【简单介绍】
【详细说明】
新型蛋白转染试剂：ProteoCarry转染试剂-wako富士胶片和光
| 供货周期 | 一个月 | 应用领域 | 生物产业 |
|---|
新型蛋白转染试剂：ProteoCarry
本产品是将蛋白以及葡聚糖等生物大分子导入细胞内，尤其是导入细胞质的试剂。传统的蛋白转染试剂存在蛋白滞留在内体或溶酶体中的问题，但是由于本产品可以高效地将蛋白运送至细胞质，可以广泛地适用于在评价导入蛋白的细胞内功能和抗体导入引起的功能抑制诱导等的实验。另外与传统产品不同的是，本品无需与蛋白进行预孵育，所以不会形成复合体，低限度地限制其对蛋白功能的影响。
新型蛋白转染试剂：
ProteoCarry
本产品是将蛋白以及葡聚糖等生物大分子导入细胞内，尤其是导入细胞质的试剂。传统的蛋白转染试剂存在蛋白滞留在内体或溶酶体中的问题，但是由于本产品可以高效地将蛋白运送至细胞质，可以广泛地适用于在评价导入蛋白的细胞内功能和抗体导入引起的功能抑制诱导等的实验。另外与传统产品不同的是，本品无需与蛋白进行预孵育，所以不会形成复合体，低限度地限制其对蛋白功能的影响。
※本产品仅供研究，研究以外请勿使用。
◆蛋白转染试剂及其问题
蛋白转染试剂（Proteofection试剂）是将重组蛋白和抗体直接导入细胞的工具。与将质粒导入以诱导表达目的蛋白的方法相比，可以更迅速地导入目的蛋白，因而受到了广泛地关注。
虽然已经开发了许多基于肽、阳离子的脂质或聚合物的蛋白转染试剂，但它们都是与蛋白形成复合物后，通过胞吞作用摄入细胞内，破坏内体膜将其运送至细胞质。然而，现有的大部分试剂内体膜的破坏活性低，并且从内体逃脱不足，导入的蛋白大部分都转移至溶酶体降解系统。本产品是一种新型肽蛋白转染试剂，克服了传统的蛋白转染试剂的缺点，通过强有力的内体膜选择性破坏活性，高效地向细胞质运送蛋白，使转导的蛋白在细胞内发挥活性。另外，与传统的蛋白转染试剂不同，本品无需与蛋白的复合物，不仅仅是蛋白，还可以向细胞质导入生物大分子（葡聚糖等）。
图1. 细胞导入原理的比较
图2是导入荧光标记IgG的案例。不添加转染试剂时，以内体/溶酶体的染色为主，从细胞质中无法获得荧光信号，与之相对的，可以观察到在本产品案例中，内体、细胞质被大面积染色。（详情请参照应用实例）
图2. 向HeLa细胞导入荧光标记IgG的比较
◆特点
● 基于肽特性的蛋白转染试剂，显示出高度水溶性。
● 优异的内体膜破坏活性，与传统方法相比显示出高细胞质传达性。
● 无需与导入物质进行预孵育，可以简便且迅速地转染。
● 由于不会与蛋白形成复合物，所以需要添加浓度较高的蛋白，但是可以低限度地抑制对蛋白功能的影响。
● 只需要1小时的处理就可以充分地转染至细胞质。
● 有无血清（<10% FBS）不会影响导入效率，可以根据想要使用的细胞设计实验。
● 已有向细胞质导入各种蛋白及生物大分子的应用实例。
● 例：IgG抗体、功能性蛋白（Cre recombinase, Saponin）、多糖（葡聚糖）
● 推荐使用浓度几乎没有细胞毒性。
◆使用方法概述
1. 向新鲜的培养基（无血清培养基，10%以下含FBS培养基或PBS）添加本产品以及想要导入的蛋白。（配制转染混合液）。
1. ※无需预孵育
2. 用PBS清洗2次细胞（80%以下的融合状态）后，向细胞添加转染混合液。
3. 在转染混合液中培养细胞（~1h）
4. 用PBS清洗2次细胞后，添加新鲜的培养基。
5. 实现各项应用。
◆试剂盒组成
● ProteoCarry（4 mg）
● FITC-dextran（2 mg，阳性对照用）
实验次数的预测
|
孔板的尺寸 |
ProteoCarry |
FITC-dextran |
|
6 well |
14 assays |
5 assays |
|
12 well |
28 assays |
10 assays |
|
24 well |
56 assays |
20 assays |
|
48 well |
140 assays |
50 assays |
|
96 well |
280 assays |
100 assays |
◆有导入数据的细胞
HeLa, SW280, COS7, NIH3T3, HUVEC
参考导入量
|
导入物 |
推荐培养基的终浓度 |
|
|
抗体 |
50～250 μg/mL |
|
|
蛋白 |
Saponin |
1～10 μg/mL |
|
Cre recombinase |
10～100 μg/mL |
|
|
FITC-dextran |
200 μg/mL |
|
※导入效率根据细胞类型，细胞数量和蛋白类型各种因素改变。以上数据仅供参考，建议每次实验都要优化数据。
◆应用实例
1. 向细胞内导入FITC-dextran
向HeLa细胞导入FITC-Dextran（培养基的终浓度为200 μg/mL），仅向细胞添加FITC-Dextran时，（Reagent(-)）观察到点状的荧光信号，细胞质中几乎没有观察到信号；相反，使用本产品时扩散到了整个细胞质。
实验概要：
向HeLa细胞（80% confluent）添加200 μg/mL FITC-dextran, 1×ProteoCarry in α-MEM，并培养1个小时。用PBS清洗细胞后，进行核染色（Hoechst）。
2. 向细胞内导入荧光标记IgG
向HeLa细胞导入荧光标记IgG抗体（培养基终浓度为250 μg/mL），仅有抗体添加至细胞时，可以观察到胞吞作用自发性摄入点状的荧光信号，表明抗体停留在内体和溶酶体中。另一方面，使用本产品时，不仅能观察到点状的内体结构，还可以观察到它主要在细胞质中广泛扩散。
※用荧光信号观察细胞扩散时，与内体相比，由于细胞质的体积较大，信号会被稀释。细胞质信号的检测需要添加高浓度的荧光标记蛋白，在本数据中添加了250 μg/mL的荧光标记IgG。
实验概要：
向HeLa细胞（80% confluent）添加250 μg/mL荧光标记IgG，1×ProteoCarry in α-MEM并培养1小时。用PBS清洗细胞后，进行核染色（Hoechst）。
3. 向细胞内导入Cre recombinase
将设计为Cre recombinase不存在时表达DsRed，只有在Cre recombinase存在时发生重组表达GFP的质粒向HeLa细胞导入基因。相对于导入第二天就表达DsRed的HeLa细胞，使用本产品导入Cre recombinase（培养基终浓度为10 μM），依赖导入细胞内的Cre recombinase表达GFP，本产品在维持Cre recombinase的功能下将其导入了细胞。
实验概要：
向HeLa细胞转染质粒的第二天，向HeLa细胞添加10 μM Cre recombinase, 1×ProteoCarry in α-MEM，并培养1小时。用PBS清洗细胞后，用新的培养基再培养24小时。
◆保存
● 运输：室温
● 保存：-20℃
◆产品列表
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| FDV-0015 | ProteoCarry <蛋白质转染试剂> | 1 set |
新型蛋白转染试剂：ProteoCarry
Piceatannol 白皮杉醇 标准品
| CAS | 10083-24-6 |
| 分子式 | C14H12O4 |
| 分子量 | 244.247604 |
| 储存条件 | Store in dry and dark place. |
| 纯度 | HPLC ≥95% |
| 单位 | 瓶 |
| 货期 | 4周 |
| 规格 | 10mg |
试管沥水架 102柱
货号：BS-TDR-102
规格：102柱
品牌：Jinpan
商品详情：
产品特点：
尺寸：230mm×85mm×60mm
间距：8mm
聚丙烯材质
可高温高压灭菌
用于试管倒置干燥，同时最大限度地减少空气污染物的聚集
可同时放置102个试管
| 货号 | BS-TDR-102 |
| 规格 | 102柱 |
| 品牌 | Jinpan |
|
独特的应用特点： ◆人性化设计，结构新颖，外形美观，性能优越。 ◆新一代电磁式称量传感器，使产品的精度有了可靠保障。 ◆具有全自动故障检测，自动校准，超载保护等多种应用程序。 ◆设有计件、百分比、单位转换等功能、操作简便、可靠。 ◆内置RS232C接口，可直接连接计算机、打印机等。 |
|
|
2—1 秤盘 2—2 秤盘座 2—3 水平泡 2—4 开机/关机 2—5 显示窗 2—6 模式 2—7 校准 2—8 单位 2—9 打印 2—10 去皮/置零 2—11 水平调节脚 |
|
维护保养 1、称量物料应使用称量纸、称量杯，严禁直接在称量台上称取物料，而且要特别注意秤盘和外盘不能碰撞。 2、使用电子天平后应及时擦拭称量台，防止药品洒落。 3、称量毒性、腐蚀性药品时，应用特制容器盛放，防止污染天平。 4、有固体粉末沾染在电子天平表面的，先用软毛刷轻轻除去粉末，再用软纱布蘸取中性洗涤剂擦拭。 5、有液体试剂沾染在电子天平表面的，先用卷筒纸轻轻吸去液体，再用软纱布蘸取中性洗涤剂擦拭。 6、定期请有关专业人员对天平进行校准。 7、保持天平适度适用，保持外壳和操作面板的情节，必要时使用沾有温和型清洁剂的湿布擦洗。 8、保持校准砝码在干燥安全的地方。 |
| 商品属性 | |
|---|---|
| 商品名称 | 电子分析天平（外校）JA1203 120g-JA1203-良平 |
| 型号 | JA1203 |
| 类别 | 实验室常用设备|||天平、泵|||实验天平|||电子分析天平（外校）JA1203120g |
| 品牌 | 良平 |
| 品牌简介 | 良平 |
| 关键字 | 天称 电子天平,电子天平,秤盘,天平,量程,精度,洗涤剂 |
Mouse HGF (肝细胞生长因子) ELISA KIT
货号：BSEM-052-96T
规格：96T
品牌：Biosharp
ELISA KIT又称为ELISA试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒，是一种灵敏度高，特异性强，重复性好的实验方法，且因其试剂稳定、易保存，操作简便、结果判断客观等已广泛应用在免疫学检验的各领域中，得到全世界科研工作者的认可和应用。
ELISA的基本原理是双抗体夹心法，将样本加入预包被了抗原或抗体的酶标板里，然后再加入酶标记的抗原或抗体，从而固相载体上的抗原或抗体与样品中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与样本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。
Biosharp ELISA KIT覆盖人、小鼠、大鼠、猪、通用等多种物种，产品达1000多种。每一个产品均经过严格的质检，结果稳定，重复性和线性范围好，特异性和灵敏度高，应用广泛，涉及免疫学、神经学、微生物学、细胞生物学、表观遗传学等多个科学领域。
| 货号 | BSEM-052-96T |
| 规格 | 96T |
| 品牌 | Biosharp |
| 说明书下载 | 点击下载 |
【简单介绍】
【详细说明】
1017970001 1.01797.0001 COD Cell Test Method: photometric 5000 – 90000 mg/l Spectroquant? Per 1.0 PCE Piece LA3 Advanced Analytical Point-of-Use (POU) (C46) 529 Point-of-Use (POU) SSQ PHOTOMETRY MERCK SSQ002ABA999 NEW ARTICLE FOR ARTICLE GROUP SSQ002ABA 30 Globally approved
TAU蛋白实验操作指南
TAU蛋白实验操作指南
硫黄素T 检测实验操作指南
一.在蒸馏水中制备 1mM 的硫黄素T储备液 (需是新鲜制备并用0.2 µm 注射式过滤器过滤).
二.然后用PBS pH 7.4将每个孔中的硫黄素T 储备液稀释至最终浓度为 25 µM (每孔容量 = 100 µL).
三.向每个孔中加入10 uM肝素.
四.于室温下将分装小份的tau蛋白在使用前进行解冻.
五.将纤维原或单体 (或两者都有) 加入到合适的实验孔中. 用移液器上下吸放混合孔中物质.
六.将孔板密封并放置于震荡孵育器上(800 rpm)，温度为 37°.
七.用 Molecular Devices Gemini XPS 微孔板读板机读取荧光读数, 使用软件是 Softmax Pro 版本为 6.5.1.
八.再次将孔板密封放置于震荡孵育器上, 温度为37°C.
九.在1 到 72 小时之间的固定间隔读数.
孔板: Greiner-Bio 96 Well Non-Binding Cell Culture Microplate, 黑色 (Greiner-Bio Catalog #655900).
XPS 酶标仪参数设置:
温度: 37°C
读取形式: 孔板扫描
波长: 激发光 450 nm，发射光 485 nm
PMT 增益: 自动
闪光每读: 6
震荡: 读数前 20 秒
如需购买TAU蛋白实验相关产品或了解更多实验操作详情，请咨询Stressmarq代理商-上海金畔生物
【简单介绍】
【详细说明】
