标签归档：ezh

EPZ005687

发表于由

EPZ005687

货号：
IE1470

品牌：
Jinpan

EPZ005687

暂无详情
产品简介
有效期 2年
英文名称 EPZ005687
CAS 1396772-26-1
分子式 C32H37N5O3
分子量 539.67
储存条件 -20℃
纯度 ≥98%
外观（性状） White to yellow Solid
单位 瓶
生物活性 EPZ005687 是一种有效的，选择性的 EZH2 抑制剂，Ki 值为 24 nM，对其选择性是对 EZH1 的 50 倍，对其他 15 种甲基转移酶的 500 倍。[1-2]
IC50 Ki: 24 nM (EZH2)[1]
In Vitro EPZ005687显示PRC2酶活性的浓度依赖性抑制，IC 50值为54±5nM。 EPZ005687特异性抑制淋巴瘤细胞中的H3K27甲基化。 EPZ005687对携带EZH2Y641F的细胞系的增殖具有显著影响。 EPZ005687降低了突变体而非野生型EZH2淋巴瘤细胞的增殖[1]。 EPZ005687（0.5,1,5和10μM）以剂量依赖性方式诱导U937细胞的明显凋亡。 EPZ005687明显抑制U937细胞的增殖，但对NBMCD34 +细胞的增殖影响较小。 EPZ005687诱导G1期阻断并降低U937细胞中S期细胞的百分比。此外，EPZ005687在U937细胞中产生明显的H3K27甲基化缺失，但对NBMCD34 +细胞的H3K27甲基化几乎没有影响[2]。
激酶实验 EPZ005687的10点曲线使用在DMSO中的连续3倍稀释制备，从2.5mM开始（化合物的最终顶部浓度为50μM，DMSO为2％）。将1μL等分试样的抑制剂稀释系列点在384孔微量滴定板中。 100％抑制对照由1mM终浓度的产物抑制剂S-腺苷高半胱氨酸（SAH）组成。在1X测定缓冲液（20mM Bicine [pH 7.6]，0.002％吐温20,0.005％牛皮明胶中）将化合物与每孔40μL的5nM PRC2（50μL中的最终测定浓度为4nM）孵育30分钟。 0.5mM DTT）。每孔加入10μL底物混合物，其包含测定缓冲液3H-SAM，未标记的SAM和代表含有C-末端生物素的组蛋白H3残基21-44的肽（附加于C-末端酰胺封端的赖氨酸）以引发反应。将反应在室温下孵育90分钟，并用每孔10μL的600μM未标记的SAM淬灭，然后转移至384孔Flashplate并在30分钟后洗涤。
SMILES O=C(NCC1=C(C)C=C(C)NC1=O)C2=CC(C3=CC=C(CN4CCOCC4)C=C3)=CC5=C2C=NN5C6CCCC6
靶点 Histone Methyltransferase（EZH2）
细胞实验 对于细胞周期，将WSU-DLCL2细胞以1×10 5个细胞/ mL的密度接种在12孔板中。将细胞与EPZ005687以0.2μM，0.67μM，2μM和6μM一起孵育，总共2mL，历时10天。进行所有剩余的细胞周期分析。
数据来源文献 [1]. Knutson SK, et al. A selective inhibitor of EZH2 blocks H3K27 methylation and kills mutant lymphoma cells. Nat Chem Biol. 2012;8(11):890-6.
[2]. Tang SH, et al. Effects of H3K27 methylation inhibitor EPZ005687 on apoptosis, proliferation and cell cycle of U937 cells and normal CD34 positive cells. Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi. 2014 Dec;22(6):1561-6
规格 5mg 10mg

EPZ005687是一种有效的，选择性EZH2抑制剂。

Rabbit anti-EZH2 Monoclonal Antibody(JRMR-204)

发表于由

Rabbit anti-EZH2 Monoclonal Antibody(JRMR-204)别名宿主反应种属应用分子量纯化方法类型克隆号同种型储存/保存方法背景说明细胞定位UniProt

概述
别名
EZH2 抗体;ENX-1; KMT6; Enhancer of zeste homolog 2
宿主
Rabbit
反应种属
Human, Mouse, Rat
应用
WB:1:2000; IHC-P:1:200-1:1000; ICC/IF:1:50;
分子量
Predicted molecular weight: 85kD
Disclaimer note: The observed molecular weight of the protein may vary from the listed predicted molecular weight due to post translational modifications, post translation cleavages, relative charges, and other experimental factors.
性能
纯化方法
Protein A
类型
Monoclonal Antibody
克隆号
JRMR-204
同种型
IgG
储存/保存方法
储存温度：-20℃，避免反复冻融
靶标
背景说明
聚梳组（PcG）蛋白。 PRC2 / EED-EZH2复合物的催化亚基，可对组蛋白H3的’Lys-9’（H3K9me）和’Lys-27’（H3K27me）进行甲基化，导致受影响的靶基因的转录抑制。 能够将组蛋白H3的单，二和三甲基化’Lys-27’分别形成H3K27me1，H3K27me2和H3K27me3。 显示对甲基化程度较低的底物的偏爱，当逐渐将更多的甲基结合到H3K27中时，H3K27me0> H3K27me1> H3K27me2会失去活性。 与含EZH1的复合物相比，它在胚胎干细胞中含量更高，并且在形成H3K27me3中起着重要作用，这是胚胎干细胞身份和正确分化所必需的。 PRC2 / EED-EZH2复合物还可以充当DNA甲基转移酶的募集平台，从而连接两个表观遗传抑制系统。
细胞定位
细胞核
UniProt
Q15910

EI1

发表于由

EI1

货号：
IE1440

品牌：
Jinpan

EI1

暂无详情
产品简介
有效期 2年
MDL MFCD25976740
英文名称 EI1
CAS 1418308-27-6
分子式 C23H26N4O2
分子量 390.48
储存条件 -20℃
纯度 ≥98%
外观（性状） Solid
单位 瓶
生物活性 EI1 是一种新颖的，有效的 EZH2 抑制剂，能够作用于 EZH2 (WT) 和 EZH2 (Y641F)，IC50 值分别为 15 nM 和 13 nM。[1]
In Vitro 在DLBCL细胞中，EI1抑制细胞H3K27甲基化并激活Ezh2靶基因p16表达。在小鼠胚胎成纤维细胞中，EI1还抑制H3K27me3和细胞增殖。此外，EI1选择性抑制携带Ezh2突变的DLBCL细胞的生长，并引起细胞周期停滞和细胞凋亡[1]。
激酶实验 对于IC50测定，将EI1在DMSO中连续稀释三倍，总共12个浓度，起始浓度为1μM。将反应物在室温下温育120分钟，并通过加入猝灭溶液（2.5％TFA和320nM d4-SAH）终止反应。使用具有Turbulon Spray和Prominence UFLC的API 4000三重四极杆质谱法对SAH产生进行定量。使用阳性（无抑制剂）和阴性（无酶）对照标准化抑制百分比，并使用PRISM计算IC 50。 S-腺苷甲硫氨酸（SAM）竞争的酶学研究在反应条件略有改变的情况下进行：10μMEII用作连续稀释的起始剂量。 SAM在1μM和50μM之间的范围内滴定（对应于1×Km和50×Km），并且底物肽在其饱和条件（10μM）下存在于最终反应混合物中。对于组蛋白甲基转移酶（HMT），所有HMT都是来自大肠杆菌或杆状病毒系统的纯化重组蛋白。 G9a，SuV39H2，Set7 / 9，CARM1，SETD8，NSD3，SETD2和Dot1L的催化结构域和全长SmyD2蛋白用于生物化学测定。用酶学研究仔细表征HMT生化反应，并测定SAM和底物Km。对于大多数HMT，SAM和底物浓度保持在它们各自的Km，除了具有低SAM-Km值的那些（SmyD2和Set7 / 9），其中使用0.5μMSAM。使用相同的测定形式进行所有HMT反应，其中通过LC-MS定量来自生化反应的SAH的产生。
SMILES CCC(CC)N(C=C1)C2=C1C(C(NCC3=C(C)C=C(C)NC3=O)=O)=CC(C#N)=C2
靶点 EZH2
细胞实验 将指数生长的弥散性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）细胞以1×10 5个细胞/ mL的密度接种于12孔板中，并具有指定浓度的EI1。通过Vi-CELL每隔3-4天测定活细胞数至14或15天。将小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）以2.5×10 4细胞/ mL接种在六孔板中，并用EI1（3.3μM）或4-OH-三苯氧胺（100nM）处理。在第3天，第6天和第11天测定活细胞数。
数据来源文献 [1]. Qi W, et al. Selective inhibition of Ezh2 by a small molecule inhibitor blocks tumor cells proliferation. Proc Natl Acad Sci U S A. 2012 Dec 26;109(52):21360-5
规格 5mg 10mg

EI1是一种有效的选择性EZH2抑制剂。

GSK126

发表于由

GSK126

货号：
IG2220

品牌：
Jinpan

GSK126

暂无详情
产品简介
有效期 2年
英文名称 GSK126
CAS 1346574-57-9
分子式 C31H38N6O2
分子量 526.67
储存条件 -20℃
纯度 ≥98%
外观（性状） White to yellow Solid
单位 瓶
生物活性 GSK126 是一种有效，选择性的 EZH2 甲基转移酶抑制剂，IC50 为 9.9 nM。[1-2]
In Vitro GSK126有效地抑制野生型和突变型EZH2甲基转移酶活性，具有相似的效力（Ki = 0.5-3nM），与使用的底物无关，并且与S-腺苷甲硫氨酸（SAM）竞争并且与肽底物不竞争。 GSK126对其他甲基转移酶和多种其他蛋白质类别（EZH1，IC50 = 680 nM）具有高选择性[1]。用GSK126处理三种SCLC细胞系诱导生长抑制。用0.5,2和8μMGSK126处理SCLC细胞系（Lu130，H209和DMS53），并通过WST-8测定分析生长曲线。在所有三种细胞系中，观察到GSK126处理对细胞生长的抑制在8μM，而Lu130和H209对GSK126更敏感，即使在较低剂量下也是如此[2]。
In Vivo 在雌性米色SCID小鼠中以每20g体重0.2mL的剂量体积腹膜内施用GSK126。 GSK126有效抑制EZH2突变体DLBCL细胞系的增殖，并显著抑制EZH2突变体DLBCL异种移植物在小鼠中的生长[1]。
激酶实验 制备含有野生型或突变体（A677G，Y641N，Y641C，Y641H，Y641S或Y641F）EZH2的五元PRC2复合物（Flag-EZH2，EED，SUZ12，AEBP2，RbAp48）。将GSK126溶解在DMSO中，并以0.6nM至300nM的浓度进行测试，最终DMSO浓度为2.5％。与在体外优选H3K27me0作为底物的野生型EZH2相反，EZH2 Y641突变体优选H3K27me2并且对H3K27me0或H3K27me1具有很小的活性。 A677G突变体不同于EZH2的野生型和Y641突变体形式，因为它有效甲基化H3K27me0，H3K27me1和H3K27me2;因此，使用K27me0（野生型，A677G EZH2），K27me1（A677G EZH2）或K27me2（A677G，Y641N，Y641C，Y641H，Y641S和Y641F EZH2）的组蛋白H3肽（残基21-44;最终10μM）作为甲基转移酶底物。将GSK126加入板中，然后加入6nM EZH2复合物和肽。由于GSK126的效力处于或接近[SAM] = Km的测定的紧密结合极限，因此在竞争性底物SAM相对于其Km的高浓度下测量IC 50值（其中SAM Km为7.5μMSAM） 0.3μM）[1]。
SMILES O=C(C1=CC(C2=CC=C(N3CCNCC3)N=C2)=CC4=C1C(C)=CN4[C@@H](C)CC)NCC5=C(C)C=C(C)NC5=O
靶点 Histone Methyltransferase（EZH2）
动物实验 小鼠[1] GSK126或媒介物以0.2mL / 20g体重的剂量体积腹膜内施用。将100％基质胶中的Pfeiffer或KARPAS-422细胞（1×107）皮下植入雌性米色SCID小鼠中。用卡尺测量肿瘤，并根据肿瘤大小随机分组到治疗组中。对于功效研究，在开始给药之前在每个治疗组中随机化10只小鼠，并且一旦肿瘤体积在Pfeiffer和KARPAS-422研究中为约200mm 3并且在KARPAS-422间歇给药研究中为500mm 3，则开始GSK126治疗。称重小鼠并用卡尺每周两次测量肿瘤。假设两个方差相等的样本进行双尾t检验。
细胞实验 将引入JUB和PTRF的DMS53细胞以1×10 3细胞/孔的密度接种在96孔板中，并使用WST-8试剂盒在12,36,60和84小时分析细胞生长。还使用WST-8试剂盒分析了通过DZNep或GSK126处理的Lu130，H209和DMS53的细胞生长。将DZNep以5mM溶解在PBS中，并以5μM的终浓度培养细胞。将GSK126以10mM溶解于DMSO中，并以0.5,2和8μM培养细胞[2]。
数据来源文献 [1]. McCabe MT, et al. EZH2 inhibition as a therapeutic strategy for lymphoma with EZH2-activating mutations. Nature. 2012 Dec 6;492(7427):108-12.
[2]. Sato T, et al. PRC2 overexpression and PRC2-target gene repression relating to poorer prognosis in small cell lung cancer. Sci Rep. 2013 May 29;3:1911
规格 2mg 5mg 10mg

GSK126 是一种有效的，高选择性EZH2 methyltransferase抑制剂。