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DNA 拓扑异构酶 I-DNA Topoisomerase I酶试剂盒Takara Clontech

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DNA 拓扑异构酶 I-DNA Topoisomerase I
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 2240A DNA Topoisomerase I 100 U ￥382 DNA 拓扑异构酶 I-DNA Topoisomerase I DNA 拓扑异构酶 I-DNA Topoisomerase I DNA 拓扑异构酶 I-DNA Topoisomerase I
Takara 2240B (A × 5) DNA Topoisomerase I 100 U × 5 ￥1,723 DNA 拓扑异构酶 I-DNA Topoisomerase I DNA 拓扑异构酶 I-DNA Topoisomerase I DNA 拓扑异构酶 I-DNA Topoisomerase I
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■ 制品内容 (Code No.: 2240A)
DNA Topoisomerase I (20 U/μl) 100 U
10X DNA Topoisomerase I Buffer 1 ml
0.1% BSA* 1 ml
   
* BSA在-20℃下易产生沉淀，应尽量避免多次反复冻融。短期使用请在4℃下保存。产生稍许沉淀不影响反应效果。
 
■ 制品说明
DNA Topoisomerase I 催化4种反应：
1. 使环状超螺旋分子的超螺旋解开。
2. 在单链环状DNA分子内形成绳结 (Knotting) 和解开绳结 (Unknotting)。
3. 催化具有互补碱基序列的环状单链DNA形成双链闭环状DNA分子。
4. 2个环状双链DNA分子之中的一个存在DNA链的切口时，发生两个分子的连结反应 (Catenation) 或者逆反应 (Decatenation)。 本酶由于来源于小牛胸腺，与来源于原核生物的酶性质不同，即使在Mg2+不存在的条件下也显示活性。而且，原核生物由来的DNA Topoisomerase I 只作用负链的超螺旋分子，而本酶则能使正负两方的超螺旋分子均形成松散型。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 起源
Calf thymus
 
■ 活性定义
在37℃、30分钟内把0.5 μg/50 μl的超螺旋pBR322 DNA完全转换成松散型的酶的活性定义为1 unit。
 
■ 使用注意
pBR322 DNA和φX174 DNA的RF I (超螺旋分子) 用DNA Topoisomerase I 处理后电泳，胶中含溴乙锭 (EtBr) 时，反应前后DNA条带的位置不发生变化。这是因为由DNA Topoisomerase I作用而转换为松散型的DNA受EtBr的影响，再次变为超螺旋状态。因此，使用Topoisomerase I反应后，一般使用不含EtBr的琼脂糖凝胶电泳，电泳终了后再用EtBr染色。
 
 

页面更新：2024-01-31 16:23:53

拓扑异构酶 I（E. coli） #M0301L 500 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 修复蛋白

拓扑异构酶 I（E. coli）                              收藏

拓扑异构酶 I（E. coli） #M0301L 500 units 拓扑异构酶 I（E. coli） #M0301L 500 units 拓扑异构酶 I（E. coli） #M0301L 500 units 拓扑异构酶 I（E. coli） #M0301L 500 units

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价 格(元)
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#M0301L
500 units
3,649.00
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#M0301S
100 units
899.00
有
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特性

 识别错配 DNA
 催化负超螺旋 DNA 松弛 

概述

拓扑异构酶 I（E. coli）催化负超螺旋 DNA 的松弛。拓扑异构酶 I 也参与 DNA 螺旋化的形成和解旋以及将两条互补的单链 DNA 环耦合为双链 DNA 环。完整的全酶分子量为 97 kDa。 

来源

克隆有 topA 基因的重组 E. coli 菌株。 

反应条件

1X CutSmart 反应缓冲液
[50 mM KAc，20 mM Tris-Ac，10 mM Mg(Ac)2，100 μg/ml BSA（pH 7.9 @ 25℃）]，37℃ 温育。
热失活：65℃ 加热 20 分钟。 

质保声明

拓扑异构酶 I 经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。  

单位定义

1 单位指在 25 μl 反应体系，37℃ 条件下，15 分钟内能催化超过 95% 的 0.5 μg pUC19 RF I 型（负超螺旋）DNA 松弛所需要的酶量。DNA 超螺旋化通过不含溴化乙啶的琼脂糖凝胶电泳来检测。 

浓度

5,000 units/ml 和 15,000 units/ml。 

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献，请联系我们。  

替尼泊苷

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替尼泊苷

货号：
IT1680

品牌：
Jinpan

替尼泊苷

暂无详情
产品简介
MDL MFCD00866516
EC EINECS 249-831-2
别名 足叶噻吩昔; VM-26
英文名称 Teniposide
CAS 29767-20-2
分子式 C32H32O13S
分子量 656.65
储存条件 -20℃
纯度 Purity≥98%
单位 瓶
生物活性 Teniposide 是一种足叶草毒素衍生物，是拓扑异构酶 II (topoisomerase II) 的抑制剂，同时为一种化疗剂。[1-3]
In Vitro 替尼泊苷是拓扑异构酶II抑制剂。替尼泊苷（VM-26,0.15-45mg/L）以剂量依赖性方式抑制Tca8113细胞的增殖，IC50为0.35mg/L.替尼泊苷（5 mg/L）诱导Tca8113细胞凋亡。替尼泊苷（5.0 mg/L）导致细胞在Tca8113细胞中停滞于G2/M期[2]。当细胞中miR-181b水平较高时，替尼泊苷对患者原代培养的胶质瘤细胞具有活性，IC50为1.3±0.34μg/ mL。与对照细胞相比，用具有低MDM2的替尼泊苷处理的细胞具有降低的活力，并且在MDM2抑制时IC50从5.86±0.36μg/ mL降低至2.90±0.35μg/ mL。替尼泊苷还通过MDM2的介导抑制具有高水平miR-181b的神经胶质瘤细胞的活力[3]。
In Vivo 替尼泊苷（0.5mg/kg，ip）显著增加微核多色红细胞（MNPCE）频率，其与骨髓毒性直接相关，因为注意到显著的骨髓抑制。替尼泊苷（24mg/kg，ip）显著降低BrdU标记的精子的频率。替尼泊苷（12,24 mg/kg，ip）也可显著诱导雄性小鼠生殖细胞中的二体精子[1]。
SMILES O=C1OC[C@]2([H])[C@H](O[C@H]3[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@@H](CO4)O3)O[C@@H]4C5=CC=CS5)O)O)C6=C(C=C7OCOC7=C6)[C@@H](C8=CC(OC)=C(O)C(OC)=C8)[C@]21[H]
靶点 Topoisomerase
动物实验 用0.5mg/kg替尼泊苷处理动物（小鼠），并在处理后24小时取样骨髓。秋水仙碱和丝裂霉素C分别以2mg/kg的剂量用作阳性对照aneugen和clastogen。制备骨髓涂片并用May-Gruenwald/Giemsa溶液染色。为每只动物制备至少四个载玻片并使其干燥过夜。每只动物的一个载玻片用May-Gruenwald/Giemsa溶液染色，用于常规评估多色红细胞（PCE）和正常红细胞（NCE）中的微核（MN）频率。将剩余的未染色载玻片储存在-20℃，通过用小鼠DNA探针鉴定MN的来源，区分致裂和气动作用。对于每只动物，对1000个编码载玻片的PCE评分是否存在MN。此外，记录每只动物1000 NCE中PCE的数量以评估骨髓抑制，并且有丝分裂活性计算为％PCE = [PCE /（PCE + NCE）]×100 [1]。
细胞实验 将对数生长的Tca8113细胞用胰蛋白酶消化并制成单细胞悬浮液，然后以5×104细胞/孔的浓度接种于96孔培养板中，对于替尼泊苷8个柱，在每个板中用于CDDP的7个柱，每个柱中3个孔。培养24小时后，每个培养皿中3个孔的培养基更换为含有0.15 mg/L，0.5 mg/L，1.5 mg/L，5.0 mg/L，15 mg/L和45 mg /的替尼泊苷的培养基。 L或CDDP分别为0.1 mg/L，0.3 mg/L，1.0 mg/L，3.0 mg/L和9.0 mg/L.空白对照孔加入不含药物的培养基。然后将细胞再培养24小时，48小时，72小时，96小时和120小时。除去上清液，在每个孔中加入20μLMTT溶液，然后再培养4小时。小心弃去上清液，加入200μL二甲基亚砜（DMSO）并剧烈摇动以溶解紫色沉淀形成。使用波长为450nm的分光光度计测试每个孔的光密度（OD）。该实验一式三份重复[2]。
数据来源文献 [1]. Attia SM, et al. Molecular cytogenetic evaluation of the aneugenic effects of teniposide in somatic and germinal cells of male mice. Mutagenesis. 2012 Jan;27(1):31-9.

[2]. Li J, et al. Topoisomerase II trapping agent teniposide induces apoptosis and G2/M or S phase arrest of oral squamous cell carcinoma. World J Surg Oncol. 2006 Jul 6;4:41.

[3]. Sun YC, et al. MiR-181b sensitizes glioma cells to teniposide by targeting MDM2. BMC Cancer. 2014 Aug 25;14:611
规格 25mg 10mM*1mL in DMSO 50mg

过与拓扑异构酶II和DNA形成三元复合物起作用，作用于细胞周期的S期晚期或G期早期。用于儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）的相关研究。