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HpaII 甲基转移酶 #M0214S 100 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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HpaII 甲基转移酶 #M0214S 100 units

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概述

HpaII 甲基转移酶与 MspI 甲基转移酶识别序列相同，但对左侧序列中的内侧胞嘧啶（C5）进行甲基化。 

来源

重组 E. coli 菌株，携带有从副流感嗜血杆菌（Haemophilus parainfluenzae）（ATCC 49669）克隆的 HpaII 修饰基因。 

反应条件

1X HpaII 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM Tris-HCl（pH 7.5 @ 25℃），10 mM EDTA，5 mM 2-巯基乙醇]。加入 80 μM SAM（随酶提供），37℃ 温育。
热失活：65℃ 加热 20 分钟。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 HpaII 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

4,000 units/ml。 

GpC 甲基转移酶 (M.CviPI) #M0227L 1,000 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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GpC 甲基转移酶 (M.CviPI) #M0227L 1,000 units

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特性

 阻止限制性内切酶的切割
 改变 DNA 的物理特性
 对 DNA 统一进行 [3H] 标记 

GpC 甲基转移酶 (M.CviPI) #M0227L 1,000 units

概述

GpC 甲基转移酶（M.CviPI）能将双链二核苷酸识别序列 5´ …GC…3´ 中所有胞嘧啶残基（C5）甲基化。 

来源

分离自重组的 E. coli 菌株，该菌株表达小球藻病毒（Chlorella virus）的甲基转移酶，该酶与麦芽糖结合蛋白（MBP）组成融合蛋白。 

反应条件

1X GC 反应缓冲液 + SAM
[50 mM NaCl，50 mM Tris-HCl，10 mM DTT（pH 8.5 @ 25℃）]。加入 160 μM S-腺苷甲硫氨酸（SAM，随酶提供），37℃ 温育。
热失活：65℃ 加热 20 分钟。 

注意

MgCl2 并不是必需的辅因子。 

质保声明

GpC 甲基转移酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。更多信息请联系我们。  

单位定义

1 酶活单位定义为在 20 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 HaeIII 限制性核酸内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

4,000 units/ml，通过 λDNA 检测。 

注意事项

胞嘧啶残基被甲基化后，可影响 DNA 的物理特性，如：降低 Z-DNA 形成的自由能，增加 DNA 的螺旋程度，改变 DNA 十字形突出的动力学特性。由于在化学测序过程中联氨的反应性降低，5-甲基胞嘧啶的位置易于确定下来。 

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献，请联系我们。  

TaqI 甲基转移酶 #M0219S 1,000 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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TaqI 甲基转移酶 #M0219S 1,000 units TaqI 甲基转移酶 #M0219S 1,000 units TaqI 甲基转移酶 #M0219S 1,000 units TaqI 甲基转移酶 #M0219S 1,000 units TaqI 甲基转移酶 #M0219S 1,000 units TaqI 甲基转移酶 #M0219S 1,000 units

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TaqI 甲基转移酶 #M0219S 1,000 units

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概述

Taq I 甲基转移酶对左侧序列中的腺嘌呤残基（N6）进行甲基化。 

来源

重组 E. coli 菌株，携带有从水栖高温菌（Thermus aquatics）克隆的 Taq I 修饰基因。 

反应条件

1X CutSmart Buffer + SAM
[50 mM KAc，20 mM Tris-Ac，10 mM Mg(Ac)2，100 μg/ml BSA（pH 7.9 @ 25℃）]。加入 80 μM SAM（随酶提供），65℃ 温育。 

注意事项

37℃ 条件下的活性为 25%。 

单位定义

1 单位指在 20 μl 反应体系中，65℃ 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 Taq I 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

10,000 units/ml。 

人 DNA（胞嘧啶-5）甲基转移酶（Dnmt1） #M0230L 250 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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人 DNA（胞嘧啶-5）甲基转移酶（Dnmt1）                              收藏

人 DNA（胞嘧啶-5）甲基转移酶（Dnmt1） #M0230L 250 units 人 DNA（胞嘧啶-5）甲基转移酶（Dnmt1） #M0230L 250 units 人 DNA（胞嘧啶-5）甲基转移酶（Dnmt1） #M0230L 250 units 人 DNA（胞嘧啶-5）甲基转移酶（Dnmt1） #M0230L 250 units 人 DNA（胞嘧啶-5）甲基转移酶（Dnmt1） #M0230L 250 units 人 DNA（胞嘧啶-5）甲基转移酶（Dnmt1） #M0230L 250 units

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人 DNA（胞嘧啶-5）甲基转移酶（Dnmt1） #M0230L 250 units

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停产通知

 停产通知：该产品于2021年12月15日停产。

概述

Dnmt1 在半甲基化 DNA 的 5´…CG…3´ 位点甲基化胞嘧啶残基。现认为哺乳动物 Dnmt1 与癌症发生、胚胎发育和几种其它生物功能有关。在细胞循环 S 期的 DNA 复制阶段发生大量的甲基化。 

来源

用杆状病毒表达系统表达人 Dnmt1 cDNA。 

反应条件

1X Dnmt1 反应缓冲液
[50 mM Tris-HCl (pH 7.8), 1 mM EDTA, 1 mM DTT, 5% 甘油]，加入 100 μg/ml BSA 和 160 μM SAM, 37℃温育。热失活：65℃ 20 分钟。 

随酶提供的试剂

10X Dnmt1 反应缓冲液
100X BSA
32 mM S-腺苷甲硫氨酸（SAM）

质保声明

未检测到核酸内切酶、外切酶污染。 

单位定义

1 单位指在 25 μl 反应体系中，37℃ 条件下 30 分钟催化 1 pmol 的甲基基团转移到多聚 dI.dC 底物上所需要的酶量。 

浓度

2,000 units/ml 

注意事项

议选用 M.Sssl（NEB #M0226）修饰和保护DNA，因该酶能同时有效地对未甲基化和半甲基化的底物 DNA 进行甲基化。 

参考文献

有关该产品性质和应用的参考文献请联系我们。 www.jinpanbio.com，www.jinpanbio.cn。 

GSK126

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GSK126

货号：
IG2220

品牌：
Jinpan

GSK126

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产品简介
有效期 2年
英文名称 GSK126
CAS 1346574-57-9
分子式 C31H38N6O2
分子量 526.67
储存条件 -20℃
纯度 ≥98%
外观（性状） White to yellow Solid
单位 瓶
生物活性 GSK126 是一种有效，选择性的 EZH2 甲基转移酶抑制剂，IC50 为 9.9 nM。[1-2]
In Vitro GSK126有效地抑制野生型和突变型EZH2甲基转移酶活性，具有相似的效力（Ki = 0.5-3nM），与使用的底物无关，并且与S-腺苷甲硫氨酸（SAM）竞争并且与肽底物不竞争。 GSK126对其他甲基转移酶和多种其他蛋白质类别（EZH1，IC50 = 680 nM）具有高选择性[1]。用GSK126处理三种SCLC细胞系诱导生长抑制。用0.5,2和8μMGSK126处理SCLC细胞系（Lu130，H209和DMS53），并通过WST-8测定分析生长曲线。在所有三种细胞系中，观察到GSK126处理对细胞生长的抑制在8μM，而Lu130和H209对GSK126更敏感，即使在较低剂量下也是如此[2]。
In Vivo 在雌性米色SCID小鼠中以每20g体重0.2mL的剂量体积腹膜内施用GSK126。 GSK126有效抑制EZH2突变体DLBCL细胞系的增殖，并显著抑制EZH2突变体DLBCL异种移植物在小鼠中的生长[1]。
激酶实验 制备含有野生型或突变体（A677G，Y641N，Y641C，Y641H，Y641S或Y641F）EZH2的五元PRC2复合物（Flag-EZH2，EED，SUZ12，AEBP2，RbAp48）。将GSK126溶解在DMSO中，并以0.6nM至300nM的浓度进行测试，最终DMSO浓度为2.5％。与在体外优选H3K27me0作为底物的野生型EZH2相反，EZH2 Y641突变体优选H3K27me2并且对H3K27me0或H3K27me1具有很小的活性。 A677G突变体不同于EZH2的野生型和Y641突变体形式，因为它有效甲基化H3K27me0，H3K27me1和H3K27me2;因此，使用K27me0（野生型，A677G EZH2），K27me1（A677G EZH2）或K27me2（A677G，Y641N，Y641C，Y641H，Y641S和Y641F EZH2）的组蛋白H3肽（残基21-44;最终10μM）作为甲基转移酶底物。将GSK126加入板中，然后加入6nM EZH2复合物和肽。由于GSK126的效力处于或接近[SAM] = Km的测定的紧密结合极限，因此在竞争性底物SAM相对于其Km的高浓度下测量IC 50值（其中SAM Km为7.5μMSAM） 0.3μM）[1]。
SMILES O=C(C1=CC(C2=CC=C(N3CCNCC3)N=C2)=CC4=C1C(C)=CN4[C@@H](C)CC)NCC5=C(C)C=C(C)NC5=O
靶点 Histone Methyltransferase（EZH2）
动物实验 小鼠[1] GSK126或媒介物以0.2mL / 20g体重的剂量体积腹膜内施用。将100％基质胶中的Pfeiffer或KARPAS-422细胞（1×107）皮下植入雌性米色SCID小鼠中。用卡尺测量肿瘤，并根据肿瘤大小随机分组到治疗组中。对于功效研究，在开始给药之前在每个治疗组中随机化10只小鼠，并且一旦肿瘤体积在Pfeiffer和KARPAS-422研究中为约200mm 3并且在KARPAS-422间歇给药研究中为500mm 3，则开始GSK126治疗。称重小鼠并用卡尺每周两次测量肿瘤。假设两个方差相等的样本进行双尾t检验。
细胞实验 将引入JUB和PTRF的DMS53细胞以1×10 3细胞/孔的密度接种在96孔板中，并使用WST-8试剂盒在12,36,60和84小时分析细胞生长。还使用WST-8试剂盒分析了通过DZNep或GSK126处理的Lu130，H209和DMS53的细胞生长。将DZNep以5mM溶解在PBS中，并以5μM的终浓度培养细胞。将GSK126以10mM溶解于DMSO中，并以0.5,2和8μM培养细胞[2]。
数据来源文献 [1]. McCabe MT, et al. EZH2 inhibition as a therapeutic strategy for lymphoma with EZH2-activating mutations. Nature. 2012 Dec 6;492(7427):108-12.
[2]. Sato T, et al. PRC2 overexpression and PRC2-target gene repression relating to poorer prognosis in small cell lung cancer. Sci Rep. 2013 May 29;3:1911
规格 2mg 5mg 10mg

GSK126 是一种有效的，高选择性EZH2 methyltransferase抑制剂。

EcoRI 甲基转移酶 #M0211S 10,000 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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EcoRI 甲基转移酶 #M0211S 10,000 units

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概述

EcoRI 甲基转移酶能对左侧序列中的内侧腺嘌呤残基（N6）进行甲基化修饰。 

来源

重组 E. coli 菌株，携带有从 E. coli RY 13（R.N. Yoshimori）克隆 EcoRI 修饰基因。 

反应条件

1X EcoRI 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM NaCl，50 mM Tris-HCl（pH 8.0 @ 25℃），10 mM EDTA]。加入 80 μM SAM（随酶提供），37℃ 温
育。
热失活：65℃ 加热 20 分钟。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 EcoRI 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

40,000 units/ml。 

注意事项

MgCl2 抑制 EcoRI 甲基转移酶活性。在存在 4 mM MgCl2 条件下，酶活只保留 50%。 

EcoGII 甲基转移酶 #M0603S 200 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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概述：

 EcoGII 甲基转移酶是非特异甲基转移酶，能对序列中任意腺嘌呤残基（N6）进行甲基化修饰。

来源：

 重组 E. coli 菌株，该载体含有从 E. coliC227-11 克隆的 EcoGII 修饰基因。

反应条件：

 1X CutSmart 缓冲液 + SAM [50 mM KAc，20 mM Tris-Ac，10 mM Mg(Ac)2，100 μg/ml BSA（pH 7.9 @ 25℃）]，加入 160 μMSAM（随酶提供），37℃ 温育。

热失活：65℃ 加热 10 分钟。

单位定义：

 1 单位指在 20 μl 反应体系中，37℃ 条件下，30 分钟能保护 100 ng FAM 标记 dsDNA 不被MboI 限制性内切酶切割所需要的酶量。

浓度：

 5,000 units/ml

注意事项：

 SAM 在 37℃（pH 7.5）条件下不稳定，温育超过 4 个小时需要补充新的 SAM。甲基化反应中，SAM 以 1:200 的比例稀释到终浓度为 160μM。EcoGII 甲基转移酶对盐敏感。确保 DNA 溶液的盐浓度很低或者确保总反应体系中 DNA 溶液仅占很低的比例。

MspI 甲基转移酶 #M0215S 100 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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#M0215S
100 units
939.00
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MspI 甲基转移酶 #M0215S 100 units

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概述

MspI 甲基转移酶与 HpaII 甲基转移酶识别序列相同，但对左侧识别序列外侧胞嘧啶（C5）进行甲基化。 

来源

重组 E. coli 菌株，携带有从莫拉氏菌属（Moraxella species）（ATCC 49670）克隆的 MspI 修饰基因。 

反应条件

1X MspI 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[100 mM NaCl，50 mM Tris-HCl（pH 7.5 @ 25℃），10 mM EDTA，5 mM 2-巯基乙醇]。加入 80 μM SAM（随酶提供），37℃ 温育。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 MspI 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

5,000 units/ml。