flashBAC™ ULTRA Baculovirus Expression System/flashBAC™ ULTRA

杆状病毒表达系统

MIR 6140

24 Reactions

Mirusbio

pOET1 Transfer Plasmid/用于昆虫细胞和哺乳动物细胞的蛋白质生产

MIR 6150

20 µl (500 ng/µl)

Mirusbio

pOET1C_6xHis Transfer Plasmid

MIR 6151

20 µl (500 ng/µl)

Mirusbio

pOET6 BacMam Transfer Plasmid

MIR 6152

20 µl (500 ng/µl)

Mirusbio

CHOgro® Transfection and Titer Enhancer Kit/CHO

细胞瞬时转染和蛋白滴度增强试剂盒

MIR 6225

1 Kit

Mirusbio

Human IgG1 Expression Control

MIR 6250

100 ug

Mirusbio

CHOgro® Expression System/CHO细胞瞬时转染表达系统

MIR 6260

1 Kit

Mirusbio

CHOgro® High Yield Expression System/CHO细胞高滴度瞬时转染表达系统

MIR 6270

1 Kit

Mirusbio

TransIT®-Lenti Transfection Reagent/适用于重组慢病毒生产的转染试剂

MIR 6600

1.5 ml

Mirusbio

TransIT®-Lenti Transfection Reagent/适用于重组慢病毒生产的转染试剂

MIR 6603

0.3 ml

Mirusbio

TransIT®-Lenti Transfection Reagent/适用于重组慢病毒生产的转染试剂

MIR 6604

0.75 ml

Mirusbio

TransIT®-Lenti Transfection Reagent/适用于重组慢病毒生产的转染试剂

MIR 6605

5 x 1.5 ml

Mirusbio

TransIT®-Lenti Transfection Reagent/适用于重组慢病毒生产的转染试剂

MIR 6606

10 x 1.5 ml

Mirusbio

TransduceIT™ Transduction Reagent/慢病毒转导增强试剂

MIR 6620

1 ml

Mirusbio

Lentivirus Packaging Mix Powered by MISSION® Genomics/慢病毒包装质粒

MIR 6630

5 RXN

Mirusbio

Lentivirus Packaging Mix Powered by MISSION® Genomics/慢病毒包装质粒

MIR 6640

34 RXN

Mirusbio

TransIT® Lentivirus System/慢病毒包装系统

(包含转染试剂、包装质粒和转导增强试剂)

MIR 6650

5 RXN

Mirusbio

TransIT® Lentivirus System/慢病毒包装系统

(包含转染试剂、包装质粒和转导增强试剂)

MIR 6655

34 RXN

Mirusbio

TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent/适用于AAV和慢病毒生产的转染试剂

MIR 6700

1.5 ml

Mirusbio

TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent/适用于AAV和慢病毒生产的转染试剂

MIR 6703

0.3 ml

Mirusbio

TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent/适用于AAV和慢病毒生产的转染试剂

MIR 6704

0.75 ml

Mirusbio

TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent/适用于AAV和慢病毒生产的转染试剂

MIR 6705

5 x 1.5 ml

Mirusbio

TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent/适用于AAV和慢病毒生产的转染试剂

MIR 6706

10 x 1.5 ml

Mirusbio

TransIT-VirusGEN® SELECT Transfection Reagent/

适用于临床前研究和工艺开发的大规模AAV和慢病毒生产

MIR 6730

30 ml – for 10 L of cell culture

Mirusbio

TransIT-VirusGEN® SELECT Transfection Reagent/

适用于临床前研究和工艺开发的大规模AAV和慢病毒生产

MIR 6735

150 ml – for 50 L of cell culture

Mirusbio

VirusGEN® AAV Transfection Kit/适用于悬浮293细胞生产AAV病毒

MIR 6750

1 Kit – for 1 L of cell culture

Mirusbio

VirusGEN® LV Transfection Kit/适用于悬浮或贴壁293细胞生产慢病毒

MIR 6760

1 Kit – for 1 L of cell culture

Mirusbio

VirusGEN® SELECT AAV Transfection Kit/

适用于悬浮293细胞生产AAV病毒(临床前级别)

MIR 6770

1 Kit – for 10 L of cell culture

Mirusbio

VirusGEN® SELECT AAV Transfection Kit/

适用于悬浮293细胞生产AAV病毒(临床前级别)

MIR 6775

1 Kit – for 50 L of cell culture

Mirusbio

VirusGEN® SELECT LV Transfection Kit/

适用于悬浮或贴壁293细胞生产慢病毒(临床前级别)

MIR 6780

1 Kit – for 10 L of cell culture

Mirusbio

VirusGEN® SELECT LV Transfection Kit/

适用于悬浮或贴壁293细胞生产慢病毒(临床前级别)

MIR 6785

1 Kit – for 50 L of cell culture

Mirusbio

TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent/

适用于AAV和慢病毒生产的转染试剂

MIR 6720

30 ml

Mirusbio

VirusGEN® GMP AAV Transfection Kit/

适用于悬浮293细胞生产AAV病毒(GMP级别)

MIR 6815-GMP

1 Kit – for 50 L of cell culture

Mirusbio

VirusGEN® GMP LV Transfection Kit/

适用于悬浮或贴壁293细胞生产慢病毒(GMP级别)

MIR 6825-GMP

1 Kit – for 50 L of cell culture

Mirusbio

TransIT-VirusGEN® GMP Transfection Reagent/

适用于AAV和慢病毒生产的转染试剂(GMP级别)

MIR 6845-GMP

150 ml – for 50 L of cell culture

Mirusbio

关于Mirus Bio转染试剂:

Mirus Bio的大部分转染试剂可以在含有血清的培养基中进行转染,省去了更换培养基的麻烦。TransIT-L1是Mirus产品的王牌,自1995年开发出来就申请了美国专利(US 5,744,335)。该项专利技术后来License给了Roche公司,以Fugene 6的品牌对外销售。TransIT-TKO & siQUEST转染试剂是常规siRNA转染试剂的王牌,与脂质体介导的转染试剂相比,该转染试剂可以高效转染siRNA,并且极大地降低了细胞的损伤程度。该试剂与siRNA混合转染细胞时,可以特异性剔除某些基因的表达,用于siRNA介导的基因沉默现象的研究。TransIT-Oligo转染试剂是即用型试剂,可以高效地将各种类型的寡聚核苷酸和寡聚脱氧核苷酸转染至受体细胞中。此外,Mirus Bio还开发了专门针对特殊细胞的体外转染试剂,例如分别针对Jurkat,COS,3T3等细胞的转染试剂。Mirus Bio的科学家们新近开发了一种新的DNA转染试剂:TransITTM-2020 Transfection Reagent。TransITTM的性能优于FuGENETM、LipofectamineTM 2000和 LipofectamineTM 2000 CD;可在多种类型的细胞(包括难转染细胞)中实现高表达。

更多详情请咨询Mirus全国代理-上海金畔生物

病毒采样管(动物)-国产培养基定制

上海金畔生物科技有限公司可以定制生产国产培养基,可以访问官网了解更多产品信息。
病毒采样管(动物)

英文名称: VTM For Animal
产品货号: JPPT8661-10
产品规格: 1ml*25支/盒
保质期: 一年
产品用途: 用于禽流感等动物病毒的样本采集及运送,用于环境中动物病毒的采样监测
备  注: 用于动物的鼻咽拭子、泄殖腔拭子等,可采集和运送禽流感,非洲猪瘟等病毒。

产品介绍:

【产品名称】 通用名称:病毒采样管(动物)

【包装规格】 1mL/支*25支/盒

【预期用途】

用于禽流感等动物病毒的样本采集及运送,用于环境中动物病毒的采样监测。

【储存条件及有效期】

储存条件:5-25℃    有效期:一年

【主要组成成份】

Hank’s液基础、庆大霉素、真菌抗生素、生物缓冲剂及制冷保护剂等。

【使用方法】

1.采样前,在采样管的标签上标注相关样品信息。

2.根据不同的采样要求,用采样拭子在相应的部位采样。

3.迅速将拭子放入无菌采样管中。

4.将采样拭子高出采样管的部分折断,旋紧管盖。

5.新鲜采集的临床标本应在4℃下48h内运送至实验室,未能在48h内送至实验室的,应置于-70℃或以下保存。标本送至实验室后,标本应尽快接种分离,48h内能进行接种的可置于4℃保存。如未能接种的应置于-70℃或以下保存。

【应用范围用于动物的鼻咽拭子、泄殖腔拭子等,可采集和运送禽流感,非洲猪瘟等病毒。


病毒采样管(动物)相关产品:

产品货号 产品名称 产品规格 产品说明及用途
JPPT037-1 胰蛋白胨生理盐水管(内置棉签) 10ml*20支/盒 用于样品的稀释
JPPT001-9 脱脂牛奶菌种保存管 50支/盒 适用于大多数菌种的菌株保存
JPPT8661-26 病毒采样管(VTM) (含胍盐)(不含拭子)(含条形码)(医疗)(20混1) 12ml*25支/盒 用于样本的收集、运输和储存等
JP8678 MEM维持液
MEM maintenance of fluid
3ml*20支/盒 用于病毒的运送
JPPT034-1 无菌生理盐水管(内附采样棉签)
Sterile Saline
10ml*20支/盒 用于样品的稀释
JP8796 Hanks氏病毒保存液(pH7.4-7.6)
Hanks Virus Preservation Fluid
3ml*20支/盒 用于hanks病毒的保存
JPPT004-3 半固体运送培养基 40ml*10 用于标本的运送保存
JPPT004-5 Cary-Blair运送培养基(液体)(含拭子)
Cary-Blair Transport Medium
3ml*20/盒 用于治病标本的运送保存
JPPT8661-3 VTM运送培养基(病毒采样管)(配双拭子) 5ml×20支/盒 用于对流感、手口足感等流行性疾病的检测采样(配套采样植绒拭子2支;配套生物安全袋1个)
JPPT001-7 液体菌种保存管(副溶专用 含40%甘油)(不含瓷珠)
Liquid Strains Storage Tube
1.4ml*50支/盒 用于副溶血性弧菌的菌种保存
JPPT8661-5 VTM运送培养基(病毒采样管)(不含抗生素)(配双拭子) 3.5ml*20支/盒 用于对流感、手口足感等流行性疾病的检测采样(配套采样植绒拭子2支;配套生物安全袋1个)
JPPT8661-6 VTM运送培养基(病毒采样管)(配单拭子) 3.5ml*20支/盒 用于对流感、手口足感等流行性疾病的检测采样(配套采样植绒拭子1支;配套生物安全袋1个)
JPPT8661-7 VTM运送培养基(病毒采样管)(不含拭子) 3ml*20支/盒 用于对流感、手口足感等流行性疾病的检测采样
JPPT001-4 半固体菌种保存管 50支/盒 半固体菌种保存

整合的慢病毒拷贝数测定酶试剂盒Takara Clontech

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整合的慢病毒拷贝数测定
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631239 Lenti-X Provirus Quantitation Kit 200 Rxns ¥6,994 整合的慢病毒拷贝数测定 整合的慢病毒拷贝数测定 整合的慢病毒拷贝数测定
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整合的慢病毒拷贝数测定 整合的慢病毒拷贝数测定 整合的慢病毒拷贝数测定 整合的慢病毒拷贝数测定 整合的慢病毒拷贝数测定 整合的慢病毒拷贝数测定 整合的慢病毒拷贝数测定
 
 
Lenti-X Provirus Quantitation Kit可以让您快速确定转导细胞混合或克隆群体中存在的整合慢病毒(前病毒)的拷贝数。该试剂盒包括用于测定前病毒拷贝数的引物、基因组DNA纯化试剂盒、制备标准曲线的对照DNA,以及基于TB Green检测的qPCR试剂(可检测200次)。
 
正确确定慢病毒的有效滴度
通过量化已整合到靶细胞核DNA中的慢病毒的数量,您可以正确确定慢病毒上清液原液的真实滴度(即有效滴度)。利用这个信息,可以用正确的MOI(感染复数)去感染细胞,让您能够预测将有多少病毒基因组会整合到细胞中。您也可以使用此方法来校准其他滴定方法,那些方法可以测量包装细胞上清液中的病毒含量,但不能测定靶细胞中的功能性整合滴度。
 
一致并且可预测的慢病毒转基因表达
当使用慢病毒载体将基因导入至靶细胞时,表达水平会随着MOI的增加而增加,因为更多的慢病毒拷贝会整合到细胞核DNA中。同样,对于给定的病毒制剂,在不同目标细胞系中的有效MOI可能会因各个细胞系对慢病毒感染的敏感度不同而不同。Lenti-X Provirus Quantitation Kit可让您评估任何细胞系中的转导结果,而不受表达水平的影响,并且可确保不同细胞系间或使用不同病毒制剂间转导水平一致。
 
概述/特点
· 预测不同实验间一致的转基因表达水平
· 比较多个细胞系的转导数据
· 确保不同实验或不同细胞系之间的拷贝数一致
· 包含纯化10种基因组DNA和进行200 次TB Green qPCR反应试剂*
* 此试剂盒中包含的引物旨在扩增HIV-1基因组包装信号附近的的保守区域。这些引物与Takara Bio销售的所有慢病毒载体和常用的慢病毒载体相兼容。如果不能确定该试剂盒是否与您的载体相兼容,请将您的载体序列发送至service,我们的技术支持团队将很乐意为您确认引物的兼容性。
 
实验例
整合的慢病毒拷贝数测定
图1. 测定靶细胞中整合的慢病毒拷贝数。使用快速qPCR方法确定前病毒含量。
 
整合的慢病毒拷贝数测定
图2. 慢病毒前病毒拷贝数会影响转导细胞中转基因的表达水平。使用AcGFP1慢病毒表达载体分别以高或低MOI感染HT1080细胞。感染后72小时,对细胞进行嘌呤霉素药物选择。一周后,选择稳定转导的细胞克隆进行扩增和表达分析。使用流式细胞术确定AcGFP1的表达水平,并使用Lenti-X Provirus Quantitation Kit确定基因组DNA中的前病毒含量。该图所示数据为低拷贝数(> 3; n = 8)和高拷贝数(> 9; n = 7)实验组两组合并数据。结果表明,前病毒含量越高,表达水平也就越高。
 
整合的慢病毒拷贝数测定
图3. 等量病毒感染细胞时,不同类型细胞获得的前病毒(整合的慢病毒)拷贝数不同。 用等量的单一慢病毒原液(100 μl)感染HT1080、HeLa和HEK 293细胞。感染后72小时,使用嘌呤霉素对细胞进行药物选择。一周后,使用Lenti-X Provirus Quantitation Kit确定稳定转导细胞群的前病毒拷贝数
 
 
产品详情请点击:整合的慢病毒拷贝数测定
 
 

页面更新:2020-04-10 16:03:39

Genetex诺如病毒抗体

Genetex诺如病毒抗体

本篇为大家整理的是Genetex诺如病毒抗体产品,这些产品主要用于科研。如需购买下列产品,或购买/咨询Genetex公司的其它产品,请联系Genetex代理商上海金畔生物。

Genetex诺如病毒抗体:

产品货号   

产品名称  

 规格

GTX134380

Norovirus VP1 antibody

100μl

GTX134381

Norovirus VP1 antibody

100μl

GTX134382

Norovirus VP1 antibody

100μl

GTX134383

Norovirus VP2 antibody

100μl

GTX134386

Norovirus VP2 antibody

100μl

GTX36788

Norovirus Capsid antibody [4911]

500μl

GTX36789

Norovirus Capsid antibody [4901]

500μl

GTX39875

Norovirus Capsid antibody [B114M]

500μg

GTX39879

Norovirus Capsid antibody [B113M]

500μg

温馨提示:复制产品货号或产品名称,粘贴到本站搜索框搜索,即可查看该产品的详细信息。

详情请咨询Genetex代理商上海金畔生物科技有限公司

InvivoGen带您读文献之“STING与病毒防御”

InvivoGen带您读文献之“STING与病毒防御”

天然免疫是宿主的第一道防线。站在“长城”上的天然免疫感受器实时监控并识别外来入侵的病原微生物,并启动抗微生物免疫应答。当微生物进入宿主细胞,活化不同的胞浆感受器,而由不同的胞浆感受器启动的信号最终都被STING受体接收,后者诱导产生I型干扰素和促炎性细胞因子。随着STING抗病毒应答研究的深入,更多的疑问也被提出,例如STING是如何与不同胞浆核酸感受器或适配器协同完成抗病毒免疫应答InvivoGen公司提供全系列STING相关产品,协助您深入开展STING研究。

 

InvivoGen提供的STING相关产品

STING 配体: 2’3’-cGAMP – 3’3’-cGAMP – c-di-GMP – c-di-AMP …

STING 变异株: STING-WT – hSTING-HAQ – hSTING-H232 …

STING 敲除细胞:RAW-Lucia ISG-KO-STING Cells – THP1-Dual KO-STING Cells…

STING 报告基因细胞系:RAW-Lucia ISG Cells – THP1-Blue ISG Cells …

ELISA 试剂盒:LumiKine™ Xpress hIFN-α – LumiKine™ Xpress hIFN-β

更多产品信息,请访问www.invivogen.cn

 

STING 与病毒防御

宿主细胞接触病毒后会立即启动天然免疫应答,包括诱导产生I型干扰素和促炎性细胞因子,以便清除入侵的病原。最近研究发现,在病毒感染后,可被细胞内受体IFI16,cGAS和STING识别并激活I型干扰素信号通路,这样的防御机制涵盖DNA病毒和RNA病毒。研究HSV-1和CMV等DNA病毒时发现,病毒基因组DNA可以结合DNA感受器-IFI16和cGAS,从而揭示了外源基因组的DNA识别机制[1,13]研究证明病毒感染宿主细胞后,将其基因组DNA被释放到细胞内,后者可激活STING-TBK1依赖的免疫应答[2,3,4]也有研究指出,病毒感染后可以引起细胞应激,触发线粒体释放DNA到胞浆,活化cGAS-STING信号通路[22]。随着研究的深入与拓展,科研人员发现STING在RNA病毒应答中也扮演重要角色。过表达STING可以抑制新城疫病毒和禽流感病毒的复制,而这个防御机制并不依赖于RIG-I和cGAS[5,6]敲底STING的表达水平,也可以提高登革热病毒的复制[7,8]。丙型肝炎病毒调节STING的应答机制虽然存在一些小的争议,不过可以确定的是,丙型肝炎病毒刺激STING敲除的细胞并不能引起I型干扰素的产生[9,10]RNA病毒也存在一些含有DNA的核酸结构,逆转录病毒在复制过程中产生的反转录DNA中间体如RNA:DNA,单链DNA,亦激活DNA感受器。HIV-1在侵染细胞中释放的单链DNA可被cGAS识别,激活I型干扰素[11, 23]。在病毒感染过程中,不同来源的DNA活化cGAS-STING通路的机制还需要进一步探明。    

越来越多的迹象表明,被感染的细胞不仅可以识别DNA完成自身防御,同时将cGAMP通过缝隙连接(gap junction)传递到临近细胞,从而激活STING依赖的I型干扰素表达[24]另外,有报道指出病毒颗粒可装配cGAMP,从而传递并激活天然免疫应答[25]。以上研究揭示了STING在病毒防御中的核心作用,为预防或治疗传染性疾病提供新线索。

 

STING 与病毒拮抗免疫防御策略

在病毒和免疫系统共同进化的压力下,病毒学会了如何与免疫系统对抗并成功入侵宿主的技能。抑制I型干扰素应答是病毒入侵的关键机制。据报道,疱疹病毒家族通过不同的策略抑制STING-TBK1信号通路,如降解或锁住IFI16[4,13];抑制cGAS的酶活性[15];或抑制STING和TBK1的相互作用[16]。其它病毒也有对应STING通路的抑制策略。乙型肝炎病毒可以促使STING降解从而抑制其功能[17]DNA肿瘤病毒中,乳头瘤病毒的E7蛋白和腺病毒的E1A蛋白可拮抗cGAS-STING通路,从而抑制免疫应答[19]DNA病毒外,RNA病毒也具有调剂STING的能力。虽然这看起来违背常理,不过已发表的数据表明RNA病毒具有不同的抑制STING应答方式。登革热病毒编码的NS2B3蛋白酶可作用于人源STING的氨基酸末端,裂解人源STING,而鼠源STING对NS2B3蛋白酶具有抗性 [7,8]丙型肝炎病毒编码的NS4B蛋白可阻断STING和TBK1的相互作用[10]A型流感病毒的血凝素蛋白可阻止STING二聚体形成[6]; HIV干扰STING与TBK1的相互作用[21]。随着科研工作的深入,病毒逃避免疫识别的机制也逐渐清晰,研究重点需转向关于体内(in vivo)的感染机制。随着对致病性病毒疾病的认知不断积累,病毒感染细胞的作用靶点以及病毒逃避免疫防御的机制都是未来抗病毒新药研发的参考依据。

 

1. Horan KA, et al. 2013.Proteasomal degradation of herpes simplex virus capsids in macrophages releases DNA to the cytosol for recognition by DNA sensors. J Immunol.

2. Lam E1, et al. 2014. Adenovirus detection by the cGAS/STING/TBK1 DNA sensing cascade. J Virol.

3. Victor R. DeFilippis, et al. 2010.Human Cytomegalovirus Induces the Interferon Response via the DNA Sensor ZBP1. J Virol.

4. Li T, et al. 2013. Human cytomegalovirus tegument protein pUL83 inhibits IFI16-mediated DNA sensing for immune evasion. Cell Host Microbe.

5. Yuqiang Cheng, et al. 2015.Chicken STING Mediates Activation of the IFN Gene Independently of the RIG-I Gene. J Immunol.

6. Christian K. Holm. et al. 2016.Influenza A virus targets a cGAS-independent STING pathway that controls enveloped RNA viruses. Nat commun.

7. Chia-Yi Yu, et al. 2012. Dengue Virus Targets the Adaptor Protein MITA to Subvert Host Innate Immunity. PLoS Path.

8. Sebastian Aguirre, et al. 2012.DENV Inhibits Type I IFN Production in Infected Cells by Cleaving Human STING. PLoS Path.

9. Nitta S, et al. 2013. Hepatitis C virus NS4B protein targets STING and abrogates RIG-I-mediated type-I interferon-dependent innate immunity. Hepatology.

10. Qiang Ding, et. al. 2013. Hepatitis C virus NS4B blocks the interaction of STING and TBK1 to evade host innate immunity. J Hepatol.

11. Daxing Gao, et. al. 2013.Cyclic GMP-AMP Synthase Is an Innate Immune Sensor of HIV and Other Retroviruses. Science.

12. Sunnie M. Yoh, et. al. 2015.PQBP1 Is a Proximal Sensor of the cGAS-Dependent Innate Response to HIV-1. Cell.

13. Orzalli MH, et al. 2012.  Nuclear IFI16 induction of IRF-3 signaling during herpesviral infection and degradation of IFI16 by the viral ICP0 protein. PNAS.

14. Maria H Christensen, et al. 2016. HSV-1 ICP27 targets the TBK1-activated STING signalsome to inhibit virus-induced type I IFN expression. The EMBO Journal.

15. Wu JJ, et al. 2015. Inhibition of cGAS DNA sensing by a herpesvirus virion protein. Cell Host Microbe.

16. Ma Z, et al. Modulation of the cGAS-STING DNA sensing pathway by gammaher- pesviruses. PNAS 2015.

17. LiuY, et al. 2015. Hepatitis B virus polymerase disrupts K63-linked ubiquitination of STING to block innate cytosolic DNA-sensing pathways. J Virol.

18. McLaughlin-Drubin ME, Munger K. 2009. The human papillomavirus E7 oncoprotein. Virology.

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上海金畔生物科技有限公司

慢病毒纯化酶试剂盒Takara Clontech

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慢病毒纯化
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631233 Lenti-X Maxi Purification Kit 2 Preps ¥3,514 慢病毒纯化 慢病毒纯化 慢病毒纯化
Clontech 631234 Lenti-X Maxi Purification Kit 5 Preps ¥5,852 慢病毒纯化 慢病毒纯化 慢病毒纯化
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慢病毒纯化
Lenti-X Maxi Purification Kit可从原始的培养上清液中纯化出高纯度和高产量的病毒。其基于重力流柱的实验操作,快速、简单、有效并且优于基于过滤器的纯化系统,后者会损坏易于损伤的慢病毒颗粒,从而降低产量。重力流柱会轻柔固定培养上清液中的病毒颗粒,未被结合的物质则会在洗涤步骤穿透柱子流出。
 
为什么要纯化慢病毒?
慢病毒纯化能去除可能对转导实验产生不利影响的细胞污染物。原始的培养上清液中包含残留的质粒DNA,不明感染和转导抑制剂,细胞和血清蛋白质,以及具有高度免疫原性的病毒蛋白质、核酸和病毒片段。在使用慢病毒作用于敏感靶细胞或体内应用之前,有必要通过纯化慢病毒来去除这些污染物。
 
简便的操作流程。
我们的慢病毒纯化柱是即用型预装柱,只需将10X结合缓冲液加入到上清液样品(9-45 ml)中,然后再将混合物添加至纯化柱即可。样品和缓冲液借助重力穿过树脂,就像是基于纯化柱的质粒制备。在两次洗涤纯化柱的过程中,杂质被去除掉了,纯化后的慢病毒回收在3 ml洗脱缓冲液中。
 
防止假转导。
使用纯化后的慢病毒储液还可以防止假转导,因为在感染的过程中,原始病毒上清液中高水平重组蛋白质会被转移至靶细胞中。而靶细胞假转导会掩盖慢病毒转导所预期的de novo表达。
 
更高的产量和纯度。
温和的纯化程序是维持病毒感染性和产生60-80%优良慢病毒产量的关键所在。基于阴离子交换的膜系统回收率要低得多,通常低于20%。而与基于过滤器的系统相比,Lenti-X纯化柱获得的病毒纯度更高。事实上,纯化后的Lenti-X样品中可检测到的蛋白质含量很低,而基于过滤器纯化的病毒液则含有与病毒共同纯化出来的高水平外源蛋白质。
 
■ Overview
· 与其他纯化技术相比,获得的纯度和产量更高
· 浓缩病毒至多10倍
· 简便而温和的重力流操作流程
· 专用收集架可与试剂盒 (Code No. 631245)一同购买,也可单独购买 (Code No. 631246)
· 实现更高效、更一致的慢病毒转导,收获更健康的靶细胞
· 有效去除转导抑制剂和细胞毒性污染物
 
■ 实验例
慢病毒纯化
图1. 收集架L。组装后,这个收集架可安全牢固地容纳三根色谱柱(例如慢病毒纯化柱)和三根收集管(50 ml锥形管)。
 
慢病毒纯化
图2. 使用Clontech慢病毒纯化试剂盒可获得高产量和高纯度。使用我们的高滴度慢病毒包装系统制备并纯化慢病毒。Panel A. 为了确定病毒产量,通过qRT-PCR(RNA拷贝数)或流式细胞仪/荧光(IFU)测定纯化前和纯化后的慢病毒滴度,展示数据为七组实验的平均值。Panel B. 使用Lenti-X或基于过滤器的纯化系统(Vendor M和Vendor S)制备等量的纯化后慢病毒(1×105 IFU)进行SDS-PAGE和银染。与其它两种基于过滤器系统所制备的样品相比,在相同IFU的情况下Lenti-X样品含有明显更少的污染蛋白质。
 
 
 
产品详情请点击:慢病毒纯化
 
 

页面更新:2020-02-25 11:41:30