SplintR® 连接酶 #M0375L 6,250 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

发表于2026年4月7日由上海金畔生物科技有限公司

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 连接酶

SplintR^® 连接酶收藏

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#M0375L

6,250 units

5,989.00

有

无

有

#M0375S

1,250 units

1,329.00

有

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特性

 连接被互补 RNA 固定的相邻的单链 DNA
 鉴定 miRNAs 和 mRNAs，包括 SNPs

概述

SplintR 连接酶也称为 PBCV-1 DNA 连接酶或 Chorella 病毒 DNA 连接酶，它能够高效催化相邻的 DNA 核苷酸的连接，这个连接过程需要一条互补的 RNA 在两条 DNA 单链间起“夹板”或“桥梁”的固定作用。这种以前没有报道过的活性可能推动一些创新性 miRNAs 和 mRNAs，包括 SNPs 的分析方法。在二代测序和分子诊断等众多领域中，SplintR 是富集目的基因的理想选择。它具有稳定的生物活性，对 RNA 介导固定的 DNA 底物亲和性强（米氏常数 Km = 1 nM），能够在复杂的混合物中检测到亚纳摩尔级的特定 RNA。因此，在 RNA 检测技术中，SplintR 连接酶不失为最佳选择用酶。

来源

来自重组的 E. coli 菌株，其携带编码 PBCV-1 DNA 连接酶的基因。

反应条件

1X SplintR 连接酶反应缓冲液，25℃ 温育，最佳连接温度是 16℃。

热失活：65℃ 温育 20分钟。

质保声明

SplintR 连接酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。

单位定义（粘性末端活性单位）

1 单位指 20 μl 反应体系中，1X SplintR 连接酶反应缓冲液，25℃ 条件下，15 分钟内能使 2 pmol（完成 50%）三重 FAM 标记的 DNA:RNA 杂交底物连接所需的酶量。单位活性检测条件请联系我们。

浓度

25,000 units/ml。

参考文献

关于该酶特性和产品应用的参考文献，请联系我们。

StickTogether™ DNA 连接酶缓冲液 #B0535S 2ml-NEB酶试剂 New England Biolabs

发表于2026年3月28日由上海金畔生物科技有限公司

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产品资料 – Buffers – Buffers

StickTogether™ DNA 连接酶缓冲液收藏

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#B0535S

2ml

669.00

无

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特性

·StickTogether™ 缓冲液随 T3（NEB#M0317）、T7（NEB#M0318）、Hi-T4™（NEB#M2622）和 Salt- T4™（NEB#M0467）DNA 连接酶提供

·这些 DNA 连接酶在 1X 缓冲液浓度下活性最佳

·提供 2X 储存浓度缓冲液

·包装内分装为两管

储存温度

-20℃

1X Buffer 组分

66 mM Tris-HCl

10 mM MgCl2

1 mM ATP

1 mM DTT

7.5% Polyethylene glycol（PEG 6000）

pH 7.6@25°C

Taq DNA 连接酶 #M0208L 10,000 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

发表于2026年3月26日由上海金畔生物科技有限公司

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 连接酶

Taq DNA 连接酶收藏

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#M0208L

10,000 units

3,889.00

有

无

#M0208S

2,000 units

969.00

有

#M0208V

1,000 units

539.00

有

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特性

 耐热性好

 dsDNA 切刻修复
 用于 Gibson 组装方法

 可用连接酶链式反应和连接酶检测反应对等位基因进行特异性检测

概述

相邻 DNA 链的 5´-磷酸末端和 3´-羟基末端形成磷酸二酯键。该连接反应只有当两条寡核苷酸链与互补靶 DNA 完全配对，并且两条寡核苷酸链之间没有空隙的条件下才可发生。因此，可以用它来检测单碱基替换。Taq DNA 连接酶以 NAD 为辅因子。在 37-75℃ 范围内，Taq DNA 连接酶均有活性。

来源

纯化自重组 E. coli 菌株，含有自 Thermus aquaticus HB8 中克隆的连接酶基因。

反应条件

1X Taq DNA 连接酶反应缓冲液

[20 mM Tris-HCl（pH 7.6 @ 25℃），25 mM KAc，10 mM Mg(Ac)₂，10 mM DTT，1 mM NAD 和 0.1% Triton X-100]，45℃ 温育。

该酶需 NAD⁺ 作辅因子，在 10X Taq DNA 连接酶缓冲液中已添加 NAD⁺；为了延长 NAD⁺的半衰期，缓冲液应于 -70℃ 贮存。

质保声明

Taq DNA 连接酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。

单位定义（粘性末端活性单位）

1 单位指 50 μl 反应体系中，45℃ 条件下，15 分钟内能使 50% 的 1 μg 经 BstEII 消化的 λDNA 片段（12 bp 粘性末端）发生连接所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。

浓度

40,000 units/ml。

注意事项

Taq DNA 连接酶可以有效连接 12 bp 的互补片段，但却无法连接 4 bp 的互补片段（典型限制酶消化产物）。

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献，请联系我们。

ElectroLigase® 电转连接酶 #M0369S 50 次反应-NEB酶试剂 New England Biolabs

发表于2026年3月25日由上海金畔生物科技有限公司

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ElectroLigase^® 电转连接酶收藏

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#M0369S

50 次反应

1,599.00

有

无

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特性

 电转化的最佳连接酶

 载体构建

 接头连接

 片段组装

 文库构建
 TA 克隆

概述

电转连接酶由 T4 DNA 连接酶和经过优化的即用型 2X 缓冲液组成，其缓冲液内含专属连接增强剂，不含 PEG。该组合专门用于促进各种 DNA 末端（平末端、粘性末端、TA 末端）的高效连接。无需脱盐和纯化，电转连接酶可直接用于电转化的细胞。因为其缓冲液在 -20℃ 储存时为液体状态，所以使用时无需解冻，从而简化了反应起始步骤。通过优化酶和缓冲液的比例，室温下即可快速连接所有末端类型的 DNA。即使当 DNA 量少且浓度低时仍可进行亚克隆连接，从而节省了用户宝贵的 DNA 样品。此外，无需稀释和纯化，反应液可直接转化多种电转感受态大肠杆菌。

来源

纯化自重组 E. coli 菌株，含有编码 T4 DNA 连接酶的基因。

反应条件

11 μl 反应体系，加入 1X 电转连接酶反应缓冲液、DNA 底物和 1 μl 电转连接酶，25℃ 温育 30 分钟。

质保声明

电转连接酶经过严格的质量控制检测，以确保最高的纯度和反应效率。详情请联系我们。

注意事项

该产品在 -20℃ 储存时为液体状态。

T4 DNA 连接酶 #M0202L 100,000 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

发表于2026年3月25日由上海金畔生物科技有限公司

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#M0202L

100,000 units

3,189.00

有

#M0202M

100,000 units (高浓度 5X)

3,189.00

有

#M0202S

20,000 units

809.00

有

#M0202T

20,000 units (高浓度 5X)

809.00

有

#M0202V

10,000 units

449.00

有

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特性

· 高效连接粘性末端和平末端

· T/A 克隆

·dsDNA 切刻修复

·构建高丰度克隆文库

·RNA 和 DNA 的连接

概述

该酶催化双链 DNA 或 RNA 上相邻的 5´ -磷酸末端和 3´ -羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平齐末端或粘性末端之间的连接，还可以修复双链 DNA、RNA 或 DNA/RNA 杂交双链中的单链切刻。

来源

纯化自 E. coli C600 pcl857 pPLc28 lig8。

反应条件

1X T4 DNA 连接酶反应缓冲液
[50 mM Tris-HCl（pH 7.5 @ 25℃），10 mM MgCl₂，10 mM DTT，1 mM ATP] 推荐 DNA 5´ 末端浓度为 0.1-1.0 μM，16℃ 温育。

热失活

65℃ 加热 10 分钟。

质保声明

T4 DNA 连接酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。www.jinpanbio.cn 或 www.jinpanbio.com。

单位定义（粘性末端活性单位）

1 单位指在 20 μl 1X T4 DNA 连接酶反应缓冲液中，16℃ 反应条件下，30 分钟能使 50% 的经 HindIII 消化的λDNA 片段 [5´ 端浓度为 0.12 μM（300μg/ml）] 连接所需的酶量。

浓度

400,000 units/ml 和 2,000,000 units/ml。

注意事项

与 E. coli DNA 连接酶需要 NAD⁺作辅因子不同，T4 DNA 连接酶的辅因子是 ATP。若需稀释 T4 DNA 连接酶，推荐使用 50% 甘油贮存缓冲液（稀释缓冲液 A，NEB #B8001）稀释，-20℃ 保存。如稀释后马上使用，也可用 1X T4 DNA 连接酶反应缓冲液稀释。
只要在反应体系中补加 1 mM ATP，连接反应就可以在 NEB 提供的四种限制性内切酶缓冲液或在 T4 DNA 多聚核苷酸激酶反应缓冲液中进行。

参考文献

该产品的特性和应用的参考文献，请联系我们。 www.jinpanbio.cn 或 www.jinpanbio.com。

T4 DNA 连接酶 #M0202L 100,000 units

UBE3A泛素连接酶E3重组单克隆抗体

发表于2026年3月21日由上海金畔生物科技有限公司

UBE3A泛素连接酶E3重组单克隆抗体

ubiquitination是什么？

Ubiquitin (泛素) 于1974年初次于小牛胸腺纯化而得，是个仅含有76个氨基酸、分子量仅为8.6 kDa的小蛋白质。如同其名，泛素广泛存在于真核生物的绝大部分组织中，且具有跨物种高度保留的序列。

Ubiquitination (泛素化) 属于翻译后修饰的一种，指的正是利用「激活、结合、连接」的级联反应将泛素加到底物蛋白上的过程 (见下图) ：泛素激活酶E1首先将泛素与ATP结合形成泛素线苷酸中间复合产物，再利用水解ATP所得的能量将被激活的泛素以硫酯键转移至E1上。接着，泛素会再一次透过硫酯化变位转移到泛素结合酶E2上。最后，由泛素连接酶E3将泛素连接到底物蛋白上标定。除了基本的E1-E2-E3级联标定过程之外，也能利用泛素链延长酶E4将事先做好的泛素链移转到特定底物蛋白上 (ref 1-3)。Ciechanover、Hershko与Rose三人于80年代以泛素化介导蛋白质降解为主题的研究，获得了2004年诺贝尔化学奖的殊荣 (ref 4)。

UBE3A泛素连接酶E3重组单克隆抗体

ubiquitination有什么作用？

泛素化的修饰型态可分为单泛素化或是多聚泛素化。特定赖氨酸(K48与K29)的多聚泛素化会导致底物蛋白的蛋白酶体介导降解。而其余位置的多聚泛素化(K63、K11、K6与M1)以及单泛素化则是会影响底物蛋白的活性、胞内位置，或者与其他蛋白之间的相互作用。透过对不同底物蛋白的调控，泛素化参与了大量且多样的细胞生理作用，如：胞吞运输、免疫反应与发炎、DNA转录与修复、细胞周期与分裂、细胞凋亡、抗原处理、神经网络型态生成、多能性维护、压力调节等等，甚至也调控了病毒感染的过程 (ref 1-3)。

UBE3A又有什么特别的？

UBE3A属于泛素连接酶E3的一种(ref 3)。做为铭印基因之一，UBE3A可藉由母性表达存在于脑部，而在其他组织则以双等位基因形式影响性状。若是由母方得到具有缺失的UBE3A基因，将会导致天使人症候群(Angelman syndrome，又称安格曼症候群)，其具体症状包括严重的运动能力缺陷、智力发育迟缓、共济失调、肌肉张力减退、癫痫、失语，以及带有特殊面相特征等(ref 5)。UBE3A也被称为是E6AP(E6相关蛋白质)，能够与HPV type 16或18的E6 蛋白一同作用，使得肿瘤抑制蛋白p53被降解，而导致肿瘤的恶化(ref 6)。除了泛素连接酶E3的生理功能外，UBE3A还能够成为为类固醇荷尔蒙受体的共同转录激活因子，影响细胞凋亡或分裂等生理现象(ref 7)。UBE3A的多重生理功能以及在发育缺陷与肿瘤等病理现象中所扮演的角色，使其成为基础科学与临床研究中关注的目标。

为了支持泛素化和UBE3A的相关研究，GeneTex精心推出了经过敲除验证的重组兔单株UBE3A antibody [HL1660](GTX637258)。欲了解相关产品，请参考以下重点商品、相关文宣品或咨询我们的代理商上海金畔生物&造访我们的网站www.genetex.com以获取更多信息。

重点产品

UBE3A泛素连接酶E3重组单克隆抗体

UBE3A antibody [HL1660] (GTX637258)

重点产品列表

目录号	产品名	应用
GTX101092	UBE3A antibody	ICC/IF, IHC-P
GTX637258	UBE3A antibody [HL1660]	WB
GTX128826	Ubiquitin antibody	WB
GTX630148	Ubiquitin antibody [GT7811]	WB, IHC-P
GTX132686	Human Papilloma virus type 16 E6 antibody	WB
GTX637228	Human Papilloma virus type 16 E7 antibody [HL1647]	WB, ICC/IF
GTX132687	Human Papilloma virus type 18 E6 antibody	WB
GTX634337	Human Papilloma virus type 18 E7 antibody [GT881]	WB, ICC/IF
GTX70214	p53 antibody [DO1]	WB, ICC/IF, IHC-P, IHC-Fr, FACS, IP, ELISA
GTX100629	p53 antibody [N1], N-term	WB, ICC/IF, IHC-P, IP

查看相关内容

1. 单页: 细胞自噬

参考文献

1. Cell Res. 2016 Apr;26(4):399-422. doi: 10.1038/cr.2016.39. Epub 2016 Mar 25.

2. Front Mol Biosci. 2020 Feb 27;7:21. doi: 10.3389/fmolb.2020.00021. eCollection 2020.

3. Mol Biomed. 2021 Jul 30;2(1):23. doi: 10.1186/s43556-021-00043-2.

4. www.nobelprize.org

5. Eur J Hum Genet. 2010 Nov;18(11):1228-35. doi: 10.1038/ejhg.2010.95. Epub 2010 Jun 23.

6. PLoS Pathog. 2020 Jan 23;16(1):e1008295. doi: 10.1371/journal.ppat.1008295. eCollection 2020 Jan.

7. Nucl Recept Signal. 2008 Apr 18;6:e006. doi: 10.1621/nrs.06006.

更多详情请咨询Genetex代理商上海金畔生物科技有限公司

T4 RNA 连接酶 2，截短型 KQ #M0373L 10,000 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

发表于2026年3月19日由上海金畔生物科技有限公司

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

T4 RNA 连接酶 2，截短型 KQ 收藏

货号

规格

价格(元)

北京库存

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苏州库存

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#M0373L

10,000 units

3,619.00

有

无

有

无

有

无

#M0373S

2,000 units

909.00

有

无

有

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特性

 将预腺苷化的 DNA 或 RNA 序列标签连接到任何 RNA 3´ 末端

 将腺苷化单链引物连接至小 RNA 上，用于 cDNA 文库构建
 将腺苷化单链引物连接至 RNA 上，用于链特异性 cDNA 文库构建

概述

T4 RNA 连接酶 2，截短型 KQ（T4 Rnl2tr KQ）能特异性将 5´ 末端预腺苷化的 DNA 或 RNA 连接到RNA 的 3´ OH 末端。反应无需 ATP，但需预腺苷化接头。

T4 Rnl2tr KQ 是 T4 RNA 连接酶 2，截短型（NEB#M0242）的双点突变体。 K227 的突变降低了赖氨酰腺苷化。由于降低了 T4 Rnl2tr 从接头将腺苷基团转移到 RNA 5´ 磷酸基的活性， K227Q 可以减少 T4 Rnl2tr 非特异性的连接（串联体和环）。在 T4 Rnl2tr K227Q 中进一步突变 R55K，提高了酶的连接活性，使其与野生型 T4 Rnl2tr 连接活性水平一致。
因为不再使用 ATP，而改用预腺苷化接头，同时降低赖氨酰腺苷化酶的活性，所以连接反应的背景可以降至最低。该酶已用于二代测序 Small RNA的文库构建中，优化了接头的连接过程。

来源

重组 E. coli 菌株，携带有 MBP 融合表达的质粒，该质粒克隆有含编码 T4 RNA 连接酶 2 的前249 个氨基酸序列。 T4 Rnl2tr K227Q 是将 227 位的赖氨酸突变为谷氨酸。 T4 Rnl2tr KQ 分别在 55 和位置进行了突变，精氨酸突变为赖氨酸、赖氨酸突变为谷氨酰胺。

反应条件

1X T4 RNA 连接酶反应缓冲液[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，10 mM MgCl₂，1 mM DTT]，25℃ 温育。
热失活：65℃ 20 分钟。

随酶提供的试剂

10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
50% PEG 8000

质保声明

无单链和双链 DNA 核酸内切酶、外切酶、 RNase 以及磷酸酶的污染。

单位定义

200 单位指 10 μl 反应体系中，25℃ 条件下，1 小时能将 80% 的 31-mer RNA 连接到预腺苷化 17-mer DNA 末端 [miRNA 通用克隆接头（NEB #S1315）] 所需的酶量。单位活性检测条件请联系我们。 www.jinpanbio.com 或 www.jinpanbio.cn。

浓度

200,000 units/ml。

参考文献

9°N™ DNA 连接酶 #M0238S 2,500 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

发表于2026年3月12日由上海金畔生物科技有限公司

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9°N™ DNA 连接酶收藏

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价格(元)

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#M0238S

2,500 units

999.00

无

有

无

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特性

 可在高温条件下，连接 DNA 链上的切刻位点

 耐热性好

 可用连接酶检测反应和连接酶链式反应对等位基因进行特异性检测

概述

9°N™ DNA 连接酶耐热性好，能够催化磷酸二酯键的形成，使与同一互补靶 DNA 链杂交的两条相邻寡核苷酸链的 5´ -磷酸末端和 3´ -羟基末端通过磷酸二酯键相连。该连接反应只有当两条寡核苷酸链与互补靶 DNA 完全配对，并且两条寡核苷酸链之间没有空隙的条件下才可发生。9°N™DNA 连接酶以 ATP 为辅因子。该酶在 45-70℃ 范围内均有活性。

来源

纯化自重组 E. coli 菌株，其携带有从极度耐热的海底超嗜热古菌（Thermococcus sp.）9°N 菌株中克隆的连接酶基因。

反应条件

1X 9°N DNA 连接酶反应缓冲液

[10 mM Tris-HCl，600 μM ATP，2.5 mM MgCl₂，2.5 mM DTT，0.1% Triton X-100（pH 7.5 @ 25℃）]，45℃ 温育。

质保声明

9°N DNA 连接酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。 www.jinpanbio.cn 或www.jinpanbio.com。

单位定义（粘性末端活性单位）

1 单位指 50 μl 反应体系中，45℃ 条件下，15 分钟内能使 50% 的 1 μg 经 BstEII 消化的 λDNA 片段（12 bp 粘性末端）发生连接所需要的酶量。粘性末端活性单位相当于切刻封闭单位。单位活性检测条件请联系我们。

浓度

40,000 units/ml。

注意事项

该酶可以有效连接 12 bp 的互补片段，但却无法连接 4 bp 的互补片段（典型限制酶消化产物）。

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献，请联系我们。

Taq 高保真 DNA 连接酶 #M0647S 50 次反应-NEB酶试剂 New England Biolabs

发表于2026年2月9日由上海金畔生物科技有限公司

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Taq 高保真 DNA 连接酶收藏

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价格(元)

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#M0647S

50 次反应

2,039.00

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无

有

无

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特性

 高保真，耐热性好

 dsDNA 切刻修复

 可用连接酶链式反应（LCR）和连接酶检测反应（LDR）对等位基因进行特异性检测

 锁式探针连接

为方便计算连接温度，请联系我们。 Ligasecalc.neb.com 使用 Thermostable Ligase Reaction Temperature Calculator在线工具。

概述

Taq 高保真 DNA 连接酶含热稳定 DNA 连接酶和专属试剂，具有无以伦比的保真性，能高保真且高效地连接 DNA 切刻。在优化的缓冲液体系中，该酶将与靶 DNA 互补的相邻 5´-磷酸基和 3´-羟基的切刻位点以磷酸二酯键进行连接，极大程度降低了错配率。改良的配方使得该产品可以更好的识别连接反应供体和受体，从而可以精确检测 SNPs 和其他等位基因变异。Taq 高保真 DNA 连接酶在 37–75℃ 温度范围内都有活性。

来源

纯化自重组的 E. coli 菌株，携带有克隆自嗜热菌的连接酶基因。

反应条件

1X Taq 高保真 DNA 连接酶反应缓冲液

[20 mM Tris-HCl，150 mM KCl，10 mM MgCl2，10mM DTT，1 mM NAD 和 0.1% Triton X-100（pH 8.5 @25℃）]，25℃ 温育。

质保声明

Taq 高保真 DNA 连接酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文

献，请联系我们。

Hi-T4™ 耐热 DNA 连接酶 #M2622L 100,000 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

发表于2026年1月19日由上海金畔生物科技有限公司

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 连接酶

Hi-T4™ 耐热 DNA 连接酶收藏

货号

规格

价格(元)

北京库存

上海库存

广州库存

成都库存

苏州库存

武汉库存

#M2622L

100,000 units

3,429.00

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无

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#M2622S

20,000 units

859.00

有

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特性

Hi-T4 耐热 DNA 连接酶是 T4 DNA 连接酶经基因工程改造过的酶，与 T4 DNA 连接酶相比，改善了热稳定性
不仅能够连接平末端和粘性末端，还能修复双链 DNA 和 DNA/RNA 杂交链的单链切刻
随酶提供 T4 DNA 连接酶缓冲液和 StickTogether™ DNA 连接酶缓冲液

概述

Hi-T4™ 耐热 DNA 连接酶是 T4 DNA 连接酶的耐热变体，该酶催化双链 DNA 或 RNA 上相邻的 5´ – 磷酸末端和 3´ – 羟基末端形成磷酸二酯键，经过改造其作用温度高于野生型 T4 DNA 连接酶。Hi-T4 耐热 DNA 连接酶可在温度高达 50ºC 时进行平末端和粘性末端的连接以及修复双链 DNA 、RNA 或
DNA / RNA 杂交链的单链切刻。

图1：Hi-T4 耐热 DNA 连接酶比普通 T4 DNA 连接酶热稳定性更好

45℃ 温度下，将 400 单位 T4 DNA 连接酶（NEB #M0202）或 Hi-T4 耐热 DNA
连接酶（NEB #M2622）与 1X T4 DNA 连接酶缓冲液，在无底物情况下预加热
如图所示时间后，所剩酶活进行如下检测：添加 0.12 µM 荧光标记的 HindIII
粘性末端片段 37℃ 温育 15 分钟，连接产物用毛细管电泳检测。
T4 DNA 连接酶在 45℃ 条件下，逐渐失去活性，而 Hi-T4 耐热 DNA 连接酶
即使在 45℃ 温育 72小时，对粘性末端底物仍有 100% 的活性。

图2：Hi-T4 耐热 DNA 连接酶比普通 T4 DNA 连接酶更耐热循环

在 1X T4 DNA连接酶缓冲液中，分别用 1000 单位的 T4 DNA 连接酶（NEB#
M0202）或 Hi-T4 耐热 DNA 连接酶（NEB# M2622）与 1 µg pBR322 进行循环
温育。循环温度设置为：42℃（A）或 50℃（B） 5 分钟，16℃ 5 分钟，
循环数如图显示：0、15、30、45、60。所剩酶活检测如下：25℃ 条件下，连
接荧光标记的 HindIII 粘性末端片段 10 分钟，连接产物用毛细管电泳检测。
相比于循环开始前的所剩酶活见图。
A. T4 DNA 连接酶在 16℃ 和 42℃ 循环温育时逐渐失去活性（金线，A），然
而 Hi-T4 耐热 DNA连接酶在 16℃ 和 42℃ 循环温育 60 次后仍保持活性
（橙色线，A）。
B. T4 DNA 连接酶在 16℃ 和 50℃ 循环温育 15 次后（金线，B）就完全失
活，然而 Hi-T4 耐热 DNA 连接酶在 16℃ 和 50℃ 循环温育 60 次（橙色
线，B）后仍保留 60% 左右的活性。

来源

重组表达纯化。

反应条件

1X T4 DNA 连接酶反应缓冲液（50 mM Tris-HCl，10 mM MgCl₂，10 mM DTT，1 mM ATP，（pH 7.5 @ 25℃）），25℃ 温育。

热失活

65℃ 加热 10 分钟。

质保声明

Hi-T4 耐热 DNA 连接酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。

单位定义（粘性末端活性单位）

1 单位指在 20 µl 反应体系中，25℃ 反应条件下，30 分钟能使 50% 的 6 µg经 HindIII 消化的λDNA 连接所需的酶量。

浓度

400,000 units/ml。

注意事项

1、与 E. coli DNA 连接酶需要 NAD+ 作辅因子不同，Hi-T4 耐热 DNA 连接酶的辅因子是 ATP。

2、若需稀释 Hi-T4 耐热 DNA 连接酶，推荐使用 50% 甘油贮存缓冲液稀释（稀释缓冲液A，

NEB #B8001S），-20℃ 保存。如稀释后马上使用，也可用 1X T4 DNA 连接酶反应缓冲液稀释。

3、连接温度

连接粘性末端（1 x T4 DNA 连接酶缓冲液）：在 20 µl 反应体系中加入 1 µl Hi-T4 DNA 连接酶，25 – 50ºC 温育 10 分钟。连接平末端或单碱基突出末端（1 x StickTogether DNA 连接酶缓冲液）：在 20 µl 反应体系中加入 1 µl Hi-T4 耐热 DNA 连接酶，25 – 50ºC 温育 10 分钟。不要用加热来终止反应，因为

StickTogether DNA连接酶缓冲液里的 PEG 受热会抑制转化。

参考文献

该产品的特性和应用的参考文献，请联系我们。

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