模式识别受体的配体筛选服务

模式识别受体的配体筛选服务

在药物研发领域中靶向Toll样受体以及其它模式识别受体的研究越来越吸引人们的注意力。作为一个在天然免疫研究领域中的公认的业界典范,InvivoGen公司将为客户提供高质量免疫调节复合物的筛选工作,从而协助您顺利完成药物的研发工作。

 

▲ 筛选参数灵活选择
▲ 高性价比
▲ 操作严谨,数据可靠

 

免疫调节复合物的筛选服务
在过去的几年,InvivoGen公司开发了一系列在细胞水平检测激活或抑制免疫系统的复合物,这些复合物通过活化模式识别受体,特别是TLRs,NOD1/2和RIG-1/MDA-5等,来发挥功能。这些灵敏的细胞水平实验通过采用NF-kB诱导的SEAP(分泌型碱性磷酸酶)或IRF(干扰素调节因子)诱导的sLUC(分泌型荧光素酶)作为报告基因来进行监测。细胞接受外界刺激后,NF-kB或IRF信号通路的活化通过特定检测试剂来监测进而提供快速准确的结果。
筛选服务
我们提供两种服务选择,包括复合物的初步检测和浓度梯度分析,它们可依次也可分开进行。
·复合物的初步检测(第一阶段):一系列模式识别受体的单一剂量分析。
只进行单一浓度的筛选工作,一般选取原始复合物或客户自行提供的样本按照通用的1:10比例进行稀释。
·复合物不同剂量测试分析(第二阶段):选取复合物样本的三种不同浓度,通常为1:10、1:100和1:1000稀释比例,来进行复合物激活PRR的活性分析,可根据客户要求进行定制。

 模式识别受体的配体筛选服务

模式识别受体信号通路的简明示意图

 

▲ TLR配体的筛选
样品进行人源或者鼠源TLR2,3,4,5,7,8,9的激动剂或拮抗剂功能分析。
▲ NOD1/2配体的筛选
样品进行人源或者鼠源NOD1和NOD2的功能分析。
▲ RIG-1/MDA-5配体的筛选
样品进行人源或者鼠源RIG-1/MDA-5的功能分析。
▲ Dectin-1和Mincle配体的筛选
关于C型凝集素受体Dectin-1和Mincle配体的分析试剂目前正在研发后期。

 

 

复合物的初步检测案例
样品溶液按照1:10稀释后加入HEK-Blue TLR(人源TLR2,3,4,5,7,8,9)和HEK-Blue NOD(人源NOD1和NOD2)细胞进行刺激,同时采取一系列阳性对照:包括100ng/ml Pam3CSK4(TLR2),1mg/ml的poly (I:C)(TLR3),100ng/ml的LPS-EK(TLR4),100ng/ml FLA-ST UP(TLR5),10mg/ml R848(TLR7/8),10mg/ml ODN 2006(TLR9),10mg/ml C12-iE-DAP(NOD1)以及10mg/ml L18-MDP(NOD2)。共同孵育24小时后,通过QUANTI-Blue试剂检测HEK-Blue细胞培养上清中碱性磷酸酶SEAP的水平来分析TLR诱导的NF-kB活化情况。
InvivoGen将会提供一份电子版和一份纸质版的详细分析报告。所有操作步骤都依照严格的流程来进行,并对实验结果进行保密。

产品名称 货号
初步检测 tlr1-test1
剂量检测 tlr1-test2

 

 

 

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上海金畔生物科技有限公司

离子转移谷氨酸能配体化合物库化合物库-wako富士胶片和光

离子转移谷氨酸能配体化合物库化合物库-wako富士胶片和光

供货周期 一个月 应用领域 生物产业

SCREEN-WELL® 离子转移谷氨酸能配体化合物库
◆原理
SCREEN-WELL® 化合物库系列产品提供了简单,方便的方法进行化合物筛选。每个化合物库包括: 某一类化合物归为一个化合物库,包括抑制剂,激动剂或者诱导剂。 每一个化合物库提供相关文件,介绍化合物的活性,在板上的位置,物理信息还有一份结构数据(SD)文件。可单独大量提供某种化合物。

离子转移谷氨酸能配体化合物库离子转移谷氨酸能配体化合物库化合物库-wako富士胶片和光

 

 

◆原理

SCREEN-WELL® 化合物库系列产品提供了简单,方便的方法进行化合物筛选。每个化合物库包括:  某一类化合物归为一个化合物库,包括抑制剂,激动剂或者诱导剂。 每一个化合物库提供相关文件,介绍化合物的活性,在板上的位置,物理信息还有一份结构数据(SD)文件。可单独大量提供某种化合物。

 

◆优点特色

●   广泛的生产线:超过2500种小分子化合物,包括天然产物,酶抑制剂,受体的配体,药物,脂类&脂肪酸*的化合物库,包括:FDA认证化合物库、天然化合物库、化学基因组学和信号通路相关化合物等。

离子转移谷氨酸能配体化合物库化合物库-wako富士胶片和光

●   颖性,化学物库是有相关的小分子组成

●   简单低成本, 化合物全都溶在相应溶剂中、无需额外溶解步骤,即可进行筛选。

   包含无毒对照品,大量毒性明确且毒性不同的化合物

  96孔板包装,溶于DMSO中,即可进行筛选

    

◆案例应用 

包含60种配体,包括内源性神经递质、激动剂、拮抗剂和商业化的药物。该化合物库非常适合于筛选或者识别GPCR、目标验证、第二轮筛选、确定新鉴定方法和其他药理学运用。组胺能和黑色素配体板是更大规格的神经递质化合物库(BML-2810,包括含有680种枢神经系统受体配体)的组成成分之一。

 

运用:高通量筛选

保存温度:-80

 

◆产品列表 

 产品编号  产品名称  包装
 BML-2817-0500 SCREEN-WELL® 离子转移谷氨酸能配体化合物库  1 Library
 BML-2817-0100 SCREEN-WELL® 离子转移谷氨酸能配体化合物库  1 Library

 

离子转移谷氨酸能配体化合物库

Toll样受体配体之炎症小体诱导剂

Toll样受体配体之炎症小体诱导剂

炎症小体是一个多蛋白复合物,通常由NLR家族的成员之一,如NLRP3、NLRC4,与接头蛋白ASC(包含CARD结构域的凋亡相关斑点样蛋白),以及Caspase-1前体蛋白这三种分子所组成。天然免疫细胞感受到细胞浆中的病原相关模式分子(PAMP)或危险相关模式分子(DAMP)后,在其细胞浆内开始组装炎症小体,进而促进炎症因子IL-1和IL-18的释放,引起快速的炎症相关细胞死亡,即pyrotosis。

研究最为广泛的是NLRP3炎症小体,它可以被很多刺激物诱导形成,包括危险信号(如ATP)、结晶质(如MSU)和微生物毒素(如尼日利亚菌素,即nigericin)。NLRC4(包含Caspase活化及募集结构域的NLR4)/NAIP(神经凋亡抑制性蛋白)炎症小体是由Salmonella typhimurium(鼠伤寒沙门氏杆菌)、Pseudomonas aeruginosa(绿浓杆菌)等细菌的鞭毛蛋白释放到细胞质中所引起的。NRLP1炎症小体则是由Bacillus anthracis lethal toxin(炭疽致死毒素)、Toxoplasma gondii(刚地弓形虫)、muramyl dipeptide(胞壁酰双肽)和宿主胞内ATP耗盡等诸多刺激诱导产生的,进而促进Caspase-1的生成。

炎症小体诱导剂相关产品:

PRODUCT

ORIGIN/DESCRIPTION

GRADE*

WORKING

CONCENTRATION

QTY

CATALOG

CODE

INFLAMMASOME INDUCERS

AIM2 Inflammasome Agonists

Poly(dA:dT) Naked

Poly(dA-dT)poly(dT-dA)

TLR2 -/ TLR4 –

10 ng/ml – 1 µg/ml

200 µg

1 mg

tlrl-patn

tlrl-patn-1

Poly(dA:dT)/LyoVec

Poly(dA-dT)poly(dT-dA)/LyoVec complexes

TLR2 -/ TLR4 –

10 ng – 10 µg/ml

100 µg

tlrl-patc

Poly(dA:dT)/Rhodamine

Rhodamine labeled poly(dA-dT)poly(dT-dA)

TLR2 -/ TLR4 –

100 ng – 10 µg/ml

10 µg

tlrl-patrh

 

PRR Ligands

 

PRODUCT

ORIGIN/DESCRIPTION

GRADE*

WORKING

CONCENTRATION

QTY

CATALOG

CODE

NLRP1 Inflammasome Inducers

L18-MDP

Muramyldipeptide with a C18 fatty acid chain

TLR2 -/ TLR4 –

1 – 100 ng/ml

1 mg

tlrl-lmdp

MDP

Muramyldipeptide (L-D isoform, active)

TLR2 -/ TLR4 –

10 ng – 10 µg/ml

5 mg

tlrl-mdp

NLRP3 Inflammasome Inducers

Alum Crystals

Aluminium potassium sulfate

TLR2 -/ TLR4 –

10 – 200 µg/ml

1 g

tlrl-alk

ATP

Adenosine 5-triphosphate disodium salt

TLR2 -/ TLR4 –

5 mM

1 g

tlrl-atpl

CPPD Crystals

Calcium pyrophosphate dihydrate

TLR2 -/ TLR4 –

1 – 50 µg/ml

5 mg

tlrl-cppd

Hemozoin

Synthetic heme crystal

TLR2 -/ TLR4 –

50 – 400 µg/ml

5 mg

tlrl-hz

MSU Crystals

Monosodium urate (uric acid)

TLR2 -/ TLR4 –

50 – 200 µg/ml

5 mg

25 mg

tlrl-msu

tlrl-msu-25

Nano-SiO2

Nanoparticles of silica dioxide

TLR2 -/ TLR4 –

10 – 200 µg/ml

10 mg

tlrl-sio

Nigericin

Nigericin, sodium salt

TLR2 -/ TLR4 –

1 µM

10 mg

50 mg

tlrl-nig

tlrl-nig-5

TDB

Synthetic analog of the cord factor

TLR2 -/ TLR4 –

1 – 100 µg/ml

2 mg

tlrl-tdb

Non-canonical Inflammasome Inducers

E. coli OMVs             NEW          

Purified outer membrane vesicles from E. coli BL21

TLR2 +/ TLR4 +

0.2-100 µg/ml

100 µg

tlrl-omv-1

E. coli OMVs InvivoFit  NEW

Sterile grade of outer membrane vesicles from E. coli

TLR2 +/ TLR4 +

10-100 µg/mouse

500 µg

tlrl-omv

Curdlan

Beta-1,3-glucan from Alcaligenes faecalis

TLR2 -/ TLR4 –

0.1 – 100 µg/ml

1 g

tlrl-curd

HKCA

Heat-killed Candida albicans

TLR2 -/ TLR4 –

108 cells/ml

109 cells

tlrl-hkca

Pustulan

Beta-glucan from Lasallia pustulata

TLR2 -/ TLR4 –

0.1 – 100 µg/ml

100 mg

tlrl-pst

Zymosan Depleted

Hot alkali treated zymosan

TLR2 -/ TLR4 –

100 µg/ml

10 mg

tlrl-zyd

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TNF配体多聚蛋白——更高的活性,更低的内毒素

TNF配体多聚蛋白——更高的活性,更低的内毒素

反向信号传递现象正逐渐受到人们的关注。简言之 ,即可溶性受体或膜表面受体与表达在细胞膜表面的相应配体结合后 ,传递信号至表达配体的细胞内 ,并引发相应的生物学效应。目前 ,对于这一热点的研究多集中于TNF配体超家族成员。Adipogen提供多种TNF配体多聚蛋白,这些蛋白均具有高活性,低内毒素的特点


TNF Ligands Multimeric Proteins

Higher Activity – Lower Endotoxin

AdipoGen® Multimeric Proteins are high activity constructs in which two trimeric TNFSF ligands are linked via the oligomeric collagen domain of ACRP30 [ACRP30headless] and therefore mimic the membrane-bound forms of the proteins.

TNF配体多聚蛋白——更高的活性,更低的内毒素

Endogenous TNF superfamily ligands are either active as membrane- form (e.g. FasL, TRAIL, CD40L, OX40L) or are secreted and activated through oligomerization by the binding of pro-teoglycans at the surface of cells (e.g. APRIL).

 

To mimic endogenous TNF ligands activity, the oligomerization of recombinant TNF ligands can be triggered:

 

• by fusing the TNF superfamily ligands, soluble form, to the collagen domain of the protein ACRP30 (which itself has no functional activity) to form a hexameric structure and therefore creating “Multimeric Proteins”, or

 

• by adding a cross-linking antibody called “TNF Ligands Enhancer” (Prod. No. AG-35B-0001).


MultimericFasL. [MegaFasL.]


FasL (human) (multimeric) (rec.)

AG-40B-0130 10 µg | 3 x 10 µg

MultimericFasL™ very effectively simulates the natural membrane-assisted aggregation of FasL in vivo.

Source:                            HEK 293 cells.

Sequence:                       Human FasL (aa 139-281) is fused at the

                                          N-terminus to mouse ACRP30headless

                                          (aa 18-111) and a FLAG®-tag.

Specificity:                       Binds to human and mouse Fas.

Biological Activity:          Induces apoptosis of human Jurkat

                                          T cells at a concentration of<1ng>

Endotoxin Content:       <0.01EU/μg purified protein (LAL test; Lonza).

LITerature references:  Two adjacent trimeric Fas ligands are required for Fas signaling and formation of a death-inducing signaling complex: N. Holler, et al.; Mol. Cell. Biol. 23, 1428 (2003) • A Fas agonist induces high levels of apoptosis in haematological malignancies: P. Greaney, et al.; Leuk. Res. 30, 415 (2006)

TNF配体多聚蛋白——更高的活性,更低的内毒素

Figure: Oligomerisation of FasL (human) efficiently triggers Jurkat cell death.

Method: Jurkat cells were treated O/N with the indicated concentrations of FasL (human) (multimeric) (rec.) (AG-40B-0130), Fc (human):FasL (human) (rec.) (AG-40B-0132), FasL (human) (rec.) (AG-40B-0001) or FasL (human) (rec.) + Enhancer (AG-44B- 0001) (2 fold-dilutions, first concentration of 1000ng/ml). Cell death was quantified using PMS/MTS. The oligomeric FasL recombinant proteins (FasL (human) (multimeric), Fc (human):FasL (human) and FasL (human) + Enhancer) kill Jurkat cells at IC50 <0.2ng/ml.

See Backcover for more Products!

• MultiPacks for additional big savings !

• Bulk Quantities for in vivo cancer immunotherapy and vaccination studies in mice !


MultimericCD40L™


CD40L (human) (multimeric) (rec.)

AG-40B-0010-C010 10 µg | 3 x 10 µg

• MultimericCD40L™ very effectively mimics the natural membrane-assisted aggregation of CD40L. It is the most potent alternative to activate CD40. No enhancer is required.

• MultimericCD40L™ is a potent B cell activator.

LITerature reference: IgG subclass switch capacity is low in switched and in IgM-

only, but high in IgD+IgM+, post-germinal center (CD27+) human B cells: C. Werner-Favre, et al.; Eur. J. Immunol. 31, 243 (2001)

CD 40L (mouse) (multimeric) (rec.)          AG-40B-0020            10 μg | 3 x 10 μg
CD 40L (rat) (multimeric) (rec.)                AG-40B-0107            10 μg | 3 x 10 μg

Bulk available for in vivo studies!


Full Panel of MultimericLigands™

APRIL (human) (multimeric) (rec.)                    AG-40B-0017               10 μg | 3 x 10 μg

APRIL (human) (H98) (multimeric) (rec.)          AG-40B-0088               10 μg | 3 x 10 μg

Same activity as AG-40B-0017. Does not bind proteoglycans.

APRIL (mouse) (multimeric) (rec.)                     AG-40B-0089               10 μg | 3 x 10 μg
APRIL (mouse) (H98) (multimeric) (rec.)           AG-40B-0035               10 μg | 3 x 10 μg
Same activity as AG-40B-0089. Does not bind proteoglycans.
OX40L (mouse) (multimeric) (rec.)                    AG-40B-0029               10 μg
TNF-α (human) (multimeric) (rec.)                    AG-40B-0019               10 μg | 3 x 10 μg
Activates TNF-R1 and TNF-R2!
TNF-α (mouse) (multimeric) (rec.)                     AG-40B-0021               10 μg | 3 x 10 μg
Activates TNF-R1 and TNF-R2!

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