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固定化 T4 DNA 连接酶 #M0569S 1.1 mg-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品特点

· 固定化 T4 DNA 连接酶（IM T4 DNA Ligase）由 T4 DNA 连接酶和磁珠组成，两者由共价键连接。

· 使用磁力可轻松去除反应中的酶
· 避免热失活步骤对下游应用的干扰
· 固定化酶可重复使用
· 开启新的工作流程和应用
 

产品说明

 T4 DNA 连接酶催化双链 DNA 或 RNA 上相邻的 5´-磷酸基末端和 3´-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平末端或粘性末端之间的连接，还可以修复双链 DNA、RNA 或 DNA/RNA 杂交双链中的单链切刻（1）。

固定化 T4 DNA 连接酶（IM T4 DNA Ligase）是包被有 T4 DNA 连接酶的磁珠悬浮液，以 10 mg/ml 的溶液（50% 甘油）提供，每微升溶液的有效浓度为 60 粘性末端单位（CEU）。反应完成后，体系中的酶可使用磁力去除，然后可重复使用。

  固定化 T4 DNA 连接酶在不同温度下的相对活性

Temperature

% Activity

16ºC

100%

25ºC

100%

37ºC

50%

 

固定化 T4 DNA 连接酶在不同 NEB 缓冲液中的活性

固定化 T4 DNA 连接酶 #M0569S 1.1 mg

 

图 1：固定化 T4 DNA 连接酶成功连接 Lambda DNA-HindIII 消化产物

 

固定化 T4 DNA 连接酶 #M0569S 1.1 mg

根据产品说明书推荐步骤，分别使用无连接酶、可溶性 T4 DNA 连接酶（NEB #M0202）、固定化 T4 DNA 连接酶（NEB #M0569）对 Lambda DNA- HindIII 消化产物（NEB #N3012）进行连接。结果显示，可溶性酶和固定化酶的连接效果一致。

 

图 2：固定化 T4 DNA 连接酶可重复使用

固定化 T4 DNA 连接酶 #M0569S 1.1 mg

将固定化 T4 DNA 连接酶（NEB #M0569）置于快连缓冲液中，对 Nanopore 接头进行连续夹板连接，数据显示：经过 20 次连续连接反应后，酶活仍不受影响。

 

T4 RNA 连接酶 2（dsRNA 连接酶） #M0239L 750 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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T4 RNA 连接酶 2（dsRNA 连接酶）                              收藏

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特性

 连接粘性末端接头
 连接双链 RNA 中切刻的最佳选择
 可用于 DNA/RNA 杂交链中，RNA 3´ 羟基与 DNA 5´ 磷酸基的连接 

概述

T4 RNA连接酶 2，也被称为 T4 Rnl2（gp24.1），同时具有 RNA 链分子间和分子内连接活性。与 T4 RNA 连接酶 1（NEB #M0204）不同的是， T4 RNA 连接酶 2 对双链 RNA 切刻的连接活性要明显高于对单链 RNA 的末端连接。该酶也可用于连接双链结构中 RNA 3´ 羟基和 DNA 5´ 磷酸基的切刻。
 

来源

纯化自携带 T4 RNA 连接酶 2 基因的重组 E. coli 菌株。 

反应条件

1X T4 RNA 连接酶 2 反应缓冲液[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，2mM MgCl2，1 mM DTT，400 μM ATP]，37℃ 温育。 

质保声明

无单链和双链 DNA 核酸内切酶、外切酶、 RNase 以及磷酸酶污染
 

单位定义

1 单位指 20 μl 反应体系中， 37℃ 条件下， 30 分钟完全连接 0.4 μg 的 23-mer 和 17-mer RNA等摩尔混合物所需的酶量。单位活性检测的检测条件请登录 www.jinpanbio.com 或 www.jinpanbio.cn。
 

浓度

10,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。 www.jinpanbio.com 或 www.jinpanbio.cn。 

连接酶T4 DNA Ligase酶试剂盒Takara Clontech

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连接酶T4 DNA Ligase
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 2011A T4 DNA Ligase 25,000 U ￥130
￥90 		连接酶T4 DNA Ligase 连接酶T4 DNA Ligase 连接酶T4 DNA Ligase
Takara 2011B (A × 5) T4 DNA Ligase 25,000 U × 5 ￥603 连接酶T4 DNA Ligase 连接酶T4 DNA Ligase 连接酶T4 DNA Ligase

*红字为促销价格，促销时间: 2024年3月1日-2024年4月30日

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■ 制品内容
T4 DNA Ligase (350 U/μl) 25,000 U
10X T4 DNA Ligase Buffer 1 ml
 
■ 制品说明
本酶催化相邻DNA链的5’-P末端和3’-OH末端以磷酸二酯键结合的反应，需Mg2+和ATP作辅因子，分子量为62,000，最适反应pH为7.6。本酶可以催化粘性末端之间和平滑末端之间的DNA的连接。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 起源
Escherichia coli carrying the plasmid that encodes the gene of T4 DNA ligase
 
■ 活性定义
在20 μl的连接反应体系中，6 μg的λDNA-Hind Ⅲ的分解物在16℃下反应30分钟时，有90%以上的DNA片段被连接所需要的酶量定义为1个活性单位 (unit)。
本酶的1 unit相当于在含有6.6 mM MgCl2，10 mM DTT，66 μM ATP和3.3 μM [32P]-Na4P2O7的66 mM Tris-HCl (pH7.6) 中发生ATP-PPi交换反应的0.008 Weiss Unit。
 
■ 用途
1. DNA片段和载体DNA的连接。
2. DNA片段和Linker或Adaptor DNA的连接。
 
■ 注意事项
连接反应因末端碱基序列的不同而反应速度各异，一般有下列倾向 (由快至慢)：
突出末端：Hind III＞Pst I＞EcoR I＞BamH I＞Sal I
平滑末端：Hae III＞Alu I＞Hinc II＞Sma I
          EcoR V＞Sca I＞Pvu II＞Nru I
其中连接Hind III 末端的速度约为连接Sal I 末端速度的10～40倍；
而连接Hae III 末端的速度约为连接Sma I 末端速度的5～10倍。
 
 

页面更新：2023-12-01 14:16:35

T4 RNA 连接酶 1（ssRNA 连接酶）（高浓度） #M0437M 5,000 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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T4 RNA 连接酶 1（ssRNA 连接酶）（高浓度）                              收藏

T4 RNA 连接酶 1（ssRNA 连接酶）（高浓度） #M0437M 5,000 units T4 RNA 连接酶 1（ssRNA 连接酶）（高浓度） #M0437M 5,000 units T4 RNA 连接酶 1（ssRNA 连接酶）（高浓度） #M0437M 5,000 units T4 RNA 连接酶 1（ssRNA 连接酶）（高浓度） #M0437M 5,000 units

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相关产品

5´ -三磷酸腺苷（ATP）
 

 通用 miRNA 克隆接头

特性

 连接单链 RNA 和 DNA
 用 5´ -[32P] pCp 进行 RNA 3´ 末端标记
 RNA 和 DNA 分子内及分子间的连接
 合成单链寡脱氧核苷酸
 蛋白质中掺入非天然氨基酸  

概述

催化 3´ →5´ 磷酸二酯键的形成，使核苷酸的 5´ -磷酸末端和 3´ -羟基末端连接，伴随着 ATP 水解为 AMP 和 PPi。作用底物包括单链 RNA、DNA 及二核苷焦磷酸。  

来源

携带 T4 RNA 连接酶 1 基因的 E. coli 菌株。  

反应条件

1X T4 RNA 连接酶反应缓冲液[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，10 mM MgCl2，1 mM DTT]，加入 1 mM ATP，37℃ 温育。热失活：65℃ 15 分钟或煮沸 2 分钟。  

使用注意事项

pCp 的连接需要加入终浓度为10%（v/v）的 DMSO。  

随酶提供试剂

10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
10 mM ATP（NEB #M0204中包含）或 100 mM ATP（NEB #M0437中包含）50% PEG 8000  

质保声明

无单链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase 和磷酸酶污染。  

单位定义

1 单位指 37℃ 条件下，30 分钟内将 1 nmol 的 5´ -[32P] rA16 转化成磷酸盐不溶物所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。 www.jinpanbio.com 或 www.jinpanbio.cn。  

浓度

10,000 或 30,000 units/ml。  

参考文献

  

T4 RNA 连接酶 1（ssRNA 连接酶） #M0204L 5,000 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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T4 RNA 连接酶 1（ssRNA 连接酶）                              收藏

T4 RNA 连接酶 1（ssRNA 连接酶） #M0204L 5,000 units T4 RNA 连接酶 1（ssRNA 连接酶） #M0204L 5,000 units T4 RNA 连接酶 1（ssRNA 连接酶） #M0204L 5,000 units T4 RNA 连接酶 1（ssRNA 连接酶） #M0204L 5,000 units

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#M0204L
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#M0204S
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5´ -三磷酸腺苷（ATP）
通用 miRNA 克隆接头

特性

 连接单链 RNA 和 DNA
 用 5´ -[32P] pCp 进行 RNA 3´ 末端标记
 RNA 和 DNA 分子内及分子间的连接
 合成单链寡脱氧核苷酸
 蛋白质中掺入非天然氨基酸 

概述

催化 3´ →5´ 磷酸二酯键的形成，使核苷酸的 5´ -磷酸末端和 3´ -羟基末端连接，伴随着 ATP 水解为 AMP 和 PPi。作用底物包括单链 RNA、DNA 及二核苷焦磷酸。 

来源

携带 T4 RNA 连接酶 1 基因的 E. coli 菌株。 

反应条件

1X T4 RNA 连接酶反应缓冲液[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，10 mM MgCl2，1 mM DTT]，加入 1 mM ATP，37℃ 温育。热失活：65℃ 15 分钟或煮沸 2 分钟。 

使用注意事项

pCp 的连接需要加入终浓度为10%（v/v）的 DMSO。 

随酶提供试剂

10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
10 mM ATP（NEB #M0204中包含）或 100 mM
 ATP（NEB #M0437中包含）
 50% PEG 8000 

质保声明

无单链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase 和磷酸酶污染。 

单位定义

1 单位指 37℃ 条件下，30 分钟内将 1 nmol 的 5´ -[32P] rA16 转化成磷酸盐不溶物所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。 www.jinpanbio.com 或 www.jinpanbio.cn。 

浓度

10,000 或 30,000 units/ml。 

参考文献

 

T7 DNA 连接酶 #M0318L 750,000 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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T7 DNA 连接酶 #M0318L 750,000 units T7 DNA 连接酶 #M0318L 750,000 units T7 DNA 连接酶 #M0318L 750,000 units T7 DNA 连接酶 #M0318L 750,000 units T7 DNA 连接酶 #M0318L 750,000 units

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#M0318L
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#M0318S
100,000 units
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特性

 仅用于连接粘性末端
 dsDNA 切刻修复 

概述

T7 DNA 连接酶来源于 T7 噬菌体，它是一种 ATP 依赖型双链 DNA 连接酶，该酶可催化双链 DNA 相邻 5´ 磷酸末端和 3´ 羟基基团之间形成磷酸二酯键。T7 DNA 连接酶可以有效地催化粘性末端和切刻的连接。与 T4 和 T3 DNA 连接酶不同，T7 DNA 连接酶不能有效地催化平末端连接。因此，在实验过程中，当平末端和粘性末端同时存在时，仅需粘性末端发生连接，T7 DNA 连接酶是理想的选择。 

来源

重组 E. coli 质粒，含有 T7 DNA 连接酶编码基因。 

反应条件

 1 X T7 DNA 连接酶反应缓冲液

[66 mM Tris-HCl，1 mM ATP，10 mM MgCl2，1 mM DTT，7.5% PEG 6000 (pH 7.6 @ 25℃)]，25℃ 温育。

质保声明

T7 DNA 连接酶经过严格的质量控制检测，以确保最高的纯度和反应效率。详情请联系我们。  

单位定义

1 单位是指在 20 μl 总反应体系中，1 X T7 DNA 连接酶反应缓冲液条件下，25℃ 温育 30 分钟，能使 50% 的 100 ng 经 HindIII 消化的 λDNA 片段连接所需的酶量。 

浓度

3,000,000 units/ml。 

注意事项

ATP 是必需的辅助因子。
当某些实验不能用 PEG 6000 时，可使用 T4 DNA 连接酶缓冲液，但活性会降低 10 倍。切记反应时体系内一定要有终浓度为 1 mM 的 ATP。
65℃ 加热 10 分钟可使 T7 DNA 连接酶失活。如果反应缓冲液中含有 PEG，该酶不能加热失活，否则会抑制后续转化实验。 

参考文献

有关该产品特性和应用的相关文献，请联系我们。  

T3 DNA 连接酶 #M0317L 750,000 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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T3 DNA 连接酶 #M0317L 750,000 units T3 DNA 连接酶 #M0317L 750,000 units T3 DNA 连接酶 #M0317L 750,000 units T3 DNA 连接酶 #M0317L 750,000 units T3 DNA 连接酶 #M0317L 750,000 units

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#M0317L
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#M0317S
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特性

 连接粘性末端或平末端
 高盐耐受力
 dsDNA 切刻修复 

概述

T3 DNA 连接酶来源于 T3 噬菌体，是 ATP 依赖型双链 DNA 连接酶，可以有效催化粘性末端、平齐末端和切刻的连接。加入 PEG 6000 可提高平齐末端连接效率。T3 DNA 连接酶在反应中对 NaCl 的耐受性是 T4 DNA 连接酶的 2 倍，因此，当体外分子生物学实验中需要考虑实验离子浓度下 DNA 连接酶活性时，就多了一个选择。 

来源

重组 E. coli 质粒，含有 T3 DNA 连接酶编码基因。 

反应条件

1X T3 DNA 连接酶反应缓冲液
[66 mM Tris-HCl，1 mM ATP，10 mM MgCl2，1 mM DTT，7.5% PEG 6000（pH 7.6 @ 25℃）]，25℃ 温育。 

质保声明

T3 DNA 连接酶经过严格的质量控制检测，以确保最高的纯度和反应效率。详情请联系我们。 

单位定义

1 单位是指在 20 μl 总反应体系中，1X T3 DNA 连接酶反应缓冲液条件下，25℃ 温育 1 分钟，能使 50% 的 100 ng 经 HindIII 消化的 λDNA 连接所需的酶量。 

浓度

3,000,000 units/ml。 

注意事项

ATP 是必需的辅因子。
当某些实验不能用 PEG 6000 时，可使用 T4 DNA 连接酶缓冲液，但活性会降低 10 倍。切记反应时体系内一定要有终浓度为 1 mM 的 ATP。需要维持高 NaCl 浓度的实验，建议使用不含 PEG 6000 的缓冲液。
65℃ 加热 10 分钟可使 T3 DNA 连接酶失活。如果反应缓冲液中含有 PEG，该酶不能加热失活，否则会抑制后续转化实验。 

参考文献

有关该产品特性和应用的相关文献，请联系我们。  

E. coli DNA 连接酶 #M0205L 1,000 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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E. coli DNA 连接酶 #M0205L 1,000 units E. coli DNA 连接酶 #M0205L 1,000 units E. coli DNA 连接酶 #M0205L 1,000 units E. coli DNA 连接酶 #M0205L 1,000 units

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#M0205S
200 units
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特性

 dsDNA 切刻修复
 Okayama 和 Berg cDNA 克隆 

概述

催化双链 DNA 粘性末端的 5´ -磷酸和 3´ –羟基形成磷酸二酯键。不能有效连接平末端底物。E. coli DNA 连接酶以 NAD 为辅因子。在 4-37℃范围内，E. coli DNA 连接酶均有活性。

来源

纯化自重组 E. coli 菌株，该菌株携带 E. coli DNA 连接酶的编码基因。 

反应条件

1X E. coli DNA 连接酶缓冲液
[30 mM Tris-HCl（pH 8.0 @ 25℃），4 mM MgCl2，1 mM DTT，26 μM NAD+，50 μg/ml BSA]，最适反应温度为16℃。 

热失活

65℃ 加热 20 分钟。 

质保声明

E. coli DNA 连接酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。  

单位定义

1 单位指在 20 μl 反应体系中，在 16℃ 反应条件下，30 分钟能使 50% 的经 HindIII 消化的 λDNA 片段 [5´ 端浓度为 0.12 μM（300 μg/ml）] 连接所需的酶量。单位活性检测条件请联系我们。 www.jinpanbio.cn 或 www.jinpanbio.com 

浓度

10,000 units/ml。 

注意事项

本酶以 NAD+（烟酰胺腺嘌呤二核苷酸）作为辅因子。
该酶对平末端片段的连接效率极低，平末端的连接请用平末端/TA 连接酶预混液（NEB #M0367）或快速连接试剂盒（NEB #M2200）。 

参考文献

关于该酶特性和产品应用的参考文献，请联系我们。  

SplintR® 连接酶 #M0375L 6,250 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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SplintR® 连接酶                              收藏

SplintR® 连接酶 #M0375L 6,250 units SplintR® 连接酶 #M0375L 6,250 units SplintR® 连接酶 #M0375L 6,250 units

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#M0375L
6,250 units
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#M0375S
1,250 units
1,329.00
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特性

 连接被互补 RNA 固定的相邻的单链 DNA
 鉴定 miRNAs 和 mRNAs,包括 SNPs  

概述

SplintR 连接酶也称为 PBCV-1 DNA 连接酶或 Chorella 病毒 DNA 连接酶，它能够高效催化相邻的 DNA 核苷酸的连接，这个连接过程需要一条互补的 RNA 在两条 DNA 单链间起“夹板”或“桥梁”的固定作用。这种以前没有报道过的活性可能推动一些创新性 miRNAs 和 mRNAs,包括 SNPs 的分析方法。在二代测序和分子诊断等众多领域中，SplintR 是富集目的基因的理想选择。它具有稳定的生物活性，对 RNA 介导固定的 DNA 底物亲和性强（米氏常数 Km = 1 nM），能够在复杂的混合物中检测到亚纳摩尔级的特定 RNA。因此，在 RNA 检测技术中，SplintR 连接酶不失为最佳选择用酶。  

来源

来自重组的 E. coli 菌株，其携带编码 PBCV-1 DNA 连接酶的基因。 

反应条件

1X SplintR 连接酶反应缓冲液，25℃ 温育，最佳连接温度是 16℃。热失活：65℃ 温育 20分钟。  

质保声明

SplintR 连接酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。   

单位定义（粘性末端活性单位）

1 单位指 20 μl 反应体系中，1X SplintR 连接酶反应缓冲液，16℃ 条件下，15 分钟内能使 2 pmol（完成 50%）三重 FAM 标记的 DNA:RNA 杂交底物连接所需的酶量。单位活性检测条件请联系我们。   

浓度

25,000 units/ml。 

参考文献

关于该酶特性和产品应用的参考文献，请联系我们。