170-5060ECL化学发光底物1705060

【简单介绍】

Bio-Rad伯乐ECL化学发光底物1705060,170-5060Contains 100 ml Clarity western peroxide reagent and 100 ml Clarity western luminol/enhancer reagent.

【详细说明】

Bio-Rad伯乐ECL化学发光底物1705060

170-5060Contains 100 ml Clarity western peroxide reagent and 100 ml Clarity western luminol/enhancer reagent.

170-5061contains 250 ml Clarity Western Peroxide Reagent and 250 ml Clarity Western Luminol/Enhancer Reagent.

Clarity Western ECL化学发光底物可与任何HRP-偶联的二抗试剂兼容,是使用数字成像设备或胶片成像的理想选择。Clarity化学发光底物能提供很好的灵敏度和超长的光信号时间,因此客户可以进行多次曝光而无需担心信号的衰减。其特点包括:

1、低背景值,图像效果非常清晰

2、高灵敏度,信号强且持续时间长

3、可室温保存12个月

Bio-Rad伯乐ECL化学发光底物1705060订购信息:

1705060 Western化学发光底物 荧光信号维持24h,100ml+100ml
1705061 Western化学发光底物 荧光信号维持24h,250ml+250ml
1705062 Clarity Max Western ECL Substrate, 100 ml
1706404 脱脂奶粉,300g
1706431 HRP Conjugate Substrate Kit for 1 L
1706435 10x Tris Buffered Saline
1706534 4CN HRP显色底物, 5 g
1706535 DAB HRP显色底物, 5 g

1705060 1705061

Western封闭液

Western封闭液

货号:BL535A

规格:100ml

品牌:Biosharp

产品简介

Western 封闭液(Blocking Buffer)可以用于 Western 时转移了蛋白样品的 PVDF 膜或 NC膜的封闭。封闭后,可以减小后续的一抗或二抗和膜的非特异性结合,降低背景,增强信噪比。

按照每张膜封闭需要 5-10 毫升封闭液计算,一个包装的 Western 封闭液可以封闭 10~20张膜。

注意事项

  1、通常在室温封闭60分钟即可,如果对于一些背景非常高的抗体,可以4℃封闭过夜。

   2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件

短期 2-8℃保存 7 天,长期-20℃保存,有效期一年


货号 BL535A
规格 100ml
品牌 Biosharp
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Immunohistochemistry、Western Blot、Cell Death线上讲座上线啦!

Immunohistochemistry、Western Blot、Cell Death线上讲座上线啦!

Immunohistochemistry、Western Blot、Cell Death线上讲座上线啦!

Immunohistochemistry、Western Blot、Cell Death线上讲座上线啦!

Immunohistochemistry、Western Blot、Cell Death线上讲座上线啦!

Immunohistochemistry、Western Blot、Cell Death线上讲座上线啦!

Immunohistochemistry、Western Blot、Cell Death线上讲座上线啦!


★ 主题一:

Immunohistochemistry(免疫组化,IHC)是一种利用抗原-抗体相互作用来检测组织切片中抗原的分布和定位的技术,已广泛应用于肿瘤学、病理学、免疫学等临床领域。IHC实验步骤较为繁杂,从组织取样到最终显色封片的每个环节都有需要注意的地方,在实验过程中多会遇到高背景、结果重复性差和出现假阳性/假阴性结果等问题。

 

★ 主题二:

Western Blot是利用聚丙烯酰胺凝胶电泳来检测特定样品或提取物中某种目的蛋白的方法,是对蛋白进行定性和相对定量的重要检测工具。该实验原理简单但操作细节稍不注意就会造成结果失败,经常会出现无信号、高背景和多带等问题。

 

上海金畔生物邀请GeneTex品牌杨雯婷博士和吴尚儒博士在本次讲座中将从Immunohistochemistry、Western Blot两个技术的实验原理、操作要点、数据分析等方面讲解,并重点讲解实验过程中遇到的疑难杂点和相应解决办法,给大家提供满满的技术干货来解决在这两个实验过程中遇到的磕磕绊绊。

 

★ 主题三:

Cell Death可分为程序性死亡和非程序性死亡,包括细胞凋亡、坏死性凋亡、焦亡、铁死亡、细胞自噬以及细胞凋亡、坏死性凋亡与焦亡三合一的泛凋亡等不同死亡形式。

 

很多小伙伴会对上述几种细胞死亡方式的概念发生混淆,上海金畔生物邀请GeneTex品牌杨雯婷博士为大家介绍上述死亡方式的原理以及检测的相关指标,帮助大家在探索细胞死亡的科研路上拨开疑雾,畅通无阻。

 


Immunohistochemistry、Western Blot、Cell Death线上讲座上线啦!




Immunohistochemistry、Western Blot、Cell Death线上讲座上线啦!


Immunohistochemistry、Western Blot、Cell Death线上讲座上线啦!

GeneTex 1997年成立于美国德克萨斯州,为抗体制造商,专注于科研诊断试剂的开发。成立之初,科学家致力于寻找引发癌症的分子新靶标,并开发抗体供科研使用。GeneTex网罗世界各地人才,至今已开发出50,000个产品,产品线横跨癌症、病毒、遗传学、神经性、免疫学、细胞分子传递、干细胞研究、斑马鱼等多个领域,并提供完善的定制抗体制备服务。

详情请咨询 GeneTex 中国代理-上海金畔生物 

Western无蛋白二抗稀释液

Western无蛋白二抗稀释液

货号:BL536A

规格:100ml

品牌:Biosharp

产品编号

产品名称

规格

BL536A

Western 无蛋白二抗稀释液

    100 ml

产品简介

Western 无蛋白二抗稀释液(Secondary Antibody Dilution Buffer)可以用于 Western 时二抗(secondary antibody)的稀释。本产品不含血清和白蛋白,保证极高的信噪比,总体效果要优于传统的BSA、脱脂奶粉等传统配方。经本 Western 无蛋白二抗稀释液稀释的二抗可以在 1-2 周内重复使用3-5 次。按照每个二抗稀释 10 毫升计算,一个包装的 Western 二抗稀释液可以稀释10 个或 10次二抗。

 使用说明:

参考所用的二抗的使用说明,以及一抗的质量和样品中目的蛋白的含量,按照适当比例  例如 1:10001:500 等比例稀释二抗。二抗稀释后即可直接用于 Western。一次 Western 束后,可以回收稀释的二抗,4保存,以用于下次的 Western,通常在 1-2 周内可以重复使 3-5 

 注意事项:

1、本 Western 无蛋白二抗稀释液经过滤除菌处理,使用过程中应尽量避免细菌污染。一旦启用后建议在一个月内用完,如果发现有沉淀或细菌污染请弃用。

2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件

货号 BL536A
规格 100ml
品牌 Biosharp
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Western blot常用封闭液及注意事项

Western blot常用封闭液及注意事项

通常我们在做Western blot实验中,会用到固相载体(如NC膜,PVDF膜),在这些固相载体表面有很多洞洞,通过电转,胶上的蛋白被转移到膜上,蛋白以机械填补(堆积)和吸附的方式结合于表面。蛋白塞进了表面的很多洞洞里面,但是蛋白并不是连续的,而有很多空隙,抗体也是蛋白,也会被吸附在空的洞里,这样就会有很多非特异性的信号。

封闭液中的蛋白可以与固相载体表面的空白位置结合,同样以机械填补(堆积)和吸附覆盖的方式结合在膜上,因为有“填补”和覆盖“蛋白结合位点以避免一抗的非特异性结合,所以有”封闭“的说法。同样这两种作用使封闭液中的蛋白能够狠牢固的结合在空白位置上,这样抗体蛋白就不会被非特异性的吸附到膜上,而只会跟特异性蛋白结合。

封闭液应封闭所有的未结合位点而不替换表面上的靶蛋白,不结合靶蛋白表位,也不与抗体或检测试剂有交叉反应。

常见的封闭液:

1.BSA  BSA是最常用的封闭液,成分单一适用于大多数情况。若免疫原是偶联BSA的,BSA有很强的免疫原性,会导致产生很多针对BSA的抗体,为避免交叉反应,不能用BSA,脱脂奶粉封闭,可以选用酪蛋白或无蛋白的封闭液。

2.血清  封闭血清的原理主要有两点,第一是待测样本有些与蛋白非特异性结合的物质,从而导致背景过高,因此可以用BSA或血清封闭掉这部分分特异性的结合,从这点看,BSA和血清没有明显区别。第二待测样品中可能会有Fc受体,可以和抗体恒定区结合,与抗体特异性无关,封闭血清中有抗体,因此用血清可以封闭掉一抗及二抗和样本Fc受体之间的结合,BSA无法封闭Fc受体。

3.脱脂奶粉  脱脂奶粉最大的优点是价格便宜,但由于成分相对复杂,所以适用范围要狭窄一些。磷酸化抗体也许会导致背景增加,此外,因为自身含有生物素,不能用于生物素标记的抗体系统。脱脂奶粉种含有少量的生物素和碱性磷酸酶残留,在使用生物素-亲和素系统和碱性磷酸酶标记的二抗时,也会使得高背景或本底水平增高。

相关产品推荐:

品牌 产品名称 产品货号 规格
Vector BLOXALL® Endogenous Blocking Solution, Peroxidase and Alkaline Phosphatase SP-6000-100 100 ml

如需推荐更多相关产品,请联系上海金畔生物

Western转膜液

Western转膜液

货号:BL534A

规格:1L

品牌:Biosharp

 

产品编号

产品名称

规格

BL534A

Western 转膜液 

1L

 

产品简介

Western 转膜液(Western Transfer Buffer)可以用于 Western 时湿法电转膜。

 Western 转膜液是一种安全无毒的转膜液,没有使用剧毒的甲醇,也没有使用其它的有毒试剂。本 Western 转膜液配制便捷,无需调节 pH 值。本 Western 转膜液可以回收, 回收后可以再使用 2-3 次。

配制方法:

粉末全部溶解于 800 ml 蒸馏水中,补加 200 ml 无水乙醇,即配成 1L 1×转膜缓冲液, 用于湿转法转膜。

注意事项:

   1、如果转膜缓冲液颜色变成浅棕色或黄褐色,应该丢弃。

   2、建议使用分析纯级别的乙醇或更高纯度的乙醇。

   3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件:

室温保存,两年有效。配成溶液后 4℃保存,有效期 6 个月。

货号 BL534A
规格 1L
品牌 Biosharp
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Western无蛋白一抗稀释液

Western无蛋白一抗稀释液

¥100.00

货号:BL1027A

规格:100ml

品牌:Jinpan

产品简介:

Western无蛋白一抗稀释液(Western Primary Antibody Dilution Buffer, Protein free)可以用于Western 时一抗的稀释和配制。本产品含信号放大剂,特别适用于表达量低的蛋白,对抗原抗体的结合有明显的放大效应。本产品不含血清和白蛋白,确保极高的信噪比,总体效果明显优于传统的基于BSA、脱脂奶粉等的一抗稀释液,无需添加任何额外的试剂,可以直接用于一抗的稀释。

按照每个一抗稀释 10 毫升计算,一个包装的Western无蛋白一抗稀释液可以稀释10个或50一抗

 

使用方法:

参考所用的抗体的说明,直接使用本产品按照适当比例如 1:10001:500 等比例稀释抗体,稀释后即可直接用于实验。

 

注意事项:

1、建议尽量在4℃进行抗体的孵育以延长稀释后抗体的使用寿命。

2、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

3、为了您的健康和安全,请穿着实验服并戴一次性手套或乳胶手套操作。

 

保存方法:

4保存,有效期一年。

货号 BL1027A
规格 100ml
品牌 Jinpan
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Western及IP细胞裂解液

Western及IP细胞裂解液

货号:BL509A

规格:100ml

品牌:Biosharp

WesternIP细胞裂解液 

别名Cell lysis buffer for Western and IP

产品简介

WesternIP细胞裂解液(Cell lysis buffer for Western and IP),是一种在非变性条件下裂解细胞的裂解液。本细胞裂解液裂解的细胞,可以用于PAGE,Western,免疫沉淀(immunol precipitation,IP)和免疫共沉淀(co-IP)

 WesternIP细胞裂解液的主要成分为20mM Tris (pH7.5),150mM NaCl,1% Triton X-100,以及sodium pyrophosphate,β-glycerophosphate,EDTA,Na3VO4,leupeptin等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白的降解,并维持原有的蛋白间相互作用。WesternIP细胞裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的Triton X-100等干扰物质,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。

使用说明

对于培养细胞样品:

1、融解WesternIP细胞裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM

2、对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(若血清中的蛋白没有干扰,可不洗)。按照6孔板每孔加入100-200ul裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。

  对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入100-200ul裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应无明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管后再裂解。大团的细胞较难裂解充分,而少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接触,相对比较容易裂解充分。

3、充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGEWestern、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。

裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加100ul裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到150200ul

对于组织样品:

1、把组织剪切成细小的碎片。

2、融解WesternIP细胞裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM

3、按照每20mg组织加入100-200ul裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)

4、用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。

5、充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGEWestern、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。

6、如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。

注意事项

1、为取得最佳的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。

2、需自备PMSF

3、裂解样品的所有步骤都需在冰上或4进行。

4、可能需要通过一些预实验来摸索最佳的适合您实验条件的裂解液。

5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件

-20保存,一年有效。

货号 BL509A
规格 100ml
品牌 Biosharp
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Western Blot一抗二抗洗脱液

Western Blot一抗二抗洗脱液

货号:BL525A

规格:100ml

品牌:Biosharp

Western Blot Stripping Buffer

Western Blot一抗二抗洗脱液 

产品编号

产品名称

规格

BL525A

Western Blot一抗二抗洗脱液

100 ml

产品简介:

Western Blot一抗二抗洗脱液可以对同一张膜进行多次Western Blot检测。在室温条件下,将用过的膜浸泡在一抗二抗洗脱液10-60分钟,可在不影响抗原蛋白的情况下清除膜上结合的抗体。随后可使用不同的抗体进行下一轮Western Blot实验,因而可利用同一张膜进行多次蛋白检测,适用于少量样品多次检测不同的蛋白质。即使样品量并不匮乏,采用这一方法多次检测同一张膜上的蛋白,大大节约时间,而且可以消除重新上样带来的误差。

本产品主要成分为Tris-Hcl缓冲液,SDSβ-巯基乙醇。

使用方法:

1、将膜充分浸泡于适当体积的Western Blot一抗二抗洗脱液中,室温摇床洗脱10-20分钟,时间长短请参考后面的说明进行优化,部分抗体的洗脱可能需较长时间,更有60分钟之久。

2、取出膜,用TBST漂洗两次,每次10分钟。

3、此时膜上抗体已除去,可再加入另一种抗体。

注意事项:

1Western Blot一抗二抗洗脱液是在不影响膜上结合的抗原的条件下将抗体洗脱下来,但实际操作中,膜类型、抗体类型、浓度及抗原特性都影响洗脱难易程度。

2、确定洗脱时间:Western Blot一抗二抗洗脱液洗脱几分钟后,可加入ECL显色液显影,如胶片上显示条带,表明抗体未除净,需进一步洗脱或浸泡至胶片无显色。

3、使用脱脂奶粉封闭的膜要比使用BSA封闭的膜更容易再生,所以尽可能的用脱脂奶粉封闭。

4、尽量避免让膜干燥。

5、本产品在低温下易出现白色絮状沉淀,是正常现象,请37℃复温后使用。

6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件:

4℃保存6个月。

货号 BL525A
规格 100ml
品牌 Biosharp
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