克隆有 fpg 基因的重组 E. coli 菌株。 

8,000 units/ml。 

·        热稳定型氧代鸟嘌呤糖基酶

·        该 DNA 糖基酶具有两种酶活：DNA N-糖基酶活性和 AP 裂解酶活性

·        N-糖基酶活性释放 8-oxo-7,8-二氢鸟嘌呤 (8-oxoG)，生成 AP 位点。AP 裂解酶活性将 3′ 切割到 AP 位点，留下 5′ 磷酸和 3′-磷酸-α，β-不饱和醛。

 热稳定 OGG 是一种来源于古细菌的 8-氧代鸟嘌呤（8-oxoG）DNA 糖基酶，具有 N-糖基酶活性和 AP-裂解酶活性。N-糖基酶活性可从双链 DNA 中切割受损的 8-氧代鸟嘌呤，从而产生脱嘌呤 (AP) 位点。AP 裂解酶活性将 3′ 切割到 AP 位点，留下 5′ 磷酸和 3′-磷酸-α，β-不饱和醛。与其它 DNA 糖基酶不同的是，热稳定 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基酶（OGG）仅特异性识别和切割 8-oxoG，对其它修饰的碱基没有活性。

图 1：与 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基酶（Fpg）不同，热稳定 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基酶（OGG）特异性识别和切割 8-氧代鸟嘌呤，对其它修饰的碱基没有活性。

使用热稳定 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基酶（OGG）和 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基酶（Fpg）分别切割含有修饰碱基的荧光标记 dsDNA，以检测其切除修饰碱基的活性，修饰碱基类型为：8-氧代腺嘌呤、5-羟基胞嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羟基尿苷或 8-氧代鸟嘌呤。样品孵育后使用毛细管电泳检测，出峰位置体现裂解产物长度。结果显示：热稳定 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基酶（OGG）仅裂解含 8-氧代鸟嘌呤的底物（上图），而 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基酶（Fpg）对于含其它修饰碱基的底物也有活性，包括 5-羟基胞嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇和 5-羟基尿苷（下图）。