异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 IPTG
货号:BS119-5g
规格:5g
品牌:Biosharp
货号 | BS119-5g |
规格 | 5g |
品牌 | Biosharp |
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异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 IPTG
货号:BS119-5g
规格:5g
品牌:Biosharp
货号 | BS119-5g |
规格 | 5g |
品牌 | Biosharp |
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IPTG, DIOXANE-FREE
单位 | 支 |
规格 | 5g |
上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。
β-半乳糖苷酶活性诱导物IPTG | ||||||
品牌 | Code No. | 产品名称 | 包装量 | 价格(元) | 说明书 | 数量 |
Takara | 9030 | IPTG (Dioxane free) | 5 g | ¥495 |
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■ 制品说明 | ||||
IPTG是β-半乳糖苷酶的活性诱导物,基于这个特性,当pUC系列的载体以lacZ缺欠细胞作为宿主进行转化时、或用M13噬菌体载体DNA进行转染时,如果在培养基中加入X-Gal 和IPTG,由于β-半乳糖苷酶的α-互补性,可以根据是否呈现白色而方便地挑选择出基因重组体。另外,它还可以作为具有lac或tac等启动子的表达载体的表达诱导物使用。 | ||||
■ 保存 | ||||
-20℃。 |
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■ 用途 | ||||
IPTG是细菌中β-半乳糖苷酶的活性诱导物质。基于这个特性,当使用pUC系列的载体转化或使用M13噬菌体的载体转导lacZ–宿主细胞时,通过在培养基中添加X-Gal (Code No.: 9031) 和IPTG,由于β-半乳糖苷酶的α-互补性,可以根据是否呈现白色菌落 (或噬菌斑) 而方便地挑选出基因重组体。此外,它还可以作为具有lac或tac等启动子的表达载体的表达诱导物使用。 |
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■ 使用方法 | ||||
溶于灭菌水配制成100 mM水溶液 (每10 ml灭菌水加0.238 g IPTG)。 过滤灭菌后,将溶液按1ml分装,-20℃保存。 (含有IPTG的培养基4℃保存,避光,配制后一周内使用。) |
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■ 工作浓度 | ||||
1) 质粒 ·Agar medium; 100 μl/ 100 ml agar medium ·Plate (直径9 cm ); 25 μl/ plate 2) 噬菌体 ·Top agar; 25 μl/ 3 ml top agar |
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页面更新:2024-01-25 16:11:10
异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 IPTG
货号:BS119-100g
规格:100g
品牌:Biosharp
产品简介:
该产品为安慰性诱导物,X-gal为生色底物,二者共同用于蓝白斑筛选。IPTG可诱导载体lac操纵子DNA区段合成β-半乳糖苷酶氨基端片段,该片段可与宿主细胞编码的缺陷型β-半乳糖苷酶实现基因内互补(α互补)。实现α互补的细菌暴露IPTG,铺在含有X-gal生色底物的培养基上,可形成蓝色菌落。外源DNA插入质粒的多克隆位点后可破坏α互补作用,将产生白色菌落。
别名:Isopropylβ-D-thiogalactopyranoside;异丙β-D-1-硫代半乳糖苷;异丙基β-D-硫代半
乳糖苷
CAS:367-93-1
分子式:C9H18O5S
分子量:238.30
纯度:≥99%
储存条件:-20℃
外观(性状):白色粉末
单位:瓶
有效期:3年
应用:IPTG常用于需要诱导β-半乳糖苷酶活性的克隆实验。它常与X-Gal或Bluo-Gal结合使用,用于重组细菌菌落的蓝白筛选,这些菌落可以诱导lac操纵子在大肠杆菌中的表达。IPTG与lacI阻遏蛋白结合并改变其构象而发挥作用,防止β-半乳糖苷酶编码基因lacZ的抑制。
使用方法:(根据实际需要参阅相关文献配制和使用)
先在8ml蒸馏水中溶解2g,定容至10ml,用0.22um滤器过滤除菌,贮存于-20℃
注意:
1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。
2.为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
货号 | BS119-100g |
规格 | 100g |
品牌 | Biosharp |
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异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 IPTG
货号:BS119-1g
规格:1g
品牌:Biosharp
货号 | BS119-1g |
规格 | 1g |
品牌 | Biosharp |
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异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 IPTG
货号:BS119-25g
规格:25g
品牌:Biosharp
货号 | BS119-25g |
规格 | 25g |
品牌 | Biosharp |
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IPTG溶液 50mg/ml
货号:BL545A
规格:5ml
品牌:Biosharp
IPTG/X-Gal即用型溶液
产品编号 |
产品名称 |
规格 |
BL545A |
IPTG 50 mg/ml |
5 ml |
BL546A |
X-Gal 20 mg/ml |
5 ml |
产品简介:
蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点(MCS),它并不破坏阅读框,但可使少数几个氨基酸插入到β-半乳糖苷酶的氨基端而不影响功能,这种载体适用于可编码β-半乳糖苷酶C端部分序列的宿主细胞。因此,宿主和质粒编码的片段虽都没有酶活性,但它们同时存在时,可形成具有酶学活性的蛋白质。这样,lacZ基因在缺少近操纵基因区段的宿主细胞与带有完整近操纵基因区段的质粒之间实现了互补,称为α-互补。由α-互补而产生的LacZ+细菌在诱导剂IPTG的作用下,在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落,因而易于识别。然而,当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后,几乎不可避免地导致无α-互补能力的氨基端片段,使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。这种重组子的筛选,又称为蓝白斑筛选。如用蓝白斑筛选则经连接产物转化的钙化菌平板37℃倒置培养12-16h后,含有插入片段重组质粒的细菌形成白色菌落,而没有插入片段的质粒细菌形成蓝色菌落。
配制方法:
50mg/ml IPTG 5 ml:取250 mg IPTG,溶于5 ml无菌水中,过滤除菌后-20℃贮存。
20mg/ml X-Gal 5 ml:取100 mg X-gal,溶于5 ml 二甲基甲酰胺(DMF),棕色瓶中-20℃贮存。此试剂无需灭菌。
实验程序:
1、转化平板的制备:
向铺好的含有相应抗生素的固体琼脂平板表面加入16 µl的IPTG(50 mg/ml)、40 µl的X-gal (20 mg/ml),使用无菌的弯头玻璃棒将其均匀的涂开,尽量使溶解X-gal的二甲基甲酰胺挥发干净。
2、转化
(1)取部分连接产物加到50-100 µl感受态细胞中(感受态细胞应刚从-70℃冰箱取出放于冰浴上,待刚刚解冻时加入连接产物,连接产物的加入量不超过感受态细胞体积的十分之一),轻弹混匀,冰浴30分钟。
(2)将离心管置于精确42℃水浴90秒,取出管后立即置于冰浴中放置2-3分钟,其间不
要摇动离心管。
(3)向离心管中加入250-500 µl 37℃预热的SOC或LB(不含抗生素)培养基,150rpm,37℃振荡培养45分钟。此步目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达,使菌体复苏。
(4)将离心管中的菌液混匀,吸取100 μl加到含相应抗生素的SOB或LB固体琼脂培养基上,用无菌的弯头玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。待平板表面干燥后,倒置平板,37℃培养12-16小时。
3、检测
将得到的白色菌落接种1-5 ml LB培养基,37℃摇床振荡培养过夜,保存菌种后提取质粒,应用PCR或酶切方法鉴定插入片段是否正确。
注意事项:
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件:
-20℃保存,一年有效。
货号 | BL545A |
规格 | 5ml |
品牌 | Biosharp |
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异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 IPTG
有效期 | 5年 |
级别 | Ultra Pure Grade |
溶解性 | 50 mg/ml Water |
别名 | Isopropyl-β-D-Thiogalactoside;IPTG |
英文名称 | IPTG(Isopropyl β-D- Thiogalactopyranoside ) |
CAS | 367-93-1 |
分子式 | C9H18O5S |
分子量 | 238.31 |
储存条件 | 2-8℃ |
纯度 | ≥99.0% |
外观(性状) | 白色粉末 |
单位 | 瓶 |
规格 | 1g 5g 25g 100g |
异丙基-β-D-硫代半乳糖苷,英文名称IPTG。为安慰性诱导物,X-gal为生色底物,二者共同用于蓝白斑筛选。IPTG可诱导载体lac操纵子DNA区段合成β-半乳糖苷酶氨基端片段,该片段可与宿主细胞编码的缺陷型β-半乳糖苷酶实现基因内互补(α互补)。实现α互补的细菌暴露IPTG,铺在含有X-gal生色底物的培养基上,可形成蓝色菌落。外源DNA插入质粒的多克隆位点后可破坏α互补作用,将产生白色菌落。
特性:纯度 :≥99.0% (TLC) 熔点:110-114℃
湿度(%):≤1.0 pH (5%, 水)25℃:5-7
比旋光度 (1%, 水):-34.0–29.0
溶解性:IPTG贮存液,先在8ml蒸馏水中溶解2g,定溶至10ml,用0.22um滤器过滤除菌,贮存于-20℃。
备注:产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。
IPTG溶液 ( 50mg/ml)
别名 | 异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷 |
英文名称 | IPTG Solution(50mg/ml) |
CAS | 367-93-1 |
分子式 | C9H18O5S |
分子量 | 238.30 |
储存条件 | -20℃,避光,有效期1年 |
纯度 | ≥99% |
外观(性状) | 液体 |
单位 | 瓶 |
规格 | 5ml |
IPTG 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷
MDL | MFCD00063273 |
EC | EINECS 206-703-0 |
别名 | Isopropyl β-D-thiogalactoside |
CAS | 367-93-1 |
分子式 | C9H18O5S |
分子量 | 238.3 |
纯度 | ≥99% |
单位 | 瓶 |
生物活性 | IPTG 是异乳糖模拟物,能够引起乳糖操纵子的转录过程,因此能够诱导乳糖操纵子下游基因对应蛋白的表达。[1] |
In Vitro | 大肠杆菌的IPTG摄取可以与乳糖通透酶的作用无关,因为还涉及其他运输途径。在低浓度时,IPTG通过乳糖通透酶进入细胞,但在高浓度(通常用于蛋白质诱导)时,IPTG可以独立于乳糖通透酶进入细胞[1]。 |
SMILES | O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1SC(C)C |
靶点 | Others |
数据来源文献 | [1]. Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside |
规格 | 100mg 10mM*1mL (in Water) 500mg |
IPTG 是异乳糖模拟物,能够引起乳糖操纵子的转录过程,因此能够诱导乳糖操纵子下游基因对应蛋白的表达。