重组体核酸内切酶Cryonase™ Cold-active Nuclease酶试剂盒Takara Clontech

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重组体核酸内切酶Cryonase Cold-active Nuclease
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 2670A Cryonase™ Cold-active Nuclease 10,000 U ¥756 重组体核酸内切酶Cryonase™ Cold-active Nuclease 重组体核酸内切酶Cryonase™ Cold-active Nuclease 重组体核酸内切酶Cryonase™ Cold-active Nuclease
Takara 2670B (A × 5) Cryonase? Cold-active Nuclease 10,000 U × 5 ¥3,575 重组体核酸内切酶Cryonase™ Cold-active Nuclease 重组体核酸内切酶Cryonase™ Cold-active Nuclease 重组体核酸内切酶Cryonase™ Cold-active Nuclease
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■ 制品内容
Cryonase Cold-active Nuclease (20 U/μl) 500 μl
   
Limited Use Label License:[M5]
 
■ 制品说明
本酶是一种重组体核酸内切酶,来源于嗜冷菌Shewanella sp.,从大肠杆菌纯化而来。它能够切断所有类型的DNA和RNA (单链、双链、线性以及环状),即使在冰上操作也能够进行反应。因此,本酶特别适用于消化蛋白质等一些热不稳定基质中的核酸物质。
 
■ 起源
Purified from E.coli
 
■ 活性定义
以鲑鱼精子DNA为底物,在37℃、pH7.5的条件下,1分钟内使反应液的260 nm吸光度增加0.001所需的酶量定义为1个活性单位(U)。
 
■ 纯度
蛋白质分解酶检出量低于检出界限。
 
■ 用途
1. 降解基因组DNA;
2. 从大肠杆菌细胞中抽提蛋白质时,降低溶液黏度;
3. 双向电泳时,对样品进行预处理;
4. 病毒纯化时的预处理。
 
 

页面更新:2024-02-29 09:45:21

CycleavePCR™ Salmonella Detection Kit Ver.2.0酶试剂盒Takara Clontech

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CycleavePCR Salmonella Detection Kit Ver.2.0
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara CY205 CycleavePCR Salmonella Detection Kit Ver.2.0 50 Rxns ¥2,063 CycleavePCR™ Salmonella Detection Kit Ver.2.0 CycleavePCR™ Salmonella Detection Kit Ver.2.0 CycleavePCR™ Salmonella Detection Kit Ver.2.0
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■ 制品内容 (25 μl × 50次量)
2X Cycleave Reaction Mixture (2X conc.)
625 μl
SIN Primer/Probe Mix (FAM、ROX标记) (5X conc.)*
250 μl
dH2O 1 ml
SIN Positive Control
150 μl (30次反应量)
   
* 含荧光标记探针,应避光保存。引物由SHIMADZU CORPORATION生产制造。
 
 
■ 制品说明
沙门氏菌 (Salmonella) 是与E.CoilShigella同属于一群的重要肠道致病菌,这一类细菌在自然界中分布很广,其中有2,500多种被确认为血清型。近年来由于Salmonella Enteritidis引起的食物中毒急剧增加。
本制品是对大部分沙门氏菌都具有的基因-侵袭蛋白A (invasion protein A,invA) 基因进行快速、准确检出的Real Time PCR试剂盒。在PCR反应中每个循环包括三个过程:模板变性、引物退火、聚合酶作用下的延伸,该反应可以实现目的基因的指数倍扩增,使用Real Time PCR可实时监测扩增过程。 制品中使用了改良后的Hot Start法用DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq HS,可防止在循环反应前因引物错配、引物二聚体所产生的非特异性扩增。
该检测使用了Cycling Probe法。Cycling Probe法是由RNA和DNA构成的杂合探针与RNase H组合使用的高灵敏度检出法,能够高效率地检出扩增过程中及扩增结束时的目的基因片段。Cycling Probe内部含有RNA碱基,一端标记荧光物质,另一端标记荧光淬灭物质,当探针处于完整状态时,由于荧光淬灭作用抑制荧光物质发出荧光,但当探针与扩增产物中的互补序列杂交后,RNase H在RNA部分将探针切断,淬灭抑制作用解除,荧光物质发出荧光,通过测定荧光强度,能够实时监控扩增产物量。
制品中检测沙门氏菌invA基因的探针荧光物质使用了FAM标记,内参照检测用探针的荧光物质使用了ROX标记,在同一反应管内对沙门氏菌invA基因及内参照 (Internal Control) 同时进行扩增,通过两种不同荧光标记探针可以对invA基因和内参基因同时检定,实现双通道同步检测。其中,对内参照反应的检测,可以监控反应是否正常进行,防止假阴性结果的产生。本检测无需电泳,简单快速,灵敏度高、特异性强。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 注意事项
1. Real Time PCR仪的使用请按照说明书进行。
2. 如果杂合探针、引物因混入核酸酶而被降解,则不能准确进行检测。实验者的汗液和唾液也会带入核酸酶,操作时应注意。
3. PCR反应是灵敏度非常高的反应。为防止污染,建议从反应液的配制到检测的实验过程中,设定以下3个实验区域,并进行物理性隔离。
  区域1:反应液的配制及分装。
区域2:检测样品的制备。
区域3:向反应液中添加检测样品,进行反应、检出。
由于本制品使用Real Time PCR法,扩增反应与检测同时进行,反应后的扩增产物不需要再进行电泳。为了避免污染,严禁从Tube管中取出扩增产物。
4. 使用本制品获得的结果是以Real Time PCR仪的分析为基础来判定的。如果Real Time PCR仪的任一功能出现问题都可能导致错误的判定结果,因此,要依据仪器说明书来正确设置Real Time PCR仪。
 

页面更新:2023-03-22 09:53:07

QCdetect™ 残留DNA检测试剂盒,大肠杆菌用试剂盒-Wako富士胶片和光

QCdetect™ 残留DNA检测试剂盒,大肠杆菌用试剂盒-Wako富士胶片和光

供货周期 一个月以上 应用领域 生物产业

本产品是使用qPCR法(探针法)定量大肠杆菌来源基因组DNA的试剂盒。
推荐用于生物制药的质量管理以及生产工艺开发中的宿主细胞来源残留DNA检测。

QCdetect™ Residual DNA Detection Kit for E. coliQCdetect™ 残留DNA检测试剂盒,大肠杆菌用试剂盒-Wako富士胶片和光

QCdetect™ 残留DNA检测试剂盒,大肠杆菌用

本产品是使用qPCR法(探针法)定量大肠杆菌来源基因组DNA的试剂盒。

推荐用于生物制药的质量管理以及生产工艺开发中的宿主细胞来源残留DNA检测。

◆特点

 检测下限:≥0.003 pg/test

 定量下限:≥0.03 pg/test

 高线性的标准曲线

 批次间差异小,再现性高

● 使用预混合缓冲液,操作简单

检测波长


 E. coli gDNA 520 nm(例:FAM)

 Internal Control 555 nm(例:HEX)

※Internal Control为非天然的合成DNA。

试剂盒组成


1×PCR Master Mix——2×1 mL

DNA Dilution Buffer (DDB) ——1×10 mL

E. coli Control DNA——1×40 μL

应用实例


标准曲线


使用本试剂盒对0.0003 pg~30,000 pg范围内的大肠杆菌来源gDNA进行qPCR检测,并制备标准曲线(n=3)。

即使是0.003 pg~30,000 pg这一大范围的浓度内,也能获得高线性的标准曲线。

QCdetect™ 残留DNA检测试剂盒,大肠杆菌用试剂盒-Wako富士胶片和光

pg/well

30000

3000

300

30

3

0.3

0.03

0.003

0.0003

Ct

15.655

19.011

22.335

25.709

28.932

31.941

33.825

37.731

N.D

15.393

18.976

22.414

25.675

28.875

31.684

34.866

38.012

15.713

19.091

22.400

25.696

28.945

31.657

34.507

N.D

Average Ct

15.587

19.026

22.383

25.693

28.917

31.760

34.399

37.872

S.E

0.1707

0.0593

0.0418

0.017

0.0371

0.1566

0.5292

0.1989






DNA片段的检测

为了测试该产品能否检测大肠杆菌gDNA,通过超声处理使大肠杆菌 gDNA片段化,并使用本试剂盒进行检测。

即使是检测片段gDNA,与检测完整gDNA相比,也有着相同的检测灵敏度。低浓度的gDNA中也没有发现灵敏度的下降。

QCdetect™ 残留DNA检测试剂盒,大肠杆菌用试剂盒-Wako富士胶片和光

高浓度蛋白样品的应用示例 —配合使用残留DNA提取/试剂盒(碘/化钠法) —


向含有人血浆来源γ-球蛋白(75 mg/mL)的样品中分别添加0.1、1、10 ng/mL的大肠杆菌gDNA,使用残留DNA提取/试剂盒(碘/化钠法)提取DNA。然后,使用本产品定量所得DNA,计算加标回收率。

DNA添加量

0.1 ng/mL

1 ng/mL

10 ng/mL

检测系统(PCR反应)中的DNA添加量

1 pg

10 pg

100 pg

回收率(平均)

96.9%

85.7%

86.9%

SD

0.013

0.67

1.4

CV%

1.3%

7.8%

1.6%



Detection of E. coli-derived genomic DNA

Detecting Internal Control

QCdetect™ 残留DNA检测试剂盒,大肠杆菌用试剂盒-Wako富士胶片和光

QCdetect™ 残留DNA检测试剂盒,大肠杆菌用试剂盒-Wako富士胶片和光

结果显示,即使是含有高浓度蛋白的样品,大肠杆菌gDNA也有着高回收率。

◆产品列表

产品编号

产品名称

产品规格

290-85301

QCdetect™ Residual DNA Detection Kit for E. coli

QCdetect™ 残留DNA检测试剂盒,大肠杆菌用

100 tests




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QCdetect™ Residual DNA Detection Kit for CHO cells

QCdetect™ 残留DNA检测试剂盒,CHO细胞用

100 tests


残留DNA提取/试剂盒(碘/化钠法)

产品编号

产品名称

产品规格

292-81101

DNA Extractor® Kit for Residual DNA, CP Method

(Sodium Iodide Method)

残留DNA提取/试剂盒(碘/化钠法)

50 tests



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※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。

冷休克表达载体pCold™ TF DNA酶试剂盒Takara Clontech

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冷休克表达载体pCold TF DNA
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 3365 pCold TF DNA 25 μg ¥4,126 冷休克表达载体pCold™ TF DNA 冷休克表达载体pCold™ TF DNA 冷休克表达载体pCold™ TF DNA
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□ 贮存溶液  
     Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM
     EDTA 1 mM
   
【注意】本制品仅限用于科研目的,凡用于商业用途,须获得Takara公司授权许可。了解详细信息以及获取相关许可文件,请致电4006518761或邮件联络service。
 
■ 制品说明
pCold TF DNA的研发则避免了转化操作的复杂性,它是一种以大肠杆菌的伴侣蛋白Trigger Factor (TF)作为可溶性标签的融合型冷休克表达载体。TF分子量为48 kDa,Trigger Factor是一种原核的核糖体结合伴侣蛋白质,能够促进新生肽链的共翻译折叠。TF来源于大肠杆菌,与其他生物来源的标签相比,在大肠杆菌中表达效率高,可溶性效果好。
本载体在cspA启动子下游插入了5’非编码区(5’UTR)、TEE(翻译增强元件)序列、His-Tag序列、TF序列和多克隆位点(MCS)。在cspA启动子下游还插入了lac operator,可以严紧调控蛋白质表达。并且在TF序列和MCS之间插入HRV 3C Protease、Thrombin和Factor Xa的切断位点,用来消除融合蛋白质的标签。pCold TF DNA应用大肠杆菌的启动子,和其他的pCold DNA一样,大多数的大肠杆菌都可以作为表达宿主。利用pCold TF DNA,通过TF的可溶性标记功能和分子伴侣作用,可以使难表达的基因得到可溶性表达。
 
■ 保存
-20℃。
*自收到之日起,适当条件下保存,两年内有效。
 
pCold TF DNA载体图谱
冷休克表达载体pCold™ TF DNA
 

页面更新:2024-01-25 15:45:51

BcaBEST RT-PCR试剂盒BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1酶试剂盒Takara Clontech

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BcaBEST RT-PCR试剂盒BcaBEST RNA PCR Kit Ver.1.1
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara RR023A BcaBEST RNA PCR Kit Ver.1.1 100 Rxns ¥1,236 BcaBEST RT-PCR试剂盒BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1 BcaBEST RT-PCR试剂盒BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1 BcaBEST RT-PCR试剂盒BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1
Takara RR023B (A × 2) BcaBEST RNA PCR Kit Ver.1.1 100 Rxns × 2 ¥2,367 BcaBEST RT-PCR试剂盒BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1 BcaBEST RT-PCR试剂盒BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1 BcaBEST RT-PCR试剂盒BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1
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BcaBEST RT-PCR试剂盒BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1 BcaBEST RT-PCR试剂盒BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1 BcaBEST RT-PCR试剂盒BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1 BcaBEST RT-PCR试剂盒BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1
 
 
■ 制品内容 (Code No.: RR023A : 100次量*1) BcaBEST RT-PCR试剂盒BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1
BcaBEST Polymerase (22 U/μl) 50 μl
RNase Inhibitor (40 U/μl) 25 μl
Random 9 mers (50 μM) 50 μl
Oligo dT Primer (50 μM) 50 μl
RNase Free dH2O 1 ml
Bca-Optimized Taq (5 U/μl) 25 μl
2 × Bca lst Buffer 1.25 ml × 2 支
5 × Bca 2nd Buffer 800 μl
dNTP Mixture (各10 mM) 50 μl
MgSO4 (25 mM) 500 μl
Control F-1 Primer*2 (20 μM) 25 μl
Control R-1 Primer*3 (20 μM) 25 μl
Positive Control RNA (2 × 105 copies/μl) 25 μl
   
*1 反转录反应10 μl,PCR反应体系50 μl,可使用100次。
*2 Positive Control RNA用上游引物。
*3 Positive Control RNA用下游引物。
 
■ 制品说明
PCR(Polymerase Chain Reaction;聚合酶链式反应)是一种体外扩增DNA的简单而有效的方法。虽然原理上PCR法是扩增DNA,RNA不能直接被扩增,但是经过反转录酶的作用把RNA反转录成cDNA后,PCR法便可应用于RNA的解析了。目前,此方法已广泛应用于RNA的构造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表达解析等多种领域。
本试剂盒含有从RNA反转录到cDNA以及扩增此cDNA所必需的全部试剂,即用Bacillus caldotenax来源的BcaBEST Polymerase从RNA合成cDNA,然后在同一试管内加入应用LA PCR技术研制的Bca-Optimized Taq扩增此cDNA。此外,使用BcaBEST Polymerase进行反转录反应的最适温度是65℃,所以对具有复杂二级结构的RNA特别适合。
 
■ 各种引物的序列
引物名称 各引物序列
Random 9 mers   5′-NNNNNNNNN-3′
Oligo dT Primer   包含Takara特别设计的dT区域。本序列与TaKaRa RNA PCR Kit(AMV)Ver.3.0(Code No. RR019A/B)及TaKaRa RNA LA PCR Kit(AMV)Ver.1.1(Code No. RR012A)中的Oligo dT-Adaptor Primer的序列不同,没有M13 Primer M4区域。
Control F-1 Primer   5′-CTGCTCGCTTCGCTACTTGGA-3′
Control R-1 Primer   5′-CGGCACCTGTCCTACGAGTTG-3′
 
■ 试剂盒的原理
 
BcaBEST RT-PCR试剂盒BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1
BcaBEST RNA PCR的原理图
 
■ 试剂盒特点
RNA模板
  适用于所有RNA (对富含GC的mRNA及具有复杂二级结构的mRNA特别有效)
扩增片段大小
   5 kb以下
反转录酶
   BcaBEST Polymerase (最适温度65℃)
DNA聚合酶
   Bca-Optimized Taq
RNase Inhibitor
   必须使用 (试剂盒中含有)
合成cDNA第一条链的引物
  Random 9 mers、Oligo dT-Adaptor Primer或 特异性下游PCR Primer 可供选择
操 作
   在同一反应管中进行 (反转录酶在进行PCR反应前须进行高温失活)
 
 

页面更新:2024-01-31 14:53:55

限制性快切酶QuickCut™ Sph I酶试剂盒Takara Clontech

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限制性快切酶QuickCut Sph I
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 1632 QuickCut Sph I 50 Rxns ¥251
¥213
限制性快切酶QuickCut™ Sph I 限制性快切酶QuickCut™ Sph I 限制性快切酶QuickCut™ Sph I

*红字为促销价格,促销时间: 2024年3月1日-2024年4月30日

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限制性快切酶QuickCut™ Sph I 限制性快切酶QuickCut™ Sph I 限制性快切酶QuickCut™ Sph I 限制性快切酶QuickCut™ Sph I 限制性快切酶QuickCut™ Sph I
 
限制性快切酶QuickCut™ Sph I
限制性快切酶QuickCut™ Sph I  
限制性快切酶QuickCut™ Sph I
 
 
■ 识别位点
限制性快切酶QuickCut™ Sph I
 
■ 制品内容
□ 附带缓冲液  
     10X QuickCut Buffer 500 μl
     10X QuickCut Green Buffer 500 μl
 
■ 制品说明
□ 起源:Streptomyces phaeochromogenes
□ 反应温度:37℃
□ 活性测定用底物:λ DNA
□ 活性检测:1 μl QuickCut限制酶在50 μl 1X QuickCut Buffer或1X QuickCut Green Buffer的反应体系中,在37℃条件下,经过5 min反应,将1 μg λ DNA 完全消化所需要的酶量。
□ 甲基化的影响:不受CG methylase的影响。
□ 使用注意:
1) 不建议进行16 hr以上酶切,易导致星活性。
2) 使用QuickCut限制酶进行双酶切或多酶切反应时,加入限制酶的总体积不能超过反应体系的1/10量;如果各酶的反应温度不同,建议按低温到高温的顺序加入相应的QuickCut限制酶进行分步酶切反应。
3) 10X QuickCut Green Buffer可能会干扰酶切产物的荧光分析。因此,酶切产物荧光分析检测时推荐使用无色的10X QuickCut Buffer。
4) 10X QuickCut Green Buffer如出现沉淀,室温下振荡5分钟可使沉淀完全溶解,不影响使用。
 
 

页面更新:2024-01-25 10:14:38

聚肽 Corystein™ (Purothionin)酶试剂盒Takara Clontech

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聚肽 Corystein (Purothionin)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 7311 Corystein (Purothionin) 5 mg Inquire 聚肽 Corystein™ (Purothionin) 聚肽 Corystein™ (Purothionin) 聚肽 Corystein™ (Purothionin)
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■ 制品说明
Corystein从小麦粉中提纯的,是一种聚肽,也叫Purothionin。Corystein能催化蛋白质形成正确二硫键。与Thioredoxin (大肠杆菌来源) 合用,能进一步促进各种蛋白质的二硫键形成。
 
■ 保存
4℃。
 
■ 起源
wheat flour
 
制品形态
冻结干燥品
 
■ 特性
分子量:5,000 (amino acid composition)
等电点:10.0
稳定的pH范围:pH2.0~10.0
热稳定性:< 80℃时稳定
 
■ 用途
矫正二硫键,促进蛋白质活化。与Thioredoxin合用能促进二硫键的正确形成。
 
 

页面更新:2024-02-29 09:41:40

高效提取、精制酵母菌基因组DNA试剂盒Dr. GenTLE™ (from Yeast) High Recovery酶试剂盒Takara Clontech

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高效提取、精制酵母菌基因组DNA试剂盒Dr. GenTLE (from Yeast) High Recovery
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 9082 Dr. GenTLE (from Yeast) High Recovery 30 Rxns ¥516 高效提取、精制酵母菌基因组DNA试剂盒Dr. GenTLE&trade; (from Yeast) High Recovery 高效提取、精制酵母菌基因组DNA试剂盒Dr. GenTLE&trade; (from Yeast) High Recovery 高效提取、精制酵母菌基因组DNA试剂盒Dr. GenTLE&trade; (from Yeast) High Recovery
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■ 制品内容高效提取、精制酵母菌基因组DNA试剂盒Dr. GenTLE&trade; (from Yeast) High Recovery
GenTLE Yeast Solution A*1,2 15 ml
GenTLE Yeast Solution B*3 3 ml
GenTLE Yeast Solution C 6 ml
TE Buffer 6 ml
 
* 1 GenTLE Yeast Solution A中含有酵母细胞破壁酶,避免剧烈震荡或其他不正当操作使酶失活。
* 2 据报道,GenTLE Yeast Solution A中作为酵母细胞破壁酶的Zymolyase-100T含有少量真菌DNA*
*:Jpn. J. Med. Mycol . (2009), 50, No. 4, 259-262
* 3 如果GenTLE Yeast Solution B出现沉淀,可于37℃温浴使其完全溶解后使用。
 
■ 制品说明
Dr. GenTLE (from Yeast) High Recovery是一种可以从酵母菌中高效抽提、精制基因组DNA的试剂盒。本试剂盒主要利用酵母菌破壁酶以及盐析法进行酵母菌DNA的提取。通过离心收集酵母菌细胞,加入GenTLE Yeast Solution A (含酵母细胞破壁酶Zymolyase-100T) 消化细胞壁,然后加入GenTLE Yeast Solution B使细胞裂解,添加GenTLE Yeast Solution C盐析、离心去除裂解液中的蛋白质等杂质,最后通过异丙醇沉淀获得酵母基因组DNA。
使用本试剂盒提取的酵母基因组DNA适合于大部分基因工程实验,如Southern blotting、PCR反应、限制酶消化等。适用酵母菌种如下表A和B所示。本试剂盒可以从1~2×108过夜培养的酵母菌中纯化得到4~10 μg较为完整的 (35~200 kb) 酵母菌基因组DNA。
 
使用Dr. GenTLE (from Yeast) High Recovery可提取DNA的酵母菌种(属)一览表
A 能够提取DNA的酵母菌菌种 Ashbya,Candida,Debaryomyces,Endomyces,Eremothecium, Hanseniaspora,Hansenula,Kloeckera,Kluyveromyces,Lipomyces,Metschikowia, Pullularia Saccharomyces,Saccharomycopsis,Saccharomycodes,Schizosaccharomyces,Selenozyma,Trigonopsis,Wickerhamia
B 能够提取,但个别株(Strain)提取困难的酵母菌菌种 Bretanomyces,Cryptococcus,Nadsonia,Pichia,Rodosporidium,Schwanniomyces,Stephnoascus,Torulopsis
C 提取困难的酵母菌菌种 Bullera,Pityrosporum,Rhosotorula,Sporidiobolus,Sporobolomyces,Stetigmatomyces,Trichosporon
 
■ 保存
4℃。GenTLE Yeast Solution B可以在室温保存。如果在低温保存后出现沉淀,可于37℃温浴使其完全溶解后使用。
 
■ 实验操作流程图
高效提取、精制酵母菌基因组DNA试剂盒Dr. GenTLE&trade; (from Yeast) High Recovery
 
 

页面更新:2024-01-25 16:06:38

酵母细胞破壁酶Westase™酶试剂盒Takara Clontech

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酵母细胞破壁酶Westase
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 9005 Westase 1 g ¥710 酵母细胞破壁酶Westase&trade; 酵母细胞破壁酶Westase&trade; 酵母细胞破壁酶Westase&trade;
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■ 制品形态 酵母细胞破壁酶Westase&trade;
干粉 (含硅藻土作为辅料) 。
 
■ 制品说明
本制品由Streptomyces rochei DB-34培养上清液中制备而来。本制品主要包含了β-1,6葡聚糖酶和β-1,3葡聚糖酶,是用于溶解酵母细胞壁的混合酶。
 
■ 保存
4℃,干燥条件。
 
■ 起源
Streptomyces rochei DB-34
 
■ 酶溶液的制备
1. 溶解于Mcllvain Buffer*
* Mcllvain Buffer由0.1 M柠檬酸和0.2 M磷酸氢二钠以36.8 : 63.2体积比配制而成,调整pH为6.0。
2. 使用醋酸纤维素滤膜对溶液进行过滤。
 
■ 注意事项
1. 使用Westase制备原生质体时,一定要使用酒石酸钠 (0.3-0.5 M) 作为渗透压稳定剂。使用山梨糖醇作为稳定剂会明显降低原生质体形成的效率。
2. 使用Westase制备原生质体时,选择指数生长期的酵母细胞比较适合。在大多数酵母菌株中,当酵母细胞处于稳定期时,原生质体形成效率会显著降低。
3. 使原生质体细胞壁再生时,可使用1.0-1.5 M山梨醇作为渗透压稳定剂。
 
 

页面更新:2024-02-01 08:15:29

GenomONE™ Neo E仙台病毒包膜转染试剂转染试剂-Wako富士胶片和光

GenomONE™ Neo E仙台病毒包膜转染试剂转染试剂-Wako富士胶片和光

供货周期 一个月 规格 1set
应用领域 生物产业 主要用途 DNA、siRNA、ODN及蛋白转染

GenomONE™-Neo EX仙台病毒包膜转染试剂
原理
待转移的分子(如DNA,蛋白,Antisense Oligonucleotide, siRNA等)与HVJ-Envelope (HVJ-E) 混合后,形成了HVJ-E载体。利用病毒衣壳蛋白的侵染能力,在融合蛋白(F)的作用下,直接与细胞融合,将分子转入目标细胞或组织。

GenomONE®Neo EX 仙台病毒包膜转染试剂

GenomONE&trade; Neo E仙台病毒包膜转染试剂转染试剂-Wako富士胶片和光

可用于DNA、siRNA、ODN及蛋白转染!

 

 

原理

 

GenomONE&trade; Neo E仙台病毒包膜转染试剂转染试剂-Wako富士胶片和光

 

  待转移的分子(如DNA,蛋白,Antisense Oligonucleotide, siRNA等)与HVJ-Envelope (HVJ-E) 混合后,形成了HVJ-E载体。利用病毒衣壳蛋白的侵染能力,在融合蛋白(F)的作用下,直接与细胞融合,将分子转入目标细胞或组织。

 

  * HVJ-E:Hemagglutinating Virus of Japan Envelope。

  ** 现已有200多篇文献使用该试剂盒,如需样本案例,请向我司索取。

 

 

优点、特色

 

      目前市面上少有的转染试剂盒,可用于细胞、组织和活体动物。可用于:

 

siRNA
      少量siRNA也可高效发挥敲除作用,无需化学修饰siRNA,高表达量。

 

DNA
      无论序列长短、线性或环状均可
 

Oligonucleotides
      DNA、RNA
 

蛋白
      保持酶和抗体的功能性与特异性
 

体内转染 !!
      大量操作和文献引用证明HVJ-E载体可直接将目标分子转移到活体动物产生作用。
 

高通量筛选
      可同时转染多种分子

1. 运用范围广
     GenomONE HVJ-E载体试剂盒可将多种分子(质粒DNA、siRNA、寡核苷酸、蛋白、抗体等)转进培养细胞(贴壁和非贴壁细胞)和组织。也可用于敏感原代细胞和 活体动物转染。每种领域的GenomONE®-Neo EX运用情况,均有大量文献报道。(如需文献列表,请向我司索取)

 

2. 安全性
     与阳离子脂质体不同,GenomONE®-Neo EX是通过膜融合作用将分子导入细胞,而脂质体转染的内吞作用可能造成转染分子经溶酶体作用而降解。GenomONE®-Neo EX内含*灭活的HVJ病毒颗粒,其具有侵染力而无潜在增殖能力,使用非常安全,无需特殊的防护措施    

 

3. 方便简单
     GenomONE 即开即用,试剂盒内包含了操作中主要使用的HVJ-E冻干粉和各种辅助试剂      

  

案例、应用

 

  GenomONE®-Neo EX和传统的脂质体转染和电穿孔法相比,有更高的转染效率和更低的细胞毒性,可更有效的发挥siRNA的knock-down作用。

 

in vivo

 

大鼠颌下腺逆行注射siRNA

  Ca2+-dependent Cl channel protein (rCLCA)表达的特异性抑制。

 

免疫染色

 

 

GenomONE&trade; Neo E仙台病毒包膜转染试剂转染试剂-Wako富士胶片和光      GenomONE&trade; Neo E仙台病毒包膜转染试剂转染试剂-Wako富士胶片和光

   non-injection side            rCLCA siRNA-injection side

 

  rCLCA siRNA(2 nmol)和GenomONE-Neo(2AU)混合后,以逆行注射的方式注入大鼠颌下腺。四十八小时后,用免疫染色检验siRNA注射对氯离子通道蛋白表达的抑制作用。
  ST:纹状管,G:颗粒曲管,A:腺泡

  【相关文献】

  K. Ishibashi et al., J. Dent. Res., 85(12), 1101-1105 (2006).

 

in vitro

 

【难转染细胞——U937细胞RNAi】

 

  总所周知,用脂质体和电转的方法将siRNA转到U937人单核细胞白血病细胞中非常困难,但我们通过实验证明,siRNA与GenomONE-Neo结合后转染该细胞,其knock-down效率可达85%以上。

 

♦ U937细胞经siRNA转染72小时后收集,用RT-PCR和WB分别检测mRNA和蛋白量的变化情况。

Real-time PCR                         Western blotting

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  左图:转染Cathepsin G的特异性siRNA后,其对应的mRNA减少到14%

  右图:转染Cathepsin G的特异性siRNA后,其蛋白水平减少到15%

 

 【相关文献】 
  Y. Tsuchiya et al, Free Radical Biology & Medicine, 43, 1604-1615 (2007).

 

试剂盒组成

 

产品编号

冻干

HVJ-E

(灭活HVJ)
 0.26 mL/vial
  (重组时)

试剂A

(增强融合)
 0.5 mL/vial

试剂B

(融合试剂)
 0.3 mL/vial

试剂C

(增强导入)
 1.0 mL/vial

缓冲液

(用于悬浮和稀释​)
 6.5 mL/vial

385-18731

1 vial

1 vial

1 vial

1 vial

1 vial

381-18733

4 vials

1 vial

1  vial

1  vial

1 vial

385-18736

40 vials

10 vials

10 vials

10 vials

10 vials

 

 

◆产品列表

 

产品编号 产品名称 规格
385-18731

GenomONE® Neo EX(FD)转染试剂套装

1 set
381-18733 4 sets
389-18734 16 sets
385-18736 40 sets