ScreenFect™ siRNA转染试剂生物试剂-Wako富士胶片和光

ScreenFect™ siRNA转染试剂生物试剂-Wako富士胶片和光

供货周期 一个月以上 应用领域 生物产业

ScreenFect™ siRNA
siRNA Transfection Reagent
ScreenFect ™ siRNA 是点击化学※ 筛选实验选出的阳离子脂质体的新型转染试剂,适用于转染多种真核细胞(HeLa,HEK293,MEF cell 等),可直接添加于血清培养基。由于低细胞毒性不含任何有毒有害成分,转染后无须更换培养基。

ScreenFect™ siRNAScreenFect™ siRNA转染试剂生物试剂-Wako富士胶片和光

siRNA Transfection Reagent

 

 

 

◆原理

ScreenFect™ siRNA转染试剂生物试剂-Wako富士胶片和光

ScreenFect ™ siRNA 是点击化学※ 筛选实验选出的阳离子脂质体的新型转染试剂,适用于转染多种真核细胞(HeLa,HEK293,MEF cell 等),可直接添加于血清培养基。由于低细胞毒性不含任何有毒有害成分,转染后无须更换培养基。

 

 

◆特点•优势

 

 

   高基因沉默效率 & 极低细胞毒性 & siRNA 使用量低至1 nM

   提供能优化siRNA 转染的缓冲液

    转染后无须更换培养基

    能与血清兼容

    可用于高通量筛选

    保质期长达12 个月

 

 

◆产品性能

 

ScreenFect™ siRNA转染试剂生物试剂-Wako富士胶片和光

 

基因沉默效率                                                      细胞毒性

 

 

ScreenFect™ siRNA转染试剂生物试剂-Wako富士胶片和光

ScreenFect™ siRNA转染试剂生物试剂-Wako富士胶片和光

 

细胞系:小鼠胚胎成纤维细胞

细胞培养板:24 孔

转染靶位点:LRP6 

 

 细胞株:HEK293 细胞

细胞培养板:96 孔

染色方法:赫斯特染色

 

ScreenFectTM siRNA导入条件   

 

siRNA:1 pmol

转染试剂:0.1 μL

悬浮细胞:420 μL

 

 

◆案例•应用 

 

ScreenFect™ siRNA转染试剂生物试剂-Wako富士胶片和光

 

 

限制性快切酶QuickCut™ Dra I (Aha III)酶试剂盒Takara Clontech

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限制性快切酶QuickCut Dra I (Aha III)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 1610 QuickCut Dra I (Aha III) 200 Rxns ¥200
¥170
限制性快切酶QuickCut™ Dra I (Aha III) 限制性快切酶QuickCut™ Dra I (Aha III) 限制性快切酶QuickCut™ Dra I (Aha III)

*红字为促销价格,促销时间: 2024年3月1日-2024年4月30日

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限制性快切酶QuickCut™ Dra I (Aha III) 限制性快切酶QuickCut™ Dra I (Aha III) 限制性快切酶QuickCut™ Dra I (Aha III) 限制性快切酶QuickCut™ Dra I (Aha III) 限制性快切酶QuickCut™ Dra I (Aha III)
 
限制性快切酶QuickCut™ Dra I (Aha III)
限制性快切酶QuickCut™ Dra I (Aha III)  
限制性快切酶QuickCut™ Dra I (Aha III)
 
 
■ 识别位点
限制性快切酶QuickCut™ Dra I (Aha III)
 
■ 制品内容
□ 附带缓冲液  
     10X QuickCut Buffer 1.5 ml×1
     10X QuickCut Green Buffer 1.5 ml×1
 
■ 制品说明
□ 起源:Deinococcus radiophilus
□ 反应温度:37℃
□ 活性测定用底物:λ DNA
□ 活性检测:1 μl QuickCut限制酶在50 μl 1X QuickCut Buffer或1X QuickCut Green Buffer的反应体系中,在37℃条件下,经过5 min反应,将1 μg λ DNA 完全消化所需要的酶量。
□ 使用注意:
1) 不建议进行16 hr以上酶切,易导致星活性性。
2) 使用QuickCut限制酶进行双酶切或多酶切反应时,加入限制酶的总体积不能超过反应体系的1/10量;如果各酶的反应温度不同,建议按低温到高温的顺序加入相应的QuickCut限制酶进行分步酶切反应。
3) 10X QuickCut Green Buffer可能会干扰酶切产物的荧光分析。因此,酶切产物荧光分析检测时推荐使用无色的10X QuickCut Buffer。
4) 10X QuickCut Green Buffer如出现沉淀,室温下振荡5分钟可使沉淀完全溶解,不影响使用。
 
 

页面更新:2024-01-25 10:12:33

限制性快切酶QuickCut™ EcoR V酶试剂盒Takara Clontech

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限制性快切酶QuickCut EcoR V
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 1612 QuickCut EcoR V 200 Rxns ¥200
¥170
限制性快切酶QuickCut™ EcoR V 限制性快切酶QuickCut™ EcoR V 限制性快切酶QuickCut™ EcoR V

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限制性快切酶QuickCut™ EcoR V 限制性快切酶QuickCut™ EcoR V 限制性快切酶QuickCut™ EcoR V 限制性快切酶QuickCut™ EcoR V 限制性快切酶QuickCut™ EcoR V
 
限制性快切酶QuickCut™ EcoR V
限制性快切酶QuickCut™ EcoR V  
限制性快切酶QuickCut™ EcoR V
 
 
■ 识别位点
限制性快切酶QuickCut™ EcoR V
 
■ 制品内容
□ 附带缓冲液  
     10X QuickCut Buffer 1.5 ml×1
     10X QuickCut Green Buffer 1.5 ml×1
 
■ 制品说明
□ 起源:Escherichia coli
□ 反应温度:37℃
□ 活性测定用底物:λ DNA
□ 活性检测:1 μl QuickCut限制酶在50 μl 1X QuickCut Buffer或1X QuickCut Green Buffer的反应体系中,在37℃条件下,经过10 min反应,将1 μg λ DNA 完全消化所需要的酶量。
□ 甲基化的影响:不受CG methylase的影响。
□ 使用注意:
1) 不建议进行16 hr以上酶切,易导致星活性。
2) 使用QuickCut限制酶进行双酶切或多酶切反应时,加入限制酶的总体积不能超过反应体系的1/10量;如果各酶的反应温度不同,建议按低温到高温的顺序加入相应的QuickCut限制酶进行分步酶切反应。
3) 10X QuickCut Green Buffer可能会干扰酶切产物的荧光分析。因此,酶切产物荧光分析检测时推荐使用无色的10X QuickCut Buffer。
4) 10X QuickCut Green Buffer如出现沉淀,室温下振荡5分钟可使沉淀完全溶解,不影响使用。
 
 

页面更新:2023-12-21 14:40:37

培养细胞RT-PCR定量检测试剂盒CellAmp™ Whole Transcriptome Amplification Kit (Real Time) Ver.2酶试剂盒Takara Clontech

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培养细胞RT-PCR定量检测试剂盒CellAmp Whole Transcriptome Amplification Kit (Real Time) Ver.2
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 3734 CellAmp Whole Transcriptome Amplification Kit (Real Time) Ver.2 100 Rxns ¥1,685
¥1432
培养细胞RT-PCR定量检测试剂盒CellAmp™ Whole Transcriptome Amplification Kit (Real Time) Ver.2 培养细胞RT-PCR定量检测试剂盒CellAmp™ Whole Transcriptome Amplification Kit (Real Time) Ver.2 培养细胞RT-PCR定量检测试剂盒CellAmp™ Whole Transcriptome Amplification Kit (Real Time) Ver.2

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■ 制品内容 (5 μl反应体系,100次量)培养细胞RT-PCR定量检测试剂盒CellAmp™ Whole Transcriptome Amplification Kit (Real Time) Ver.2
Lysis Buffer (4X) 150 μl
Recombinant RNase Inhibitor (40 U/μl) 30 μl
RT dT Primer 2 12 μl
dNTP Mixture (2.5 mM each) 12 μl
MgCl2 (22.5 mM) 36 μl
RT Enzyme Mix 2*1 36 μl
Exonuclease I (5 U/μl) 72 μl
TdT Buffer (5X) 144 μl
dATP (90 mM) 24 μl
TdT Enzyme Mix*2 54 μl
PCR Primer Mix 2 300 μl
RNase Free dH2O 1 ml
 
*1 含有PrimeScript Reverse Transcriptase、RNase Inhibitor。
*2 含有Terminal Deoxynucleotidyl Transferase、RNase H。
 
Limited Use Label License:[L54]
 
■ 制品说明
本制品是从少数细胞直接反转录合成cDNA,然后对反转录的cDNA进行扩增的试剂盒。扩增的cDNA可以作为Real Time PCR的模板使用。通常情况下,进行微量核酸提取时,纯化过程中核酸会有所损失,使用本制品不需要对细胞RNA和反转录的cDNA进行纯化,即可对反转录的cDNA高效扩增。
使用本试剂盒首先溶解细胞,然后使用dT Adaptor Primer(RT dT Primer 2)进行反转录反应,由mRNA合成cDNA,通过TdT酶对合成的cDNA进行dA加尾反应后,以此作为模板进行PCR反应扩增cDNA。
本制品除了能从少数细胞直接进行cDNA扩增外,也可以对微量的RNA进行cDNA扩增。
本试剂盒还添加了Exonuclease I 的处理步骤,能够抑制引物的非特异性扩增,并且提高低表达水平基因的扩增产量。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 注意事项
1. 为了保证反应液配制的准确性,进行各项反应时,应先按反应数+1的量配制Master Mix,然后再分装到每个反应管中。因为反应体系比较小,建议每次反应至少要配置5个反应以上的Master Mix。
2. 各步反应结束后,反应管放在冰上冷却,轻微离心后再进入下一步操作。
3. 请使用0.2 ml的Microtube和PCR仪进行反应。
 
 

页面更新:2024-01-31 15:03:55

TA克隆用试剂盒pMD™18-T Vector Cloning Kit酶试剂盒Takara Clontech

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TA克隆用试剂盒pMD18-T Vector Cloning Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 6011 pMD 18-T Vector Cloning Kit 20 Rxns ¥425
¥213
TA克隆用试剂盒pMD™18-T Vector Cloning Kit TA克隆用试剂盒pMD™18-T Vector Cloning Kit TA克隆用试剂盒pMD™18-T Vector Cloning Kit

*红字为促销价格,促销时间: 2024年3月1日-2024年4月30日

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TA克隆用试剂盒pMD™18-T Vector Cloning Kit TA克隆用试剂盒pMD™18-T Vector Cloning Kit TA克隆用试剂盒pMD™18-T Vector Cloning Kit TA克隆用试剂盒pMD™18-T Vector Cloning Kit TA克隆用试剂盒pMD™18-T Vector Cloning Kit
 
TA克隆用试剂盒pMD™18-T Vector Cloning Kit
TA克隆用试剂盒pMD™18-T Vector Cloning Kit  
TA克隆用试剂盒pMD™18-T Vector Cloning Kit
 
 
■ 制品内容
pMD 18-T Vector (50 ng/μl) 20 μl × 1 支
Control Insert (50 ng/μl) 10 μl × 1 支
Solution I* 75 μl × 2 支
   
* 使用时请于冰中融解。  
 
■ 制品说明
pMD 18-T Vector是一种高效克隆PCR产物 (TA Cloning) 的专用载体。本载体由pUC18载体改建而成,在pUC18载体的多克隆位点处的Xba I 和Sal I 识别位点之间插入了EcoR V 识别位点,用EcoR V 进行酶切反应后,再在两侧的3′端添加 “T” 而成。因大部分耐热性DNA聚合酶进行PCR反应时都有在PCR 产物的3′末端添加一个 “A” 的特性,所以使用本制品可以大大提高PCR产物的连接、克隆效率。
由于本载体以pUC18载体为基础构建而成,所以它具有同pUC18载体相同的功能。此外,本制品中的高效连接液Solution I 可以在短时间内 (约30分钟) 完成连接反应,其连接液可以直接用于细菌转化,大大方便了实验操作。本制品中的Control Insert (500 bp) 还可以用于Control反应。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 纯度
Control Insert经克隆后的白色菌落中,有90%以上含有Insert DNA片段。
 
■ 用途
1. 进行TA克隆,克隆PCR产物。
2. 对克隆后的PCR产物使用BcaBEST Sequencing Primers、M13 Primers进行DNA测序。
 
■ pMD 18-T Vector的结构
TA克隆用试剂盒pMD™18-T Vector Cloning Kit
 
■ 注意事项
1. Solution I 请于冰中融解。
2. 克隆时使用的Insert DNA片段 (PCR产物) 建议进行切胶回收纯化,否则PCR产物中的短片段DNA (甚至是电泳也无法确认的非特异性小片段)、残存引物等杂质都会影响TA克隆效率。
3. 按照本实验操作进行连接后,直接进行转化时的连接液不要超过20 μl。当要转化的DNA量较大或准备进行电转化时,需对连接液进行乙醇沉淀,纯化DNA后再进行转化。进行乙醇沉淀时使用Dr. GenTLE Precipitation Carrier (Code No.: 9094) 可以提高DNA的回收率。
4. 连接反应请在25℃以下进行,温度升高 (>26℃) 较难形成环状DNA。连接效率偏低时,可适当延长连接反应时间至数小时。
5. 本制品来源于pUC18载体,因此,适合pUC18载体的感受态细胞都可以使用,如:JM109等。
 
 

页面更新:2023-12-01 14:44:27

限制性快切酶QuickCut™ Not I酶试剂盒Takara Clontech

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限制性快切酶QuickCut Not I
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 1623 QuickCut Not I 25 Rxns ¥200
¥170
限制性快切酶QuickCut™ Not I 限制性快切酶QuickCut™ Not I 限制性快切酶QuickCut™ Not I

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限制性快切酶QuickCut™ Not I 限制性快切酶QuickCut™ Not I 限制性快切酶QuickCut™ Not I 限制性快切酶QuickCut™ Not I 限制性快切酶QuickCut™ Not I
 
限制性快切酶QuickCut™ Not I
限制性快切酶QuickCut™ Not I  
限制性快切酶QuickCut™ Not I
 
 
■ 识别位点
限制性快切酶QuickCut™ Not I
 
■ 制品内容
□ 附带缓冲液  
     10X QuickCut Buffer 500 μl
     10X QuickCut Green Buffer 500 μl
 
■ 制品说明
□ 起源:Escherichia coli carrying the plasmid encoding Not I gene
□ 反应温度:37℃
□ 活性测定用底物:pASF2
□ 活性检测:1 μl QuickCut限制酶在50 μl 1X QuickCut Buffer或1X QuickCut Green Buffer的反应体系中,在37℃条件下,经过10 min反应,将1 μg pASF2完全消化所需要的酶量。
□ 甲基化的影响:受CG methylase的影响。
□ 使用注意:
1) 不建议进行16 hr以上酶切,易导致星活性。
2) 使用QuickCut限制酶进行双酶切或多酶切反应时,加入限制酶的总体积不能超过反应体系的1/10量;如果各酶的反应温度不同,建议按低温到高温的顺序加入相应的QuickCut限制酶进行分步酶切反应。
3) 10X QuickCut Green Buffer可能会干扰酶切产物的荧光分析。因此,酶切产物荧光分析检测时推荐使用无色的10X QuickCut Buffer。
4) 10X QuickCut Green Buffer如出现沉淀,室温下振荡5分钟可使沉淀完全溶解,不影响使用。
 
 

页面更新:2024-01-25 10:13:43

限制性快切酶QuickCut™ Afl II酶试剂盒Takara Clontech

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限制性快切酶QuickCut Afl II
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 1602 QuickCut Afl II 100 Rxns ¥268
¥228
限制性快切酶QuickCut™ Afl II 限制性快切酶QuickCut™ Afl II 限制性快切酶QuickCut™ Afl II

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限制性快切酶QuickCut™ Afl II 限制性快切酶QuickCut™ Afl II 限制性快切酶QuickCut™ Afl II 限制性快切酶QuickCut™ Afl II 限制性快切酶QuickCut™ Afl II
 
限制性快切酶QuickCut™ Afl II
限制性快切酶QuickCut™ Afl II  
限制性快切酶QuickCut™ Afl II
 
 
■ 识别位点
限制性快切酶QuickCut™ Afl II
 
■ 制品内容
□ 附带缓冲液  
     10X QuickCut Buffer 500 μl×2
     10X QuickCut Green Buffer 500 μl×2
 
■ 制品说明
□ 起源:Escherichia coli carrying the plasmid encoding Afl II gene
□ 反应温度:37℃
□ 活性测定用底物:λ DNA
□ 活性测定:1 μl QuickCut限制酶在50 μl 1X QuickCut Buffer或1X QuickCut Green Buffer的反应体系中,在37℃条件下,经过5 min反应,将1 μg λ DNA完全消化所需要的酶量。
□ 使用注意:
1) 因该酶切出的突出末端比一般的4个碱基突出末端的连接效率低,所以必须使用平滑末端的连接条件。
2) 不建议进行16 hr以上酶切,易导致星活性。
3) 使用QuickCut限制酶进行双酶切或多酶切反应时,加入限制酶的总体积不能超过反应体系的1/10量;如果各酶的反应温度不同,建议按低温到高温的顺序加入相应的QuickCut限制酶进行分步酶切反应。
4) 10X QuickCut Green Buffer可能会干扰酶切产物的荧光分析。因此,酶切产物荧光分析检测时推荐使用无色的10X QuickCut Buffer。
5) 10X QuickCut Green Buffer如出现沉淀,室温下振荡5分钟可使沉淀完全溶解,不影响使用。
 
 
 

页面更新:2024-01-25 10:12:04

限制性快切酶QuickCut™ Hha I酶试剂盒Takara Clontech

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限制性快切酶QuickCut Hha I
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 1614 QuickCut Hha I 100 Rxns ¥964
¥819
限制性快切酶QuickCut™ Hha I 限制性快切酶QuickCut™ Hha I 限制性快切酶QuickCut™ Hha I

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限制性快切酶QuickCut™ Hha I 限制性快切酶QuickCut™ Hha I 限制性快切酶QuickCut™ Hha I 限制性快切酶QuickCut™ Hha I 限制性快切酶QuickCut™ Hha I
 
限制性快切酶QuickCut™ Hha I
限制性快切酶QuickCut™ Hha I  
限制性快切酶QuickCut™ Hha I
 
 
■ 识别位点
限制性快切酶QuickCut™ Hha I
 
■ 制品内容
□ 附带缓冲液  
     10X QuickCut Buffer 500 μl×2
     10X QuickCut Green Buffer 500 μl×2
 
■ 制品说明
□ 起源:Escherichia coli carrying the plasmid encoding Hha I gene
□ 反应温度:37℃
□ 活性测定用底物:λ DNA
□ 活性检测:1 μl QuickCut限制酶在50 μl 1X QuickCut Buffer或1X QuickCut Green Buffer的反应体系中,在37℃条件下,经过5 min反应,将1 μg λ DNA 完全消化所需要的酶量。
□ 甲基化的影响:受CG methylase的影响。
□ Star活性:高甘油浓度条件下,识别序列会发生变化。
□ 使用注意:
1) 不建议进行16 hr以上酶切,易导致星活性。
2) 使用QuickCut限制酶进行双酶切或多酶切反应时,加入限制酶的总体积不能超过反应体系的1/10量;如果各酶的反应温度不同,建议按低温到高温的顺序加入相应的QuickCut限制酶进行分步酶切反应。
3) 10X QuickCut Green Buffer可能会干扰酶切产物的荧光分析。因此,酶切产物荧光分析检测时推荐使用无色的10X QuickCut Buffer。
4) 10X QuickCut Green Buffer如出现沉淀,室温下振荡5分钟可使沉淀完全溶解,不影响使用。
 
 

页面更新:2024-01-25 10:12:50

粗提样品扩增试剂盒MightyAmp™ Genotyping Kit酶试剂盒Takara Clontech

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粗提样品扩增试剂盒MightyAmp Genotyping Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara R074A MightyAmp Genotyping Kit 200 Rxns ¥1,202
¥1022
粗提样品扩增试剂盒MightyAmp™ Genotyping Kit 粗提样品扩增试剂盒MightyAmp™ Genotyping Kit 粗提样品扩增试剂盒MightyAmp™ Genotyping Kit

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粗提样品扩增试剂盒MightyAmp™ Genotyping Kit 粗提样品扩增试剂盒MightyAmp™ Genotyping Kit 粗提样品扩增试剂盒MightyAmp™ Genotyping Kit 粗提样品扩增试剂盒MightyAmp™ Genotyping Kit
 
 
■ 制品内容(50 μl反应, 200次量)
MightyAmp DNA Polymerase (1.25 U/μl)
200 μl
2 × MightyAmp Buffer (Mg2+,dNTP plus)* 1.25 ml × 4
5 × Loading Dye 1 ml × 3
Extraction Buffer
20 ml
Proteinase K (20 mg/ml)
200 μl
 
*:Mg2+浓度是4 mM (2×),dNTP浓度是各800 μM (2×)。
 
 
■ 制品说明
MightyAmp Genotyping Kit是一种从小鼠尾等动物组织或植物组织中简单、快速地提取DNA后直接用PCR扩增的试剂盒。
试剂盒中含有提取DNA的专用Buffer和Proteinase K,可直接从动植物组织中提取DNA。PCR反应中使用了对粗提样品显示出很强扩增能力的MightyAmp DNA Polymerase,可对普通PCR酶难以扩增的含有PCR阻害物的粗提样品以及GC Rich、AT Rich的模板均可在宽广的模板范围内进行有效扩增。特别适合2 kb左右片段的扩增,并对低浓度起始的模板也能进行很好的扩增。本制品也适用于基因型的判定。
同时,为了减轻混入杂质的影响,PCR扩增产物电泳时使用专用5×Loading Dye进行Agarose Gel电泳,在短时间内可检测出PCR扩增产物。
本酶是Hot Start型PCR扩增用DNA聚合酶。98℃高温加热前,抗体与酶结合,抑制聚合酶活性,可以避免非特异性扩增。
 
保存
-20℃。
Extraction Buffer开封后请于室温(约15-25℃)保存。
 
 

页面更新:2023-11-01 16:14:19

表达载体pCold™ Vector Set酶试剂盒Takara Clontech

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表达载体pCold Vector Set
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 3360 pCold Vector Set 1 Set ¥5,157 表达载体pCold™ Vector Set 表达载体pCold™ Vector Set 表达载体pCold™ Vector Set
Takara 3361 pCold I DNA 25 μg ¥3,094 表达载体pCold™ Vector Set 表达载体pCold™ Vector Set 表达载体pCold™ Vector Set
Takara 3362 pCold II DNA 25 μg ¥3,094 表达载体pCold™ Vector Set 表达载体pCold™ Vector Set 表达载体pCold™ Vector Set
Takara 3363 pCold III DNA 25 μg ¥3,094 表达载体pCold™ Vector Set 表达载体pCold™ Vector Set 表达载体pCold™ Vector Set
Takara 3364 pCold IV DNA 25 μg ¥3,094 表达载体pCold™ Vector Set 表达载体pCold™ Vector Set 表达载体pCold™ Vector Set
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□ 贮存溶液  
     Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM
     EDTA 1 mM
   
【注意】本制品仅限用于科研目的,凡用于商业用途,须获得Takara公司授权许可。了解详细信息以及获取相关许可文件,请致电4006518761或邮件联络service。
 
■ GenBank登录
      Accession No.
     pCold I DNA AB186388
     pCold II DNA AB186389
     pCold III DNA AB186390
     pCold IV DNA AB186391
 
■ 链长
     pCold I DNA 4,407 bp
     pCold II DNA 4,392 bp
     pCold III DNA 4,377 bp
     pCold IV DNA 4,359 bp
 
■ 保存
-20℃。
注意:自收到之日起,适当条件下保存,两年内有效。
 
■ 制品说明
在后基因组研究中,蛋白质结构与功能的解析是一个重要的课题,有效的蛋白质表达系统是一项必不可少的基础性技术。以大肠杆菌为宿主的表达系统广泛应用于重组蛋白质的生产中。大肠杆菌表达系统具有使用方便和成本低的优点,但是,有一些基因会出现表达困难或者表达的蛋白质不可溶等问题。为了解决这些问题,Takara公司与 Professor Masayori Inouye (University of Medicine and Dentistry of New Jersey, USA)联合研发了冷休克表达载体pCold DNA系列,它利用了大肠杆菌的低温表达基因 (冷休克基因),并具备上述优点。随着蛋白质的功能解析、结构解析工作的开展,这个系列制品成为蛋白质研究的重要工具。
[产品概述及特点]
当培养温度切换到低温时,大肠杆菌暂时停止生长,大部分的大肠杆菌蛋白质表达减少,但是一类称为冷休克蛋白的蛋白质被特异性诱导表达。pCold DNA I~IV是应用冷休克基因之一的cspA基因启动子而设计并可以有效表达蛋白质的冷休克表达载体。在cspA启动子下游插入了lac operator,可以严紧调控蛋白质表达。另外,在cspA启动子下游还有5’非编码区 (5’UTR)、TEE序列、His tag序列、Factor Xa切断序列和多克隆位点。因为本制品应用了大肠杆菌来源的启动子,所以大部分的大肠杆菌菌株都可以作为表达宿主使用。pCold系列载体根据TEE序列、His tag序列和Factor Xa切断序列的有无,分成四种pCold载体,可根据使用目的选择相应的载体。
 
pCold 载体图谱
表达载体pCold™ Vector Set
表达载体pCold™ Vector Set
 
 

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