Iba1抗体，兔源（免疫组化用）疾病研究-Wako富士胶片和光

Iba1（Ionized calcium-binding adapter molecule1）是分子量约为17 kDa的钙结合蛋白。由于在中枢神经系统中，Iba1在小胶质细胞中特异性表达，因此被用作小胶质细胞标志物。据报告称，Iba1在静息型小胶质细胞和活化型小胶质细胞中均有表达，但有报告称在活化型小胶质细胞中其表达会有所增加。

Iba1抗体，兔源（免疫组化用）

Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry)

Iba1（Ionized calcium-binding adapter molecule 1）是分子量约为17 kDa的钙结合蛋白。由于在中枢神经系统中，Iba1在小胶质细胞中特异性表达^1），因此被用作小胶质细胞标志物。据报告称，Iba1在静息型小胶质细胞和活化型小胶质细胞中均有表达，但有报告称在活化型小胶质细胞中其表达会有所增加^2）。另外，Iba1也会在外周组织的巨噬细胞中表达，被称为AIF-1（同种异体移植物炎症因子1，Allograft inflammatory factor-1）。Iba1在细胞内与F-肌动蛋白结合，发挥着形成肌动蛋白纤维束的作用。这种肌动蛋白纤维束的形成被认为是细胞迁移和吞噬过程中观察细胞膜波动结构形成所必须的^3）。

抗Iba1，兔源（免疫组化用）在免疫组织染色中可以对小胶质细胞包括突起一并进行染色，因此被世界各地的研究人员作为小胶质细胞标记抗体的标准来使用。

近年来，小胶质细胞因其神经营养和保护作用以及通过产生NO、TNF-α和IL-1β引起的神经损伤作用备受关注。

小胶质细胞的染色图像

Anti Iba1，兔源（免疫组化用）

◆特点

● 在免疫组织染色（冰冻切片）中可染色小胶质细胞包括其突起^※

● 使用浓度为1︰500 – 1︰1,000，少量使用也可染色。

※ 染色程度取决于样品状况，无法保证一定能染色成功。

◆抗体信息

※ 拥有犬^4）、猫^5）、猪^6）、狨猴^7）、斑马鱼^8）的应用实例

   点击此处查看使用论文

◆应用数据

免疫组织染色（小鼠）

免疫组织染色（大鼠）

◆Anti Iba1抗体系列

◆Anti Iba1产品列表

相关资料

◆原代小胶质细胞ICC实验方案示例

将从新生大鼠（出生0~2天）的大脑中制备和培养的原代混合胶质细胞按照1.0×105 cell/well接种至4 well-plate、13 φmm盖玻片（PLL涂层）。

↓

固定：4% formaldehyde-PBS, 15 min

↓

清洗：PBS

↓

通透：0.1% TX-100 PBS, 5 min

↓

封闭：3% BSA-3% normal goat serum-PBS (blocking buffer), >15min

↓

一抗反应：抗Iba1抗体（1:1,000）blocking buffer, 1h

↓

清洗

↓

二抗反应：Alexa Fluor 488标记抗兔IgG抗体/blocking buffer, 1h

↓

封片

↓

在荧光显微镜下进行观察

FAQ

◆关于抗体

Q1：抗原是什么样的？

A1：是Iba1的合成肽（C端序列相同）。具体序列未公开。

Q2：50 μg的使用量是多少？

A2：在免疫组织染色中，每张玻片使用200 μL抗体溶液（稀释度为 1:1,000）的情况下，可使用约500次。

◆关于实验方案

Q3：建议使用哪种二抗？

A3：FUJIFILM Wako拥有以下二抗的使用实例，可供参考。

Alexa Fluor^® 488-AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) （Jackson ImmunoResearch公司, 厂家编号: 111-545-144）

Alexa Fluor^® 647-conjugated AffiniPure Donkey anti-Rabbit IgG (H+L)　(Jackson ImmunoResearch公司, 厂家编号: 711-605-152)

◆关于故障排除

Q4：WB中无法检测出条带

A4：本抗体适用于免疫组织染色（冰冻切片）以及免疫细胞染色，如需进行WB，请使用 抗Iba1,兔源（Western Blotting用) （产品编号：016-20001）

Q5：免疫组织染色和免疫细胞染色中小胶质细胞无法染色

A5：可能导致此问题的原因有以下几种，请尝试对应的解决方案。

1. 固定不充分

有报告称，未灌注固定或固定不充分的样品染色效果会降低。请在免疫组织染色中使用4%多-聚甲醛（PFA）进行灌注固定后再制备冰冻切片。

2. 抗原变性

请尝试在以下条件下进行抗原修复操作

（A）柠檬酸缓冲液（pH 6.0）, 90℃, 9 min

（B）TE缓冲液（pH 9.0）, 90℃, 9 min

3. 样品变质

需要重新制备样品，切片厚度约为20-50 μm。

4. 抗体量少

请提高抗体浓度，推荐浓度为1︰500~1,000。

Q6：免疫组织染色和免疫细胞染色的背景过高。

A6：导致此问题的可能原因有以下几种，请尝试对应的解决方案。

① 封闭不充分

请尝试延长封闭的孵育时间或更换封闭试剂。建议使用推荐Protocol中记载的1% BSA, 含0.3% TritonX-100的PBS和含1% BSA, 0.3% Tween-20的PBS，或3%二抗宿主的正常血清。

② 一抗的量过多

请降低一抗浓度，推荐浓度为1︰500~1,000。

③ 二抗的反应时间过长

请缩短反应时间。推荐反应时间为1~2 h，或增加二抗反应后的清洗次数。

④ 样品变质

需要重新制备样品，切片厚度约为20-50 μm。

⑤ 抗原变性

请尝试在以下条件下进行抗原修复操作

（A）柠檬酸缓冲液（pH 6.0）, 90℃, 9 min

（B）TE缓冲液（pH 9.0）, 90℃, 9 min

⑥ 内源性的过氧化物酶发生反应（使用HRP或POD作为检测酶时）

为了灭活内源性过氧化物酶，请在阻断前使用含3%过氧化氢的80%甲醇溶液，并在-20℃条件下处理20 min。

Q7：在免疫组织染色中，除小胶质细胞外，神经细胞也被染色。

A7：可能导致此问题的原因有以下几种，请尝试对应的解决方案。

① 抗体的量过多

请降低一抗或二抗的抗体浓度，抗Iba1抗体的推荐浓度为1︰500~1,000。

② 二抗的反应时间过长

请缩短反应时间。推荐反应时间为1~2 h，或增加二抗反应后的清洗次数。

③ 抗原变性

请尝试在以下条件下进行抗原修复操作

（A）柠檬酸缓冲液（pH 6.0）, 90℃, 9 min

（B）TE缓冲液（pH 9.0）, 90℃, 9 min

◆关于应用数据

Q8：本抗体可以用于流式细胞仪吗？

A8：FUJIFILM Wako没有使用实例，但以下论文中使用了本抗体，敬请参考。

Koh, H. S., et al.: Nat. Commun., 6(1),1(2015).
The HIF-1/glial TIM-3 axis controls inflammation-associated brain damage under hypoxia.

参考文献

抗Iba1，兔（用于免疫印迹）疾病研究-Wako富士胶片和光

Iba1是在巨噬细胞/小胶质细胞特异性表达的钙结合蛋白，分子量17 kDa。本产品为与Iba1特异性反应的兔源多克隆抗体。
神经研究用标签抗体。
近年来，小胶质细胞除了神经营养和保护作用以外，其通过产生NO、TNF-α和IL-1β引起的神经损伤作用也备受关注。 本产品是一种WB用的Iba1抗体，适用于特异性检测小胶质细胞。

抗Iba1，兔（用于免疫印迹）

Anti Iba1, Rabbit (for Western Blotting)

Iba1是在巨噬细胞/小胶质细胞特异性表达的钙结合蛋白，分子量17 kDa。本产品为与Iba1特异性反应的兔源多克隆抗体。

神经研究用标签抗体。

近年来，小胶质细胞除了神经营养和保护作用以外，其通过产生NO、TNF-α和IL-1β引起的神经损伤作用也备受关注。 本产品是一种WB用的Iba1抗体，适用于特异性检测小胶质细胞。

◆产品信息

◆物理特性

物理特性中的信息仅供参考。除规定值外，其中的数值并不能保证本产品的性能。

有关本产品的质量以及性能请参阅产品说明书。

另外，也建议根据自身的研究目的，在实验前预先进行探讨。

◆抗体信息

◆Anti Iba1抗体系列

◆产品列表

更多资料请通过下方链接下载：

http://labchem.fujifilm-wako.com.cn/pdf/show/235.html

Iba1抗体免疫组化,Iba1抗体免疫组化优点-Wako富士胶片和光

氨主要产生于肠道和肾脏。在生物体内产生的氨通过肝脏中的尿素循环通路转变成尿素，然后从尿液中排出。

LabAssay™ Ammonia

LabAssay™ 氨检测试剂盒

氨主要产生于肠道和肾脏。在生物体内产生的氨通过肝脏中的尿素循环通路转变成尿素，然后从尿液中排出。

本产品把亚硝基铁qíng化钠作为催化剂，以基于苯酚、次氯酸的贝特洛反应的比色法为基础的氨检测试剂。

LabAssay™ Ammonia 是以人和小鼠等动物样品作为对象的生化学检测用试剂，可检测样品中的氨。

LabAssay™ 系列是研究用试剂。不可用于诊断。

检测样品：血液

检测物种：小鼠、大鼠、人

◆特点

●　少量样品即可进行检测

●　可使用微孔板检测多个样品

●　可检测小鼠等动物样品

◆检测原理

　　氨和苯酚在催化剂亚硝基铁qíng化钠的作用下置换生成二氧二苯胺。在强碱存在下，利用与次氯酸钠反应生成呈蓝色的靛酚，通过测定吸光度，从而测定出样本中的氮氨浓度。

◆试剂盒组成

●　脱蛋白试剂——100 mL×1瓶

●　显色剂 A——50 mL×1瓶

●　显色剂 B——25 mL×1瓶

●　显色剂 C——50 mL×1瓶

●　氨标准溶液——15 mL×1瓶

●　标准溶液用稀释液——200 mL×1瓶

◆性能

●　标准曲线范围——100~400 μg/dL（μg/100 mL）

●　检测时间——约70分钟

●　所需样品量——70 μL

●　检测波长——630 nm

<标准曲线示例>

◆使用方法

【微孔板法】

添加经脱蛋白试剂处理的样品 70 μL、显色剂 A 70 μL、显色剂 B 35 μL、显色剂 C 70 μL 至微孔板，使用孔板混匀仪充分混合，在37°C下加热 20 min。再次充分混合，室温下静置 30 min。以空白为对照，检测样品和标准溶液的吸光度。

【试管法】

添加经脱蛋白试剂处理的样品 800 μL、显色剂 A 800 μL、显色剂 B 400 μL、显色剂 C 800 μL 至微管或试管，充分搅拌，并在37°C下加热 20 min。再次搅拌后，用水（20~25°C）冷却 30 min。以空白为对照，检测样品和标准溶液的吸光度。

※    使用此方法在试管内检测时，试剂盒的使用次数为 60 次。

◆产品列表

◆相关产品

点击http://labchem.fujifilm-wako.com.cn/product/show/1054.html，了解LabAssay™全系列

鼠源Iba1抗体，无标签，单克隆抗体疾病研究-Wako富士胶片和光

鼠源Iba1抗体，无标签，单克隆抗体
Iba1是在小胶质细胞和巨噬细胞中高度表达的蛋白质，分子量约17 kDa。 此蛋白质通常称为中枢神经系统中的小胶质细胞标记物。
近，小胶质细胞已被广泛研究，其负责中枢神经系统中的免疫功能，并且与各种疾病相关，如神经变性疾病，精神错乱，脑肿瘤和感染。

 鼠源Iba1抗体，无标签，单克隆抗体​

　　Iba1是在小胶质细胞和巨噬细胞中高度表达的蛋白质，分子量约17 kDa。 此蛋白质通常称为中枢神经系统中的小胶质细胞标记物。

　　近，小胶质细胞已被广泛研究，其负责中枢神经系统中的免疫功能，并且与各种疾病相关，如神经变性疾病，精神错乱，脑肿瘤和感染。

类别：Monoclonal

应用物种：IHC（小鼠、大鼠和狨猴冰冻切片,DABlocking）（1:500-2,000），

IHC（大鼠冰冻切片,fluorescent）（1:100）

◆特点

●　免疫组化评估

●　用于多色免疫染色

●　具有高特异性和低背景的单克隆抗体

◆应用 – 免疫组织化学染色

→使用抗Iba1，单克隆抗体（产品编号：012-26723）小胶质细胞的定位信号清晰，与抗Iba1，兔多克隆抗体的效果相同（产品编号：019-19741、019-19741）。

◆实验条件

●样品：7周龄大鼠，7周龄小鼠或成年狨猴的大脑皮质

●切片：50 μm冰冻切片（小鼠和大鼠），40 μm冰冻切片（狨猴）

●染色法：ABC法+DAB染色

●抗体浓度= 1：500

抗体信息

◆产品列表

 鼠源Iba1抗体，无标签，单克隆抗体

兔源Iba1抗体，无标签疾病研究-Wako富士胶片和光

兔源Iba1抗体，无标签
Iba 1是在巨噬细胞/小胶质细胞中特异性表达的分子量为17,000的钙结合蛋白。近来小胶质细胞备受关注，除了在神经营养/神经保护中起作用外，也已被证实通过产生NO，TNF-α和IL-1β对神经造成损伤。
该产品是与小胶质细胞特异性反应的兔多克隆抗体，适用于与星形胶质细胞特异性抗GFAP单克隆抗体进行双染色。

小胶质细胞特异性抗体

兔源Iba1抗体，无标签

Iba1是在巨噬细胞/小胶质细胞中特异性表达的分子量为17,000的钙结合蛋白。近来小胶质细胞备受关注，除了在神经营养/神经保护中起作用外，也已被证实通过产生NO，TNF-α和IL-1β对神经造成损伤。

该产品是与小胶质细胞特异性反应的兔多克隆抗体，适用于与星形胶质细胞特异性抗GFAP单克隆抗体进行双染色。

◆特点

●抗原：对应于Iba1的C末端的合成肽
●形式：TBS溶液（1 mg/mL）
●纯化：兔抗血清的抗原亲和层析纯化

●特异性：对小胶质细胞和巨噬细胞具有特异性，但不与神经元和星形胶质细胞发生交叉反应。

与人类，小鼠大鼠Iba1反应。
●用法：

1.抗Iba1，兔（免疫细胞化学）适用于免疫细胞化学。1-2 μg/mL使用

2.抗Iba1，兔（用于Westernblotting）适合于Western blotting（免疫印迹）。0.5-1 μg/mL使用。

◆应用

大鼠原代混合培养细胞双染色和相同视野的相位图像

◆免疫印迹实验

◆推荐准备工作

a）石蜡切片

1.脱蜡
100％二甲苯10分钟，2次
⇓
100％乙醇5分钟，2次
⇓
80％乙醇5分钟
⇓
70％乙醇5分钟
⇓
dH2O，5分钟，2次
 

2.用0.01M PBS洗涤，2次

3.在0.3％H2O2的甲醇溶液中孵育30分钟

4.用0.01M PBS洗涤，3次

5.室温（RT）下用封闭缓冲液（1.5％正常山羊血清和0.001M PBS的1％BSA）孵育2小时。

6.4℃下在封闭缓冲液中与抗Iba1抗体（0.5 μg/mL）（Wako目录号019-19741）孵育过夜。

7.用0.01M PBS洗涤，3次。

8.与生物素化的抗兔IgG抗体（1:200）在封闭缓冲液中室温孵育1小时。

9.用0.01M PBS洗涤，3次。

10.室温下与Elite ABC试剂（0.01M PBS中的试剂A（1:50）和试剂B（1:50））孵育1小时。

11.用0.01M PBS洗涤，3次

12.在过氧化物酶溶液中孵育（0.05M Tris缓冲液的0.01％过氧化氢和0.05％DAB）

◆实验步骤链接

b）冰冻切片
冷冻的小鼠脑组织或培养的细胞应用4％多聚甲醛-PBS灌注固定。然后制备组织切片。制备后，将组织切片和培养的细胞用抗Iba1抗体免疫染色。

◆产品列表

兔源Iba1抗体，无标签 

兔源Iba1抗体，无标签疾病研究-wako富士胶片和光

兔源Iba1抗体，无标签
Iba 1是在巨噬细胞/小胶质细胞中特异性表达的分子量为17,000的钙结合蛋白。近来小胶质细胞备受关注，除了在神经营养/神经保护中起作用外，也已被证实通过产生NO，TNF-α和IL-1β对神经造成损伤。
该产品是与小胶质细胞特异性反应的兔多克隆抗体，适用于与星形胶质细胞特异性抗GFAP单克隆抗体进行双染色。

小胶质细胞特异性抗体

兔源Iba1抗体，无标签

Iba1是在巨噬细胞/小胶质细胞中特异性表达的分子量为17,000的钙结合蛋白。近来小胶质细胞备受关注，除了在神经营养/神经保护中起作用外，也已被证实通过产生NO，TNF-α和IL-1β对神经造成损伤。

该产品是与小胶质细胞特异性反应的兔多克隆抗体，适用于与星形胶质细胞特异性抗GFAP单克隆抗体进行双染色。

◆特点

●抗原：对应于Iba1的C末端的合成肽
●形式：TBS溶液（1 mg/mL）
●纯化：兔抗血清的抗原亲和层析纯化

●特异性：对小胶质细胞和巨噬细胞具有特异性，但不与神经元和星形胶质细胞发生交叉反应。

与人类，小鼠大鼠Iba1反应。
●用法：

1.抗Iba1，兔（免疫细胞化学）适用于免疫细胞化学。1-2 μg/mL使用

2.抗Iba1，兔（用于Westernblotting）适合于Western blotting（免疫印迹）。0.5-1 μg/mL使用。

◆应用

大鼠原代混合培养细胞双染色和相同视野的相位图像

◆免疫印迹实验

◆推荐准备工作

a）石蜡切片

1.脱蜡
100％二甲苯10分钟，2次
⇓
100％乙醇5分钟，2次
⇓
80％乙醇5分钟
⇓
70％乙醇5分钟
⇓
dH2O，5分钟，2次
 

2.用0.01M PBS洗涤，2次

3.在0.3％H2O2的甲醇溶液中孵育30分钟

4.用0.01M PBS洗涤，3次

5.室温（RT）下用封闭缓冲液（1.5％正常山羊血清和0.001M PBS的1％BSA）孵育2小时。

6.4℃下在封闭缓冲液中与抗Iba1抗体（0.5 μg/mL）（Wako目录号019-19741）孵育过夜。

7.用0.01M PBS洗涤，3次。

8.与生物素化的抗兔IgG抗体（1:200）在封闭缓冲液中室温孵育1小时。

9.用0.01M PBS洗涤，3次。

10.室温下与Elite ABC试剂（0.01M PBS中的试剂A（1:50）和试剂B（1:50））孵育1小时。

11.用0.01M PBS洗涤，3次

12.在过氧化物酶溶液中孵育（0.05M Tris缓冲液的0.01％过氧化氢和0.05％DAB）

◆实验步骤链接

b）冰冻切片
冷冻的小鼠脑组织或培养的细胞应用4％多聚甲醛-PBS灌注固定。然后制备组织切片。制备后，将组织切片和培养的细胞用抗Iba1抗体免疫染色。

◆产品列表

兔源Iba1抗体，无标签